細(xì)胞治療高密度培養(yǎng)技術(shù)員崗位考試試卷及答案單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞高密度培養(yǎng)常用的生物反應(yīng)器類型是（）A.攪拌罐式B.氣升式C.固定床式D.流化床式2.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，控制溶解氧常用的氣體是（）A.空氣B.氮?dú)釩.氧氣D.二氧化碳3.以下哪種培養(yǎng)基成分主要提供細(xì)胞能量（）A.氨基酸B.葡萄糖C.維生素D.無機(jī)鹽4.細(xì)胞計(jì)數(shù)常用的方法是（）A.比濁法B.平板計(jì)數(shù)法C.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法D.重量法5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，適宜的pH范圍一般是（）A.6.0-6.5B.6.5-7.0C.7.2-7.4D.7.5-8.06.進(jìn)行細(xì)胞無菌操作時(shí)，超凈工作臺(tái)需提前開啟多久（）A.5分鐘B.15分鐘C.30分鐘D.60分鐘7.細(xì)胞凍存常用的保護(hù)劑是（）A.甘油B.乙醇C.DMSOD.丙酮8.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，污染后出現(xiàn)菌絲狀物質(zhì)，最可能的污染是（）A.細(xì)菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染9.細(xì)胞高密度培養(yǎng)時(shí)，提高細(xì)胞密度的關(guān)鍵因素是（）A.培養(yǎng)基配方B.培養(yǎng)溫度C.攪拌速度D.通氣量10.細(xì)胞傳代時(shí)，常用的消化液是（）A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.纖維素酶多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞高密度培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)有（）A.提高細(xì)胞產(chǎn)量B.降低成本C.減少占地面積D.提高產(chǎn)品質(zhì)量2.細(xì)胞培養(yǎng)常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基有（）A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.McCoy’s5A3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要監(jiān)測的參數(shù)有（）A.溫度B.pHC.溶解氧D.細(xì)胞密度4.防止細(xì)胞培養(yǎng)污染的措施有（）A.嚴(yán)格無菌操作B.定期更換培養(yǎng)基C.對(duì)實(shí)驗(yàn)器材進(jìn)行滅菌D.凈化實(shí)驗(yàn)室環(huán)境5.細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)包括（）A.緩慢降溫B.使用合適的凍存液C.標(biāo)記清楚D.快速復(fù)蘇6.影響細(xì)胞生長的因素有（）A.營養(yǎng)物質(zhì)B.生長因子C.培養(yǎng)條件D.細(xì)胞接種密度7.細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法有（）A.臺(tái)盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)法B.熒光定量法C.流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)法D.分光光度法8.細(xì)胞高密度培養(yǎng)過程中，可采取的優(yōu)化策略有（）A.優(yōu)化培養(yǎng)基成分B.控制培養(yǎng)條件C.采用合適的生物反應(yīng)器D.定期補(bǔ)料9.細(xì)胞培養(yǎng)常用的血清有（）A.胎牛血清B.小牛血清C.馬血清D.人血清10.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，可能出現(xiàn)的污染類型有（）A.細(xì)菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染判斷題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，溫度越高細(xì)胞生長越快。（）2.細(xì)胞高密度培養(yǎng)不需要考慮營養(yǎng)物質(zhì)的消耗。（）3.只要在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作，就一定不會(huì)發(fā)生細(xì)胞污染。（）4.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的過程對(duì)細(xì)胞活性沒有影響。（）5.培養(yǎng)基的pH對(duì)細(xì)胞生長影響不大。（）6.細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，死細(xì)胞也會(huì)被計(jì)數(shù)。（）7.細(xì)胞高密度培養(yǎng)只能使用攪拌罐式生物反應(yīng)器。（）8.血清在細(xì)胞培養(yǎng)中主要提供營養(yǎng)物質(zhì)和調(diào)節(jié)細(xì)胞生長。（）9.細(xì)胞傳代次數(shù)越多，細(xì)胞的特性越穩(wěn)定。（）10.真菌污染細(xì)胞培養(yǎng)物后，通常會(huì)出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象。（）簡答題（每題5分，共4題）1.簡述細(xì)胞高密度培養(yǎng)的意義。2.簡述細(xì)胞培養(yǎng)過程中無菌操作的要點(diǎn)。3.簡述細(xì)胞凍存的基本步驟。4.簡述細(xì)胞培養(yǎng)過程中污染的常見原因。討論題（每題5分，共4題）1.討論如何優(yōu)化細(xì)胞高密度培養(yǎng)的條件以提高細(xì)胞產(chǎn)量和質(zhì)量。2.討論細(xì)胞培養(yǎng)過程中不同類型污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響及應(yīng)對(duì)策略。3.討論細(xì)胞計(jì)數(shù)方法的優(yōu)缺點(diǎn)及適用場景。4.討論細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)員在日常工作中應(yīng)如何確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。答案單項(xiàng)選擇題1.A2.C3.B4.C5.C6.C7.C8.B9.A10.A多項(xiàng)選擇題1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.ACD5.ABC6.ABCD7.AC8.ABCD9.ABC10.ABCD判斷題1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.×10.×簡答題1.細(xì)胞高密度培養(yǎng)可大幅提高細(xì)胞產(chǎn)量，降低生產(chǎn)成本，減少生產(chǎn)占地面積，有利于提高產(chǎn)品質(zhì)量和生產(chǎn)效率，滿足大規(guī)模生產(chǎn)需求。2.操作前超凈臺(tái)提前開啟30分鐘，用酒精擦拭臺(tái)面；實(shí)驗(yàn)器材需滅菌；操作人員穿戴滅菌服、口罩等；操作時(shí)動(dòng)作輕緩，避免空氣流動(dòng)，盡量靠近酒精燈火焰。3.配制凍存液，收集對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，離心去上清，加入凍存液制成細(xì)胞懸液，裝入凍存管，放入程序降溫盒，-80℃過夜后轉(zhuǎn)移至液氮保存。4.無菌操作不嚴(yán)格，如器材滅菌不徹底、操作時(shí)引入微生物；實(shí)驗(yàn)環(huán)境不潔凈；培養(yǎng)基和血清等原材料污染；細(xì)胞本身帶菌。討論題1.優(yōu)化培養(yǎng)基成分，添加合適營養(yǎng)物質(zhì)；精確控制溫度、pH、溶解氧等培養(yǎng)條件；選用合適生物反應(yīng)器并優(yōu)化操作參數(shù)；采用流加培養(yǎng)等方式及時(shí)補(bǔ)充營養(yǎng)。2.細(xì)菌污染使培養(yǎng)液渾濁、細(xì)胞生長受抑制，真菌污染可見菌絲，支原體污染影響細(xì)胞代謝和功能。應(yīng)對(duì)需嚴(yán)格無菌操作、檢測原材料、污染后及時(shí)處理。3.血球計(jì)數(shù)板法操作簡單但準(zhǔn)確性有限，適用于初步計(jì)數(shù)；