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獸醫(yī)檢驗考試題與答案一、單項選擇題(每題2分,共40分)1.犬血常規(guī)檢測中,正常成年犬的白細胞計數(shù)參考范圍是:A.3.0-5.0×10?/LB.6.0-17.0×10?/LC.20.0-30.0×10?/LD.1.0-3.0×10?/L答案:B解析:犬正常白細胞計數(shù)范圍為6.0-17.0×10?/L,低于此范圍提示白細胞減少(如病毒感染、免疫抑制),高于則可能為細菌感染、炎癥反應(yīng)或應(yīng)激。2.檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)最常用的實驗室方法是:A.革蘭氏染色鏡檢B.病毒分離培養(yǎng)C.實時熒光定量PCR(qPCR)D.間接血凝試驗(IHA)答案:C解析:PRRSV為RNA病毒,qPCR可快速檢測病毒核酸,靈敏度和特異性均高于病毒分離(耗時)和血清學(xué)方法(需抗體產(chǎn)生),是當(dāng)前首選檢測手段。3.牛布魯氏菌病血清學(xué)檢測中,虎紅平板凝集試驗(RBPT)的主要作用是:A.確診感染B.初步篩查C.區(qū)分疫苗免疫與野毒感染D.檢測IgG亞型答案:B解析:RBPT操作簡便、反應(yīng)快速,適用于大規(guī)模群體篩查,陽性結(jié)果需通過試管凝集試驗(SAT)或補體結(jié)合試驗(CFT)進一步確認,屬于初篩試驗。4.犬細小病毒(CPV)抗原快速檢測試紙條的檢測靶標(biāo)是:A.病毒DNAB.病毒RNAC.病毒衣殼蛋白VP2D.病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS1答案:C解析:CPV抗原檢測試紙條通過膠體金標(biāo)記的單克隆抗體與病毒衣殼主要結(jié)構(gòu)蛋白VP2結(jié)合顯色,可在感染后2-7天檢測到,適用于臨床快速診斷。5.奶牛乳汁體細胞計數(shù)(SCC)超過多少時提示可能存在乳房炎?A.50×10?/mLB.100×10?/mLC.200×10?/mLD.500×10?/mL答案:C解析:正常乳汁SCC應(yīng)低于200×10?/mL,超過此值提示乳腺組織受細菌感染(如金黃色葡萄球菌、鏈球菌),導(dǎo)致白細胞浸潤增加。6.雞新城疫(ND)抗體檢測中,血凝抑制試驗(HI)的判定標(biāo)準(zhǔn)是:A.能完全抑制50%紅細胞凝集的血清最高稀釋度B.能完全抑制100%紅細胞凝集的血清最高稀釋度C.出現(xiàn)50%紅細胞凝集的血清最高稀釋度D.出現(xiàn)100%紅細胞凝集的血清最高稀釋度答案:B解析:HI試驗中,抗體與病毒結(jié)合后可抑制其對紅細胞的凝集作用。判定時以能完全抑制4單位病毒血凝活性的血清最高稀釋度作為抗體效價,通常要求雞群HI效價≥2?(log?4)為免疫合格。7.犬貓血液生化檢測中,肌酸激酶(CK)顯著升高最常見于:A.肝臟損傷B.心肌或骨骼肌損傷C.腎臟功能衰竭D.胰腺炎癥答案:B解析:CK主要存在于心肌、骨骼肌和腦組織中,肌肉損傷(如外傷、肌炎)或心肌梗死時,CK釋放入血導(dǎo)致濃度升高,是評估肌肉損傷的敏感指標(biāo)。8.羊癢病(Scrapie)的確診依據(jù)是:A.臨床癥狀觀察B.