專(zhuān)題綜合檢測(cè)(五)(考查專(zhuān)題八)(75分鐘100分)一、單項(xiàng)選擇題:共14題,每小題3分,共42分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.(2024·無(wú)錫模擬)下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述,正確的是()A.用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料,可通過(guò)發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取B.菌種的選育是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),優(yōu)良菌種可從自然界篩選出來(lái)C.醬油制作中利用黑曲霉將原料中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸D.啤酒發(fā)酵過(guò)程中糖的分解和代謝物的生成主要在后發(fā)酵階段完成【解析】選C。用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料,其中的單細(xì)胞蛋白是微生物菌體,并不是通過(guò)發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取獲得的,A錯(cuò)誤;發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié),B錯(cuò)誤;醬油制作中利用黑曲霉將原料中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸,C正確;啤酒發(fā)酵過(guò)程中糖的分解和代謝物的生成主要在主發(fā)酵階段完成,D錯(cuò)誤。2.餐廚垃圾會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重污染。采用生物技術(shù)手段對(duì)餐廚垃圾進(jìn)行快速處理,需要利用具有高效分解能力的微生物菌株,這就需要對(duì)這類(lèi)微生物進(jìn)行篩選。下列敘述正確的是()A.菌種要在剛放置的餐廚垃圾中進(jìn)行采集B.至少需要配制以淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)為唯一碳源的三種培養(yǎng)基C.可用平板劃線(xiàn)法接種,水解圈的大小可表示菌種產(chǎn)生水解酶的活性D.降解時(shí)要將不同培養(yǎng)基篩選得到的微生物單獨(dú)加入餐廚垃圾中【解析】選B。剛放置的餐廚垃圾中含微生物的數(shù)量較少,不易獲得高效處理餐廚垃圾的微生物,A錯(cuò)誤;餐廚垃圾中含有淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)等有機(jī)物,至少需要配制以淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)為唯一碳源的三種培養(yǎng)基,B正確;需要觀(guān)察并測(cè)量水解圈的大小時(shí),應(yīng)用稀釋涂布平板法接種,C錯(cuò)誤;降解時(shí)要將篩選得到的微生物一起加入餐廚垃圾中,這樣才能分解餐廚垃圾中的多種物質(zhì),D錯(cuò)誤。3.在傳統(tǒng)白酒釀造的過(guò)程中,酵母菌是最主要的功能性微生物,不同種類(lèi)的酵母菌代謝產(chǎn)生的風(fēng)味物質(zhì)含量存在較大差異。實(shí)驗(yàn)小組對(duì)釀酒酵母菌進(jìn)行平板劃線(xiàn)的純培養(yǎng)操作,下列有關(guān)敘述正確的是()A.將配制好的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基放入干熱滅菌箱內(nèi)滅菌B.在酒精燈火焰附近,將培養(yǎng)皿蓋完全打開(kāi)后倒入培養(yǎng)基C.從第一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始到第二次劃線(xiàn)結(jié)束,即完成接種D.將接種后的平板和未接種的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)【解析】選D。將培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行滅菌,A錯(cuò)誤;在酒精燈火焰附近,將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙,將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,B錯(cuò)誤;從第一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始第二次劃線(xiàn),重復(fù)該操作,一般需要繼續(xù)做第三、四、五次劃線(xiàn),以便于得到單菌落,C錯(cuò)誤;將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),其中設(shè)置空平板的目的是檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格,D正確。4.(2024·邯鄲二模)牛奶中富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),但牛奶也是多種病原體的傳播載體,比如牛奶中可能存在金黃色葡萄球菌,該菌是一種高度耐鹽的兼性厭氧微生物,可引起人類(lèi)肺炎和腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長(zhǎng)時(shí),可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞,使其褪色。為定性檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌,操作流程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.配制好的肉湯培養(yǎng)基應(yīng)采用濕熱滅菌法進(jìn)行滅菌B.振蕩培養(yǎng)有利于微生物的生長(zhǎng)繁殖C.在血平板上的接種方法是稀釋涂布平板法D.用7.5%NaCl進(jìn)行培養(yǎng)可增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量【解析】選C。配制好的肉湯培養(yǎng)基應(yīng)采用濕熱滅菌法如高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,A正確;振蕩培養(yǎng)有利于微生物與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的接觸,也有利于增大溶氧量,促進(jìn)微生物的生長(zhǎng)繁殖,B正確;結(jié)合圖示可知,在血平板上的接種方法是平板劃線(xiàn)法,C錯(cuò)誤;金黃色葡萄球菌是一種高度耐鹽的兼性厭氧微生物,用7.5%NaCl進(jìn)行培養(yǎng)可增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量,D正確。5.(2024·衡水模擬)植物組織培養(yǎng)是將植物組織或細(xì)胞接種到培養(yǎng)基中,然后在人工控制的條件下進(jìn)行培養(yǎng),使其形成完整植株的過(guò)程。植物組織培養(yǎng)有多種形式,如原生質(zhì)體培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、花藥培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)等,其中最常見(jiàn)的是愈傷組織培養(yǎng)。下列敘述正確的是()A.在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí),需要經(jīng)歷原生質(zhì)體的培養(yǎng)階段B.對(duì)植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),都用到了固體培養(yǎng)基C.