臨床微生物標(biāo)本采集運(yùn)送及處理臨床標(biāo)本的分類帶菌標(biāo)本無菌標(biāo)本痰液血液咽拭子腦脊液尿液關(guān)節(jié)腔積液糞便胸腹水、膽汁其他類別其他類別1.血培養(yǎng)2.腦脊液培養(yǎng)3.下呼吸道（痰培養(yǎng)）標(biāo)本4.穿刺液培養(yǎng)5.中段尿培養(yǎng)6.糞便標(biāo)本7.生殖道標(biāo)本8.膿液和傷口標(biāo)本血培養(yǎng)問題一：血培養(yǎng)的指征是什么?

當(dāng)懷疑血流感染或膿毒癥時(shí)，應(yīng)常規(guī)行血培養(yǎng)懷疑患者有血流感染的癥狀有：不明原因的發(fā)燒(＞38℃)或體溫過低(＜36℃)白細(xì)胞增多（＞10,000/ul），粒細(xì)胞減少（＜1,000ul）休克，寒顫，僵直嚴(yán)重的局部感染(腦膜炎，心內(nèi)膜炎，肺炎，腎盂腎炎，腹部術(shù)后感染，…)心率異常加快低血壓或高血壓呼吸頻率加快03060時(shí)間(分鐘)體溫血培養(yǎng)采血時(shí)機(jī)細(xì)菌濃度問題二：懷疑血流感染，何時(shí)采血最佳？盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時(shí)采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥之前采血培養(yǎng)問題三：應(yīng)該采幾份血液標(biāo)本?每位患者采血最少2套，3套更好

初發(fā)患者，絕不能只采1套標(biāo)本成人“一套”血培養(yǎng)應(yīng)該包括需氧瓶和厭氧瓶各一個(gè)，也叫“一份”注意：一次穿刺采血，算“一套”，采集第二套應(yīng)從另一個(gè)穿刺點(diǎn)獲得。兒童一般只做需氧培養(yǎng)，特殊患者才考慮厭氧培養(yǎng)

采血套數(shù)Weinsteinetal.DetectionofBloodstreamInfectionsinAdults:HowManyBloodCulturesAreNeededJClinMicrobiol.2007;45:3546-3548表皮葡萄球菌的臨床意義2－3套血培養(yǎng)，有助于污染的判斷。Tokars,JI.ClinInfectDis2004;39:333污染菌致病菌？

采集1套無法判斷是病原菌還是污染菌。問題四：

標(biāo)本須間隔多久采集?同時(shí)或短時(shí)間內(nèi)采集2－3套血培養(yǎng)，因?yàn)轶w內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)會(huì)在15～30min內(nèi)清除掉進(jìn)入人體內(nèi)的細(xì)菌可疑急性心內(nèi)膜炎患者要立即取血作血培養(yǎng)，30分鐘內(nèi)完成3套血培養(yǎng)的采集，采集后立即進(jìn)行抗菌藥的經(jīng)驗(yàn)治療。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)?？梢傻膩喖毙孕膬?nèi)膜炎患者每間隔30分鐘至1h采集1套，連續(xù)采集3套標(biāo)本。如果24小時(shí)內(nèi)報(bào)告陰性，則繼續(xù)采集2套血培養(yǎng)。

問題五：

應(yīng)該采集多少血液?血液中細(xì)菌和真菌的檢出率依賴于足夠的血量，但并非越多越好，超過一定數(shù)量的采血量會(huì)稀釋培養(yǎng)基內(nèi)的肉湯，使肉湯無法有效中和血中的抑制物質(zhì)（補(bǔ)體、抗體、抗生素）。血量與培養(yǎng)液的比例以

1：5~1：10為宜，但對(duì)已接受抗菌藥物長達(dá)10天以上的患者，采血量與培養(yǎng)基的比例應(yīng)為1：20或大于1：20為宜。成人5~10ml兒童3~5ml嬰幼兒1~2ml骨髓1~2ml兒童一般只需采集需氧瓶，一般靜脈血1－5ml采血量不足時(shí)應(yīng)優(yōu)先保證需氧瓶，因臨床90％以上的感染為需氧菌或兼性厭氧菌感染問題六：血培養(yǎng)瓶的運(yùn)送不要放入溫箱，會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌進(jìn)入生長對(duì)數(shù)期，從而錯(cuò)過檢測的最佳時(shí)期。閾值報(bào)陽采集要點(diǎn)：1.每一對(duì)血培養(yǎng)應(yīng)當(dāng)從身體的不同部位采集2.用來培養(yǎng)的血推薦是靜脈血3.盡量避免從靜脈導(dǎo)管中抽血4.皮膚和瓶子的消毒非常關(guān)鍵5.蝶形針：先需氧后厭氧