血清抗體檢測C.腦組織中朊病毒蛋白(PrPSc)檢測D.血常規(guī)異常答案:C解析:羊癢病是朊病毒病,無病毒核酸和抗體產(chǎn)生,確診需通過免疫組化、WesternBlot等方法檢測腦組織中的異常朊蛋白(PrPSc),臨床癥狀(瘙癢、共濟失調(diào))僅為提示。9.馬傳染性貧血(EIA)的特異性檢測方法是:A.瓊脂擴散試驗(AGID)B.細菌分離培養(yǎng)C.血常規(guī)檢測D.糞便蟲卵檢查答案:A解析:EIA由反轉(zhuǎn)錄病毒引起,AGID(Coggins試驗)通過檢測血清中針對病毒p26蛋白的抗體,是OIE規(guī)定的確診方法,其他方法無法特異性診斷。10.豬瘟病毒(CSFV)與牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)的血清學(xué)交叉反應(yīng)主要源于:A.病毒形態(tài)相似B.基因組序列高度同源C.表面糖蛋白E2有共同抗原表位D.傳播途徑相同答案:C解析:CSFV與BVDV同屬黃病毒科瘟病毒屬,其E2糖蛋白存在共同抗原表位,導(dǎo)致部分血清學(xué)試驗(如ELISA)可能出現(xiàn)交叉反應(yīng),需結(jié)合PCR區(qū)分。11.犬貓糞便檢查中,檢測賈第蟲包囊的最佳方法是:A.直接涂片法B.飽和鹽水漂浮法C.沉淀法D.碘液染色法答案:D解析:賈第蟲包囊體積較?。?-12μm),直接涂片易漏檢;飽和鹽水漂浮法適用于比重較輕的蟲卵(如蛔蟲);沉淀法適用于吸蟲卵;碘液染色可使包囊內(nèi)的核和擬染色體著色,提高檢出率。12.奶牛結(jié)核菌素皮內(nèi)試驗(PPD試驗)的注射部位是:A.頸部上1/3處皮內(nèi)B.背部皮下C.耳根部肌肉D.尾根部靜脈答案:A解析:牛結(jié)核菌素皮試需將0.1mLPPD注射于頸部上1/3處皮內(nèi),72小時后測量注射部位紅腫直徑,≥12mm為陽性反應(yīng)。13.雞白痢沙門氏菌的快速檢測方法是:A.麥康凱培養(yǎng)基分離B.生化鑒定C.血清平板凝集試驗D.糞便潛血試驗答案:C解析:雞白痢沙門氏菌具有特異性O(shè)抗原(1、9、12),用已知陽性血清做平板凝集試驗,可在2分鐘內(nèi)判定結(jié)果,適用于種雞群篩查。14.犬貓C反應(yīng)蛋白(CRP)升高主要反映:A.過敏反應(yīng)B.病毒感染早期C.細菌感染或組織損傷D.貧血程度答案:C解析:CRP是急性時相蛋白,細菌感染、炎癥、創(chuàng)傷時肝臟快速合成,4-6小時開始升高,是評估細菌感染和炎癥活動的敏感指標(biāo),病毒感染時通常不升高或輕度升高。15.檢測豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)的病毒載量最常用的方法是:A.免疫熒光試驗(IFA)B.間接ELISAC.qPCRD.病毒中和試驗(VNT)答案:C解析:qPCR可定量檢測PCV2的DNA拷貝數(shù),用于評估病毒血癥程度及疫苗免疫效果,其他方法(IFA、ELISA)主要檢測抗原或抗體,無法準(zhǔn)確定量。16.馬鼻疽的實驗室診斷中,鼻疽菌素點眼試驗的判定時間是:A.點眼后2小時B.點眼后6-8小時C.點眼后24-36小時D.