大型實驗動物標準作業(yè)指導書一、概述

大型實驗動物標準作業(yè)指導書旨在規(guī)范實驗動物的操作流程，確保動物福利、實驗數據準確性和人員安全。本指導書適用于各類涉及大型實驗動物（如豬、羊、犬、猴等）的實驗研究機構，內容涵蓋動物飼養(yǎng)、健康管理、實驗操作、環(huán)境控制及廢棄物處理等關鍵環(huán)節(jié)。

二、動物飼養(yǎng)管理

（一）環(huán)境要求

1.實驗動物房應保持恒溫、恒濕、通風良好，溫度控制在20±2℃，濕度控制在40%-60%。

2.空氣過濾系統應定期更換濾網，確保空氣潔凈度達到10,000級標準。

3.地面、墻壁、天花板應采用易清潔材料，定期消毒（每周至少2次）。

（二）飼養(yǎng)管理

1.飼養(yǎng)密度：每平米飼養(yǎng)面積不超過2只動物，確保動物有足夠活動空間。

2.飲食管理：提供營養(yǎng)均衡的飼料，每日定時喂食，保持飲水清潔（每日更換）。

3.清潔衛(wèi)生：每日清理動物籠具，每周深度清潔1次，使用70%-75%酒精或消毒液消毒。

（三）健康管理

1.定期體檢：每月進行1次健康檢查，記錄體重、體溫、行為狀態(tài)等數據。

2.疾病監(jiān)測：建立疾病檔案，發(fā)現異常及時隔離并報告。

3.獸醫(yī)支持：配備專業(yè)獸醫(yī)，提供緊急診療和手術支持。

三、實驗操作規(guī)范

（一）實驗前準備

1.動物篩選：選擇健康、年齡匹配的實驗動物，確保實驗結果可靠性。

2.實驗方案：提前審批實驗方案，明確操作步驟、麻醉方式及數據采集方法。

3.設備檢查：確保實驗儀器（如手術臺、呼吸機）功能正常，校準精度符合要求。

（二）實驗過程

1.麻醉操作：使用合格麻醉劑，按體重精確給藥，全程監(jiān)測動物生命體征。

2.手術規(guī)范：嚴格無菌操作，使用消毒器械，減少手術創(chuàng)傷。

3.數據記錄：實時記錄實驗數據，包括生理指標、行為變化等，確保數據完整性。

（三）實驗后處理

1.動物恢復：術后放置恢復區(qū)，觀察至少2小時，確認無生命危險后方可轉移。

2.數據整理：匯總實驗數據，分析結果并撰寫報告。

3.動物處置：實驗結束后的動物可繼續(xù)用于其他研究或人道處理，過程需符合倫理要求。

四、環(huán)境與廢棄物管理

（一）環(huán)境控制

1.氣體排放：實驗產生的有害氣體需經過過濾裝置處理，排放濃度低于國家標準。

2.噪音控制：設備運行噪音低于60分貝，避免對動物造成應激。

3.照明管理：提供12小時明暗交替的光照，模擬自然光照周期。

（二）廢棄物處理

1.生物廢棄物：手術器械、組織樣本等需高壓滅菌后焚燒處理。

2.化學廢棄物：廢液需分類收集，按危險品規(guī)定處理。

3.廢棄物記錄：建立廢棄物臺賬，定期向監(jiān)管機構匯報。

五、人員安全與培訓

（一）人員防護

1.個人防護：實驗人員需穿戴實驗服、手套、護目鏡等防護用品。

2.感染防控：接觸動物前后需洗手消毒，避免交叉感染。

3.急救準備：實驗區(qū)配備急救箱，人員熟悉應急處理流程。

（二）培訓要求

1.新員工培訓：上崗前需接受動物福利、操作規(guī)范及安全知識培訓，考核合格后方可操作。

2.定期復訓：每年進行1次復訓，更新實驗流程及安全標準。

3.持證上崗：關鍵崗位（如獸醫(yī)、麻醉師）需持相關資格證書。

六、附錄

（一）常用消毒劑配制表

