解剖病理解剖病理診斷規(guī)程一、概述

解剖病理解剖病理診斷是醫(yī)學(xué)診斷的重要組成部分，旨在通過組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)和分子學(xué)方法，對病變進(jìn)行系統(tǒng)性分析和判斷。本規(guī)程旨在規(guī)范解剖病理解剖病理診斷的操作流程，確保診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。診斷過程包括樣本接收、固定、處理、切片、染色、鏡檢和報(bào)告撰寫等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

二、診斷規(guī)程

（一）樣本接收與登記

1.樣本接收：接收來自臨床科室的病理樣本，包括組織塊、細(xì)胞學(xué)涂片等。

2.樣本登記：詳細(xì)記錄樣本信息，包括患者姓名、性別、年齡、送檢科室、送檢醫(yī)生、樣本類型、送檢時(shí)間等。

3.樣本編號(hào)：為每個(gè)樣本分配唯一編號(hào)，確保全流程追蹤。

（二）樣本固定與處理

1.固定：將組織樣本立即浸入10%中性緩沖甲醛溶液中，固定時(shí)間一般為24-48小時(shí)，確保組織結(jié)構(gòu)完整。

2.脫水：固定后的樣本通過梯度乙醇脫水，逐步提高乙醇濃度（如70%、85%、95%、100%），去除水分。

3.透明：將脫水后的樣本置于二甲苯中透明，使組織透明化，便于后續(xù)包埋。

4.包埋：將透明后的樣本浸入石蠟中，包埋成蠟塊，便于切片。

（三）切片與染色

1.切片：使用顯微鏡切片機(jī)將蠟塊切成4-5μm厚的切片，置于載玻片上。

2.脫蠟水化：切片依次經(jīng)二甲苯、梯度乙醇（100%、95%、85%、70%）脫蠟，再經(jīng)蒸餾水水化。

3.染色：常用染色方法包括HE染色（蘇木精-伊紅染色）和特殊染色（如免疫組化、特殊染色等）。

-HE染色步驟：

(1)蒸餾水清洗；

(2)蘇木精染色；

(3)1%鹽酸酒精分化；

(4)蒸餾水清洗；

(5)伊紅染色；

(6)脫水透明；

(7)封片。

（四）鏡檢與診斷

1.鏡檢：在光學(xué)顯微鏡下觀察切片，重點(diǎn)關(guān)注細(xì)胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)、炎癥反應(yīng)等特征。

2.診斷：根據(jù)鏡下表現(xiàn)，結(jié)合臨床信息，進(jìn)行病理診斷。常見診斷類別包括腫瘤性病變（良性、惡性）、炎癥性病變、發(fā)育性異常等。

3.免疫組化：對于疑難病例，可進(jìn)行免疫組化檢測，輔助診斷（如上皮細(xì)胞標(biāo)記、間質(zhì)標(biāo)記等）。

（五）報(bào)告撰寫與審核

1.報(bào)告撰寫：詳細(xì)記錄診斷結(jié)果，包括病變類型、分級(jí)、分期（如適用），并提供臨床建議。

2.報(bào)告審核：由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師審核報(bào)告，確保診斷準(zhǔn)確性。

3.報(bào)告發(fā)放：將審核后的報(bào)告發(fā)送至臨床科室，并保留電子版和紙質(zhì)版存檔。

三、質(zhì)量控制與安全

（一）質(zhì)量控制

1.標(biāo)準(zhǔn)化操作：嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，減少人為誤差。

2.設(shè)備校準(zhǔn)：定期校準(zhǔn)切片機(jī)、顯微鏡等設(shè)備，確保性能穩(wěn)定。

3.人員培訓(xùn)：定期對病理技師和醫(yī)師進(jìn)行培訓(xùn)，提升操作技能和診斷水平。

（二）生物安全

1.個(gè)人防護(hù)：操作過程中佩戴手套、口罩、護(hù)目鏡等防護(hù)用品。

2.樣本處理：避免樣本交叉污染，使用一次性器械和耗材。

3.廢物處理：按照生物安全規(guī)定處理廢棄樣本和化學(xué)試劑。

四、總結(jié)

解剖病理解剖病理診斷規(guī)程涉及多個(gè)環(huán)節(jié)，每個(gè)步驟均需嚴(yán)格把控，以確保診斷結(jié)果的可靠性。通過規(guī)范化操作、質(zhì)量控制和生物安全措施，可以提高診斷效率，為臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。

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**一、概述**

解剖病理解剖病理診斷是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診斷體系中的核心環(huán)節(jié)，其根本任務(wù)是通過系統(tǒng)性的組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)和分子學(xué)檢查，對從患者體內(nèi)獲取的標(biāo)本進(jìn)行微觀分析，以明確病變的性質(zhì)、類型、程度，并為臨床醫(yī)生制定治療方案、評(píng)估預(yù)后提供關(guān)鍵依據(jù)。本規(guī)程旨在建立一套標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的操作流程，覆蓋從樣本接收到最終報(bào)告發(fā)出的每一個(gè)環(huán)節(jié)，確保診斷工作的準(zhǔn)確性、客觀性和效率。

解剖病理診斷的核心在于“微觀觀察”與“宏觀聯(lián)系”。它不僅要求病理醫(yī)師具備扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)，能夠識(shí)別各種復(fù)雜的細(xì)胞和組織變化，還要求能夠結(jié)合臨床信息、影像學(xué)資料等，綜合判斷病變的臨床意義。因此，規(guī)范的流程是保證診斷質(zhì)量的基礎(chǔ)。

二、診斷規(guī)程

（一）樣本接收與登記

1.**樣本接收與初步評(píng)估：**

*病理科接收來自各臨床科室送檢的病理樣本，包括但不限于手術(shù)切除標(biāo)本、穿刺活檢組織、細(xì)胞學(xué)涂片等。

*接收時(shí)，首先核對樣本與送檢單信息是否一致，檢查樣本是否有標(biāo)簽，標(biāo)簽是否清晰、完整。

*快速評(píng)估樣本的質(zhì)量，包括組織塊的尺寸（一般要求≥10mm×10mm或≥15mm×5mm，具體根據(jù)部位和檢查目的而定）、有無肉眼可見的壞死、出血或污染，以及細(xì)胞學(xué)涂片的覆蓋度和細(xì)胞ularity。