植物組織培養(yǎng)的脫分化和再分化階段,培養(yǎng)條件沒(méi)有差異D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)最終的目的都是獲得完整個(gè)體【解析】選A。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時(shí),需要先用酶解法獲得原生質(zhì)體及誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,該階段需要進(jìn)行原生質(zhì)體的培養(yǎng),A正確;對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用到的是液體培養(yǎng)基,B錯(cuò)誤;植物組織培養(yǎng)的脫分化階段不需要光照,再分化階段需要光照,即兩階段的培養(yǎng)條件有差異,C錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般不能獲得完整個(gè)體,D錯(cuò)誤。6.研究人員以某病毒的外殼蛋白A為抗原制備單克隆抗體,以期快速檢測(cè)該病毒,其主要技術(shù)路線(xiàn)如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.選擇兩種限制酶切割基因A,可防止基因A反向連接或自我環(huán)化B.脾可參與制造新的血細(xì)胞和清除衰老的血細(xì)胞,脾內(nèi)含大量淋巴細(xì)胞C.與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前,需要擴(kuò)大已免疫的脾細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)量D.雜交瘤細(xì)胞篩選使用的特殊培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞可以增殖【解析】選C。不同的限制酶切割后產(chǎn)生的黏性末端一般不同,而DNA分子要在兩個(gè)黏性末端相同的情況下才能連接,因此兩種限制酶切割基因可以避免基因A反向連接或自我環(huán)化,A正確;脾的作用是制造新的血細(xì)胞與清除衰老的血細(xì)胞,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞,B正確;一般認(rèn)為,已免疫的脾細(xì)胞中已經(jīng)含有足夠數(shù)量的免疫的B淋巴細(xì)胞,不需要再擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量,C錯(cuò)誤;雜交瘤細(xì)胞篩選使用的特殊培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基,在此培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞可以生存、增殖,D正確。7.動(dòng)物學(xué)家在某林地發(fā)現(xiàn)了少量野生瀕危的亞洲黑熊,他們期望通過(guò)與動(dòng)物園現(xiàn)存的亞洲黑熊之間進(jìn)行雜交、體內(nèi)授精、胚胎移植等方法拯救亞洲黑熊,其過(guò)程如下圖。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.E后代和F后代的形成都離不開(kāi)胚胎移植技術(shù)B.D受體雌性必須和動(dòng)物園亞洲黑熊♀A、野生亞洲黑熊♀B同期發(fā)情處理C.超數(shù)排卵一般用促性腺激素,排出的卵細(xì)胞必須培養(yǎng)到MⅡ期D.E后代和F后代形成方式相比,前者繁殖的后代有更大的生活力和變異性【解析】選B。胚胎移植技術(shù)是胚胎工程的基礎(chǔ),E后代和F后代的形成都需要胚胎移植技術(shù),A正確;D受體雌性必須和動(dòng)物園亞洲黑熊♀A同期發(fā)情處理,而野生亞洲黑熊♀B只是提供體細(xì)胞核,不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理,B錯(cuò)誤;超數(shù)排卵一般用促性腺激素,排出的卵細(xì)胞必須培養(yǎng)到MⅡ期,C正確;E后代為有性生殖而來(lái),F后代為無(wú)性繁殖而來(lái),有性生殖繁殖的后代有更大的生活力和變異性,D正確。8.為得到性狀優(yōu)良的高產(chǎn)奶牛,可采取下圖中的技術(shù)路徑。下列敘述正確的是()A.核移植過(guò)程中需要減數(shù)分裂Ⅱ前期的去核卵母細(xì)胞B.過(guò)程1需將胚胎培養(yǎng)至原腸胚期進(jìn)行胚胎移植C.過(guò)程2子代奶牛遺傳性狀與供體奶牛完全一致D.轉(zhuǎn)基因技術(shù)可為過(guò)程1、2提供改良性狀的方式【解析】選D。核移植過(guò)程中需要將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ中期再去核,A錯(cuò)誤;過(guò)程1需將胚胎培養(yǎng)至桑葚胚或者囊胚期進(jìn)行胚胎移植,B錯(cuò)誤;過(guò)程2子代奶牛核遺傳物質(zhì)由供體奶牛提供,質(zhì)遺傳物質(zhì)由卵母細(xì)胞提供,所以遺傳性狀與供體奶牛不一定完全一致,C錯(cuò)誤;轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以將優(yōu)良性狀基因?qū)胧荏w細(xì)胞,可為過(guò)程1、2提供改良性狀的方式,D正確。9.生物技術(shù)與工程學(xué)相結(jié)合,可研究、設(shè)計(jì)和加工生產(chǎn)各種生物工程產(chǎn)品。下列有關(guān)敘述正確的是()①由于外植體在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中不感染病毒,用任何外植體都可制備脫毒苗②由iPS細(xì)胞產(chǎn)生的特定細(xì)胞,可以在新藥的測(cè)試中發(fā)揮重要作用③胚胎移植作為胚胎工程的前端技術(shù)環(huán)節(jié),推動(dòng)了胚胎工程其他技術(shù)的研究和應(yīng)用④PCR反應(yīng)過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中自動(dòng)完成,而后常用瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定PCR的產(chǎn)物⑤利用基因工程技術(shù)的乳腺生物反應(yīng)器,可以讓哺乳動(dòng)物批量生產(chǎn)相應(yīng)的藥物⑥蛋白質(zhì)工程僅以蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ)逆中心法則進(jìn)行,就可以改造或制造新的蛋白質(zhì)A.①③ B.②④⑤C.②③④⑥ D.①③④⑤⑥【解析】選B。雖然外植體在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中不感染病毒,但外植體可能本身攜帶病毒,因此不是任何外植體都可制備脫毒苗,一般用莖尖制備脫毒苗,①錯(cuò)誤;iPS細(xì)胞為多功能干細(xì)胞,能分裂分化產(chǎn)生特定細(xì)胞,可以在新藥的測(cè)試中發(fā)揮重要作用,②正確;胚胎移植作為胚胎工程的最后技術(shù)環(huán)節(jié),推動(dòng)了胚胎工程其他技術(shù)的研究和應(yīng)用,③錯(cuò)誤;PCR反應(yīng)過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中自動(dòng)完成,PCR的產(chǎn)物的相對(duì)分子質(zhì)量大小不同,因此常用瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定PCR的產(chǎn)物,④正確;利用基因工程技術(shù)的乳腺生物反應(yīng)器,可以讓哺乳動(dòng)物源源不斷地批量生產(chǎn)相應(yīng)的藥物,⑤正確;蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需要,⑥錯(cuò)誤。10.(2024·鹽城模擬)2022年3月7日,上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院某研究團(tuán)隊(duì)利用基因編輯技術(shù),對(duì)小鼠卵母細(xì)胞的7個(gè)甲基化印記控制區(qū)域進(jìn)行DNA甲基化重寫(xiě),并將一個(gè)極體注入修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞中,成功創(chuàng)造了孤雌生殖的小鼠。