1.70%-75%酒精：市售酒精稀釋至所需濃度。

2.高錳酸鉀溶液：0.1%-0.5%濃度，根據消毒對象調整。

3.過氧乙酸溶液：0.2%-0.5%濃度，用于器械浸泡。

（二）實驗記錄表模板

1.動物基本信息：編號、品種、體重、年齡。

2.實驗過程記錄：操作時間、麻醉劑量、生命體征變化。

3.數據分析結果：統計方法、結論建議。

（三）應急處理流程

1.動物攻擊：立即啟動隔離程序，人員撤離至安全區(qū)域。

2.設備故障：緊急聯系維修人員，切換備用設備。

3.疾病爆發(fā)：隔離病患，上報獸醫(yī)并調整實驗方案。

**四、環(huán)境與廢棄物管理**

（一）環(huán)境控制

1.**空氣質量管理：**

*(1)**通風系統維護：**確保實驗動物房通風系統（HVAC）正常運行，定期（建議每月）檢查風機運行狀況、風量分配，并更換或清洗空氣過濾棉/濾網（初效、中效、高效濾網）。高效濾網（HEPA）的更換周期根據使用頻率和壓差監(jiān)測結果確定，通常為6-12個月。通風量需滿足動物需求并考慮人員活動，換氣次數一般不低于15次/小時。

*(2)**有害氣體控制：**對于可能產生氨氣、二氧化碳等氣體的區(qū)域（如飼育區(qū)、實驗操作區(qū)），應設置獨立通風或加強整體通風，并考慮安裝氣體監(jiān)測報警裝置，實時監(jiān)控氨氣濃度等關鍵指標，設定報警閾值（例如，氨氣濃度低于0.5ppm）。定期檢測通風系統對有害氣體的排除效果。

*(3)**空氣過濾：**在靠近動物飼養(yǎng)區(qū)或實驗操作區(qū)的通風回風口可考慮增設活性炭濾網，以吸附實驗中可能產生的揮發(fā)性有機物（VOCs），但需注意活性炭飽和后的及時更換，避免二次污染。

2.**噪音控制：**

*(1)**設備隔震：**對運行時產生較大噪音的設備（如空調壓縮機、水泵、通風風機、真空泵等），應在其基礎或設備與地面接觸處安裝隔震墊或設置隔震溝，減少振動和噪音傳播。

*(2)**設備布局：**將高噪音設備盡量布置在遠離動物飼養(yǎng)區(qū)和敏感實驗區(qū)域的位置，利用建筑結構或隔墻進行阻隔。

*(3)**運行時間管理：**合理安排高噪音設備的運行時間，避免在動物休息時段（如夜間）進行維護或產生噪音的操作。

*(4)**定期檢查：**定期檢查設備運行狀態(tài)，確保軸承潤滑良好，避免因故障產生異常噪音。測量關鍵區(qū)域的噪音水平，確保符合標準（例如，動物飼養(yǎng)區(qū)白天噪音低于60分貝，夜間低于50分貝）。

3.**光照管理：**

*(1)**照明設計：**實驗動物房照明應避免產生頻閃，使用長壽命、光色適宜的燈具（如LED燈）。照明設計需模擬自然光照周期，采用定時開關或光控系統，實現每日12-14小時的明亮期和10-12小時的黑暗期。

*(2)**遮光措施：**黑暗期必須保證環(huán)境完全黑暗，窗簾、百葉窗等遮光設施應完好，防止外界光線干擾動物生理節(jié)律。定期檢查遮光效果。

*(3)**照度測量：**定期使用照度計測量明亮期和黑暗期的光照強度，明亮區(qū)照度應均勻，一般不低于100勒克斯（lux），黑暗區(qū)應確保無可見光源。

（二）廢棄物處理

1.**生物廢棄物處理：**

*(1)**分類收集：**按照廢棄物類型（如感染性廢物、損傷性廢物、體液廢物、普通動物尸體等）進行嚴格分類收集。使用符合標準的、有明確標識的收集容器（如黃色防滲漏塑料袋、利器盒等）。

