術(shù)

精液液樣本類(lèi)型：精液。樣

16CCFQ5000次a3B

化處理本采集，按照實(shí)際精

-12-

液量加入1/100的液

化劑，巴氏吸管輕輕

吹打；昆合后37攝氏

度孵育30-60分鐘，

觀察精液液化和粘度

的變化，發(fā)送報(bào)告；

按規(guī)定處理廢棄物；

接受臨床相關(guān)咨詢。

經(jīng)皮穿外生殖器消毒,局部以1個(gè)穿

刺附翠麻醉,穿刺針刺入附刺部位為

17HSD60101精子抽睪,獲取附睪液置入次b基價(jià)，每3A

吸術(shù)精子培養(yǎng)液中，送常增加1個(gè)

(PESA)規(guī)體外受精胚胎移植加收不超

實(shí)驗(yàn)室(IVF),加壓包過(guò)50%

扎、冰敷,顯微鏡下

觀察精子質(zhì)量。不含

精子優(yōu)選處理、精子

培養(yǎng)、精子冷凍.

準(zhǔn)備胚胎培養(yǎng)液、體

外顯微操作液、無(wú)胚

卵母細(xì)胎毒性透明質(zhì)酸酶、

胞胞漿無(wú)胚胎毒性聚乙烯毗

18HTX48701次3A

內(nèi)單精咯烷朋(PVP)、元胚胎

子注射毒性礦物油，預(yù)熱，

制備顯微操作皿和胚

胎培養(yǎng)皿，置于培養(yǎng)

14-

箱內(nèi)平衡過(guò)夜,取卵

后在顯微鏡下將卵冠

丘復(fù)合體(OCCCS)在

含透明質(zhì)酸酹蕾的體

外顯微操作液內(nèi)消

化，轉(zhuǎn)至操作液內(nèi)用

不同內(nèi)徑的胚胎轉(zhuǎn)移

管輕輕脫去卵丘，用

操作液反復(fù)洗7-8

遍，放入培養(yǎng)滴中，

在倒置鏡下觀察并評(píng)

估卵母細(xì)胞的成熟程

度，記錄，將體外操

-15-

作液及二甲基毗咯烷

酮(PVP)加入顯微操

作微滴中，在PVP中

加入精子，在顯微操

作系統(tǒng)下，用顯微注

射針制動(dòng)精子，吸入

注射針，注射進(jìn)卵國(guó)

細(xì)胞胞漿內(nèi)，注射后

將胚胎培養(yǎng)液中清洗

后移入胚胎培養(yǎng)液

內(nèi)，置于37℃三氣培

養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，所有操

作均在萬(wàn)級(jí)層流的培

-16-

養(yǎng)室內(nèi)，在百級(jí)層流

超凈IVF工作站或工

作臺(tái)內(nèi)避光進(jìn)行，需

使用裝有恒溫?zé)崤_(tái)的

實(shí)體顯微鏡、倒置顯

微鏡和顯微操作-顯

微注射系統(tǒng)。

正在接受體外授精-

胚胎移植技術(shù)的患者

卵子贈(zèng)

自愿贈(zèng)卵，臨床醫(yī)生

19KUB16701送技術(shù)次△3B

向贈(zèng)受雙方分別談

咨詢

話，受者夫婦完善相

關(guān)檢查，在取卵當(dāng)日

-17-

受者方男方取精,IVF

實(shí)驗(yàn)室工作人員隨機(jī)

分出所贈(zèng)卵子,根據(jù)

精液情況決定受精方

式，實(shí)施受精和胚胎

培養(yǎng),100%隨訪到嬰

兒至出生后1個(gè)月，

并在結(jié)婚前做婚前排

豆

未成熟所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

卵體外流的培養(yǎng)室內(nèi),在百

20KUB23701次&3A

成熟培級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

養(yǎng)完成.所有體外操作

18-

設(shè)備均配備有熱臺(tái)。

需使用裝有恒溫?zé)崤_(tái)

的實(shí)體顯微鏡、倒置

顯微鏡合格和顯微操

作-顯微注射系統(tǒng)。取

卵前一天準(zhǔn)備好未成

熟卵體外成熟培養(yǎng)