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.上述甲基化重寫(xiě)沒(méi)有改變小鼠體內(nèi)的遺傳信息B.體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞,為防止污染需在培養(yǎng)基中加入抗生素C.移植后的囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致滋養(yǎng)層破裂,胚胎從其中伸展出來(lái)D.孤雌小鼠的誕生過(guò)程沒(méi)有精子參與,但其基因型不一定與提供卵母細(xì)胞的雌鼠相同【解析】選C。題述甲基化重寫(xiě)沒(méi)有改變DNA的堿基序列,則小鼠體內(nèi)的遺傳信息不會(huì)改變,A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入抗生素,防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染,所以體外培養(yǎng)卵母細(xì)胞時(shí),為防止污染需在培養(yǎng)基中加入抗生素,B正確;囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大,會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂,胚胎從其中伸展出來(lái),這一過(guò)程叫作孵化,C錯(cuò)誤;孤雌小鼠是由兩個(gè)生殖細(xì)胞(修飾后的次級(jí)卵母細(xì)胞和另一個(gè)卵子的極體)結(jié)合后發(fā)育形成,同時(shí)由于配子在形成過(guò)程中會(huì)經(jīng)歷減數(shù)分裂的基因重組,或發(fā)生基因突變,最終兩個(gè)生殖細(xì)胞結(jié)合后的孤雌小鼠其基因型不一定與提供卵母細(xì)胞的雌鼠相同,D正確。11.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是指通過(guò)振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞在培養(yǎng)液內(nèi)始終處于分散懸浮狀態(tài)。將產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng),可用于生產(chǎn)流感疫苗。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.單克隆細(xì)胞懸浮培養(yǎng)可保證足夠的氣體交換B.單克隆細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)時(shí)不需要更換培養(yǎng)液C.病毒利用單克隆細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)和能量進(jìn)行繁殖D.單克隆細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)可有效避免接觸抑制【解析】選B。細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)通過(guò)振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置可以保證足夠的氣體交換,A正確;細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)液需要定期更換以更新?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和排出代謝廢物,B錯(cuò)誤;病毒營(yíng)寄生生活,借助細(xì)胞進(jìn)行繁殖,利用了活細(xì)胞的物質(zhì)、能量、酶等,C正確;單克隆細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí),通過(guò)振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞在培養(yǎng)液內(nèi)始終處于分散懸浮狀態(tài),可有效避免接觸抑制,D正確。12.(2024·江西高考)γ-氨基丁酸在醫(yī)藥等領(lǐng)域有重要的應(yīng)用價(jià)值。利用L-谷氨酸脫羧酶(GadB)催化L-谷氨酸脫羧是高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸的重要途徑之一。研究人員采用如圖方法將釀酒酵母S的L-谷氨酸脫羧酶基因(gadB)導(dǎo)入生產(chǎn)菌株E.coliA,構(gòu)建了以L(fǎng)-谷氨酸鈉為底物高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸的菌株E.coliB。下列敘述正確的是()A.上圖表明,可以從釀酒酵母S中分離得到目的基因gadBB.E.coliB發(fā)酵生產(chǎn)γ-氨基丁酸時(shí),L-谷氨酸鈉的作用是供能C.E.coliA和E.coliB都能高效降解γ-氨基丁酸D.可以用其他酶替代NcoⅠ和KpnⅠ構(gòu)建重組質(zhì)粒【解析】選A。本題主要考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。題干顯示,研究人員采用題圖方法將釀酒酵母S的L-谷氨酸脫羧酶基因(gadB)導(dǎo)入生產(chǎn)菌株E.coliA,說(shuō)明可以從釀酒酵母S中分離得到目的基因gadB,A正確;題干顯示,E.coliB以L(fǎng)-谷氨酸鈉為底物,可高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸,所以L(fǎng)-谷氨酸鈉的作用不是提供能量,B錯(cuò)誤;將目的基因?qū)刖闑.coliA構(gòu)建高效生產(chǎn)γ-氨基丁酸的菌株E.coliB,E.coliA和E.coliB均不能高效降解γ-氨基丁酸,C錯(cuò)誤;選擇限制酶時(shí)需考慮多重條件,如確保目的基因不被破壞,切割位點(diǎn)精準(zhǔn)位于啟動(dòng)子和終止子之間等,根據(jù)題干提供的信息,無(wú)法推斷出是否有其他酶能夠替代,D錯(cuò)誤。13.小膠質(zhì)細(xì)胞參與一系列神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生過(guò)程,包括阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓舞蹈癥、肌萎縮側(cè)索硬化等?？蒲腥藛T制備了抗小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD22的單克隆抗體,具體方法如圖所示。下列對(duì)抗CD22單克隆抗體的制備的分析,不合理的是()A.步驟①和步驟⑤向小鼠注射的都是CD22B.步驟②所用的SP2/0細(xì)胞具有無(wú)限增殖的特點(diǎn)C.吸取③中的上清液到④的培養(yǎng)孔中后需加入CD22進(jìn)行檢測(cè)D.步驟⑥提取的抗CD22抗體,可抑制神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生【解析】選A。要獲得抗CD22單克隆抗體,步驟①應(yīng)該注射CD22蛋白(CD22抗原),步驟⑤是將分泌抗CD22抗體的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠體內(nèi)培養(yǎng),以獲得大量單克隆抗體,A錯(cuò)誤;步驟②所用的SP2/0細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞,特點(diǎn)是能在體外無(wú)限增殖,B正確;根據(jù)抗原—抗體雜交原理,應(yīng)該用CD22蛋白檢測(cè)其中是否含抗CD22蛋白的抗體,因此,步驟④中需加入CD22蛋白進(jìn)行專(zhuān)一抗體檢測(cè),C正確;步驟⑥提取的抗CD22抗體,能與抗小膠質(zhì)細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD22特異性結(jié)合,可抑制神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生,D正確。