注射器：先厭氧后需氧導(dǎo)管相關(guān)性血流感染CRBSI導(dǎo)管可拔除的，應(yīng)采集外周靜脈血2套做血培養(yǎng)，同時(shí)送檢導(dǎo)管尖端5cm做一般細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定導(dǎo)管不可拔除的，應(yīng)采集外周靜脈血2套做血培養(yǎng)，同時(shí)采集導(dǎo)管血1套做血培養(yǎng)，同時(shí)送檢腦脊液培養(yǎng)采集的臨床指征在生理情況下，血液和腦脊液之間有血腦屏障，阻礙各種微生物通過血液進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。因此正常人的腦脊液是絕對(duì)無菌的。當(dāng)懷疑結(jié)核性、化膿性、流行性、霉菌性腦膜炎時(shí)進(jìn)行腦脊液培養(yǎng)。標(biāo)本采集由臨床醫(yī)生以無菌操作行腰椎穿刺，采集約3-5ml腦脊液于3支無菌試管中，每支試管至少1-2ml，然后馬上將第2根送至實(shí)驗(yàn)室。做腦脊液培養(yǎng)時(shí)，建議同時(shí)做血培養(yǎng)。腰穿時(shí)必須作徹底消毒和無菌操作。腦脊液標(biāo)本的運(yùn)送采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。常溫立即送檢，實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)本后應(yīng)立即接種。腦脊液標(biāo)本送檢的理想時(shí)間為15分鐘內(nèi)，半小時(shí)送檢是可接受的，如果送檢時(shí)間超過1小時(shí)，則會(huì)影響結(jié)果。注：腦膜炎雙球菌具有自溶酶，放置時(shí)間過長易自溶死亡，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌離體后也易死亡，因此，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，并且保溫（禁止放冰箱，因腦膜炎雙球菌遇冷死亡）下呼吸道（痰培養(yǎng)）標(biāo)本采集的臨床指征咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常見的癥狀?？┭ㄅ菽怠Ⅴr血和痰中帶血等呼吸困難，呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛發(fā)熱伴WBC增高尤其是中性粒細(xì)胞或CRP明顯增高胸部影像學(xué)檢查提示感染可能標(biāo)本采集痰（咳出的）痰（誘導(dǎo)的）支氣管標(biāo)本采集指南1.在護(hù)士指導(dǎo)下取標(biāo)本2.先用清水清洗或漱口3.深咳痰以獲得深部痰，放入無菌痰杯中4.不能取鼻后液1.先刷洗牙齦和舌2.再用清水漱口3.用霧化器使患者吸入約25ml3-10％的無菌鹽水4.采集誘導(dǎo)的痰液放入無菌痰杯1.由臨床醫(yī)生操作采集2.抽吸物或洗出物放入痰采集容器中3.將刷取物放入裝有鹽水的無菌容器中痰培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留物采集后的標(biāo)本應(yīng)立即送往實(shí)驗(yàn)室（室溫≤2ｈ）申請(qǐng)抗酸桿菌檢查或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時(shí)送檢，應(yīng)放入4℃冰箱，以免雜菌生長，但存放時(shí)間應(yīng)不超過24ｈ懷疑嗜血桿菌或肺炎鏈球菌感染時(shí)，標(biāo)本應(yīng)立即送檢，切忌冷藏穿刺液培養(yǎng)穿刺液主要包括：膽汁胸水腹水心包液關(guān)節(jié)液腦脊液

在正常人體中，上述體液均是無菌的。有感染的情況下檢出的細(xì)菌，在排除污染后應(yīng)視為病原菌，及時(shí)給予正確的治療。

采集的臨床指征臨床上出現(xiàn)胸腔積液（胸水）、腹腔積液（腹水）、關(guān)節(jié)液、心包腔積液、鞘膜腔積液等情況時(shí)，多因漿膜腔發(fā)生循環(huán)障礙、炎癥、癌浸潤等病變，腔內(nèi)液體滲漏增加所致。標(biāo)本采集一般由臨床醫(yī)師在無菌操作下穿刺抽取或外科手術(shù)采集標(biāo)本。?。怠保埃恚煊跓o菌肝素抗凝管中（０.５ｍｇ肝素可抗凝５ｍｌ標(biāo)本），充分混勻后立即送檢，不能有凝塊。中段尿培養(yǎng)采集的臨床指征1.尿痛、尿急、尿頻等典型的尿路感染癥狀2.出現(xiàn)血尿或膿尿3.泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前4.留置導(dǎo)尿管時(shí)間太長，患者出現(xiàn)發(fā)熱5.尿常規(guī)中WBC高和（或）亞硝酸鹽陽性

