1T/HLJTDXH006—2025寒地牧草耐蘇打鹽堿性鑒定技術(shù)規(guī)程本標準規(guī)定了寒地牧草耐蘇打鹽堿性鑒定的的技術(shù)程序，規(guī)定了寒地牧草鑒定用鹽堿溶液的配制、芽期耐蘇打鹽堿性鑒定、苗期耐蘇打鹽堿性鑒定以及牧草耐蘇打鹽堿性的分級標準。本文件適用于寒地牧草耐蘇打鹽堿性的鑒定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T2930.2草種子檢驗規(guī)程凈度分析GB/T2930.4草種子檢驗規(guī)程發(fā)芽試驗3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。寒地牧草forageincoldregion在寒冷氣候區(qū)能夠自然越冬或正常生長的牧草種類。3.2耐蘇打鹽堿性sodasaline-alkalinetolerance寒地牧草對蘇打鹽堿環(huán)境的耐受能力。4寒地牧草耐蘇打鹽堿性鑒定程序寒地牧草芽期耐蘇打鹽堿性鑒定程序包括3個階段，其中鑒定溶液配制細分為2個步驟，芽期耐蘇打鹽堿性鑒定細分為5個步驟，苗期耐蘇打鹽堿性鑒定細分為7個步驟。程序流程圖如圖1所示。T/HLJTDXH006—20251鑒定溶液配制苗期蘇打鹽堿溶液配制（見5.2）2芽期耐蘇打鹽堿性鑒定3苗期耐蘇打鹽堿性鑒定牧草種子選擇與處理（見6.1）鹽堿脅迫處理（見6.2）指標計算（見6.3）芽期耐蘇打鹽堿度（見6.4）牧草種子選擇與處理（見7.1）播種與育苗（見7.3）脅迫處理（見7.4）苗期耐蘇打鹽堿度（見7.6）圖1寒地牧草耐蘇打鹽堿性鑒定程序流程圖T/HLJTDXH006—20255鑒定溶液配制5.1芽期蘇打鹽堿溶液配制以1/2霍格蘭德營養(yǎng)液（附表1）為溶劑配制75mmol/L鹽堿溶液，NaCl、Na2CO3、NaHCO3、Na5.2苗期蘇打鹽堿溶液配制以1/2霍格蘭德營養(yǎng)液為溶劑配制配制200mmol/L的鹽堿溶液，NaCl、Na2CO3、NaHCO3、Na2S6芽期耐蘇打鹽堿性鑒定6.1牧草種子選擇與處理選取大小均勻、籽粒飽滿的種子，種子質(zhì)量應符合GB/T2930.2的規(guī)定。用75%乙醇溶液浸泡30s消毒，無菌水沖洗3次～4次，無菌濾紙吸干多余水分。6.2鹽堿脅迫處理按GB/T2930.4的規(guī)定測定發(fā)芽率。采用濾紙法，選用直徑90mm培養(yǎng)皿，鋪2層90mm濾紙，放置50粒處理好的種子，加5mL芽期蘇打鹽堿溶液，蒸餾水為對照，每個處理設(shè)3次重復。培養(yǎng)皿置于智能人工氣候箱，溫度25℃,光照強度10000lx，光照周期為16h/8h（光照/黑暗），每天觀察培養(yǎng)皿水分情況，并向培養(yǎng)皿中補加蒸餾水至潤濕濾紙即可。每日統(tǒng)計種子發(fā)芽數(shù)，發(fā)芽標準為芽長達到種子長度一半以上，連續(xù)3d無種子萌發(fā)時，計算發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)。6.3指標計算6.3.1相對發(fā)芽勢計算6.3.1.1發(fā)芽勢按公式（1）計算：式中：GE——發(fā)芽勢；Xp——發(fā)芽高峰日的發(fā)芽種子數(shù)；Xgt——發(fā)芽種子總數(shù)。