14.(2024·南通模擬)下列有關(guān)PCR技術(shù)的敘述,正確的是()A.不同反應(yīng)體系PCR的溫度差別主要表現(xiàn)為延伸溫度的差異B.引物較短以及復(fù)性溫度較低均可能形成大量非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物C.PCR反應(yīng)體系中需加入TaqDNA聚合酶,該酶主要在目的基因解旋中起作用D.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)新型冠狀病毒,反應(yīng)體系中的酶僅有耐高溫的DNA聚合酶【解析】選B。在設(shè)定的PCR體系下可以特異性擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段,主要是因?yàn)榧尤肓伺c特定部位結(jié)合的引物,引物可以通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)特異性結(jié)合到模板DNA的相應(yīng)位置,復(fù)性過(guò)程中引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上,故不同反應(yīng)體系PCR的溫度差別主要表現(xiàn)為復(fù)性溫度的差異,A錯(cuò)誤;若復(fù)性溫度低,引物較短時(shí),引物和模板匹配低時(shí),也能穩(wěn)定存在,那么模板上可能存在很多區(qū)域能和引物上的少量堿基匹配,可能形成大量非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物,B正確;PCR反應(yīng)中,是通過(guò)高溫使目的基因解旋,TaqDNA聚合酶主要是在延伸子鏈過(guò)程中起作用,C錯(cuò)誤;應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)新型冠狀病毒,反應(yīng)體系中的酶有耐高溫的DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶,D錯(cuò)誤。二、多項(xiàng)選擇題:共3題,每題4分,共12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)者得4分,選對(duì)但不全的得1分,選錯(cuò)或不答的得0分。15.(2024·徐州模擬)工業(yè)上生產(chǎn)青霉素的流程如圖所示。有關(guān)敘述正確的有()A.制備該培養(yǎng)基除添加必要的營(yíng)養(yǎng)成分外,還需要將pH調(diào)至堿性B.過(guò)程①②都屬于擴(kuò)大培養(yǎng),發(fā)酵過(guò)程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐中發(fā)酵C.過(guò)程③需要嚴(yán)格的滅菌,否則可能會(huì)導(dǎo)致青霉素產(chǎn)量下降D.過(guò)程④可采用過(guò)濾、沉淀方法將菌體分離干燥【解析】選B、C、D。制備培養(yǎng)基時(shí),除添加必要的營(yíng)養(yǎng)成分外,還需要將pH調(diào)至酸性,A錯(cuò)誤;接種之前的過(guò)程①②都屬于擴(kuò)大培養(yǎng),以提高微生物產(chǎn)品的產(chǎn)量,其中在發(fā)酵罐中發(fā)酵是整個(gè)發(fā)酵過(guò)程的中心環(huán)節(jié),B正確;過(guò)程③需要嚴(yán)格的滅菌,因?yàn)殡s菌污染后,某些雜菌會(huì)分泌青霉素酶將青霉素分解掉,可能會(huì)導(dǎo)致青霉素產(chǎn)量下降,C正確;待完全發(fā)酵結(jié)束后,采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體分離干燥,D正確。16.(2024·滄州三模)鴨坦布蘇病毒病是由鴨坦布蘇病毒(DTMUV)引起的一種急性、病毒性傳染病。研究人員制備了DTMUVE蛋白單克隆抗體4A1,其可與E蛋白發(fā)生免疫反應(yīng),不與鴨A型肝炎病毒、細(xì)小病毒和H9亞型禽流感病毒發(fā)生交叉反應(yīng);4A1株雜交瘤細(xì)胞株分泌的抗體對(duì)DTMUV具有中和活性,可完全清除感染小鼠血液中的DTMUV。下列相關(guān)敘述正確的是()A.需獲取注射過(guò)E蛋白的小鼠的B淋巴細(xì)胞B.PEG可促進(jìn)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合C.雜交瘤細(xì)胞株克隆培養(yǎng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)接觸抑制D.單克隆抗體4A1能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異【解析】選A、B、D。根據(jù)題意可知,DTMUVE蛋白單克隆抗體4A1,其可與E蛋白發(fā)生免疫反應(yīng),將E蛋白注入小鼠體內(nèi),從小鼠脾臟中分離出已免疫的B淋巴細(xì)胞,該漿細(xì)胞能夠分泌特定的抗體,A正確;用滅活的病毒或PEG處理,可促進(jìn)已免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,B正確;雜交瘤細(xì)胞株克隆培養(yǎng)時(shí)不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制,C錯(cuò)誤;雜交瘤細(xì)胞株進(jìn)行有絲分裂,產(chǎn)物是單克隆抗體,特異性強(qiáng)、靈敏度高,單克隆抗體4A1能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異,D正確。17.(2024·滄州二模)生物技術(shù)是把雙刃劍,造福人類(lèi)的同時(shí)也帶來(lái)了安全性和倫理問(wèn)題,人們必須高度重視。下列敘述正確的是()A.利用核移植技術(shù)獲得胚胎,從中分離出ES細(xì)胞治療白血病不涉及倫理問(wèn)題B.若有國(guó)家把研制出的新型鼠痘病毒作為生物武器,將會(huì)威脅人類(lèi)安全C.研究轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物時(shí)應(yīng)采取多種方法防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播D.干細(xì)胞的研究具有廣闊的應(yīng)用前景,應(yīng)大力支持和發(fā)展,不需要監(jiān)管【解析】選B、C。從人胚胎分離出ES細(xì)胞治療白血病,會(huì)涉及胚胎的處理問(wèn)題,進(jìn)而產(chǎn)生倫理問(wèn)題,A錯(cuò)誤;研制出的新型鼠痘病毒,若作為生物武器,殺傷力強(qiáng)、傳播廣泛、難預(yù)防,會(huì)威脅人類(lèi)安全,B正確;研究轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物時(shí)應(yīng)采取多種方法防止轉(zhuǎn)基因花粉的傳播,以防止基因污染的發(fā)生,C正確;干細(xì)胞的研究可治療很多疾病,但也可能會(huì)向著克隆人的方向發(fā)展,帶來(lái)倫理問(wèn)題,因此需要嚴(yán)格監(jiān)管,D錯(cuò)誤。三、非選擇題:共2題,共46分。18.(20分)(2024·保定三模)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來(lái)源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為營(yíng)養(yǎng)進(jìn)行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類(lèi)酵母,并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)配制培養(yǎng)基時(shí),按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱(chēng)量各組分,將其溶解、定容后,并進(jìn)行________________滅菌,待培養(yǎng)基冷卻至約50℃時(shí),在酒精燈火焰附近進(jìn)行_______,待培養(yǎng)基凝固后倒置。