點眼后72小時答案:B解析:馬鼻疽菌素點眼后6-8小時開始觀察,12-24小時達反應(yīng)高峰,出現(xiàn)膿性眼眵、結(jié)膜紅腫為陽性,是我國規(guī)定的馬鼻疽檢疫方法。17.犬巴貝斯蟲病的實驗室確診方法是:A.糞便蟲卵檢查B.血液涂片姬姆薩染色鏡檢C.血清生化檢測D.X線檢查答案:B解析:巴貝斯蟲寄生于紅細胞內(nèi),取抗凝血液涂片,姬姆薩染色后鏡檢可見梨形蟲體(犬巴貝斯蟲為大型蟲體,吉氏巴貝斯蟲為小型蟲體),是最直接的確診方法。18.奶牛乳房炎乳汁樣品細菌分離時,常用的選擇性培養(yǎng)基是:A.普通營養(yǎng)瓊脂B.麥康凱瓊脂(MAC)C.血瓊脂平板(BA)D.沙保弱瓊脂(SDA)答案:C解析:乳房炎主要致病菌(如金黃色葡萄球菌、鏈球菌)在血瓊脂上可觀察溶血現(xiàn)象(β-溶血),有助于初步鑒定;MAC用于腸桿菌科細菌分離,SDA用于真菌。19.豬偽狂犬?。≒R)gE-ELISA檢測的目的是:A.檢測疫苗免疫抗體B.區(qū)分野毒感染與疫苗免疫C.檢測病毒核酸D.評估病毒載量答案:B解析:PR基因缺失疫苗(如gE-缺失苗)免疫動物不產(chǎn)生gE抗體,而野毒感染動物會產(chǎn)生gE抗體。通過gE-ELISA檢測可區(qū)分免疫豬和感染豬,是凈化偽狂犬病的關(guān)鍵技術(shù)。20.犬貓尿液常規(guī)檢查中,尿比重降低(<1.015)最常見于:A.脫水B.急性腎功能衰竭C.糖尿病D.尿崩癥或慢性腎衰答案:D解析:正常犬尿比重為1.015-1.045,貓為1.030-1.060。尿比重降低提示腎臟濃縮功能障礙,常見于尿崩癥(抗利尿激素缺乏)或慢性腎功能衰竭(腎單位破壞)。二、判斷題(每題1分,共10分。正確打“√”,錯誤打“×”)1.瑞氏染色血涂片時,細胞漿呈藍色、細胞核呈紅色為染色過堿的表現(xiàn)。(×)解析:瑞氏染色中,細胞漿嗜酸性物質(zhì)(如血紅蛋白)呈紅色,細胞核嗜堿性物質(zhì)呈藍色。染色過堿(pH偏高)時,所有細胞會偏藍色;過酸則偏紅色。2.雞傳染性法氏囊?。↖BD)的典型病變是法氏囊水腫、出血,實驗室檢測可通過瓊脂擴散試驗檢測病毒抗原。(√)解析:IBD病毒可刺激機體產(chǎn)生沉淀抗體,用已知陽性血清與病料(法氏囊勻漿)做瓊脂擴散試驗,出現(xiàn)沉淀線即可確診。3.犬瘟熱病毒(CDV)的包涵體檢查應(yīng)取病犬鼻液或眼結(jié)膜涂片,瑞氏染色后觀察細胞漿內(nèi)的嗜堿性包涵體。(√)解析:CDV感染時,在呼吸道、消化道上皮細胞漿內(nèi)可形成嗜堿性包涵體,涂片染色后鏡檢是快速診斷方法之一。4.牛傳染性胸膜肺炎(牛肺疫)的病原是支原體,實驗室確診需通過血清學(xué)試驗,無法進行病原分離。(×)解析:牛肺疫支原體可在特定培養(yǎng)基(如含馬血清的液體培養(yǎng)基)中分離培養(yǎng),結(jié)合PCR或血清學(xué)試驗(補體結(jié)合試驗)可確診。5.豬丹毒的病原是豬丹毒桿菌,革蘭氏染色呈陰性,在血瓊脂上形成β-溶血菌落。(×)解析:豬丹毒桿菌為革蘭氏陽性桿菌,血瓊脂上形成α-溶血(草綠色溶血環(huán)),而非β-溶血(完全溶血)。6.犬貓弓形蟲病的血清學(xué)檢測中,IgM抗體陽性提示近期感染,IgG抗體陽性提示既往感染或免疫。(√)解析:弓形蟲IgM抗體在感染后1-2周出現(xiàn),持續(xù)數(shù)周至數(shù)月;IgG抗體在感染后2-3周出現(xiàn),可終身存在,用于區(qū)分感染階段。