尿感根據(jù)感染部位分為：

上尿路感染（腎盂腎炎）下尿路感染（膀胱炎、尿道炎)

男性可出現(xiàn)前列腺炎標(biāo)本采集一般認(rèn)為來自正常尿液是無菌的，而尿道口有正常菌群寄生，標(biāo)本的采集必須無菌操作。1.女性（female）：成年女性外陰部以肥皂水清洗，再用無菌水洗凈，用無菌紗布擦拭，然后排尿棄去前段尿，留取中段尿3毫升，置于無菌容器內(nèi)。2.男性（male）：用肥皂水清洗尿道口，后用清水洗后取中段尿。包皮過長者為防止包皮內(nèi)細(xì)菌污染，可將包皮翻開沖洗后再取中段尿。3.兒童（children）：采集中段尿較困難。如尿中細(xì)菌明顯增多，可高度懷疑尿路感染，無細(xì)菌則可否定，細(xì)菌數(shù)中度增加時(shí)，有必要用膀胱穿刺術(shù)（vesicopuncture）或?qū)颍╱rethralcatheterization）采集尿液。4.兩側(cè)腎盂尿：由醫(yī)生采集，視為無菌體液。5.膀胱穿刺尿：由醫(yī)生采集，此法用于厭氧菌培養(yǎng)。也可床旁注入?yún)捬跹囵B(yǎng)瓶。留取中段尿簡單易行，又無感染的危險(xiǎn)。通常取晨起第一次尿送檢。尿液在膀胱內(nèi)停留6-8h以上（給細(xì)菌足夠的繁殖時(shí)間）尿標(biāo)本必須用無菌帶螺帽的容器采集，否則為拒收標(biāo)本。痰培養(yǎng)容器？NO。。。

糞便標(biāo)本采集指征腹瀉病人應(yīng)盡量在急性期（３天內(nèi)）、在用抗生素前留取標(biāo)本以提高病原菌的檢出率，陳舊標(biāo)本影響檢出陽性率。連續(xù)出現(xiàn)膿血、黏液、糊狀、米泔樣等形狀異常的糞便。疑似細(xì)菌性食物中毒患者，大便培養(yǎng)可作為一個(gè)輔助檢查手段。懷疑感染傷寒沙門菌、細(xì)菌性痢疾的患者。胃腸道感染懷疑霍亂等弧菌感染者。標(biāo)本采集無需特別準(zhǔn)備，但最好不要住院超過３ｄ，在使用抗生素前采集最佳。自然排便后，可挑取新鮮糞便中有膿血、黏液部分的糞便約２～３ｇ，液體糞便取絮狀物２～３ｍｌ，糊狀、米泔樣等性狀異常的糞便盛于無菌的容器中或置于保存液中送檢。大便標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄漏或容器外部留有殘留物。糞便標(biāo)本：室溫1小時(shí)內(nèi)送至。直腸拭子（proctoswab）：室溫1小時(shí)內(nèi)送至。高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本室溫1小時(shí)內(nèi)送至，運(yùn)送必須符合特殊標(biāo)本的安全要求。堿性蛋白胨水：霍亂弧菌增菌培養(yǎng)生殖道標(biāo)本標(biāo)本采集男性：翻起包皮，無菌生理鹽水沖洗尿道口，采集從尿道口溢出的膿性分泌物或用男性專用拭子插入尿道內(nèi)2~4cm處取分泌物。前列腺液可用前列腺按摩法采集標(biāo)本于無菌試管。女性：先用生理鹽水局部沖洗，使用窺器擴(kuò)張陰道，用無菌棉拭子根據(jù)臨床需要采集陰道、宮頸、宮內(nèi)分泌物。采集之后的標(biāo)本需密封好，盡可能采用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基拭子轉(zhuǎn)運(yùn)（阿米斯拭子），冷藏（2~8℃）保存，懷疑有淋球菌感染的應(yīng)采用常溫保存，盡快送檢。