細胞治療細胞凍存考試試卷與答案一、單項選擇題（每題2分，共20分）1.細胞凍存常用的保護劑是（）A.乙醇B.DMSOC.甘油D.丙酮2.細胞凍存時，一般凍存管內(nèi)細胞懸液體積為（）A.1mlB.2mlC.3mlD.4ml3.細胞凍存的最佳溫度是（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃4.復(fù)蘇細胞時，快速解凍的溫度是（）A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃5.細胞凍存液中血清的比例一般是（）A.10%B.20%C.50%D.80%6.凍存細胞時，以下操作正確的是（）A.直接放入-80℃冰箱B.先在4℃冰箱放置1hC.梯度降溫D.先在37℃孵育10min7.細胞復(fù)蘇后，首先要進行的操作是（）A.換液B.傳代C.計數(shù)D.觀察形態(tài)8.凍存細胞復(fù)蘇后，活率一般要求達到（）A.50%以上B.60%以上C.70%以上D.80%以上9.細胞凍存管的標記不包括（）A.細胞名稱B.凍存日期C.操作人員D.細胞來源10.以下哪種細胞不適合長時間凍存（）A.干細胞B.腫瘤細胞C.紅細胞D.成纖維細胞二、多項選擇題（每題2分，共20分）1.細胞凍存的目的包括（）A.長期保存細胞B.減少細胞污染C.便于運輸D.降低細胞成本2.細胞凍存液的成分通常有（）A.血清B.保護劑C.培養(yǎng)基D.抗生素3.細胞凍存過程中可能出現(xiàn)的問題有（）A.細胞死亡B.冰晶形成C.污染D.凍存管破裂4.復(fù)蘇細胞時需要注意（）A.快速解凍B.無菌操作C.及時換液D.觀察細胞狀態(tài)5.影響細胞凍存效果的因素有（）A.細胞密度B.凍存保護劑濃度C.降溫速度D.復(fù)蘇方法6.常用的細胞凍存設(shè)備有（）A.液氮罐B.-80℃冰箱C.超凈工作臺D.離心機7.細胞凍存記錄應(yīng)包含（）A.細胞名稱B.凍存日期C.凍存條件D.復(fù)蘇情況8.以下哪些細胞適合凍存（）A.原代細胞B.細胞系C.胚胎干細胞D.造血干細胞9.細胞凍存和復(fù)蘇過程中，正確的操作有（）A.凍存前對細胞進行計數(shù)和活力檢測B.復(fù)蘇時輕輕吹打細胞C.凍存管密封良好D.復(fù)蘇后直接傳代10.細胞凍存的質(zhì)量控制指標包括（）A.細胞活率B.細胞形態(tài)C.細胞功能D.細胞數(shù)量三、判斷題（每題2分，共20分）1.細胞凍存時，凍存液可以直接加入細胞懸液中。（）2.復(fù)蘇細胞時，溫度越高解凍越快越好。（）3.凍存細胞的活力不受凍存時間影響。（）4.細胞凍存管可以重復(fù)使用。（）5.細胞凍存過程中，降溫速度越快越好。（）6.復(fù)蘇后的細胞不需要進行質(zhì)量檢測。（）7.細胞凍存液中保護劑濃度越高對細胞保護越好。（）8.液氮罐中的液氮不需要定期補充。（）9.標記凍存管時，可以用普通記號筆。（）10.不同類型的細胞凍存條件相同。（）四、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述細胞凍存的基本步驟。2.細胞復(fù)蘇時為何要快速解凍？3.簡述選擇細胞凍存保護劑的原則。4.凍存細胞復(fù)蘇后活率低可能的原因有哪些？五、討論題（每題5分，共20分）1.如何優(yōu)化細胞凍存方案以提高細胞復(fù)蘇后的活力？2.探討細胞凍存過程中污染問題的來源及預(yù)防措施。3.比較不同細胞凍存設(shè)備的優(yōu)缺點。4.談?wù)劶毎麅龃嬖诩毎委燁I(lǐng)域的重要性及面臨的挑戰(zhàn)。答案一、單項選擇題1.B2.B3.C4.B5.B6.C7.A8.D9.D10.C二、多項選擇題1.ABC2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABC10.ABC三、判斷題1.×2.×3.×4.×5.×6.×7.×8.×9.×10.×四、簡答題1.制備細胞懸液，計數(shù)調(diào)整細胞密度；將凍存液與細胞懸液按比例混合；將細胞懸液分裝入凍存管；梯度降溫，先4℃1h，-20℃2h，再-80℃過夜，最后放入液氮保存。2.快速解凍可防止緩慢解凍過程中形成大冰晶，大冰晶會損傷細胞結(jié)構(gòu)，快速解凍能減少對細胞的物理損傷，提高細胞復(fù)蘇活力。3.對細胞無毒性，能有效降低冰點，在低溫下保持良好的化學(xué)穩(wěn)定性，容易去除且不影響細胞后續(xù)生長和功能。4.凍存過程中降溫速度不當、凍存保護劑濃度不合適、復(fù)蘇操作不規(guī)范、凍存時間過長、細胞凍存前狀態(tài)不佳等。五、討論題1.優(yōu)化包括調(diào)整凍存液配方、改進降溫程序、選擇合適的凍存設(shè)備、控制細胞凍存密度等，通過實驗對比不同條件下細胞復(fù)蘇活力找到最佳方案。2.污染來源可能是操作環(huán)境不潔凈、凍存液污染、細胞本身帶菌等。預(yù)防措施有嚴格無菌操作、對凍存液等耗材滅菌處理、凍存前檢測細胞是否污染等。3.液氮罐儲存溫度低且穩(wěn)定，適合長期保存，但需定期補充液氮，使用不便；-80℃冰