*對于不合格樣本，應(yīng)立即與送檢醫(yī)生溝通，必要時(shí)要求重新取樣。

2.**樣本登記與編號(hào)：**

*在樣本登記本或電子系統(tǒng)中，詳細(xì)記錄每份樣本的關(guān)鍵信息，至少包括：

*患者標(biāo)識(shí)（如住院號(hào)、門診號(hào)，需脫敏處理）；

*患者基本信息（年齡、性別，需脫敏處理）；

*送檢科室；

*送檢醫(yī)生；

*送檢標(biāo)本的詳細(xì)描述（部位、大小、數(shù)量、固定液等）；

*臨床診斷或手術(shù)名稱；

*送檢日期和時(shí)間；

*是否有特殊要求（如加做免疫組化、特殊染色、分子檢測等）。

*為每份樣本分配一個(gè)唯一的病理號(hào)（如“20231027001”），該編號(hào)將貫穿整個(gè)診斷流程，用于追蹤樣本和記錄信息。

3.**標(biāo)本固定：**

***原則：**固定是保存組織結(jié)構(gòu)、使細(xì)胞成分沉寂、為后續(xù)處理奠定基礎(chǔ)的關(guān)鍵步驟。固定不良會(huì)導(dǎo)致組織變性和結(jié)構(gòu)破壞，嚴(yán)重影響診斷。

***固定液：**通常使用10%中性緩沖甲醛（Formalin）溶液。確保甲醛濃度準(zhǔn)確，并使用合適的緩沖液（如磷酸鹽緩沖液）維持pH穩(wěn)定（約7.4）。

***固定時(shí)間：**固定時(shí)間直接影響固定效果。一般原則是組織塊越大，所需固定時(shí)間越長。常見參考時(shí)間為：

*小組織塊（<1cm3）：24-48小時(shí)；

*中等組織塊（1-5cm3）：48-72小時(shí)；

*大組織塊（>5cm3）：72小時(shí)以上，甚至可達(dá)一周。

***注意：**過長的固定時(shí)間可能導(dǎo)致組織變脆。對于某些特殊標(biāo)本（如腦組織、睪丸組織），可能需要特殊考慮固定時(shí)間。

***固定容器：**使用干凈、有刻度（便于判斷浸沒深度和更換固定液）的廣口瓶或?qū)Ｓ萌萜?。容器容量?yīng)足夠容納組織塊，并留有足夠空間讓組織充分浸沒。

***操作要點(diǎn)：**

*標(biāo)本放入容器后，立即記錄固定液初始體積。

*定期檢查固定液液位，必要時(shí)補(bǔ)充至初始刻度（避免組織暴露于空氣中）。

*確保所有組織塊均被固定液完全浸沒。

*標(biāo)記固定容器，注明標(biāo)本編號(hào)、固定液種類、開始固定日期和時(shí)間。

4.**標(biāo)本標(biāo)識(shí)：**

*所有容器、組織塊（若需分離不同區(qū)域）均需清晰、牢固地粘貼帶有標(biāo)本編號(hào)的標(biāo)簽。標(biāo)簽材質(zhì)應(yīng)防水、耐化學(xué)腐蝕。

*避免使用易脫落的標(biāo)簽或墨水，防止標(biāo)本混淆。

（二）樣本處理與制備

1.**初步處理與取材（核心步驟）：**

***目的：**從大體標(biāo)本中選取具有代表性、最能反映病變特征的組織區(qū)域進(jìn)行病理檢查。取材質(zhì)量直接決定診斷準(zhǔn)確性。

***工具：**使用手術(shù)刀、組織鉗、取材鑷、量尺、取材固定液（通常是10%甲醛）等。

***原則：**

***全面性：**確保取材覆蓋所有肉眼可見的病變區(qū)域，包括主要病灶、邊緣組織、可疑區(qū)域以及肉眼看似正常的組織（作為對照）。

***代表性：**選取最能體現(xiàn)病變特點(diǎn)的部分，如腫瘤的實(shí)性部分、浸潤前沿、壞死中心等。

***系統(tǒng)性：**按照一定的順序（如由外向內(nèi)、按特定解剖層面）進(jìn)行取材，避免遺漏。

***適量性：**每個(gè)取材塊大小應(yīng)足以制作2-3張切片，并留有備片。

***具體操作（以手術(shù)切除標(biāo)本為例）：**

*仔細(xì)閱讀手術(shù)記錄或大體描述，了解標(biāo)本大體情況。

*清理標(biāo)本表面血污和壞死組織（若影響取材）。

*測量標(biāo)本大小，記錄。

***系統(tǒng)取材：**

***表面：**取材標(biāo)本表面幾個(gè)關(guān)鍵方位的組織（如四角、邊緣、中央）。

***深部/內(nèi)部：**按解剖層次或區(qū)域取材。例如，乳腺標(biāo)本需按象限取材；胃標(biāo)本需按不同皺襞和距離腫瘤邊緣不同距離取材；腦標(biāo)本需按不同葉區(qū)和深度取材。

***腫瘤相關(guān)：**對于腫瘤標(biāo)本，必須取材腫瘤中心、邊緣（距腫瘤不同距離，如0.5cm、1cm）、切緣（切緣、縫邊）、淋巴結(jié)（區(qū)域淋巴結(jié)、轉(zhuǎn)移灶）等。

***記錄取材部位：**在取材過程中，詳細(xì)記錄每個(gè)取材塊的具體位置和取材目的（如在“胃大彎距腫瘤邊緣2cm處取材一塊”）。

***標(biāo)記取材塊：**使用記號(hào)筆在組織塊表面標(biāo)記取材編號(hào)和取材部位，或使用不同顏色的記號(hào)筆區(qū)分。

***立即固定：**取下的組織塊立即放入裝有新鮮取材固定液的小容器或瓶中，并確保完全浸沒。標(biāo)記清晰。

2.**脫水：**

***目的：**逐步去除組織中的水分，使組織透明，便于后續(xù)包埋。

***原理：**利用乙醇濃度梯度，將組織中的水分置換出來。

***流程：**組織塊從低濃度乙醇逐漸過渡到高濃度乙醇，最后進(jìn)入透明劑（二甲苯）。

***操作：**

*將固定好的組織塊依次放入不同濃度的乙醇溶液中，每次更換乙醇濃度前，需在相應(yīng)濃度的乙醇中浸泡足夠時(shí)間，一般24-48小時(shí)。常用乙醇濃度梯度：70%->85%->95%(I)->95%(II)->100%(I)->100%(II)。

