細(xì)胞治療TALEN基因編輯考試試卷與答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.TALEN技術(shù)中TALE蛋白的重復(fù)單元通常識(shí)別幾個(gè)堿基？A.1個(gè)B.2個(gè)C.3個(gè)D.4個(gè)2.以下哪種不是TALEN構(gòu)建載體的常用元件？A.啟動(dòng)子B.終止子C.抗性基因D.熒光蛋白基因3.TALEN基因編輯技術(shù)的優(yōu)勢(shì)不包括？A.特異性高B.脫靶效應(yīng)低C.操作復(fù)雜D.可編輯多種基因4.最早發(fā)現(xiàn)TALE蛋白的細(xì)菌是？A.大腸桿菌B.金黃色葡萄球菌C.黃單胞菌D.肺炎鏈球菌5.TALEN作用于DNA的哪個(gè)部位？A.磷酸二酯鍵B.氫鍵C.糖苷鍵D.肽鍵6.構(gòu)建TALEN質(zhì)粒時(shí)常用的酶不包括？A.限制性內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.以上都不是7.TALEN導(dǎo)入細(xì)胞的方法不包括？A.電穿孔法B.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法C.基因槍法D.免疫共沉淀法8.檢測(cè)TALEN基因編輯效果常用的技術(shù)是？A.WesternblotB.RT-PCRC.測(cè)序D.ELISA9.TALEN基因編輯可以實(shí)現(xiàn)？A.基因敲除B.基因敲入C.基因定點(diǎn)突變D.以上都可以10.以下關(guān)于TALEN說(shuō)法錯(cuò)誤的是？A.由TALE蛋白和核酸酶結(jié)構(gòu)域組成B.能特異性識(shí)別DNA序列C.只能用于動(dòng)物細(xì)胞編輯D.可用于基因功能研究二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.TALEN技術(shù)中TALE蛋白的特點(diǎn)有（）A.模塊化結(jié)構(gòu)B.可識(shí)別特定DNA序列C.高度特異性D.可人工設(shè)計(jì)2.構(gòu)建TALEN載體需要考慮的因素有（）A.載體骨架B.啟動(dòng)子強(qiáng)度C.融合蛋白表達(dá)D.抗性標(biāo)記3.提高TALEN基因編輯效率的方法有（）A.優(yōu)化TALEN設(shè)計(jì)B.選擇合適的導(dǎo)入方法C.提高細(xì)胞活性D.增加TALEN濃度4.TALEN基因編輯可能產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)有（）A.脫靶效應(yīng)B.細(xì)胞毒性C.免疫反應(yīng)D.基因沉默5.以下哪些實(shí)驗(yàn)可以用于驗(yàn)證TALEN基因編輯成功（）A.基因組PCRB.酶切鑒定C.熒光定量PCRD.蛋白質(zhì)印跡6.適用于TALEN技術(shù)的細(xì)胞類型有（）A.原代細(xì)胞B.細(xì)胞系C.干細(xì)胞D.生殖細(xì)胞7.TALEN與ZFN技術(shù)相比，優(yōu)勢(shì)在于（）A.設(shè)計(jì)更靈活B.特異性更高C.更容易構(gòu)建D.成本更低8.TALEN基因編輯在以下哪些領(lǐng)域有應(yīng)用前景（）A.疾病治療B.作物育種C.藥物研發(fā)D.基因治療9.影響TALEN導(dǎo)入細(xì)胞效率的因素有（）A.細(xì)胞類型B.導(dǎo)入試劑C.細(xì)胞密度D.培養(yǎng)條件10.以下關(guān)于TALEN蛋白結(jié)構(gòu)說(shuō)法正確的是（）A.N端為轉(zhuǎn)運(yùn)結(jié)構(gòu)域B.C端為核酸酶結(jié)構(gòu)域C.中間為T(mén)ALE重復(fù)結(jié)構(gòu)域D.包含信號(hào)肽三、判斷題（每題2分，共10題）1.TALEN可以對(duì)線粒體DNA進(jìn)行編輯。（）2.構(gòu)建TALEN載體時(shí)，所有的TALE重復(fù)單元長(zhǎng)度都一樣。（）3.TALEN技術(shù)只能用于基因敲除，不能用于基因敲入。