(IVM)培養(yǎng)液及培養(yǎng)

nn,置于培養(yǎng)箱內(nèi)平

衡過(guò)夜，取卵日B超

下取卵，將抽吸出的

卵泡液通過(guò)特殊的細(xì)

胞篩過(guò)漉、充分清洗，

19-

然后置于體視顯微鏡

下仔細(xì)尋找，將抽吸

出的未成熟卵母細(xì)胞

撿出，清洗后置于未

成熟卵體外成熟培養(yǎng)

(IVM)培界液中，培養(yǎng)

箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)24

小時(shí)、48小時(shí)后分別

剝卵，在倒置顯微鏡

下觀察卵母細(xì)胞成熟

情況。登記，鑿精子

成熟卵細(xì)胞內(nèi)顯微注

射法受精，存檔.

-20-

冷凍卵子放入液氮罐

卵子冷中保存，需每日添加

21KUB23703次a3A

凍保存液氮，做記錄，核對(duì)

冷凍記錄.

所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

流的培養(yǎng)室內(nèi),在百

級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

完成.需使用實(shí)體顯

卵子冷

22KUB23704微鏡、倒置顯微鏡.次b3A

凍復(fù)蘇

將卵子預(yù)熱，將解凍

液1、解凍液2及洗

卵液置于室溫，從冷

凍庫(kù)里取出卵子冷凍

-21-

管，液氮置于保溫瓶

中待用。迅速將冷凍

卵子從液氮中取出，

按解凍程序解凍卵

子，顯微鏡下觀察，

記錄。置于準(zhǔn)備好的

培養(yǎng)皿中放入二氧化

碳培養(yǎng)箱中培蕤.

體外受所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

精早期流的培養(yǎng)室內(nèi)，在百

23KUD23702胚胎輔級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)次b3A

助孵化完成，所有體外操作

透明帶設(shè)備均配備有熱臺(tái)，

-22-

切割術(shù)需使用裝有恒溫?zé)崤_(tái)

的實(shí)體顯微鏡、倒置

顯微鏡合、顯瑞操作-

顯微注射系統(tǒng)、激光

輔助的顯微打孔系

統(tǒng)。預(yù)先準(zhǔn)備好顯微

操作微滴,置二三氣

培養(yǎng)箱內(nèi)平衡過(guò)夜，

輔助孵化前換成已預(yù)

熱的體外操作液，將

胚胎轉(zhuǎn)入顯微操作微

滴內(nèi)，在倒置顯微鏡

下用顯微操作針在透

-23-

明帶上作一個(gè)切口，

最后進(jìn)行登記，存檔。

所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

流的培養(yǎng)室內(nèi),在百

體外受級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

精早期完成，需使用裝有恒

胚胎輔溫?zé)崤_(tái)的實(shí)體顯微

24KUD23703助孵化鏡、倒置顯微鏡合、次&3A

透明帶顯微操作-顯徼注射

激光打系統(tǒng)、激光輔助的顯

孔術(shù)微打孔系統(tǒng).預(yù)先準(zhǔn)

備好顯微操作微滴，

置于三氣培養(yǎng)箱內(nèi)平

-24-

衡過(guò)夜，將胚胎轉(zhuǎn)入

顯微操作微滴內(nèi),在

倒置顯微鏡下應(yīng)用激

光打孔軟件控制激光

打孔儀，用激光在透

明帶上打孔（直徑約

為20微米）,完成后

將胚胎在胚胎培養(yǎng)液

中洗過(guò)后移入培養(yǎng)滴

中置于三氣培養(yǎng)箱內(nèi)

培養(yǎng)，最后進(jìn)行登記，

陽(yáng)。

-25-

所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

流的培養(yǎng)室內(nèi)，在百

級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

體外受完成，所有體外操作

精早期設(shè)備均配備有熱臺(tái)，

胚胎輔需使用裝有恒溫?zé)崤_(tái)

25KUD23704助孵化的實(shí)體顯微鏡、倒置次△3A

透明帶顯微鏡、顯微操作-

激光削顯微注射系統(tǒng)、激光

薄術(shù)輔助的顯微打孔系

統(tǒng)。預(yù)先準(zhǔn)備好顯微

操作微滴，置不三氣

培養(yǎng)箱內(nèi)平衡過(guò)夜，

-26-

輔助孵化前為顯微操

作換液（換成體外操

作液）,在倒置顯微鏡

下用激光將透明帶部

分削薄，苣于三氣培

養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，最后進(jìn)