*(2)**感染性廢物處理：**實驗動物尸體、組織、血液、體液、被其污染的器械、紗布、手套等，應先置于生物安全柜內進行初步消毒（如使用10%漂白水或有效氯濃度為1000-2000ppm的消毒液浸泡30分鐘），然后裝入雙層防滲漏包裝袋，封口嚴密，并標注“感染性廢物”字樣。

*(3)**損傷性廢物處理：**穿刺針、手術刀、玻璃碎片等銳器，應直接放入符合國際安全型銳器盒（防刺穿、防滲漏、防泄漏）中，直至盒滿3/4時封口，并標注“銳器廢物”。

*(4)**高溫高壓滅菌：**所有感染性廢物和大部分體液廢物，在轉移前必須經過高壓蒸汽滅菌處理（參數：壓力121kPa，時間15-20分鐘），滅菌效果需定期監(jiān)測（如使用生物指示劑）。

*(5)**最終處置：**滅菌合格的醫(yī)療廢物，按照當地regulations運至符合資質的醫(yī)療廢物處理廠進行無害化處理（如焚燒）。未達到感染性標準的動物尸體，可進行化尸處理（如化尸爐），或經高壓滅菌后作為普通垃圾處理（需確認當地法規(guī)允許）。

2.**化學廢棄物處理：**

*(1)**分類收集：**廢棄化學試劑、溶液、清洗劑等應根據其化學性質（如酸堿性、易燃性、毒性）進行分類收集。嚴禁將不相容的化學物質混裝在同一容器中。

*(2)**廢液處理：**廢酸、廢堿液應先進行中和處理（如酸堿中和法）至中性（pH6-8）后，再按照“普通化學廢棄物”進行處理。含有重金屬、有機溶劑等有毒有害物質的廢液，需委托有資質的專業(yè)公司進行安全處置，嚴禁直接排放。

*(3)**包裝標識：**所有化學廢棄物容器必須貼有清晰標簽，注明廢物名稱、產生日期、危險特性（如腐蝕、易燃、有毒）等信息。

*(4)**儲存管理：**化學廢棄物應儲存在陰涼、通風、干燥的專門儲存區(qū)域，遠離熱源、火源和incompatiblematerials，防止泄漏或混合反應。

3.**固體廢棄物處理：**

*(1)**普通固體廢棄物：**實驗中產生的紙巾、實驗記錄紙、未被污染的包裝材料等，應作為普通垃圾處理。收集時使用普通垃圾袋，但需確保垃圾袋完好無損，無滲漏風險。

*(2)**包裝廢棄物：**未使用或過期的動物飼料袋、藥品包裝等，根據材質分類處理，可回收利用的應交予回收部門。

*(3)**合規(guī)處置：**所有固體廢棄物均需按照當地regulations進行分類收集和處置，確保符合環(huán)保要求。

4.**廢棄物記錄與處置追蹤：**

*(1)**臺賬記錄：**建立詳細的廢棄物管理臺賬，記錄廢棄物的種類、數量、產生日期、收集人員、轉移日期、最終處置單位及方式等信息。臺賬保存期限根據法規(guī)要求執(zhí)行。

*(2)**轉移聯單：**廢棄物在轉移過程中，必須使用環(huán)保部門規(guī)定的危險廢物轉移聯單制度，確保廢物去向清晰可追溯。

*(3)**定期審核：**定期（如每季度）對廢棄物管理臺賬和處置記錄進行審核，確保所有廢棄物均得到合規(guī)、安全的處理。

**五、人員安全與培訓**

（一）人員防護

1.**個人防護裝備（PPE）選用與使用：**

*(1)**基礎防護：**所有進入實驗動物區(qū)域的人員必須穿戴工作服、工作帽，以減少對動物環(huán)境的污染和自身暴露風險。

*(2)**手部防護：**根據操作性質選擇合適的防護手套。接觸潛在感染性物質或化學試劑時，必須佩戴一次性無菌手套或耐化學手套（如丁腈手套）。接觸動物（特別是非屏障環(huán)境）時，建議佩戴丁腈手套或橡膠手套。操作完成后必須及時脫掉手套并進行手部清潔。