(2)圖中③通過(guò)觀(guān)察菌落特征獲得各類(lèi)酵母菌菌落,④用于進(jìn)一步篩選和純化的培養(yǎng)基從功能上分析,特點(diǎn)是________________________。挑取分離平板中長(zhǎng)出的單菌落,按步驟④所示進(jìn)行劃線(xiàn)。下列敘述合理的有________。

a.為保證無(wú)菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線(xiàn)時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取多個(gè)菌落,分別測(cè)定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.圖中接種環(huán)蘸取一次菌液后劃5次線(xiàn),滅5次菌(3)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過(guò)程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和_______供應(yīng)。假設(shè)實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)圖中錐形瓶中酵母菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液,且保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè),則至少應(yīng)將錐形瓶中的菌液繼續(xù)稀釋_______倍。

【解析】(1)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽(濕熱)滅菌法進(jìn)行滅菌。滅菌后待培養(yǎng)基冷卻至約50℃時(shí),在酒精燈火焰附近進(jìn)行倒平板,待培養(yǎng)基凝固后倒置。(2)④的目的是篩選能利用工業(yè)廢甲醇作為營(yíng)養(yǎng)的酵母,因此④的培養(yǎng)基應(yīng)以甲醇為唯一碳源。a.為保證無(wú)菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌,以防止雜菌污染,a正確;b.劃線(xiàn)時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,若劃破培養(yǎng)基表面,會(huì)導(dǎo)致酵母菌大量聚集繁殖,從而不能形成正常菌落,b正確;c.挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取多個(gè)菌落,分別測(cè)定培養(yǎng)液中甲醇的含量,c錯(cuò)誤;d.據(jù)圖可知,圖中劃線(xiàn)區(qū)域有5個(gè),說(shuō)明接種環(huán)蘸取一次菌液后依次在5個(gè)區(qū)域進(jìn)行了劃線(xiàn),每次接種結(jié)束都要進(jìn)行滅菌,因此需要滅5次菌,d正確。(3)酵母菌在有氧條件下可快速繁殖,因此為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過(guò)程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和氧氣供應(yīng)。1mL=1000μL,假設(shè)稀釋的倍數(shù)為a,則200÷100×103×a=2×107,a=104,即至少應(yīng)將錐形瓶中的菌液繼續(xù)稀釋104倍。答案:(1)高壓蒸汽(濕熱)倒平板(2)以甲醇為唯一碳源(的選擇培養(yǎng)基)a、b、d(3)氧氣104【加固訓(xùn)練】1.我國(guó)秸稈資源產(chǎn)量豐富,玉米秸稈是常用的畜牧飼料。科研人員為了從豬盲腸中分離純化出能分解秸稈中纖維素的微生物,設(shè)計(jì)了如下培養(yǎng)基(主要成分見(jiàn)下表)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:培養(yǎng)基成分硫酸銨七水硫酸亞鐵七水磷酸鎂磷酸氫二鉀羧甲基纖維素鈉(CMC-a)剛果紅溶液蒸餾水用量1.0g2.5mg250mg500mg5.0g300mg500mL(1)僅根據(jù)表中成分配制培養(yǎng)基_______(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,理由是________________________。