6.3.1.2相對發(fā)芽勢按公式（2）計算：式中：RGE——相對發(fā)芽勢；T/HLJTDXH006—20254GEt——鹽堿脅迫處理組發(fā)芽勢；GEck——對照組發(fā)芽勢。6.3.2相對發(fā)芽率計算6.3.2.1發(fā)芽率按公式（3）計算：式中：RG——發(fā)芽率；Xgt——發(fā)芽種子總數(shù)；XT——培養(yǎng)種子總數(shù)。6.3.2.2相對發(fā)芽率按公式（4）計算：式中：RRG——相對發(fā)芽率；RGt——鹽堿脅迫處理組發(fā)芽率；RGck——對照組發(fā)芽率。6.3.3相對發(fā)芽指數(shù)計算6.3.3.1發(fā)芽指數(shù)按公式（5）計算：式中：GI——發(fā)芽指數(shù)；Gt——第t天發(fā)芽的種子數(shù)；Dt——與Gt對應的發(fā)芽試驗日數(shù)。6.3.3.2相對發(fā)芽指數(shù)按公式（6）計算：RGI——相對發(fā)芽指數(shù)；T/HLJTDXH006—20255GIt——鹽堿脅迫處理組發(fā)芽指數(shù)；GIck——對照組發(fā)芽指數(shù)。6.4芽期耐蘇打鹽堿度牧草芽期耐蘇打鹽堿度按公式（7）計算：式中：STD——牧草芽期耐蘇打鹽堿度；RGE——相對發(fā)芽勢；RRG——相對發(fā)芽率；RGI——相對發(fā)芽指數(shù)。6.5芽期耐蘇打鹽堿性分級芽期耐蘇打鹽堿性分級按表2判定。表2芽期耐蘇打鹽堿性分級標準ⅠⅡ耐ⅢⅣⅤ7苗期耐蘇打鹽堿性鑒定7.1牧草種子選擇與處理種子選擇與處理方法同6.1。7.2催芽在培養(yǎng)皿中放置滅菌后的濾紙，將種子均勻排布于濾紙上，并保持濕潤。培養(yǎng)皿置于25℃的培養(yǎng)箱中催芽至芽長達種子長度一半以上。7.3播種與育苗選取15粒長勢一致的發(fā)芽種子，均勻播種到預先加入30g滅菌蛭石的營養(yǎng)缽中（直徑×高度：10cm×10cm，底部具孔），播種深度0.5cm～1.0cm，澆1/2霍格蘭德營養(yǎng)液，保持濕潤。置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，控制溫度為25℃,光強10000Lx，光周期為16h/8h（光照/黑暗相對濕度60%～80%。每個處理3次重復，待幼苗長至第一片真葉完全展開、第二片真葉展開初期時間苗，每缽保苗10株。7.4脅迫處理T/HLJTDXH006—20256間苗后處理組開始澆苗期蘇打鹽堿溶液進行脅迫，對照組繼續(xù)澆1/2霍格蘭德營養(yǎng)液。每3d澆1次，澆液量為10mL。7.5苗情分級脅迫處理7d后，記錄幼苗的生長狀態(tài)，并按表1進行苗情分級。表1耐蘇打鹽堿脅迫處理下單株苗情分級標準1莖葉正常生長莖質(zhì)地堅韌且有一定的彈性，葉片柔軟23莖葉的生長明顯受阻，莖的粗細可能比正常幼苗略457.6苗期耐蘇打鹽堿度苗期耐蘇打鹽堿度按公式（8）計算：式中：STI——苗期耐蘇打鹽堿度；Ci——苗情級別；Ni——每類苗情株數(shù)；5——最高苗情級別；Nt——幼苗總株數(shù)。7.7苗期耐蘇打鹽堿性分級苗期耐蘇打鹽堿性分級按表3判定。表3苗期耐蘇打鹽堿性分級標準Ⅰ<35.0Ⅱ耐ⅢⅣⅤ8技術(shù)檔案應對牧草耐鹽堿鑒定過程進行記錄，將數(shù)據(jù)、圖像、評價指標統(tǒng)計分析表、評價報告等建立檔案并及時歸檔。檔案長期保存，做到可追溯。T/HLJTDXH006—20257附錄A（資料性附錄）