*(3)**眼部防護：**在可能發(fā)生飛濺（如手術、注射、處理腐蝕性物質）的操作中，必須佩戴護目鏡或面屏，必要時可佩戴全面罩。

*(4)**呼吸道防護：**在生物安全柜外進行可能產生氣溶膠的操作（如氣驅式吸痰、高壓滅菌后開蓋），或進入生物安全級別較低的動物房時，建議佩戴醫(yī)用外科口罩。在處理高致病性病原體或存在未知感染風險時，必須佩戴N95/KN95或更高級別的防護口罩和防護面屏。

*(5)**身體防護：**進入動物房操作時，應穿著長袖實驗服，避免皮膚暴露。根據需要可穿防滲透實驗圍裙或套袖。嚴禁佩戴可能掉落或被動物抓取的飾品（如戒指、手表、項鏈、耳環(huán)）。

2.**手部衛(wèi)生：**

*(1)**洗手時機：**每次接觸動物前后、摘掉手套后、處理污染物后、進食、飲水、吸煙、使用衛(wèi)生間前后、進入和離開清潔區(qū)/緩沖區(qū)/污染區(qū)時，都必須進行手部清洗。

*(2)**洗手方法：**使用流動水和抗菌洗手液（含至少60%酒精或含氯消毒劑）徹底清洗雙手，包括指縫和指尖，整個過程不少于20秒。必要時可用含70%-75%酒精的免洗手消毒液進行手部消毒。

*(3)**手部傷口處理：**手部如有破損傷口，必須先進行包扎，然后佩戴雙層手套進行操作，或避免直接接觸。

3.**著裝規(guī)范：**

*(1)**工作服要求：**實驗動物房的工作服應專用，保持清潔干燥，不得穿出實驗區(qū)域。如有污染，應及時更換。

*(2)**進出管理：**進入動物房前，工作服應經過必要的清潔或消毒（如使用消毒液噴灑或紫外線照射）。離開動物房時，工作服不能接觸到外界環(huán)境，應按規(guī)定流程處理或帶回清潔區(qū)換裝。

4.**生物安全柜使用：**

*(1)**操作前檢查：**每次使用前檢查生物安全柜的運行狀態(tài)（燈光、風機聲音、風速指示），確保過濾器完好（目視檢查或根據使用時間/壓差判斷）。

*(2)**正確操作：**確保操作符合安全柜類型（B3/B2型）的要求，物品擺放不超過柜內有效工作區(qū)，避免阻礙氣流。手部操作區(qū)域應靠近前窗中央。盡量減少開門次數和時間。

*(3)**清潔消毒：**每日工作結束后，對操作臺面和內部表面進行清潔和消毒。定期（如每周或根據污染風險）進行內部徹底清潔和消毒。

（二）培訓要求

1.**上崗前培訓：**

*(1)**通用培訓：**所有進入實驗動物房的人員必須接受通用培訓，內容包括：實驗動物福利的基本原則、本指導書規(guī)定的各項操作規(guī)程、生物安全等級及防護要求、廢棄物處理流程、應急預案等。培訓后需通過考核。

*(2)**崗位專項培訓：**根據崗位職責，接受專項培訓：

*飼養(yǎng)人員：動物日常管理、健康監(jiān)測、環(huán)境維護、基礎保定、清潔消毒等。

*實驗操作人員：實驗方案執(zhí)行、麻醉與鎮(zhèn)痛技術、采樣技術、手術操作（如需）、行為觀察、數據記錄等。

*獸醫(yī)人員：動物疾病診斷與治療、手術技術、安樂死規(guī)范、尸體剖檢等。

*設備維護人員：相關儀器設備（HVAC、生物安全柜、監(jiān)測設備等）的操作、維護與故障排除。

*(3)**實際操作培訓：**理論培訓后，必須在經驗豐富的指導下進行實際操作練習，直至熟練掌握。

2.**定期復訓與考核：**

*(1)**復訓頻率：**每