*更換乙醇時(shí)，用鑷子輕輕攪動(dòng)或晃動(dòng)容器，加速脫水和溶解。

*記錄每個(gè)階段的時(shí)間。

3.**透明：**

***目的：**使組織完全透明，與石蠟的折射率接近，便于組織切片時(shí)與石蠟清晰分離。

***試劑：**使用二甲苯（Xylene）。

***流程：**組織塊先后放入二甲苯中兩次，每次約24-48小時(shí)。

***操作：**

*將經(jīng)過高濃度乙醇處理的組織塊放入裝有新鮮二甲苯的容器中。

*靜置足夠時(shí)間，直至組織塊完全透明（外觀無明顯混濁）。

*更換二甲苯，重復(fù)一次。

*透明后的組織應(yīng)完全透明，無色或微黃。

4.**包埋：**

***目的：**將透明的組織塊浸泡在石蠟中，使其硬化，并形成規(guī)則的切片面，便于切片機(jī)操作。

***工具：**包埋盒、石蠟、恒溫包埋儀。

***流程：**

*準(zhǔn)備包埋盒，確保底部平整。

*在包埋盒底部滴加幾滴融化的石蠟。

*將透明后的組織塊小心放入包埋盒中，調(diào)整位置，使其大致居中。

*將包埋盒放入恒溫包埋儀中，加熱石蠟至完全融化（通常45-55°C，具體溫度依石蠟牌號(hào)和包埋儀性能而定）。

*緩慢、均勻地注入融化的石蠟，覆蓋組織塊。確保組織塊被完全浸沒，無氣泡。

*允許石蠟在包埋儀中或室溫下緩慢冷卻、凝固。

*冷卻后，取出包埋盒，置于陰涼處待后續(xù)切片。

（三）切片與染色

1.**切片：**

***目的：**將包埋好的組織塊切成極薄的切片（通常4-7μm），置于載玻片上，以便顯微鏡觀察。

***工具：**脫水機(jī)、切片機(jī)、切片刀、載玻片、切片刀架。

***流程：**

***組織修塊：**檢查石蠟塊，去除表面多余或斷裂的石蠟。必要時(shí)用石蠟刀修整組織塊邊緣，使其平整。

***裝載：**將石蠟塊放置在切片機(jī)的載物臺(tái)上，用專用夾子固定。調(diào)整切片刀的位置，使其能夠準(zhǔn)確切割到組織。

***切片：**開啟切片機(jī)，設(shè)定切片厚度（通常4-5μm）。啟動(dòng)設(shè)備，石蠟塊被自動(dòng)推進(jìn)，刀片切割組織。產(chǎn)生的切片被刀架收集。

***分片：**將連續(xù)的切片按照預(yù)設(shè)的順序（如從組織中心到邊緣，或按區(qū)域編號(hào)）分裝到不同的載玻片上。每張載玻片通常放置1-3個(gè)組織區(qū)域或多個(gè)連續(xù)切片。

***標(biāo)記：**在載玻片背面清晰標(biāo)記標(biāo)本編號(hào)、切片序號(hào)（如“標(biāo)本號(hào)：20231027001，切片號(hào)：1-10”），確保與后續(xù)染色和鏡檢對應(yīng)。

***貼片：**將分裝好的切片輕輕貼附在清潔、干燥、已預(yù)處理（如用多聚賴氨酸處理）的載玻片上?？墒褂脤Ｓ觅N片劑或直接貼附。

***干燥：**將貼好切片的載玻片水平放置，在室溫或37°C溫箱中干燥。

2.**脫蠟與水化：**

***目的：**將石蠟從切片中去除，使組織重新進(jìn)入水溶液環(huán)境，以便進(jìn)行染色。

***流程：**切片依次通過不同濃度乙醇，最后進(jìn)入水。

***操作：**

*將載玻片放入裝有100%二甲苯的染色缸中，浸泡5-10分鐘。

*小心取出，放入裝有100%乙醇的染色缸中，浸泡5-10分鐘。

*依次放入95%乙醇（I）、95%乙醇（II）、70%乙醇各5-10分鐘。

*依次放入蒸餾水或去離子水（I）、蒸餾水或去離子水（II）各5-10分鐘，使組織充分水化。

3.**染色（以HE染色為例）：**

***HE染色（蘇木精-伊紅染色）：**是最常用、最基礎(chǔ)的染色方法，能顯示細(xì)胞核（蘇木精染成藍(lán)色）和細(xì)胞質(zhì)、組織結(jié)構(gòu)（伊紅染成紅色或粉色）。

***流程：**

***蘇木精染色（核染）：**將載玻片放入蘇木精染液中（可加熱或常溫，依染液和設(shè)備而定），染色時(shí)間從幾分鐘到幾十分鐘不等，根據(jù)需要調(diào)整，以獲得理想的染色深度。染色后，用蒸餾水沖洗。

***分化（降低染色深度）：**將載玻片放入1%鹽酸酒精（HCl酒精）溶液中，分化時(shí)間非常短暫（幾秒到幾分鐘），目的是降低染色深度，使細(xì)胞間質(zhì)和背景清晰。分化程度需經(jīng)驗(yàn)判斷。用蒸餾水迅速?zèng)_洗。

***伊紅染色（質(zhì)染）：**將載玻片放入伊紅染液中，染色幾分鐘。伊紅會(huì)使細(xì)胞質(zhì)和背景染成紅色。用蒸餾水沖洗。

***脫水與透明：**依次通過95%乙醇（I）、95%乙醇（II）、100%乙醇（I）、100%乙醇（II）、100%二甲苯各5-10分鐘，使組織脫水并透明。

***封片：**在切片表面滴加適量中性樹膠（如中性香柏油），用蓋玻片輕輕蓋住，用吸水紙吸去多余樹膠，邊緣用指甲油或封片膜封邊。樹膠的作用是固定切片、保護(hù)組織、提高透光性。

4.**特殊染色與免疫組化染色：**

***目的：**對于常規(guī)HE染色難以鑒別的病變、需要確定組織來源、表達(dá)特定標(biāo)志物的情況，進(jìn)行補(bǔ)充染色。

***常見方法：**

***特殊染色：**如網(wǎng)狀纖維染色（VanGieson）、膠原纖維染色（Masson三色染色）、嗜銀纖維染色（銀染）等，用于顯示特定的細(xì)胞外基質(zhì)成分。

***免疫組化染色（Immunohistochemistry,IHC）：**利用抗體與組織細(xì)胞中特定抗原結(jié)合的原理，顯示抗原的分布和表達(dá)情況。常用標(biāo)志物包括上皮細(xì)胞標(biāo)志物（如AE1/AE3、CK19）、間質(zhì)標(biāo)志物（如Vimentin）、神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物（如Syn、CgA）等。操作流程通常包括：脫蠟水化、抗原修復(fù)（如熱修復(fù)）、血清封閉、滴加primaryantibody（一抗）、孵育、洗滌、滴加secondaryantibody（二抗）、孵育、洗滌、加入顯色劑（如DAB）、顯色、復(fù)染（如蘇木精）、脫水透明、封片。