7.馬傳染性腦脊髓炎(EHV-1)的實驗室診斷中,病毒分離應(yīng)采集急性期病馬的鼻拭子或全血(含EDTA抗凝)。(√)解析:EHV-1主要存在于上呼吸道分泌物和血液中的單核細胞內(nèi),急性期樣本病毒載量高,適合分離培養(yǎng)。8.羊腸毒血癥的病原是產(chǎn)氣莢膜梭菌D型,實驗室檢測需通過中和試驗鑒定毒素類型。(√)解析:產(chǎn)氣莢膜梭菌不同型別產(chǎn)生不同毒素(如D型產(chǎn)ε毒素),需通過動物中和試驗(小鼠或家兔)確定毒素類型,結(jié)合細菌分離才能確診。9.兔球蟲病的糞便檢查中,艾美耳球蟲卵囊可用飽和鹽水漂浮法收集,顯微鏡下觀察呈圓形或橢圓形,有雙層卵殼。(√)解析:球蟲卵囊比重較輕(約1.06),飽和鹽水(比重1.20)漂浮法可使卵囊上浮,便于鏡檢,形態(tài)特征符合描述。10.犬貓血涂片制作時,推片與載玻片的夾角應(yīng)為30-45度,過快推片會導(dǎo)致細胞分布過密,過慢則細胞分布過稀。(√)解析:推片角度和速度直接影響血膜厚度,30-45度為最佳角度,速度均勻可使細胞呈單層分布,便于觀察。三、簡答題(每題8分,共40分)1.簡述犬貓血常規(guī)檢測中“白細胞分類計數(shù)”的主要內(nèi)容及臨床意義。答案:白細胞分類計數(shù)包括中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞的百分比及絕對值。(1)中性粒細胞:正常犬占60-70%,貓占35-75%。增多見于細菌感染、炎癥、應(yīng)激(如手術(shù));減少見于病毒感染(如犬瘟熱)、骨髓抑制(如化療)。(2)淋巴細胞:犬占12-30%,貓占20-45%。增多見于慢性感染、病毒性疾病(如貓白血?。⒘馨图毎园籽?;減少見于免疫抑制(如糖皮質(zhì)激素使用)、嚴(yán)重感染。(3)單核細胞:犬占3-10%,貓占0-5%。增多見于慢性炎癥、組織損傷修復(fù)、某些寄生蟲感染(如利什曼病)。(4)嗜酸性粒細胞:犬占0-10%,貓占0-3%。增多見于過敏反應(yīng)(如食物過敏)、寄生蟲感染(如蛔蟲)、嗜酸性粒細胞性疾病;減少無顯著意義(因生理波動大)。(5)嗜堿性粒細胞:數(shù)量極少(<1%),增多見于罕見的過敏反應(yīng)或骨髓疾病。2.詳述豬瘟病毒(CSFV)實驗室檢測的主要方法及各自優(yōu)缺點。答案:(1)病毒分離培養(yǎng):取病豬脾、淋巴結(jié)等病料,接種豬腎細胞(PK-15),觀察細胞病變(CPE)或通過免疫熒光確認。優(yōu)點是確診金標(biāo)準(zhǔn);缺點是耗時(5-7天)、對實驗室生物安全要求高(需BSL-2級)。(2)實時熒光定量PCR(qPCR):針對CSFV的5'非編碼區(qū)(5'-UTR)設(shè)計引物,檢測病毒RNA。優(yōu)點是靈敏度高(可檢測10拷貝/μL)、特異性強(區(qū)分BVDV)、快速(2-3小時);缺點是需專業(yè)設(shè)備(熒光PCR儀),無法區(qū)分活病毒與死病毒。(3)抗原捕獲ELISA:用抗CSFV單克隆抗體包被,檢測病料中的病毒抗原(如E2蛋白)。優(yōu)點是操作簡便、適合大規(guī)模篩查;缺點是靈敏度低于qPCR,可能出現(xiàn)假陰性(早期感染或病毒載量低時)。