ICS11.020

CCSC05

DB22

吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB22/T3256—2021

血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果審核規(guī)范

Standardforvalidationofbloodroutinetestresults

2021-06-01發(fā)布2021-06-15實(shí)施

吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布

DB22/T3256—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)

定起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。

本文件由吉林大學(xué)提出。

本文件由吉林省衛(wèi)生健康委員會(huì)歸口。

本文件起草單位：吉林大學(xué)第一醫(yī)院。

本文件主要起草人：續(xù)薇、曲林琳、王學(xué)軍、李映潼、趙旭、黃晶、許建成、陳顯秋。

I

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血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果審核規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果審核的儀器與試劑、樣本、規(guī)則建立流程、限值/臨界值確定、質(zhì)量

控制、自動(dòng)審核規(guī)則適宜性評(píng)價(jià)和安全性保證。

本文件適用于臨床實(shí)驗(yàn)室血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果的自動(dòng)審核。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

WS/T246白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)參考方法

WS/T347血細(xì)胞分析的校準(zhǔn)指南

WS/T616臨床實(shí)驗(yàn)室定量檢驗(yàn)結(jié)果的自動(dòng)審核

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

自動(dòng)審核autoverification

應(yīng)用簡單或復(fù)雜的規(guī)則，根據(jù)事先建立的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)，為常規(guī)結(jié)果的審核和發(fā)送提供高效的過程。

3.2

假陰性falsenegative

樣本結(jié)果未觸發(fā)自動(dòng)審核規(guī)則同時(shí)符合鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)。

3.3

真陽性truepositive

樣本結(jié)果觸發(fā)自動(dòng)審核規(guī)則同時(shí)符合鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)。

3.4

假陽性falsepositive

樣本結(jié)果觸發(fā)自動(dòng)審核規(guī)則同時(shí)不符合鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)。

3.5

真陰性truenegative

樣本結(jié)果未觸發(fā)自動(dòng)審核規(guī)則同時(shí)不符合鏡檢陽性的標(biāo)準(zhǔn)。

3.6

通過率（放行率）passrate

未觸發(fā)自動(dòng)審核規(guī)則的樣本例數(shù)/樣本總例數(shù)。

3.7

1

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通過正確率passaccuracy

未觸發(fā)自動(dòng)審核規(guī)則的樣本中真陰性例數(shù)/放行樣本的總例數(shù)。

4儀器與試劑

4.1儀器

4.1.1全自動(dòng)血液分析儀。

4.1.2全自動(dòng)推片染片機(jī)。

4.1.3全自動(dòng)閱片機(jī)。

4.1.4標(biāo)準(zhǔn)普通光學(xué)顯微鏡，含低倍鏡（10×10）、高倍鏡（10×40）、油浸鏡（10×100）的顯微鏡。

4.1.5乙二胺四乙酸二鉀（EDTA～K2）,抗凝劑終濃度為每毫升血液1.5mg～2.2mg的真空采血管。

4.1.637℃恒溫水浴箱。

4.1.7醫(yī)用冰箱：2℃～8℃。

4.1.8低溫高速離心機(jī)：最高轉(zhuǎn)速≥24000g。

4.2試劑與耗材

4.2.1血液分析儀用試劑、質(zhì)控品、校準(zhǔn)品，宜使用儀器配套試劑。

4.2.2瑞氏吉姆薩染液及磷酸鹽緩沖液（pH6.4～7.0）。

4.2.3鏡檢高倍視野用鏡油。

4.2.4血涂片用載玻片。

5樣本

5.1采集

5.1.1采集EDTA～K2抗凝靜脈血樣本1.5mL～2.0mL。

5.1.2樣本接收記錄采用實(shí)驗(yàn)室的LIS系統(tǒng)自動(dòng)記錄。

5.2保存運(yùn)輸

待檢樣本在15℃～30℃的室溫下及時(shí)送檢，宜4小時(shí)內(nèi)完成檢測。

5.3拒收樣本

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定拒收的不合格樣本如：

a)抗凝不充分，有凝塊的樣本；

b)無標(biāo)簽或標(biāo)簽信息不明確的樣本；

c)采集量不符合要求的樣本；

d)采集管或抗凝劑使用錯(cuò)誤的樣本；

e)類型不正確的樣本；

f)空管、漏管等情況的樣本等。

5.4樣本入組

2

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5.4.1建立自動(dòng)審核規(guī)則時(shí)，隨機(jī)選擇門急診或住院患者的血常規(guī)樣本，其中首診樣本80%，復(fù)診樣