***操作要求：**特殊染色和免疫組化染色需遵循相應(yīng)的操作說明書，嚴(yán)格控制溫度、時(shí)間、抗體濃度等條件，并進(jìn)行陰性對照和陽性對照。

（四）鏡檢與診斷報(bào)告

1.**顯微鏡檢查：**

***目的：**仔細(xì)觀察染色切片在顯微鏡下的形態(tài)學(xué)特征。

***設(shè)備：**光學(xué)顯微鏡。

***操作：**

*將蓋有切片的載玻片放置在顯微鏡載物臺(tái)上，蓋上蓋玻片。

*調(diào)整顯微鏡光源亮度、聚光器、可變光圈等，獲得清晰、對比度良好的視野。

*先在低倍鏡下（如10x物鏡）尋找組織結(jié)構(gòu)，找到感興趣區(qū)域。

*切換到高倍鏡（如40x物鏡）進(jìn)行詳細(xì)觀察，重點(diǎn)關(guān)注：

***細(xì)胞形態(tài)：**大小、形狀、核形、核染色質(zhì)形態(tài)、核仁、胞漿量、胞漿顏色和內(nèi)含物。

***組織結(jié)構(gòu)：**細(xì)胞排列方式、腺管/腺泡結(jié)構(gòu)、間質(zhì)成分、是否有特殊結(jié)構(gòu)（如假包膜、出血、壞死、鈣化）。

***與其他組織的鑒別：**與正常組織或良性病變的細(xì)微差別。

*對同一張切片的不同區(qū)域、多張切片的不同區(qū)域進(jìn)行系統(tǒng)觀察，避免漏診。

*如有疑問，可使用油鏡（100x物鏡）進(jìn)一步觀察細(xì)節(jié)。

2.**診斷思考與撰寫報(bào)告：**

***信息整合：**結(jié)合臨床送檢信息、大體描述、HE染色形態(tài)、特殊染色/免疫組化結(jié)果進(jìn)行綜合分析。

***診斷邏輯：**

*根據(jù)形態(tài)學(xué)特征，初步判斷病變的類型（如腫瘤性、炎癥性、反應(yīng)性）。

*如果是腫瘤，進(jìn)一步判斷其分化程度（高分化、中分化、低分化/未分化）、組織類型（如癌、肉瘤）、特殊形態(tài)學(xué)特征。

*結(jié)合免疫組化結(jié)果，輔助確認(rèn)組織來源、分化方向或有無特殊分子標(biāo)記。

*評(píng)估病變的浸潤范圍、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無復(fù)發(fā)高危因素等。

*得出最終診斷結(jié)論。

***報(bào)告撰寫：**按照標(biāo)準(zhǔn)格式撰寫病理診斷報(bào)告，內(nèi)容通常包括：

*標(biāo)本信息（編號(hào)、來源、描述）。

*臨床摘要（性別、年齡、送檢診斷、主要臨床問題）。

*病理描述（大體觀、鏡下觀，詳細(xì)描述所見主要病變特征）。

*診斷意見（明確診斷名稱，必要時(shí)分級(jí)、分期）。

*免疫組化結(jié)果（如已做）。

*建議或提示（如建議進(jìn)一步檢查、注意鑒別診斷等）。

*簽名（病理醫(yī)師姓名、職稱、日期）。

3.**報(bào)告審核與發(fā)出：**

***審核：**報(bào)告初稿完成后，由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師進(jìn)行審核。對于復(fù)雜、疑難病例，或涉及重大診斷結(jié)論（如惡性腫瘤）的報(bào)告，需經(jīng)更高級(jí)別醫(yī)師（如主治醫(yī)師、副主任醫(yī)師）審核簽字。確保診斷依據(jù)充分、結(jié)論準(zhǔn)確、報(bào)告規(guī)范。

***發(fā)出：**審核通過的報(bào)告通過電子系統(tǒng)或紙質(zhì)版形式發(fā)送給臨床醫(yī)生。確保報(bào)告及時(shí)、準(zhǔn)確送達(dá)。

***存檔：**所有報(bào)告（電子版和紙質(zhì)版）及相關(guān)切片、блоки(蠟塊)均需按照規(guī)定進(jìn)行歸檔保存，以備查閱。

（五）質(zhì)量控制與持續(xù)改進(jìn)

1.**過程質(zhì)控：**

***樣本層面：**定期評(píng)估樣本接收、固定、取材環(huán)節(jié)的質(zhì)量，如統(tǒng)計(jì)不合格樣本率、分析原因、改進(jìn)流程。

***技術(shù)層面：**定期檢查染色質(zhì)量（如HE染色效果、特殊染色/免疫組化結(jié)果的可靠性），評(píng)估切片質(zhì)量（如切片厚度、完整性），校準(zhǔn)設(shè)備。

***報(bào)告層面：**定期抽查報(bào)告，檢查診斷的準(zhǔn)確性、報(bào)告的規(guī)范性、描述的完整性。

2.**人員培訓(xùn)與能力評(píng)估：**

*定期對病理技師和醫(yī)師進(jìn)行專業(yè)知識(shí)和操作技能的培訓(xùn)，如新的染色技術(shù)、診斷標(biāo)準(zhǔn)、設(shè)備操作等。

