細(xì)胞治療工藝開發(fā)工程師助理崗位考試試卷及答案單項選擇題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基是（）A.生理鹽水B.PBSC.DMEMD.乙醇2.以下哪種細(xì)胞計數(shù)方法較為常用（）A.比色法B.臺盼藍(lán)染色法C.熒光定量法D.重量法3.細(xì)胞凍存時常用的保護(hù)劑是（）A.甘油B.蔗糖C.DMSOD.葡萄糖4.無菌操作時，常用的消毒試劑是（）A.甲醛B.碘伏C.75%乙醇D.雙氧水5.細(xì)胞傳代的時機(jī)通常是（）A.細(xì)胞長滿B.細(xì)胞凋亡C.細(xì)胞死亡D.細(xì)胞密度達(dá)到50%6.以下屬于原代細(xì)胞的是（）A.HeLa細(xì)胞B.293T細(xì)胞C.人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞D.NIH3T3細(xì)胞7.細(xì)胞培養(yǎng)箱的氣體成分主要是（）A.O?和N?B.O?和CO?C.N?和CO?D.CO?和H?8.細(xì)胞復(fù)蘇時，通常在（）中快速解凍。A.37℃水浴B.室溫C.4℃冰箱D.液氮9.用于細(xì)胞培養(yǎng)的水是（）A.自來水B.蒸餾水C.去離子水D.超純水10.以下哪種儀器用于細(xì)胞離心（）A.天平B.離心機(jī)C.移液器D.酸度計多項選擇題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件包括（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.無菌環(huán)境D.充足的氣體2.細(xì)胞凍存的步驟包括（）A.配制凍存液B.收集細(xì)胞C.梯度降溫D.放入液氮3.細(xì)胞計數(shù)的方法有（）A.血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)B.流式細(xì)胞儀計數(shù)C.比濁法D.熒光計數(shù)法4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)的污染有（）A.細(xì)菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染5.細(xì)胞傳代的操作步驟有（）A.消化細(xì)胞B.離心收集細(xì)胞C.重懸細(xì)胞D.接種細(xì)胞6.以下屬于細(xì)胞培養(yǎng)常用耗材的有（）A.培養(yǎng)瓶B.移液器吸頭C.離心管D.載玻片7.細(xì)胞復(fù)蘇的注意事項包括（）A.快速解凍B.無菌操作C.及時換液D.低溫保存8.細(xì)胞培養(yǎng)對氣體環(huán)境的要求有（）A.一定濃度的O?B.一定濃度的CO?C.高濃度N?D.少量H?9.原代細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)有（）A.細(xì)胞活性高B.增殖能力強(qiáng)C.分化程度高D.培養(yǎng)難度大10.細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要監(jiān)測的指標(biāo)有（）A.細(xì)胞密度B.細(xì)胞形態(tài)C.培養(yǎng)基pHD.細(xì)胞活力判斷題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞培養(yǎng)過程中可以不使用無菌技術(shù)。（）2.臺盼藍(lán)染色后，活細(xì)胞呈藍(lán)色。（）3.細(xì)胞凍存液可以反復(fù)凍融使用。（）4.細(xì)胞培養(yǎng)箱中的CO?主要作用是調(diào)節(jié)pH。（）5.原代細(xì)胞可以無限傳代。（）6.離心時轉(zhuǎn)速越高越好。（）7.細(xì)胞復(fù)蘇時可以慢慢解凍。（）8.細(xì)胞培養(yǎng)用的培養(yǎng)基可以長期保存。（）9.無菌操作前需要對手進(jìn)行消毒。（）10.細(xì)胞計數(shù)時只需要計數(shù)一個視野的細(xì)胞數(shù)。（）簡答題（每題5分，共4題）1.簡述細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作的要點(diǎn)。2.說明細(xì)胞凍存的目的。3.列舉細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染來源。4.簡述細(xì)胞傳代的意義。討論題（每題5分，共4題）1.討論如何提高細(xì)胞復(fù)蘇的成功率。2.探討原代細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞系培養(yǎng)在應(yīng)用上的區(qū)別。3.分析細(xì)胞培養(yǎng)過程中pH變化的原因及應(yīng)對措施。4.談?wù)劶?xì)胞治療工藝開發(fā)中細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)節(jié)的關(guān)鍵要點(diǎn)。答案單項選擇題1.C2.B3.C4.C5.A6.C7.B8.A9.D10.B多項選擇題1.ABCD2.ABCD3.AB4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABC8.AB9.AD10.ABCD判斷題1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.×8.×9.√10.×簡答題1.要點(diǎn)：操作前對環(huán)境、器械等消毒；操作人員穿戴無菌服、口罩、手套；在超凈臺內(nèi)操作，避免氣流影響；操作時動作輕緩，減少空氣流動；接觸細(xì)胞的物品均需無菌。2.目的：長期保存細(xì)胞，保持細(xì)胞活性和特性，避免細(xì)胞在傳代過程中發(fā)生變異或丟失，為后續(xù)實驗和研究提供穩(wěn)定的細(xì)胞來源。3.來源：實驗環(huán)境不潔凈；操作人員未嚴(yán)格無菌操作；培養(yǎng)基、耗材滅菌不徹底；實驗動物本身攜帶微生物等。4.意義：防止細(xì)胞過度生長導(dǎo)致營養(yǎng)缺乏、代謝產(chǎn)物積累等影響細(xì)胞生長和活性，使細(xì)胞保持良好的生長狀態(tài)，維持細(xì)胞的正常生物學(xué)特性，保證實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。討論題1.提高復(fù)蘇成功率要點(diǎn)：凍存細(xì)胞時做好標(biāo)記和記錄；復(fù)蘇時快速解凍，減少冰晶對細(xì)胞損傷；復(fù)蘇后及時將細(xì)胞接種到合適培養(yǎng)基，保持培養(yǎng)條件穩(wěn)定；復(fù)蘇初期密切觀察細(xì)胞狀態(tài)，及時處理異常情況。2.原代細(xì)胞培養(yǎng)更接近體內(nèi)細(xì)胞狀態(tài)，常用于藥物研發(fā)早期毒性測試、細(xì)胞分化研究等；細(xì)胞系培養(yǎng)增殖能力強(qiáng)、易培養(yǎng)，常用于基因表達(dá)、信號通路研究等常規(guī)實驗。但原代細(xì)胞培養(yǎng)難度大、周期短，細(xì)胞系可能與體內(nèi)細(xì)胞有差異。3.原因：細(xì)胞代謝產(chǎn)生酸性物質(zhì)，培養(yǎng)基中緩沖物質(zhì)消耗等。措施：選擇合適緩沖體系的培養(yǎng)基；控制細(xì)胞接種密度和培養(yǎng)時間；及時更換培養(yǎng)基；使用CO?培養(yǎng)箱維持