(4)血清學(xué)檢測(如間接ELISA):檢測血清中的CSFV抗體(IgG)。優(yōu)點是評估群體免疫水平;缺點是無法區(qū)分野毒感染與疫苗免疫(需結(jié)合gE-ELISA),且感染后7-10天才出現(xiàn)抗體,不適用于早期診斷。3.如何通過實驗室檢測區(qū)分犬細小病毒(CPV)感染與犬冠狀病毒(CCoV)感染?答案:(1)病原學(xué)檢測:-CPV:糞便PCR檢測VP2基因(CPV為DNA病毒),或抗原快速檢測試紙條(檢測VP2蛋白)。-CCoV:糞便RT-PCR檢測N蛋白基因(CCoV為RNA病毒),或免疫電鏡觀察冠狀病毒顆粒(表面有棘突)。(2)臨床癥狀輔助:CPV感染以劇烈嘔吐、番茄汁樣血便、白細胞顯著減少(尤其幼犬)為特征;CCoV感染癥狀較輕,以腹瀉(黃色稀便)為主,白細胞多正?;蜉p度減少。(3)病理變化:CPV剖檢可見小腸黏膜出血、壞死,腸內(nèi)容物含血液;CCoV可見小腸黏膜充血、腸壁變薄,無明顯出血。(4)血清學(xué)檢測:CPV抗體檢測(HI試驗)用于評估免疫狀態(tài);CCoV抗體檢測(中和試驗)特異性較高,但臨床應(yīng)用較少。4.簡述奶牛乳房炎乳汁樣品的采集與實驗室檢測流程。答案:(1)樣品采集:-擠奶前用溫水清洗乳房,75%酒精消毒乳頭,棄去前3-5滴乳汁;-無菌采集約10mL乳汁于滅菌試管(每乳區(qū)單獨采樣);-4℃保存,24小時內(nèi)送檢(如需長途運輸,可添加0.02%疊氮鈉防腐)。(2)實驗室檢測流程:①感官檢查:觀察乳汁顏色(是否發(fā)黃、有凝塊)、氣味(是否有酸敗味)。②體細胞計數(shù)(SCC):用體細胞計數(shù)器或熒光染色法,SCC>200×10?/mL提示乳房炎。③細菌分離培養(yǎng):將乳汁接種于血瓊脂平板(37℃培養(yǎng)24-48小時),觀察菌落形態(tài)、溶血特性(如金黃色葡萄球菌呈β-溶血,無乳鏈球菌呈α-溶血)。④細菌鑒定:通過革蘭氏染色(葡萄球菌為G+球菌,鏈球菌為G+鏈狀球菌,大腸桿菌為G-桿菌)、生化試驗(如觸酶試驗:葡萄球菌陽性,鏈球菌陰性)或PCR檢測(如特異性16SrRNA基因擴增)。⑤藥敏試驗:用Kirby-Bauer法檢測分離菌對常用抗生素(如青霉素、頭孢類)的敏感性,指導(dǎo)臨床用藥。5.詳述雞新城疫(ND)的實驗室診斷方法及判定標(biāo)準(zhǔn)。答案:(1)病原學(xué)檢測:-病毒分離:取病雞腦、脾、肺等病料,接種9-11日齡SPF雞胚尿囊腔,48-72小時后收集尿囊液,檢測血凝活性(HA試驗)。若HA陽性,進一步用新城疫陽性血清做血凝抑制試驗(HI)確認。-RT-PCR:針對NDV的F基因(融合蛋白基因)設(shè)計引物,檢測病毒RNA。強毒株F基因裂解位點為多堿性氨基酸(如112R-R-Q-K-R-F11?),弱毒株為112G-K-Q-G-R-L11?,可通過測序區(qū)分毒力。(2)血清學(xué)檢測:-HI試驗:檢測血清中的ND抗體。雞群免疫合格標(biāo)準(zhǔn)為HI效價≥2?(log?4),且離散度≤4(即75%以上個體效價≥2?)。-間接ELISA:檢測IgG抗體,適用于大規(guī)模篩查,結(jié)果以S/P值(樣品OD/陽性對照OD)≥0.5為陽性。(3)判定標(biāo)準(zhǔn):-臨床懷疑ND時,若病毒分離陽性或RT-PCR檢測到NDV核酸,即可確診;-血清學(xué)檢測中,未免疫雞群HI效價≥2?