*通過考核、會(huì)診、病例討論等方式評(píng)估人員能力，確保持有相應(yīng)的資質(zhì)和能力。

3.**室內(nèi)質(zhì)控與室間質(zhì)評(píng)：**

***室內(nèi)質(zhì)控（IQC）：**定期使用已知陽性的質(zhì)控品（如細(xì)胞系、組織微陣列）進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制，監(jiān)測染色和診斷的一致性。記錄并分析質(zhì)控結(jié)果。

***室間質(zhì)評(píng)（EQA）：**參加相關(guān)機(jī)構(gòu)（如病理學(xué)會(huì)、檢驗(yàn)協(xié)會(huì)）組織的室間質(zhì)評(píng)計(jì)劃，與其他實(shí)驗(yàn)室的檢測結(jié)果進(jìn)行比較，評(píng)估自身診斷水平，發(fā)現(xiàn)和糾正問題。

4.**反饋與改進(jìn)：**

*建立與臨床科室的溝通機(jī)制，收集臨床醫(yī)生對病理診斷報(bào)告的意見和建議。

*定期分析診斷錯(cuò)誤或爭議病例，總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，改進(jìn)工作流程和診斷標(biāo)準(zhǔn)。

*關(guān)注國內(nèi)外最新研究進(jìn)展和指南，持續(xù)更新知識(shí)體系，提升診斷水平。

四、生物安全與環(huán)境保護(hù)

1.**個(gè)人防護(hù)：**

*所有操作人員必須嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程，佩戴合適的個(gè)人防護(hù)裝備（如工作服、口罩、手套）。

*在處理潛在傳染性樣本時(shí)，需采取額外的防護(hù)措施（如使用防滲透工作服、面屏或護(hù)目鏡、雙層手套）。

*定期進(jìn)行健康檢查。

2.**樣本處理與廢棄物處置：**

*所有標(biāo)本在未明確排除傳染病風(fēng)險(xiǎn)前，均按潛在感染性樣本處理。

*樣本固定液、染色液（特別是含重金屬的）、二甲苯等化學(xué)試劑需按其特性分類收集和處理，禁止隨意傾倒。

*廢棄的樣本組織塊、載玻片、蓋玻片、化學(xué)試劑容器等需放入符合生物安全等級(jí)的銳器盒和化學(xué)廢物桶中，交由有資質(zhì)的機(jī)構(gòu)進(jìn)行安全處置（如高壓滅菌、焚燒）。

*污水排放需符合環(huán)保要求，含氯廢水（如甲醛、二甲苯處理過程可能產(chǎn)生）需經(jīng)過處理達(dá)標(biāo)后排放。

3.**環(huán)境清潔與消毒：**

*定期對工作區(qū)域、設(shè)備表面、地面進(jìn)行清潔和消毒。

*使用合適的消毒劑，并確保足夠的接觸時(shí)間。

*垃圾桶、洗手池等設(shè)施應(yīng)保持清潔，并及時(shí)加蓋。

4.**實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與通風(fēng)：**

*病理科實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照生物安全等級(jí)要求進(jìn)行設(shè)計(jì)，包括合理的空間布局、通風(fēng)系統(tǒng)、污水處理設(shè)施等。

*通風(fēng)櫥等設(shè)備應(yīng)定期維護(hù)，確保正常工作。

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一、概述

解剖病理解剖病理診斷是醫(yī)學(xué)診斷的重要組成部分，旨在通過組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)和分子學(xué)方法，對病變進(jìn)行系統(tǒng)性分析和判斷。本規(guī)程旨在規(guī)范解剖病理解剖病理診斷的操作流程，確保診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。診斷過程包括樣本接收、固定、處理、切片、染色、鏡檢和報(bào)告撰寫等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

二、診斷規(guī)程

（一）樣本接收與登記

1.樣本接收：接收來自臨床科室的病理樣本，包括組織塊、細(xì)胞學(xué)涂片等。

2.樣本登記：詳細(xì)記錄樣本信息，包括患者姓名、性別、年齡、送檢科室、送檢醫(yī)生、樣本類型、送檢時(shí)間等。

3.樣本編號(hào)：為每個(gè)樣本分配唯一編號(hào)，確保全流程追蹤。

（二）樣本固定與處理

1.固定：將組織樣本立即浸入10%中性緩沖甲醛溶液中，固定時(shí)間一般為24-48小時(shí)，確保組織結(jié)構(gòu)完整。

2.脫水：固定后的樣本通過梯度乙醇脫水，逐步提高乙醇濃度（如70%、85%、95%、100%），去除水分。

3.透明：將脫水后的樣本置于二甲苯中透明，使組織透明化，便于后續(xù)包埋。

4.包埋：將透明后的樣本浸入石蠟中，包埋成蠟塊，便于切片。

（三）切片與染色

1.切片：使用顯微鏡切片機(jī)將蠟塊切成4-5μm厚的切片，置于載玻片上。

2.脫蠟水化：切片依次經(jīng)二甲苯、梯度乙醇（100%、95%、85%、70%）脫蠟，再經(jīng)蒸餾水水化。

3.染色：常用染色方法包括HE染色（蘇木精-伊紅染色）和特殊染色（如免疫組化、特殊染色等）。

-HE染色步驟：

(1)蒸餾水清洗；

(2)蘇木精染色；

(3)1%鹽酸酒精分化；

(4)蒸餾水清洗；

(5)伊紅染色；

(6)脫水透明；

(7)封片。

（四）鏡檢與診斷

1.鏡檢：在光學(xué)顯微鏡下觀察切片，重點(diǎn)關(guān)注細(xì)胞形態(tài)、組織結(jié)構(gòu)、炎癥反應(yīng)等特征。

2.診斷：根據(jù)鏡下表現(xiàn)，結(jié)合臨床信息，進(jìn)行病理診斷。常見診斷類別包括腫瘤性病變（良性、惡性）、炎癥性病變、發(fā)育性異常等。

3.免疫組化：對于疑難病例，可進(jìn)行免疫組化檢測，輔助診斷（如上皮細(xì)胞標(biāo)記、間質(zhì)標(biāo)記等）。

（五）報(bào)告撰寫與審核

1.報(bào)告撰寫：詳細(xì)記錄診斷結(jié)果，包括病變類型、分級(jí)、分期（如適用），并提供臨床建議。

2.報(bào)告審核：由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師審核報(bào)告，確保診斷準(zhǔn)確性。