(2)從豬盲腸中分離得到單菌落的過(guò)程,可采用_______溶解腸內(nèi)容物制成菌液,采用_______________法將菌液接種于培養(yǎng)基的表面。

(3)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí),CR可與纖維素形成____________。如果觀(guān)察到產(chǎn)生透明圈的菌落,說(shuō)明可能獲得了纖維素分解菌。

(4)科研人員已成功分離出三種菌株并測(cè)量透明圈直徑(D)與菌落的直徑(d)比值大小如下表。據(jù)表分析可知,_______號(hào)菌株的分解能力最強(qiáng),依據(jù)是________________________________________________。

編號(hào)透明圈直徑D/cm菌落直徑d/cm12.310.7722.811.6232.510.81【解析】(1)僅根據(jù)表中成分配制培養(yǎng)基不能用于分離和鑒別纖維素分解菌,因?yàn)楸碇信囵B(yǎng)基的成分中不含瓊脂,為液體培養(yǎng)基,而液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落,因而也不能分離和鑒別纖維素分解菌。(2)從豬盲腸中分離得到單菌落的過(guò)程,為了防止雜菌污染,可采用無(wú)菌水溶解腸內(nèi)容物制成菌液,采用稀釋涂布平板法將菌液接種于培養(yǎng)基的表面,從而獲得單菌落。(3)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí),CR可與纖維素形成紅色復(fù)合物,隨著纖維素被分解,會(huì)在纖維素分解菌菌落的周?chē)a(chǎn)生透明圈。如果觀(guān)察到產(chǎn)生透明圈的菌落,說(shuō)明可能獲得了纖維素分解菌。(4)據(jù)表分析可知,3號(hào)菌株的分解能力最強(qiáng),這是因?yàn)?號(hào)透明圈直徑(D)與菌落的直徑(d)比值最大,因而其分解能力更強(qiáng)。答案:(1)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落(2)無(wú)菌水稀釋涂布平板(3)紅色復(fù)合物(4)33號(hào)透明圈直徑(D)與菌落的直徑(d)比值最大2.(2024·宜春三模)抗凝血酶Ⅲ在人體中主要由肝臟合成,是存在于血漿中的一種重要的抗凝血因子。研究者將人的抗凝血酶Ⅲ基因?qū)肽躺窖蚣?xì)胞,獲得乳汁中含有大量人抗凝血酶Ⅲ的轉(zhuǎn)基因克隆奶山羊。已知β-酪蛋白廣泛存在于哺乳動(dòng)物的乳汁中?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)獲取人抗凝血酶Ⅲ基因:從人的肝細(xì)胞中提取mRNA,再通過(guò)________獲取cDNA,利用PCR擴(kuò)增目的基因。根據(jù)人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的堿基序列,設(shè)計(jì)2種特異性引物,在PCR過(guò)程中,引物的作用是________________________。