本20%，用于差值檢驗(yàn)（deltacheck）規(guī)則的建立，差值檢查樣本時(shí)限宜為1天～7天。樣本量至少為

1000份，包括800份首診患者樣本，200份為之前在800例樣本中已經(jīng)檢測過的樣本。

5.4.2自動(dòng)審核規(guī)則建立時(shí)應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，要至少收集300份門急診或住院患者的血常規(guī)樣本并檢測用

于規(guī)則的驗(yàn)證。

5.4.3自動(dòng)審核規(guī)則建立后應(yīng)進(jìn)行周期性驗(yàn)證，至少在5000份以上日常檢測樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行驗(yàn)證。

6規(guī)則建立流程

6.1調(diào)試校準(zhǔn)

6.1.1按照全自動(dòng)血液分析儀生產(chǎn)廠家說明書的要求將儀器調(diào)試到正常可用狀態(tài)。

6.1.2樣本上機(jī)檢測前應(yīng)進(jìn)行儀器的校準(zhǔn)，校準(zhǔn)過程應(yīng)符合WS/T347的要求，如采用血液分析儀配套

校準(zhǔn)品來校準(zhǔn)儀器。

6.1.3確認(rèn)通過性能驗(yàn)證，如儀器正確度、精密度、可報(bào)告范圍等。

6.2形態(tài)學(xué)考核

6.2.1參與鏡檢的人員應(yīng)進(jìn)行形態(tài)學(xué)考核，考核通過后可參與自動(dòng)審核規(guī)則建立與驗(yàn)證中的形態(tài)學(xué)鏡

檢工作。

6.2.2建議由在相關(guān)專業(yè)工作不少于5年，具有豐富臨床實(shí)驗(yàn)室工作經(jīng)驗(yàn)的中級(jí)及以上職稱人員完成

鏡檢工作。

6.2.3多人進(jìn)行形態(tài)學(xué)鏡檢是應(yīng)進(jìn)行人員比對(duì)，比對(duì)以有經(jīng)驗(yàn)的形態(tài)學(xué)人員為基準(zhǔn)，一致性的符合率

應(yīng)≥80%。

6.2.4血涂片鏡檢方法應(yīng)符合WS/T246的要求。

6.2.5鏡檢陽性判斷應(yīng)符合如下條件：

a)細(xì)胞形態(tài)≥2+，且只要發(fā)現(xiàn)瘧原蟲均認(rèn)為是紅細(xì)胞有陽性形態(tài)改變；

b)大血小板形態(tài)≥2+；

c)血小板偶見聚集；

d)D?hle小體≥2+；

e)中毒顆?！?+；

f)空泡變性≥2+；

g)原始和幼稚細(xì)胞≥1%；

h)早幼粒細(xì)胞和中幼粒細(xì)胞≥1%；

i)晚幼粒細(xì)胞≥2%；

j)異型淋巴細(xì)胞>5%；

k)有核紅細(xì)胞>1%；

l)漿細(xì)胞>1%。

6.2.6鏡檢報(bào)告中使用的異常血細(xì)胞的名稱，見附錄A。

6.3數(shù)據(jù)采集

6.3.1隨機(jī)挑選日常門急診或住院的患者血常規(guī)樣本在全自動(dòng)血液分析儀上進(jìn)行檢測，檢測后備份或

導(dǎo)出每個(gè)樣本的檢測結(jié)果報(bào)告數(shù)據(jù)；

6.3.2鏡檢形態(tài)學(xué)檢查的數(shù)據(jù)如下：

3

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a)每個(gè)樣本推片染色2張血涂片，鏡檢人員對(duì)血涂片鏡檢檢查，

b)低倍鏡觀察：觀察血片的整體，涂片的制作以及染色的狀態(tài)，并找出適合鏡檢的部位。

c)觀察白細(xì)胞和血小板的增減，估計(jì)血小板的數(shù)量，是否有血小板聚集，估計(jì)聚集血小板的堆數(shù)，

是否有紅細(xì)胞聚集或緡錢狀出現(xiàn)，血涂片的左右兩側(cè)以及尾部是否有巨大細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞）出

