動物實驗養(yǎng)護操作規(guī)程###一、總則

####（一）目的

本規(guī)程旨在規(guī)范動物實驗過程中的養(yǎng)護操作，確保實驗動物的健康、福利和實驗結(jié)果的可靠性。通過標準化操作，減少動物應(yīng)激反應(yīng)，提高實驗數(shù)據(jù)準確性，并符合相關(guān)倫理和生物安全要求。

####（二）適用范圍

本規(guī)程適用于所有涉及實驗動物的飼養(yǎng)、清潔、環(huán)境控制、飲食管理及日常觀察等環(huán)節(jié)。涵蓋嚙齒類、鳥類、魚類及其他實驗動物。

####（三）基本原則

1.**人道主義原則**：確保動物在實驗過程中免受不必要的痛苦和傷害。

2.**標準化原則**：所有操作需遵循統(tǒng)一規(guī)范，避免個體差異影響實驗結(jié)果。

3.**預(yù)防性原則**：通過科學(xué)管理降低疾病傳播風(fēng)險，定期進行健康監(jiān)測。

4.**可追溯原則**：記錄動物來源、飼養(yǎng)環(huán)境、實驗處理等信息，便于問題排查。

###二、飼養(yǎng)環(huán)境管理

####（一）設(shè)施要求

1.**籠具規(guī)格**：根據(jù)動物種類選擇適宜的籠具，確保動物有足夠的活動空間。例如，小鼠籠底面積不應(yīng)小于60cm2，大鼠不應(yīng)小于100cm2。

2.**通風(fēng)與光照**：保持室內(nèi)空氣流通，換氣次數(shù)≥15次/小時；光照周期模擬自然光照（12小時明/暗循環(huán)）。

3.**溫度與濕度**：溫度控制在22±2℃，濕度維持在50±10%。

####（二）清潔消毒

1.**日常清潔**：每日清理糞便和食物殘渣，每周全面清洗籠具（如使用70%酒精或消毒液浸泡）。

2.**環(huán)境消毒**：每月使用紫外燈照射（30分鐘/次）或噴灑消毒劑（如0.1%聚維酮碘溶液）。

3.**墊料更換**：小型動物（如小鼠）每周更換全部墊料，大型動物（如兔）需保持墊料干燥、無結(jié)塊。

###三、飲食與飲水管理

####（一）飼料供應(yīng)