3.報(bào)告發(fā)放：將審核后的報(bào)告發(fā)送至臨床科室，并保留電子版和紙質(zhì)版存檔。

三、質(zhì)量控制與安全

（一）質(zhì)量控制

1.標(biāo)準(zhǔn)化操作：嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，減少人為誤差。

2.設(shè)備校準(zhǔn)：定期校準(zhǔn)切片機(jī)、顯微鏡等設(shè)備，確保性能穩(wěn)定。

3.人員培訓(xùn)：定期對病理技師和醫(yī)師進(jìn)行培訓(xùn)，提升操作技能和診斷水平。

（二）生物安全

1.個(gè)人防護(hù)：操作過程中佩戴手套、口罩、護(hù)目鏡等防護(hù)用品。

2.樣本處理：避免樣本交叉污染，使用一次性器械和耗材。

3.廢物處理：按照生物安全規(guī)定處理廢棄樣本和化學(xué)試劑。

四、總結(jié)

解剖病理解剖病理診斷規(guī)程涉及多個(gè)環(huán)節(jié)，每個(gè)步驟均需嚴(yán)格把控，以確保診斷結(jié)果的可靠性。通過規(guī)范化操作、質(zhì)量控制和生物安全措施，可以提高診斷效率，為臨床治療提供科學(xué)依據(jù)。

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**一、概述**

解剖病理解剖病理診斷是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診斷體系中的核心環(huán)節(jié)，其根本任務(wù)是通過系統(tǒng)性的組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)和分子學(xué)檢查，對從患者體內(nèi)獲取的標(biāo)本進(jìn)行微觀分析，以明確病變的性質(zhì)、類型、程度，并為臨床醫(yī)生制定治療方案、評(píng)估預(yù)后提供關(guān)鍵依據(jù)。本規(guī)程旨在建立一套標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的操作流程，覆蓋從樣本接收到最終報(bào)告發(fā)出的每一個(gè)環(huán)節(jié)，確保診斷工作的準(zhǔn)確性、客觀性和效率。

解剖病理診斷的核心在于“微觀觀察”與“宏觀聯(lián)系”。它不僅要求病理醫(yī)師具備扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)，能夠識(shí)別各種復(fù)雜的細(xì)胞和組織變化，還要求能夠結(jié)合臨床信息、影像學(xué)資料等，綜合判斷病變的臨床意義。因此，規(guī)范的流程是保證診斷質(zhì)量的基礎(chǔ)。

二、診斷規(guī)程

（一）樣本接收與登記

1.**樣本接收與初步評(píng)估：**

*病理科接收來自各臨床科室送檢的病理樣本，包括但不限于手術(shù)切除標(biāo)本、穿刺活檢組織、細(xì)胞學(xué)涂片等。

*接收時(shí)，首先核對樣本與送檢單信息是否一致，檢查樣本是否有標(biāo)簽，標(biāo)簽是否清晰、完整。

*快速評(píng)估樣本的質(zhì)量，包括組織塊的尺寸（一般要求≥10mm×10mm或≥15mm×5mm，具體根據(jù)部位和檢查目的而定）、有無肉眼可見的壞死、出血或污染，以及細(xì)胞學(xué)涂片的覆蓋度和細(xì)胞ularity。

*對于不合格樣本，應(yīng)立即與送檢醫(yī)生溝通，必要時(shí)要求重新取樣。

2.**樣本登記與編號(hào)：**

*在樣本登記本或電子系統(tǒng)中，詳細(xì)記錄每份樣本的關(guān)鍵信息，至少包括：

*患者標(biāo)識(shí)（如住院號(hào)、門診號(hào)，需脫敏處理）；

*患者基本信息（年齡、性別，需脫敏處理）；

*送檢科室；

*送檢醫(yī)生；

*送檢標(biāo)本的詳細(xì)描述（部位、大小、數(shù)量、固定液等）；

*臨床診斷或手術(shù)名稱；

*送檢日期和時(shí)間；

*是否有特殊要求（如加做免疫組化、特殊染色、分子檢測等）。

*為每份樣本分配一個(gè)唯一的病理號(hào)（如“20231027001”），該編號(hào)將貫穿整個(gè)診斷流程，用于追蹤樣本和記錄信息。

3.**標(biāo)本固定：**

***原則：**固定是保存組織結(jié)構(gòu)、使細(xì)胞成分沉寂、為后續(xù)處理奠定基礎(chǔ)的關(guān)鍵步驟。固定不良會(huì)導(dǎo)致組織變性和結(jié)構(gòu)破壞，嚴(yán)重影響診斷。

***固定液：**通常使用10%中性緩沖甲醛（Formalin）溶液。確保甲醛濃度準(zhǔn)確，并使用合適的緩沖液（如磷酸鹽緩沖液）維持pH穩(wěn)定（約7.4）。

***固定時(shí)間：**固定時(shí)間直接影響固定效果。一般原則是組織塊越大，所需固定時(shí)間越長。常見參考時(shí)間為：

*小組織塊（<1cm3）：24-48小時(shí)；

*中等組織塊（1-5cm3）：48-72小時(shí)；

*大組織塊（>5cm3）：72小時(shí)以上，甚至可達(dá)一周。

***注意：**過長的固定時(shí)間可能導(dǎo)致組織變脆。對于某些特殊標(biāo)本（如腦組織、睪丸組織），可能需要特殊考慮固定時(shí)間。

***固定容器：**使用干凈、有刻度（便于判斷浸沒深度和更換固定液）的廣口瓶或?qū)Ｓ萌萜鳌Ｈ萜魅萘繎?yīng)足夠容納組織塊，并留有足夠空間讓組織充分浸沒。

***操作要點(diǎn)：**

*標(biāo)本放入容器后，立即記錄固定液初始體積。

*定期檢查固定液液位，必要時(shí)補(bǔ)充至初始刻度（避免組織暴露于空氣中）。

*確保所有組織塊均被固定液完全浸沒。

*標(biāo)記固定容器，注明標(biāo)本編號(hào)、固定液種類、開始固定日期和時(shí)間。

4.**標(biāo)本標(biāo)識(shí)：**

*所有容器、組織塊（若需分離不同區(qū)域）均需清晰、牢固地粘貼帶有標(biāo)本編號(hào)的標(biāo)簽。標(biāo)簽材質(zhì)應(yīng)防水、耐化學(xué)腐蝕。