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:重組人抗凝血酶Ⅲ基因表達(dá)載體由山羊β-酪蛋白基因啟動(dòng)子、人抗凝血酶Ⅲ基因、標(biāo)記基因和終止子等結(jié)構(gòu)組成,其中______________________決定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)。

(3)成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化:取幼齡雌性動(dòng)物的組織,經(jīng)酶處理后獲得成纖維細(xì)胞懸液,放在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng),從幼齡動(dòng)物取材的原因是______________________。然后用____________法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入成纖維細(xì)胞。

(4)轉(zhuǎn)基因奶山羊的獲得:從奶山羊中獲取卵母細(xì)胞,將陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞注入_______________,通過(guò)電融合法使兩細(xì)胞融合,供體進(jìn)入卵母細(xì)胞,形成重構(gòu)胚。常通過(guò)________(填物理方法)激活重構(gòu)胚。經(jīng)胚激活,培養(yǎng)獲得早期胚胎,胚胎移植前,需要用孕激素對(duì)受體母羊進(jìn)行同期發(fā)情處理。

(5)克隆羊的鑒定:取少量克隆羊組織細(xì)胞提取DNA,將用____________處理后的產(chǎn)物進(jìn)行電泳,檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入。待克隆羊成年并產(chǎn)奶,收集奶樣,可用____________________技術(shù)鑒定克隆羊是否成功表達(dá)人抗凝血酶Ⅲ。若最終獲得的抗凝血酶Ⅲ不能很好地完成其功能,可利用________工程進(jìn)行改造。

【解析】(1)人抗凝血酶Ⅲ由人體肝細(xì)胞產(chǎn)生,所以要獲取人抗凝血酶Ⅲ基因,需要從人的肝細(xì)胞中獲取RNA,再通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲取cDNA。在PCR過(guò)程中,引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。(2)重組人抗凝血酶Ⅲ基因表達(dá)載體中,山羊β-酪蛋白基因啟動(dòng)子決定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)。(3)幼齡動(dòng)物的細(xì)胞分裂增殖能力強(qiáng),更易于培養(yǎng)?？捎蔑@微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入成纖維細(xì)胞。(4)將陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞,可利用電融合法使兩細(xì)胞融合,可通過(guò)電刺激激活重構(gòu)胚。經(jīng)胚激活,培養(yǎng)獲得早期胚胎,胚胎移植前,要用孕激素對(duì)受體母羊進(jìn)行同期發(fā)情處理。(5)提取克隆羊的DNA后用限制酶進(jìn)行處理,利用電泳檢測(cè)產(chǎn)物、確定目的基因是否成功導(dǎo)入。用抗原—抗體雜交技術(shù)可鑒定人抗凝血酶Ⅲ基因是否成功表達(dá)。蛋白質(zhì)工程能實(shí)現(xiàn)對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的定向改造。答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸(2)山羊β-酪蛋白基因啟動(dòng)子(3)幼齡動(dòng)物的細(xì)胞分裂增殖能力強(qiáng)顯微注射(4)去核卵母細(xì)胞電刺激(5)限制酶抗原—抗體雜交蛋白質(zhì)3.(2024·南通二模)人類(lèi)γ基因啟動(dòng)子上游的調(diào)控序列中含有BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn),該位點(diǎn)結(jié)合BCL11A蛋白后,γ基因的表達(dá)被抑制。通過(guò)改變?cè)摻Y(jié)合位點(diǎn)的序列,解除對(duì)γ基因表達(dá)的抑制,可對(duì)某種地中海貧血癥進(jìn)行基因治療?？蒲腥藛T擴(kuò)增了γ基因上游不同長(zhǎng)度的片段,將這些片段分別插入表達(dá)載體中進(jìn)行轉(zhuǎn)化和熒光檢測(cè),以確定BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)的具體位置。相關(guān)信息如圖所示。(1)為將擴(kuò)增后的產(chǎn)物定向插入載體指導(dǎo)熒光蛋白基因表達(dá),需在引物末端添加限制酶識(shí)別序列。據(jù)圖可知,在F1~F7末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是________,在R末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是_______。PCR緩沖體系中除圖示條件外還要加入______________________(至少2個(gè))。獲得擴(kuò)增產(chǎn)物后,應(yīng)選擇限制酶________切割載體。本實(shí)驗(yàn)中,從產(chǎn)物擴(kuò)增到載體構(gòu)建完成的整個(gè)過(guò)程共需要______種酶。

(2)將構(gòu)建的載體導(dǎo)入_______(填“保留”或“除去”)BCL11A基因的受體細(xì)胞,成功轉(zhuǎn)化后,含F(xiàn)1~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的載體表達(dá)熒光蛋白,受體細(xì)胞有熒光,含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無(wú)熒光。據(jù)圖分析,構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體上熒光蛋白基因和BCL11A基因轉(zhuǎn)錄時(shí)的模板鏈在______(填“相同”或“不同”)的DNA鏈上,含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無(wú)熒光的原因是__________________。