1.**飼料類型**：選用符合實驗需求的標準化飼料（如SPF級小鼠飼料），避免霉變或過期。

2.**投喂量**：根據(jù)動物種類和實驗需求調(diào)整，每日定時投喂，避免過量。例如，小鼠每日投喂量約5-8g/只。

3.**儲存條件**：飼料需儲存在陰涼、干燥、避光的環(huán)境中，開封后建議48小時內(nèi)用完或冷藏保存。

####（二）飲水管理

1.**飲水器**：使用自動化飲水器，確保水質(zhì)清潔，每日更換飲水。

2.**水質(zhì)標準**：符合GB/T6682標準，定期檢測pH值（6.5-7.5）、總硬度（≤200mg/L）。

3.**斷水要求**：特殊實驗（如脫水實驗）需嚴格記錄，但需確保動物在非實驗時段有充足飲水。

###四、日常觀察與記錄

####（一）健康監(jiān)測

1.**行為觀察**：每日記錄動物的活動狀態(tài)、食欲、精神狀態(tài)等，異常情況需立即上報。

2.**體重測量**：每周稱重1次，記錄體重變化趨勢，異常需分析原因（如疾病或應(yīng)激）。

3.**體征檢查**：每月進行一次基礎(chǔ)檢查，包括呼吸頻率、皮膚完整性、眼睛清潔度等。

####（二）記錄規(guī)范

1.**記錄內(nèi)容**：包括動物編號、性別、品種、飼養(yǎng)環(huán)境數(shù)據(jù)、飲食飲水情況、異常事件及處理措施。

2.**記錄工具**：使用電子或紙質(zhì)記錄表，確保信息完整、字跡清晰。

3.**數(shù)據(jù)存檔**：實驗結(jié)束后，所有記錄需歸檔保存至少3年，便于后續(xù)查閱。

###五、廢棄物處理

####（一）固體廢棄物

1.**分類收集**：動物尸體、墊料、廢棄飼料等需裝入專用袋，標記“實驗動物廢棄物”字樣。

2.**滅菌處理**：高溫高壓滅菌（121℃，15分鐘）或化學(xué)消毒（如10%甲醛浸泡24小時）后，交由有資質(zhì)機構(gòu)處理。

####（二）液體廢棄物

1.**污水排放**：實驗廢水需經(jīng)消毒處理（如加入次氯酸鈉至余氯0.5mg/L），符合環(huán)保排放標準。

2.**沖洗用水**：籠具清洗用水需過濾沉淀，避免病原體擴散。

###六、人員操作規(guī)范

####（一）消毒要求

1.**進入環(huán)境**：操作前需更換實驗服，使用消毒液洗手（如含氯消毒液）。

2.**工具消毒**：所有接觸動物的工具（如抓取棒）需定期滅菌（如高壓蒸汽滅菌）。

####（二）行為準則

1.**輕柔操作**：避免粗暴抓取，減少動物應(yīng)激。如需捕捉，使用專用器械（如小鼠抓取籠）。

2.**禁止行為**：禁止在飼養(yǎng)區(qū)飲食、吸煙，避免產(chǎn)生噪音或震動。

###七、應(yīng)急處理

####（一）常見問題

1.**疾病爆發(fā)**：發(fā)現(xiàn)異常動物立即隔離，送檢病原并采取控制措施（如淘汰或治療）。

2.**意外傷害**：如動物受傷（如骨折），需緊急處理（如止血、包扎），并記錄處理過程。

####（二）報告流程

1.**即時報告**：任何異常情況需在2小時內(nèi)上報實驗負責(zé)人。

2.**記錄更新**：應(yīng)急處理措施需完整記錄在實驗日志中。

###八、附則

本規(guī)程由實驗管理部門負責(zé)解釋和修訂，所有相關(guān)人員需定期接受培訓(xùn)，確保操作符合標準。每年審核一次規(guī)程的適用性，必要時更新版本。

###二、飼養(yǎng)環(huán)境管理（續(xù)）

####（二）清潔消毒（續(xù)）

4.**生物安全隔離**：

(1)**高風(fēng)險實驗**：涉及病原體操作時，需使用獨立實驗單元，包括專用更衣室、獨立通風(fēng)系統(tǒng)和負壓消毒通道。

(2)**進出道具**：使用一次性傳遞窗或風(fēng)淋室，所有工具需外包裝消毒（如75%酒精噴灑）后進入。

5.**特殊消毒場景**：

(1)**空籠消毒**：實驗結(jié)束后，籠具需徹底清洗后，使用高濃度消毒劑（如10%過氧化氫）浸泡24小時，再用清水沖洗。

(2)**污染事件**：如發(fā)生動物咬籠或逃逸，需對周邊區(qū)域擴大消毒范圍，并評估環(huán)境二次污染風(fēng)險。

####（三）環(huán)境參數(shù)監(jiān)測

1.**監(jiān)測設(shè)備**：使用專業(yè)環(huán)境監(jiān)測儀（如ThermoScientificHeracell系列），定期檢測以下指標：

(1)溫度：±0.5℃精度，每4小時記錄一次。

(2)濕度：±5%精度，每4小時記錄一次。

(3)氣流速度：30-50cm/s，使用熱球式風(fēng)速儀每月校準。

(4)照度：0-1000Lux，使用分光光度計每季度檢測。

2.**異常處理**：

(1)**溫度超標**：立即啟動空調(diào)系統(tǒng)，檢查送回風(fēng)溫度，必要時調(diào)整設(shè)定值（小鼠房22±2℃）。

(2)**濕度過高**：開啟除濕設(shè)備，檢查門窗密封性，排除漏水隱患。

3.**數(shù)據(jù)記錄**：所有監(jiān)測數(shù)據(jù)需自動存檔，每日生成報表，存檔周期≥3年。

###三、飲食與飲水管理（續(xù)）

####（一）飼料供應(yīng)（續(xù)）

1.**飼料配方調(diào)整**：

(1)**實驗需求**：如需限制熱量攝入，選用低脂特殊飼料（如HarlanTD.S.38L）；需高蛋白實驗，選用BSH飼料（如Rat/MouseStandardPellets）。