*避免使用易脫落的標(biāo)簽或墨水，防止標(biāo)本混淆。

（二）樣本處理與制備

1.**初步處理與取材（核心步驟）：**

***目的：**從大體標(biāo)本中選取具有代表性、最能反映病變特征的組織區(qū)域進(jìn)行病理檢查。取材質(zhì)量直接決定診斷準(zhǔn)確性。

***工具：**使用手術(shù)刀、組織鉗、取材鑷、量尺、取材固定液（通常是10%甲醛）等。

***原則：**

***全面性：**確保取材覆蓋所有肉眼可見的病變區(qū)域，包括主要病灶、邊緣組織、可疑區(qū)域以及肉眼看似正常的組織（作為對照）。

***代表性：**選取最能體現(xiàn)病變特點(diǎn)的部分，如腫瘤的實(shí)性部分、浸潤前沿、壞死中心等。

***系統(tǒng)性：**按照一定的順序（如由外向內(nèi)、按特定解剖層面）進(jìn)行取材，避免遺漏。

***適量性：**每個(gè)取材塊大小應(yīng)足以制作2-3張切片，并留有備片。

***具體操作（以手術(shù)切除標(biāo)本為例）：**

*仔細(xì)閱讀手術(shù)記錄或大體描述，了解標(biāo)本大體情況。

*清理標(biāo)本表面血污和壞死組織（若影響取材）。

*測量標(biāo)本大小，記錄。

***系統(tǒng)取材：**

***表面：**取材標(biāo)本表面幾個(gè)關(guān)鍵方位的組織（如四角、邊緣、中央）。

***深部/內(nèi)部：**按解剖層次或區(qū)域取材。例如，乳腺標(biāo)本需按象限取材；胃標(biāo)本需按不同皺襞和距離腫瘤邊緣不同距離取材；腦標(biāo)本需按不同葉區(qū)和深度取材。

***腫瘤相關(guān)：**對于腫瘤標(biāo)本，必須取材腫瘤中心、邊緣（距腫瘤不同距離，如0.5cm、1cm）、切緣（切緣、縫邊）、淋巴結(jié)（區(qū)域淋巴結(jié)、轉(zhuǎn)移灶）等。

***記錄取材部位：**在取材過程中，詳細(xì)記錄每個(gè)取材塊的具體位置和取材目的（如在“胃大彎距腫瘤邊緣2cm處取材一塊”）。

***標(biāo)記取材塊：**使用記號(hào)筆在組織塊表面標(biāo)記取材編號(hào)和取材部位，或使用不同顏色的記號(hào)筆區(qū)分。

***立即固定：**取下的組織塊立即放入裝有新鮮取材固定液的小容器或瓶中，并確保完全浸沒。標(biāo)記清晰。

2.**脫水：**

***目的：**逐步去除組織中的水分，使組織透明，便于后續(xù)包埋。

***原理：**利用乙醇濃度梯度，將組織中的水分置換出來。

***流程：**組織塊從低濃度乙醇逐漸過渡到高濃度乙醇，最后進(jìn)入透明劑（二甲苯）。

***操作：**

*將固定好的組織塊依次放入不同濃度的乙醇溶液中，每次更換乙醇濃度前，需在相應(yīng)濃度的乙醇中浸泡足夠時(shí)間，一般24-48小時(shí)。常用乙醇濃度梯度：70%->85%->95%(I)->95%(II)->100%(I)->100%(II)。

*更換乙醇時(shí)，用鑷子輕輕攪動(dòng)或晃動(dòng)容器，加速脫水和溶解。

*記錄每個(gè)階段的時(shí)間。

3.**透明：**

***目的：**使組織完全透明，與石蠟的折射率接近，便于組織切片時(shí)與石蠟清晰分離。

***試劑：**使用二甲苯（Xylene）。

***流程：**組織塊先后放入二甲苯中兩次，每次約24-48小時(shí)。

***操作：**

*將經(jīng)過高濃度乙醇處理的組織塊放入裝有新鮮二甲苯的容器中。

*靜置足夠時(shí)間，直至組織塊完全透明（外觀無明顯混濁）。

*更換二甲苯，重復(fù)一次。

*透明后的組織應(yīng)完全透明，無色或微黃。

4.**包埋：**

***目的：**將透明的組織塊浸泡在石蠟中，使其硬化，并形成規(guī)則的切片面，便于切片機(jī)操作。

***工具：**包埋盒、石蠟、恒溫包埋儀。

***流程：**

*準(zhǔn)備包埋盒，確保底部平整。

*在包埋盒底部滴加幾滴融化的石蠟。

*將透明后的組織塊小心放入包埋盒中，調(diào)整位置，使其大致居中。

*將包埋盒放入恒溫包埋儀中，加熱石蠟至完全融化（通常45-55°C，具體溫度依石蠟牌號(hào)和包埋儀性能而定）。

*緩慢、均勻地注入融化的石蠟，覆蓋組織塊。確保組織塊被完全浸沒，無氣泡。

*允許石蠟在包埋儀中或室溫下緩慢冷卻、凝固。

*冷卻后，取出包埋盒，置于陰涼處待后續(xù)切片。

（三）切片與染色

1.**切片：**

***目的：**將包埋好的組織塊切成極薄的切片（通常4-7μm），置于載玻片上，以便顯微鏡觀察。

***工具：**脫水機(jī)、切片機(jī)、切片刀、載玻片、切片刀架。

***流程：**

***組織修塊：**檢查石蠟塊，去除表面多余或斷裂的石蠟。必要時(shí)用石蠟刀修整組織塊邊緣，使其平整。

***裝載：**將石蠟塊放置在切片機(jī)的載物臺(tái)上，用專用夾子固定。調(diào)整切片刀的位置，使其能夠準(zhǔn)確切割到組織。

***切片：**開啟切片機(jī)，設(shè)定切片厚度（通常4-5μm）。啟動(dòng)設(shè)備，石蠟塊被自動(dòng)推進(jìn)，刀片切割組織。產(chǎn)生的切片被刀架收集。

***分片：**將連續(xù)的切片按照預(yù)設(shè)的順序（如從組織中心到邊緣，或按區(qū)域編號(hào)）分裝到不同的載玻片上。每張載玻片通常放置1-3個(gè)組織區(qū)域或多個(gè)連續(xù)切片。

***標(biāo)記：**在載玻片背面清晰標(biāo)記標(biāo)本編號(hào)、切片序號(hào)（如“標(biāo)本號(hào)：20231027001，切片號(hào)：1-10”），確保與后續(xù)染色和鏡檢對應(yīng)。