行登記，存檔。

體外受所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

精早期流的培養(yǎng)室內(nèi)，在百

胚胎輔級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

26KUD23705次△3A

助蜉化完成，所有體外操作

透明帶設(shè)備均配備有熱臺(tái)，

化學(xué)削需使用裝有恒溫?zé)崤_(tái)

-27-

薄術(shù)的實(shí)體顯微鏡、倒走

顯微鏡、顯微糜作-

顯微注射系統(tǒng)、激光

輔助的顯微打孔系

統(tǒng)。將胚胎置7預(yù)先

平衡好的鏈霉蛋白酹

（10國(guó)際單位/宅開(kāi)）

內(nèi)消化約61秒始終

用倒置顯微鏡觀察，

以防透明帶全部消

失，待透明帶變薄后

將胚胎移入胚胎培養(yǎng)

液內(nèi)清洗，再裝入胚

-28-

胎培養(yǎng)滴內(nèi)，置于三

氣培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，最

后進(jìn)行登記，存檔。

所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

流的培養(yǎng)室內(nèi),在百

級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

完成.所有體外操作

囊胚培設(shè)備均配備有熱臺(tái).

27KUD23706B3A

養(yǎng)預(yù)先用囊胚培養(yǎng)液準(zhǔn)

備好培養(yǎng)用微滴，置

于培養(yǎng)箱內(nèi)平衡過(guò)

夜.取卵后第3天將

用于囊胚培養(yǎng)的胚胎

-29-

從早期卵裂期培養(yǎng)液

內(nèi)轉(zhuǎn)入預(yù)先準(zhǔn)備好的

囊胚培養(yǎng)液內(nèi),置于

三氣培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培

養(yǎng)2-3天，在倒置顯

微鏡下觀察并記錄囊

胚的形態(tài)，待有囊胚

形成即進(jìn)行囊胚的移

植和冷凍。最后進(jìn)行

登記，存檔（不含囊胚

評(píng)分）。需使用裝有恒

溫?zé)崤_(tái)的實(shí)體顯微

鏡、倒置顯微鏡.

-30-

前一天準(zhǔn)備凍存原

液。當(dāng)天在萬(wàn)級(jí)層流

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的百級(jí)層流

超凈工作臺(tái)將3-4根

巴斯特管在酒精燈上

燒軟拉細(xì)用砂輪切

胚胎冷

28KUD23707斷，100亳米培養(yǎng)皿次△3A

凍

放置無(wú)菌物品，將冷

凍原液與人血清替代

品同放入四孔皿中，

置于37-C培養(yǎng)箱內(nèi)

預(yù)熱,定時(shí)器足時(shí)，

將胚胎轉(zhuǎn)移至冷涼液

-31-

1孔內(nèi)5分鐘，2孔

內(nèi)15分鐘，3孔內(nèi)

15分鐘，裝入冷凍麥

管內(nèi)，每管約3個(gè)胚

胎，放入程再冷凍儀

中按常規(guī)程序冷凍。

待程序結(jié)束后，將裝

有冷凍胚胎的麥管插

入冷凍支架，置于液

期建內(nèi)保存。意使用

實(shí)體顯微鏡、倒置顯

微鏡、程序降溫儀。

-32-

冷凍胚胎放入液氮罐

胚胎冷中保存，需每日添加

29KUD23708月a3A

凍保存液氮，做記錄，核對(duì)

冷凍記錄，安錨控。

前一天，配制原存原

液，在萬(wàn)級(jí)層流實(shí)驗(yàn)

室內(nèi)的百級(jí)層流超凈

胚胎玻工作臺(tái)內(nèi)制備原液，

30KUD23709璃化冷放入4℃冰箱保存.次b3A

凍當(dāng)天在萬(wàn)級(jí)層流實(shí)驗(yàn)