或免疫雞群HI效價≥2?(log?6)提示野毒感染;-結(jié)合病理變化(如腺胃乳頭出血、腸道棗核狀潰瘍)可輔助診斷。四、案例分析題(每題15分,共30分)案例1:某犬場飼養(yǎng)50只2-3月齡幼犬,近1周內(nèi)陸續(xù)出現(xiàn)精神沉郁、食欲廢絕、頻繁嘔吐(初為白色泡沫,后帶血絲)、腹瀉(初期黃色稀便,后期呈番茄汁樣血便)癥狀,已死亡8只。(1)請列出可能的病原(至少5種);(2)設(shè)計實驗室檢測方案(包括樣本采集、檢測方法及目的);(3)若確診為犬細小病毒感染,提出實驗室支持的治療建議。答案:(1)可能病原:犬細小病毒(CPV)、犬冠狀病毒(CCoV)、犬瘟熱病毒(CDV)、沙門氏菌、賈第蟲。(2)實驗室檢測方案:①樣本采集:-糞便樣本(急性腹瀉期):用于病原檢測(PCR、抗原檢測)、細菌培養(yǎng)(沙門氏菌);-抗凝血(EDTA抗凝):用于血常規(guī)(白細胞計數(shù))、CPV-PCR(病毒載量);-血清:用于CDV抗體檢測(排除犬瘟熱)、CPV抗體檢測(評估免疫狀態(tài));-剖檢病料(死亡幼犬):取小腸黏膜、淋巴結(jié),用于病毒分離、組織病理學(xué)檢查(觀察腸絨毛壞死)。②檢測方法及目的:-糞便CPV抗原快速檢測試紙條:快速篩查CPV感染(15分鐘出結(jié)果);-糞便RT-PCR(檢測CCoV、CDV核酸):排除冠狀病毒、犬瘟熱混合感染;-糞便細菌培養(yǎng)(麥康凱瓊脂)+生化鑒定:檢測沙門氏菌(G-桿菌,發(fā)酵乳糖陰性);-血常規(guī)檢測:CPV感染時白細胞顯著減少(常<5.0×10?/L);-組織病理學(xué)檢查:小腸黏膜上皮細胞壞死、脫落,腸絨毛萎縮,可觀察到核內(nèi)包涵體(CPV為DNA病毒,包涵體在核內(nèi))。(3)治療建議(需實驗室支持):-抗病毒:使用高免血清(CPV抗體效價≥2?)或單克隆抗體(中和病毒,需實驗室檢測抗體效價確認有效性);-補液:根據(jù)血氣分析(檢測pH、HCO??)和電解質(zhì)(檢測K?、Na?、Cl?)結(jié)果,補充乳酸林格氏液(糾正酸中毒)+氯化鉀(防低血鉀,需監(jiān)測血鉀濃度);-控制繼發(fā)感染:根據(jù)糞便細菌培養(yǎng)+藥敏試驗結(jié)果,選擇敏感抗生素(如頭孢曲松,避免使用對腸道菌群影響大的藥物);-止吐止血:胃復(fù)安(需監(jiān)測血藥濃度,避免過量)、維生素K1(促進凝血,需檢測凝血功能);-營養(yǎng)支持:靜脈注射氨基酸、葡萄糖(檢測血糖,避免低血糖),待嘔吐緩解后給予腸道處方糧(低纖維、易消化)。案例2:某奶牛場200頭泌乳牛中,近2周有30頭出現(xiàn)乳汁變稀、含絮狀物,乳區(qū)腫脹、觸痛,體溫39.5-40.5℃。場主反映近期未更換飼料,擠奶設(shè)備已消毒。(1)分析可能的病因(至少4種);(2)設(shè)計實驗室檢測步驟(包括樣本選擇、檢測項目及意義);(3)若檢測結(jié)果為金黃色葡萄球菌感染,提出實驗室支持的防控措施。答案:(1)可能病因:金黃色葡萄球菌性乳房炎、無乳鏈球菌性乳房炎、大腸桿菌性乳房炎、環(huán)境性鏈球菌(如停乳鏈球菌)感染。(2)
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