***貼片：**將分裝好的切片輕輕貼附在清潔、干燥、已預(yù)處理（如用多聚賴氨酸處理）的載玻片上?？墒褂脤Ｓ觅N片劑或直接貼附。

***干燥：**將貼好切片的載玻片水平放置，在室溫或37°C溫箱中干燥。

2.**脫蠟與水化：**

***目的：**將石蠟從切片中去除，使組織重新進(jìn)入水溶液環(huán)境，以便進(jìn)行染色。

***流程：**切片依次通過不同濃度乙醇，最后進(jìn)入水。

***操作：**

*將載玻片放入裝有100%二甲苯的染色缸中，浸泡5-10分鐘。

*小心取出，放入裝有100%乙醇的染色缸中，浸泡5-10分鐘。

*依次放入95%乙醇（I）、95%乙醇（II）、70%乙醇各5-10分鐘。

*依次放入蒸餾水或去離子水（I）、蒸餾水或去離子水（II）各5-10分鐘，使組織充分水化。

3.**染色（以HE染色為例）：**

***HE染色（蘇木精-伊紅染色）：**是最常用、最基礎(chǔ)的染色方法，能顯示細(xì)胞核（蘇木精染成藍(lán)色）和細(xì)胞質(zhì)、組織結(jié)構(gòu)（伊紅染成紅色或粉色）。

***流程：**

***蘇木精染色（核染）：**將載玻片放入蘇木精染液中（可加熱或常溫，依染液和設(shè)備而定），染色時(shí)間從幾分鐘到幾十分鐘不等，根據(jù)需要調(diào)整，以獲得理想的染色深度。染色后，用蒸餾水沖洗。

***分化（降低染色深度）：**將載玻片放入1%鹽酸酒精（HCl酒精）溶液中，分化時(shí)間非常短暫（幾秒到幾分鐘），目的是降低染色深度，使細(xì)胞間質(zhì)和背景清晰。分化程度需經(jīng)驗(yàn)判斷。用蒸餾水迅速?zèng)_洗。

***伊紅染色（質(zhì)染）：**將載玻片放入伊紅染液中，染色幾分鐘。伊紅會(huì)使細(xì)胞質(zhì)和背景染成紅色。用蒸餾水沖洗。

***脫水與透明：**依次通過95%乙醇（I）、95%乙醇（II）、100%乙醇（I）、100%乙醇（II）、100%二甲苯各5-10分鐘，使組織脫水并透明。

***封片：**在切片表面滴加適量中性樹膠（如中性香柏油），用蓋玻片輕輕蓋住，用吸水紙吸去多余樹膠，邊緣用指甲油或封片膜封邊。樹膠的作用是固定切片、保護(hù)組織、提高透光性。

4.**特殊染色與免疫組化染色：**

***目的：**對于常規(guī)HE染色難以鑒別的病變、需要確定組織來源、表達(dá)特定標(biāo)志物的情況，進(jìn)行補(bǔ)充染色。

***常見方法：**

***特殊染色：**如網(wǎng)狀纖維染色（VanGieson）、膠原纖維染色（Masson三色染色）、嗜銀纖維染色（銀染）等，用于顯示特定的細(xì)胞外基質(zhì)成分。

***免疫組化染色（Immunohistochemistry,IHC）：**利用抗體與組織細(xì)胞中特定抗原結(jié)合的原理，顯示抗原的分布和表達(dá)情況。常用標(biāo)志物包括上皮細(xì)胞標(biāo)志物（如AE1/AE3、CK19）、間質(zhì)標(biāo)志物（如Vimentin）、神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)志物（如Syn、CgA）等。操作流程通常包括：脫蠟水化、抗原修復(fù)（如熱修復(fù)）、血清封閉、滴加primaryantibody（一抗）、孵育、洗滌、滴加secondaryantibody（二抗）、孵育、洗滌、加入顯色劑（如DAB）、顯色、復(fù)染（如蘇木精）、脫水透明、封片。

***操作要求：**特殊染色和免疫組化染色需遵循相應(yīng)的操作說明書，嚴(yán)格控制溫度、時(shí)間、抗體濃度等條件，并進(jìn)行陰性對照和陽性對照。

（四）鏡檢與診斷報(bào)告

1.**顯微鏡檢查：**

***目的：**仔細(xì)觀察染色切片在顯微鏡下的形態(tài)學(xué)特征。

***設(shè)備：**光學(xué)顯微鏡。

***操作：**

*將蓋有切片的載玻片放置在顯微鏡載物臺(tái)上，蓋上蓋玻片。

*調(diào)整顯微鏡光源亮度、聚光器、可變光圈等，獲得清晰、對比度良好的視野。

*先在低倍鏡下（如10x物鏡）尋找組織結(jié)構(gòu)，找到感興趣區(qū)域。

*切換到高倍鏡（如40x物鏡）進(jìn)行詳細(xì)觀察，重點(diǎn)關(guān)注：

***細(xì)胞形態(tài)：**大小、形狀、核形、核染色質(zhì)形態(tài)、核仁、胞漿量、胞漿顏色和內(nèi)含物。

***組織結(jié)構(gòu)：**細(xì)胞排列方式、腺管/腺泡結(jié)構(gòu)、間質(zhì)成分、是否有特殊結(jié)構(gòu)（如假包膜、出血、壞死、鈣化）。

***與其他組織的鑒別：**與正常組織或良性病變的細(xì)微差別。

*對同一張切片的不同區(qū)域、多張切片的不同區(qū)域進(jìn)行系統(tǒng)觀察，避免漏診。

*如有疑問，可使用油鏡（100x物鏡）進(jìn)一步觀察細(xì)節(jié)。

2.**診斷思考與撰寫報(bào)告：**

***信息整合：**結(jié)合臨床送檢信息、大體描述、HE染色形態(tài)、特殊染色/免疫組化結(jié)果進(jìn)行綜合分析。

***診斷邏輯：**

*根據(jù)形態(tài)學(xué)特征，初步判斷病變的類型（如腫瘤性、炎癥性、反應(yīng)性）。

*如果是腫瘤，進(jìn)一步判斷其分化程度（高分化、中分化、低分化/