現(xiàn)，是否有白細(xì)胞聚集。

d)油浸鏡觀察：鏡下觀察200個(gè)白細(xì)胞分類及形態(tài)，紅細(xì)胞的形態(tài)，血小板的形態(tài)及數(shù)量估計(jì)，

最后記錄鏡檢結(jié)果。

e)有條件的實(shí)驗(yàn)室，可以采用經(jīng)驗(yàn)證的全自動(dòng)閱片機(jī)進(jìn)行自動(dòng)閱片。

6.3.3建立自動(dòng)審核規(guī)需要血細(xì)胞分析儀檢測的結(jié)果報(bào)告數(shù)據(jù)、鏡檢形態(tài)學(xué)檢查的數(shù)據(jù)，此外還需要

每個(gè)樣本的患者信息、臨床信息、設(shè)備研究參數(shù)、報(bào)警信息、激光靈敏度參數(shù)等。

7限值/臨界值（cutoff）確定

7.1審核規(guī)則項(xiàng)目條件的確定應(yīng)依據(jù)全部檢測結(jié)果報(bào)告參數(shù)、鏡檢形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果和研究參數(shù)、靈敏

度參數(shù)等其他參數(shù)的匯總后統(tǒng)計(jì)（宜使用微機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)），篩選確定自動(dòng)審核規(guī)則中包含的項(xiàng)目。

7.2設(shè)置審核規(guī)則項(xiàng)目的限值即臨界值（cutoff值）應(yīng)在統(tǒng)計(jì)軟件中輸入自動(dòng)審核條件（項(xiàng)目參數(shù)和

cutoff值），并在ROC曲線上確定審核規(guī)則的cutoff值。

7.3建立的自動(dòng)審核規(guī)則的條件輸入，利用臨床樣本的檢測結(jié)果來驗(yàn)證規(guī)則，同時(shí)調(diào)整每個(gè)自動(dòng)審核

規(guī)則項(xiàng)目的cutoff值，以確保漏檢率小于5%，且沒有重要的異常細(xì)胞（如原始細(xì)胞）漏檢等。

7.4統(tǒng)計(jì)規(guī)則建立與驗(yàn)證的假陰性、真陽性、假陽性、真陰性、自動(dòng)審核通過率及通過正確率等指標(biāo)，

最終形成血常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果自動(dòng)審核規(guī)則，形成的自動(dòng)審核規(guī)則示例見附錄B。

8質(zhì)量控制

8.1應(yīng)使用至少兩水平儀器配套的質(zhì)控品。

8.2每天應(yīng)至少做兩批次質(zhì)控分析，確保分析樣本前后的質(zhì)控結(jié)果在控，樣本的數(shù)據(jù)才能用于自動(dòng)審

核規(guī)則的建立與驗(yàn)證。

8.3質(zhì)控應(yīng)覆蓋所有自動(dòng)審核規(guī)則中涉及的參數(shù)，包括報(bào)告參數(shù)、研究參數(shù)、激光的靈敏度參數(shù)等。

8.4報(bào)警信息的質(zhì)量控制應(yīng)由激光的靈敏度參數(shù)決定，在激光靈敏度參數(shù)在控的情況下，報(bào)警信息的

質(zhì)量可以得到保證。

9自動(dòng)審核規(guī)則適宜性評(píng)價(jià)

9.1統(tǒng)計(jì)自動(dòng)審核規(guī)則的假陰性率小于5%。

9.2自動(dòng)審核規(guī)則篩選后自動(dòng)放行的樣本中沒有重要的異常細(xì)胞（如原始細(xì)胞）漏檢。

9.3沒有錯(cuò)誤的結(jié)果漏檢（依據(jù)臨床反饋及報(bào)告假陰性率）。

9.4在滿足以上3點(diǎn)的情況下，盡可能降低假陽性，提高自動(dòng)審核通過率。

9.5宜采用人工審核的方式抽查自動(dòng)審核規(guī)則有無漏檢重要異常細(xì)胞和錯(cuò)誤結(jié)果，是否存在規(guī)則失效

的情況。

9.6定期與臨床溝通，以便評(píng)估自動(dòng)審核規(guī)則有誤漏檢重要異常細(xì)胞和錯(cuò)誤結(jié)果。

9.7自動(dòng)審核規(guī)則項(xiàng)目及限值因檢測系統(tǒng)不同而異，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行應(yīng)用前驗(yàn)證。

10安全性保證

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10.1在使用自動(dòng)審核軟件時(shí)，應(yīng)設(shè)置使用者的權(quán)限，以防止隨意更改。

10.2在儀器出現(xiàn)質(zhì)控失控、網(wǎng)絡(luò)故障、儀器故障等情況時(shí)，授權(quán)人員隨時(shí)關(guān)閉自動(dòng)審核功能，轉(zhuǎn)為人