(3)向培養(yǎng)液中添加適量的________,含F(xiàn)1~F4與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞不再有熒光,而含F(xiàn)5~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞仍有熒光。若γ基因上游調(diào)控序列上與引物序列所對(duì)應(yīng)的位置不含有BCL11A蛋白的結(jié)合位點(diǎn)序列,據(jù)此結(jié)果可推測(cè),BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)位于引物___________在調(diào)控序列上所對(duì)應(yīng)序列之間的區(qū)段上,理由是________。

【解析】(1)據(jù)題意可知,需要將擴(kuò)增后的產(chǎn)物定向插入并指導(dǎo)熒光蛋白基因的表達(dá),則含有啟動(dòng)子的擴(kuò)增后的產(chǎn)物讀取方向與熒光蛋白基因的讀取方向一致,故擴(kuò)增后的產(chǎn)物中的R端與熒光蛋白基因中限制酶MunⅠ識(shí)別序列端結(jié)合,才能保證擴(kuò)增后的產(chǎn)物定向插入并指導(dǎo)熒光蛋白基因的表達(dá)。要做到定向插入,需要引物末端兩端添加限制酶的識(shí)別序列,且被限制酶識(shí)別并切割后,兩端的黏性末端不能相同。而擴(kuò)增后的產(chǎn)物中可能含有MunⅠ和XhoⅠ的識(shí)別位點(diǎn),故在引物末端添加限制酶的識(shí)別序列不能被限制酶MunⅠ和XhoⅠ所識(shí)別,故應(yīng)該選用添加限制酶EcoRⅠ和限制酶SalⅠ識(shí)別序列,據(jù)圖中對(duì)限制酶的注釋可知,限制酶MunⅠ識(shí)別并切割后的黏性末端與限制酶EcoRⅠ識(shí)別并切割后的黏性末端相同,故R末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是EcoRⅠ,在F1~F7末端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶是SalⅠ;PCR緩沖體系中除圖示條件外還要加入dNTP、耐高溫的DNA聚合酶、Mg2+等;熒光蛋白基因中含有限制酶EcoRⅠ的識(shí)別位點(diǎn),故對(duì)載體使用限制酶MunⅠ和XhoⅠ切割。綜上所述,對(duì)載體使用限制酶MunⅠ和XhoⅠ切割,對(duì)擴(kuò)增后的產(chǎn)物用限制酶EcoRⅠ和限制酶SalⅠ切割,然后在DNA連接酶的催化作用下,連接形成重組載體;產(chǎn)物擴(kuò)增中需要使用TaqDNA聚合酶催化,合成更多的產(chǎn)物,故從產(chǎn)物擴(kuò)增到載體構(gòu)建完成的整個(gè)過(guò)程共需要6種酶,分別是TaqDNA聚合酶、限制酶EcoRⅠ、限制酶SalⅠ、限制酶MunⅠ、限制酶XhoⅠ、DNA連接酶。(2)將構(gòu)建的載體導(dǎo)入除去BCL11A基因的受體細(xì)胞,成功轉(zhuǎn)化后,含F(xiàn)1~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的載體表達(dá)熒光蛋白,受體細(xì)胞有熒光,含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無(wú)熒光。據(jù)圖分析,構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體上熒光蛋白基因和BCL11A基因轉(zhuǎn)錄時(shí)的模板鏈在不同的DNA鏈上;含F(xiàn)1~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的載體表達(dá)熒光蛋白,受體細(xì)胞有熒光,含F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞無(wú)熒光,則可能是F7與R擴(kuò)增產(chǎn)物不含完整的啟動(dòng)子,熒光蛋白基因不表達(dá)。(3)向培養(yǎng)液中添加適量的雌激素,此時(shí)重組載體上的BCL11A基因表達(dá),產(chǎn)生BCL11A蛋白,BCL11A蛋白與BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合后,導(dǎo)致熒光蛋白基因被抑制;含F(xiàn)1~F4與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞不再有熒光,則說(shuō)明BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合后在引物F4與引物R之間的序列上;含F(xiàn)5~F6與R擴(kuò)增產(chǎn)物的受體細(xì)胞仍有熒光,則說(shuō)明BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合后在引物F5的上游序列,故據(jù)此結(jié)果可推測(cè),BCL11A蛋白結(jié)合位點(diǎn)位于引物F4與F5在調(diào)控序列上所對(duì)應(yīng)序列之間的區(qū)段上。答案:(1)SalⅠEcoRⅠdNTP、耐高溫的DNA聚合酶、Mg2+XhoⅠ、MunⅠ6(2)除去不同F(xiàn)7與R擴(kuò)增產(chǎn)物不含完整的啟動(dòng)子,熒光蛋白基因不表達(dá)(3)雌激素F4、F5根據(jù)有無(wú)熒光情況判斷,F1~F4與R擴(kuò)增產(chǎn)物上均有結(jié)合位點(diǎn),因此結(jié)合位點(diǎn)位于F4所對(duì)應(yīng)調(diào)控序列的下游F5~F6與R