（）4.不同的TALE蛋白識(shí)別不同的DNA序列是由其重復(fù)單元的氨基酸序列決定的。（）5.電穿孔法導(dǎo)入TALEN時(shí)，電壓越高效果越好。（）6.TALEN基因編輯效率只與TALEN本身設(shè)計(jì)有關(guān)，與細(xì)胞狀態(tài)無(wú)關(guān)。（）7.檢測(cè)TALEN基因編輯效果時(shí)，測(cè)序結(jié)果能直接判斷是否編輯成功。（）8.TALEN可以在原核細(xì)胞中發(fā)揮基因編輯作用。（）9.構(gòu)建TALEN載體不需要考慮密碼子優(yōu)化。（）10.TALEN技術(shù)的脫靶效應(yīng)可以完全避免。（）四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述TALEN基因編輯技術(shù)的基本原理。2.簡(jiǎn)要說(shuō)明構(gòu)建TALEN載體的主要步驟。3.列舉兩種檢測(cè)TALEN基因編輯效果的方法及原理。4.說(shuō)出TALEN技術(shù)在疾病治療方面可能的應(yīng)用方向。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論TALEN基因編輯技術(shù)與CRISPR/Cas9技術(shù)在應(yīng)用上的異同點(diǎn)。2.分析TALEN基因編輯技術(shù)在作物育種中的優(yōu)勢(shì)和潛在風(fēng)險(xiǎn)，并提出應(yīng)對(duì)策略。3.如何評(píng)估TALEN基因編輯產(chǎn)品的安全性，結(jié)合實(shí)際談?wù)勀愕目捶ā?.探討TALEN基因編輯技術(shù)在未來(lái)基因治療領(lǐng)域的發(fā)展趨勢(shì)和面臨的挑戰(zhàn)。答案一、單項(xiàng)選擇題1.C2.D3.C4.C5.A6.C7.D8.C9.D10.C二、多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ABC5.ABCD6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABC三、判斷題1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.×10.×四、簡(jiǎn)答題1.TALEN由TALE蛋白和核酸酶結(jié)構(gòu)域組成。TALE蛋白可特異性識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)DNA序列，核酸酶結(jié)構(gòu)域切割該位點(diǎn)的DNA雙鏈，細(xì)胞自身修復(fù)機(jī)制對(duì)斷裂DNA進(jìn)行修復(fù)，實(shí)現(xiàn)基因敲除、敲入或定點(diǎn)突變。2.主要步驟：選擇合適載體骨架，設(shè)計(jì)TALE重復(fù)單元并合成，將其與載體連接，加入啟動(dòng)子、終止子、抗性基因等元件，構(gòu)建完整的TALEN載體。3.測(cè)序：直接測(cè)定目標(biāo)基因序列，與野生型對(duì)比判斷是否編輯成功；酶切鑒定：若編輯成功可能改變酶切位點(diǎn)，通過(guò)酶切產(chǎn)物電泳條帶判斷。4.用于治療單基因遺傳病，通過(guò)編輯突變基因恢復(fù)正常功能；癌癥治療，編輯相關(guān)基因抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等。五、討論題1.相同點(diǎn)：都能實(shí)現(xiàn)基因編輯，用于基因功能研究、疾病治療等領(lǐng)域。不同點(diǎn)：CRISPR/Cas9操作更簡(jiǎn)便，應(yīng)用更廣泛；TALEN特異性高，設(shè)計(jì)更靈活，但構(gòu)建復(fù)雜。2.優(yōu)勢(shì)：可精準(zhǔn)改良作物性狀，加速育種進(jìn)程。風(fēng)險(xiǎn)：可能產(chǎn)生脫靶效應(yīng)，影響非目標(biāo)基因；引發(fā)生態(tài)安全問(wèn)題。策略：優(yōu)化設(shè)計(jì)減少脫靶，進(jìn)行安全性評(píng)估。3.從以