工審核模式。

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AA

附錄A

（規(guī)范性附錄）

異常血細(xì)胞形態(tài)的命名標(biāo)準(zhǔn)

A.1紅細(xì)胞鏡檢判斷標(biāo)準(zhǔn)（鏡下觀察不少于1000個(gè)紅細(xì)胞）

A.1.1大紅細(xì)胞（Macrocytes）>10%（紅細(xì)胞直徑大于8.5μm，體積大于100fl）

A.1.2卵圓形大紅細(xì)胞（Ovalmacrocytes）>2%

A.1.3小紅細(xì)胞（Microcytes）>10%（紅細(xì)胞直徑小于7μm，體積小于80fl）

A.1.4低色素性紅細(xì)胞（Hypochromiccells）>10%

A.1.5嗜多色性紅細(xì)胞（Polychromasia）>5%

A.1.6棘紅細(xì)胞（Acanthocytes）>5%

A.1.7咬紅細(xì)胞（Bitecells）>1%

A.1.8水泡紅細(xì)胞（Blistercells）>1%

A.1.9鈍鋸齒狀紅細(xì)胞（Echinocytes）>5%

A.1.10橢圓形紅細(xì)胞（Elliptocytes）>5%

A.1.11不規(guī)則皺縮細(xì)胞（Irregularlycontractedcells）>1%

A.1.12卵圓形紅細(xì)胞（Ovalocytes）>5%

A.1.13裂片紅細(xì)胞（Schistocytes）>1%

A.1.14鐮狀紅細(xì)胞（Sicklecells）>1%

A.1.15球形紅細(xì)胞（Spherocytes）>5%

A.1.16口形紅細(xì)胞（Stomatocytes）>5%

A.1.17靶紅細(xì)胞（Targetcells）>5%

A.1.18淚滴樣紅細(xì)胞（Teardropcells）>5%

A.1.19嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞（Basophilicstippling）>5%

A.1.20豪焦小體（Howell～Jollybodies）>2%

A.1.21帕彭海默氏小體（Pappenheimerbodies）>2%

A.1.22有核紅細(xì)胞核畸形

A.1.23有核紅細(xì)胞脫核障礙現(xiàn)象

A.1.24卡～波氏環(huán)（Cabotring）

A.1.25有核紅細(xì)胞

A.1.26紅細(xì)胞聚集、緡錢狀紅細(xì)胞、瘧原蟲見到即陽性

A.2白細(xì)胞的鏡檢判斷標(biāo)準(zhǔn)（鏡下數(shù)200個(gè)白細(xì)胞）

A.2.1原始細(xì)胞（髓系原始細(xì)胞、淋系原始細(xì)胞、原始細(xì)胞內(nèi)有或無Auer小體）≥1%

A.2.2早幼粒細(xì)胞和中幼粒細(xì)胞之和≥1%

A.2.3晚幼粒細(xì)胞≥2%

A.2.4杜勒小體（Dohlebodies）>2%（以中性粒細(xì)胞為分母）

A.2.5空泡變性（Vacuolation)>4%（以中性粒細(xì)胞為分母）

A.2.6中性粒細(xì)胞脫顆粒（Hypogranulation)>4%（以中性粒細(xì)胞為分母）

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A.2.7嗜酸性粒細(xì)胞脫顆粒>1%（以中性粒細(xì)胞為分母）