(2)**更換流程**：新舊飼料需分階段過渡（如前3天混合10%新飼料，后5天混合30%，再全換），避免消化紊亂。

2.**儲存條件（續(xù)）**：

(1)**蟲害防治**：儲存區(qū)需離地30cm，使用防鼠網(wǎng)，定期檢查有無蟲鼠害跡象。

(2)**庫存管理**：先進先出原則，優(yōu)先使用離生產(chǎn)日期最近的批次，庫存量≤2個月消耗量。

####（二）飲水管理（續(xù)）

1.**飲水器類型選擇**：

(1)**小鼠/大鼠**：使用重力式飲水器（如Nalgene乳頭式），確保乳頭高度與動物背線齊平。

(2)**兔/犬**：使用瓶式飲水系統(tǒng)，每日檢查水位，避免污染。

2.**水質(zhì)異常處理**：

(1)**渾濁**：立即更換濾芯（如PP濾膜，孔徑0.22μm），清洗水壺。

(2)**異味**：檢測氯含量（余氯0-0.1mg/L），如超標需使用活性炭過濾器。

3.**飲水限制實驗**：

(1)**記錄要求**：精確測量每日飲水量（如使用量杯或電子飲水計），記錄動物編號、體重變化。

(2)**倫理審查**：需通過機構(gòu)動物保護委員會批準，并設(shè)定最大限制時間（如兔≤12小時）。

###四、日常觀察與記錄（續(xù)）

####（一）健康監(jiān)測（續(xù)）

1.**異常指標清單**：

(1)**行為**：弓背、驚恐、刻板動作、拒食、蜷縮。

(2)**生理**：呼吸急促/困難、眼睛紅腫/分泌物、肛門紅潤/潮濕（腹瀉）。

(3)**體征**：體重下降>5%、皮膚脫毛、跛行。

2.**疾病篩查**：

(1)**常規(guī)檢查**：每月使用電子體溫計測量體溫（正常值：小鼠36.5-37.5℃）。

(2)**寄生蟲**：每季度使用透明膠帶法檢查體表寄生蟲（如跳蚤）。

####（二）記錄規(guī)范（續(xù)）

1.**電子記錄系統(tǒng)**：

(1)**模塊設(shè)置**：包含動物基本信息、環(huán)境數(shù)據(jù)、飲食飲水、異常事件、用藥（如適用）等字段。

(2)**權(quán)限管理**：操作人員需密碼登錄，主管可查看所有記錄，但僅限授權(quán)人員修改。

2.**紙質(zhì)記錄表（備用）**：

(1)**表格設(shè)計**：表格需包含日期、觀察者、動物編號、異常描述、處理措施、備注等列。

(2)**簽字確認**：每日觀察完成后，記錄者需簽字，主管每周審核一次。

###五、廢棄物處理（續(xù)）

####（一）固體廢棄物（續(xù)）

1.**特殊廢棄物**：

(1)**針頭/注射器**：需放入銳器盒（如18mm直徑，高度≥30cm），定期交由醫(yī)療廢物處理公司。

(2)**生物培養(yǎng)物**：實驗結(jié)束后，培養(yǎng)基需高壓滅菌（15MPa，121℃，15分鐘）再丟棄。

2.**運輸要求**：

(1)**容器標識**：所有廢棄物袋需印制“生物危險”字樣及產(chǎn)生日期。

(2)**運輸路線**：使用專用密閉車運輸至?xí)捍纥c，避免泄漏。

####（二）液體廢棄物（續(xù)）

1.**沉淀處理**：

(1)**流程**：實驗廢水→沉淀池（停留時間≥12小時）→消毒處理。

(2)**檢測**：每月檢測沉淀物中懸浮物含量（≤50mg/L）。

2.**消毒劑管理**：

(1)**配制記錄**：每次配制需記錄藥品名稱、濃度、配制人、日期。

(2)**廢棄處置**：過期消毒液需中和處理（如加入NaOH至pH中性）再排放。

###六、人員操作規(guī)范（續(xù)）

####（一）消毒要求（續(xù)）

1.**手部消毒**：

(1)**消毒劑選擇**：使用含氯消毒液（如0.2%次氯酸鈉）或含季銨鹽洗手液（如潔爾滅）。

(2)**揉搓時間**：每次需揉搓20秒以上，戴手套時需先脫手套再洗手。

2.**空氣消毒**：

(1)**紫外線消毒**：實驗結(jié)束后，關(guān)閉動物接觸前30分鐘開啟紫外燈（強度≥30μW/cm2）。

(2)**臭氧消毒**：適用于短期空置籠具，臭氧濃度0.2mg/m3，作用時間60分鐘。

####（二）行為準則（續(xù)）

1.**動物搬運**：

(1)**小鼠**：使用外包布的小鼠盒，避免直接抓取后肢。

(2)**大鼠**：使用前爪+尾巴固定法，注意避免壓迫胸腔。

2.**應(yīng)激避免**：

(1)**聲音控制**：實驗操作需在隔音環(huán)境下進行，避免敲擊設(shè)備。

(2)**操作頻次**：每日每籠操作時間≤5分鐘，連續(xù)工作超過2小時需休息。

###七、應(yīng)急處理（續(xù)）

####（一）常見問題（續(xù)）

1.**中毒事件**：

(1)**識別**：觀察動物抽搐、呼吸困難、瞳孔散大等。

(2)**措施**：立即隔離，如已知中毒物，參考《常用中毒物質(zhì)手冊》進行催吐/導(dǎo)瀉（僅限獸醫(yī)操作）。

2.**火災(zāi)處置**：

(1)**初期撲救**：使用二氧化碳滅火器（避免水污染），關(guān)閉實驗區(qū)電源。

(2)**疏散**：沿安全路線撤離，攜帶動物應(yīng)急箱（含保溫毯、氧氣瓶）。

####（二）報告流程（續(xù)）

1.**分級報告**：

(1)**一般事件**：24小時內(nèi)提交書面報告，含事件描述、處理結(jié)果。

(2)**重大事件**：立即電話通知主管，同時提交應(yīng)急預(yù)案執(zhí)行情況。

2.**記錄完善**：

(1)**電子系統(tǒng)**：自動生成事件編號，關(guān)聯(lián)相關(guān)記錄（如環(huán)境數(shù)據(jù)）。

(2)**紙質(zhì)補充**：在原始記錄表后附上詳細圖示（如污染范圍）。

###八、附則（續(xù)）

####（一）培訓(xùn)要求

1.**新員工**：需完成72小時理論培訓(xùn)（含解剖、疾病識別、操作考核），考核合格后方可獨立操作。

2.**定期復(fù)訓(xùn)**：每年進行2次實操演練（如動物保定、急救處理），成績存檔。

####（二）設(shè)備維護

1.**關(guān)鍵設(shè)備**：

(1)**空