室內(nèi)的百級(jí)層流超凈

工作臺(tái)內(nèi)將3-4根巴

斯特管在酒精燈上燒

-33-

軟拉細(xì)用砂輪切斷，

100亳米培養(yǎng)皿放首

無(wú)菌物品，將冷凍原

液與人血清替代品同

放入四孔皿中，苣于

37。（：培養(yǎng)箱內(nèi)預(yù)熱。

冷凍支架上書(shū)寫(xiě)姓名

病例號(hào)，根據(jù)胚胎數(shù)

量準(zhǔn)備冷凍環(huán)數(shù)個(gè)，

安裝到冷凍管蓋上,2

升液氮容器盛滿液

氮.定時(shí)器定時(shí),將

胚胎轉(zhuǎn)移至冷涼液第

-34-

一培養(yǎng)皿內(nèi)1分鐘，

第二培養(yǎng)皿內(nèi)2分

鐘，第三培養(yǎng)皿內(nèi)30

秒鐘，裝入冷楙上，

每環(huán)2-3個(gè),放入液

氮，再轉(zhuǎn)移入液氮罐

內(nèi)保存。需使月實(shí)體

顯微鏡、倒置顯微鏡。

所有胚胎操作均在萬(wàn)

級(jí)層流的培養(yǎng)室內(nèi)，

冷凍胚

31KUD23710在百級(jí)層流超凈工作次b3A

胎復(fù)蘇

臺(tái)內(nèi)避光完成.需使

用實(shí)體顯微鏡、倒置

-35-

顯微鏡。預(yù)先準(zhǔn)備好

培養(yǎng)解凍后胚胎的培

養(yǎng)微滴，首于三氣培

養(yǎng)箱內(nèi)平衡過(guò)夜。準(zhǔn)

備好解凍液，置于四

孔培養(yǎng)皿中，恢復(fù)至

室溫。從胚胎庫(kù)中取

出存有冷凍胚胎管，

雙人核對(duì)無(wú)誤后,置

于室溫靜置40秒放

入30℃水浴中，取出

冷凍管，剪斷兩頭，

使冷凍液及胚胎流入

-36-

四孔皿中間。轉(zhuǎn)入解

凍液1孔內(nèi)5分鐘，

2孔內(nèi)5分鐘，3孔

內(nèi)5分鐘，4孔內(nèi)5

分鐘，后放入恒溫箱

復(fù)溫10分鐘。移入預(yù)

先平衡好的培養(yǎng)滴中

培養(yǎng)。倒置鏡下觀察

胚胎形態(tài)，記錄.完

成后將胚胎放回三氣

培賽箱內(nèi)培養(yǎng)，記錄，

陽(yáng)。

32KSS23701精液冷取精室內(nèi)采集精液，次3A

-37-

凍標(biāo)準(zhǔn)化精液分析，計(jì)

數(shù)并記錄。預(yù)先準(zhǔn)備

好精子冷凍保護(hù)劑，

恢復(fù)至室溫，與精液

混合后分裝，置于程

序冷凍儀內(nèi)行程序冷

凍后移入液氨嶂中保

存。一周之內(nèi)預(yù)解凍

一管，再次行精液分

析，記錄，決定冷凍

精液是否可用，登記，

陽(yáng)。

33KSS23702睪丸/附配制培養(yǎng)液次3A

-38-

睪精子(G-IVF+10%HSA),

分謝二氧化碳培養(yǎng)箱平衡

培養(yǎng)6小時(shí)以上，手

術(shù)取出睪丸（或附睪）

組織，置于預(yù)先平衡

好的培養(yǎng)液中，體視

鏡下用TD針將組織

撕開(kāi)，釋放出精子及

支持細(xì)胞,置三倒苣

顯微鏡下觀察精子計(jì)

數(shù)，精子形態(tài)及活力

分析，記錄，曲艮告，

所有操作均在萬(wàn)級(jí)層

-39-

流的培養(yǎng)室內(nèi),在百

級(jí)層流超凈工作臺(tái)內(nèi)

避光完成，最后進(jìn)行

記錄，存檔，需使用

相差顯微鏡、倒置顯

微鏡。

分題后的睪丸（或附

睪）精子離心去上清

睪丸/附后加入冷凍保護(hù)劑，

34KSS23703睪精子分裝成4管，雙人核次△3A

冷凍對(duì)并標(biāo)記記錄，置于

程序冷凍儀中進(jìn)行程

序化冷凍后置三液血