A.2.8中毒顆粒（Hypergranulation)>4%（以中性粒細(xì)胞為分母）

A.2.9中性粒細(xì)胞分葉不良（P～H畸形）

A.2.10中性多分葉核粒細(xì)胞

A.2.11中性粒細(xì)胞中含有異常巨大的藍(lán)紫色或紫紅色顆粒（Chediak～Higashi）

A.2.12中性粒細(xì)胞中含有巨大深染的嗜天青顆粒（Alder～Reilly）

A.2.13中性粒細(xì)胞核左移及中性粒細(xì)胞核右移

A.2.14異型淋巴細(xì)胞（反應(yīng)性淋巴、良性）>5%

A.2.15異常淋巴（惡性）包括毛細(xì)胞、幼稚的淋巴細(xì)胞、淋巴瘤細(xì)胞、異常漿細(xì)胞>1%

A.2.16漿細(xì)胞>1%

A.2.17巨中性分葉核粒細(xì)胞、巨中性桿狀核粒細(xì)胞、巨中性多分葉核粒細(xì)胞

A.2.18中性粒細(xì)胞退行性變（核固縮、核溶解、核碎裂）

A.2.19雙核中性中、晚幼粒細(xì)胞

A.2.20中性粒細(xì)胞吞噬細(xì)菌、中性粒細(xì)胞吞噬真菌

A.2.21淋巴細(xì)胞微核

A.2.22退化淋巴細(xì)胞（淋巴細(xì)胞的涂抹細(xì)胞）

A.2.23巨噬細(xì)胞及巨噬細(xì)胞吞噬血細(xì)胞現(xiàn)象

A.2.24漿質(zhì)體

A.2.25幼稚嗜酸性粒細(xì)胞

A.2.26幼稚嗜堿性粒細(xì)胞

A.2.27幼稚單核細(xì)胞

A.3血小板的鏡檢標(biāo)準(zhǔn)

A.3.1血小板聚集：全片瀏覽，重點(diǎn)看尾端和兩側(cè)，給血小板聚集進(jìn)行分級(jí)，低度聚集：3～5一堆；

中度聚集：5～10個(gè)一堆；高度聚集：大于10個(gè)一堆，記錄每種聚集的堆數(shù)。估計(jì)血小板的數(shù)量，如果

估計(jì)的數(shù)量與儀器結(jié)果差異20%以上，認(rèn)為樣本血小板聚集陽性。估計(jì)血小板計(jì)數(shù)方法：高倍鏡看10個(gè)

視野，每個(gè)視野觀察紅細(xì)胞和血小板比例。使用自動(dòng)化閱片機(jī)的實(shí)驗(yàn)室，也可以在自動(dòng)讀片儀器上估計(jì)

血小板的數(shù)量。

A.3.2巨（大）血小板：體積與正常紅細(xì)胞體積相當(dāng)及以上，大血小板大于11%為陽性。

A.3.3顆粒減少或缺失的正常體積血小板及巨、大血小板

A.3.4血小板衛(wèi)星現(xiàn)象（中性粒細(xì)胞或淋巴瘤細(xì)胞的血小板衛(wèi)星現(xiàn)象）

A.3.5畸形血小板

A.3.6巨核細(xì)胞

A.4血液內(nèi)可見的寄生蟲或其他病原微生物

A.4.1瘧原蟲

A.4.2巴貝西蟲

A.4.3絲蟲微絲蚴

A.4.4錐蟲

A.4.5弓形蟲

A.4.6附紅細(xì)胞體

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A.4.7人粒細(xì)胞無形體

8

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BB

附錄B

（規(guī)范性附錄）

血液分析自動(dòng)審核規(guī)則

血液分析自動(dòng)審核規(guī)則見表B.1。

表B.1血液分析自動(dòng)審核規(guī)則

項(xiàng)條條件項(xiàng)條條件

(1)原始細(xì)胞Q～Flag(Blasts/AbnLympho?)>(9)血小板聚集

126Q～Flag(PLTClumps?)>195

165

2Q～Flag(Blasts?)>10027PLT<60×109/L

3Q～Flag(AbnLympho?)>100(10)大血小板28Q～Flag(PLTClumps?)>195

4IG%>5%29PDW>24.45fl

(2)不正常淋Q～Flag(Blasts/AbnLympho?)>

530PDW=“----”

巴細(xì)胞165

6Lymph%>70%(11)Deltacheck31RBC>20%

7IG#>0.755×109/L（1～7天內(nèi)前后32HGB>20%

(3)幼稚粒細(xì)8IG#>0.2×109/L兩次結(jié)果差異）33HCT>20%

胞9IG%>2.0%34MCV>5%

(4)反應(yīng)性淋Q～Flag(AtypicalLympho?)>

1035MCH>5%

巴細(xì)胞195

11HFLC%>1.5%36MCHC>5%

(5)中毒顆粒12NEWX>390.537RDW～SD>20%

13NESFL>5838RDW～CV>15%

(6)空泡變性(12)血小板結(jié)果PLT<50×109/LandQ～Flag(PLT

14LYWX>76639

錯(cuò)誤Clumps?)<100

PDW=“----”andMicroR>10%

15NEWX>45040

andPLT<300×109/L

(13)原始細(xì)胞Q～Flag(Blasts/AbnLympho?)>

16MONO#>2.69×109/L41

100

(14)儀器ΔWBC超42DifferencebetweenWNRandWDF

17LYZ>65

限

(7)有核紅細(xì)(15)乳糜干擾/紅

18NRBC#>0.045×109/L43MCHC>380g/L

胞細(xì)胞聚集/溶血

(NEUT～SSC>=155or

NEUT～WX>=340or

19NRBC%>0.45%44