2025年上學(xué)期高三生物動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)試題一、單選題（每題6分，共60分）巴馬香豬因肉質(zhì)鮮美成為理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，研究人員利用其腎臟成纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是（）A.用膠原蛋白酶或胃蛋白酶代替胰蛋白酶處理腎臟組織均可獲得單細(xì)胞懸液B.卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至MⅡ期，且腎臟成纖維細(xì)胞與卵母細(xì)胞的培養(yǎng)條件完全相同C.實(shí)驗(yàn)中三次細(xì)胞培養(yǎng)均需通入5%CO?，目的是刺激細(xì)胞呼吸并維持培養(yǎng)液pH穩(wěn)定D.重構(gòu)胚需激活后培養(yǎng)至囊胚期，再移植到同期發(fā)情處理的母豬子宮內(nèi)2025年湖南首例體細(xì)胞克隆沙子嶺豬誕生，該品種具有產(chǎn)仔多、抗病力強(qiáng)等優(yōu)良特性。下列有關(guān)克隆流程的敘述錯(cuò)誤的是（）A.胚胎細(xì)胞核移植比體細(xì)胞核移植成功率更高，因其細(xì)胞核全能性更易表達(dá)B.可通過(guò)乙醇、鈣離子載體或電刺激等方式激活重構(gòu)胚，使其啟動(dòng)分裂發(fā)育C.胚胎移植前需取囊胚期滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA鑒定，以篩選符合需求的性別個(gè)體D.克隆豬的遺傳物質(zhì)與供體沙子嶺豬完全一致，代孕母體僅提供發(fā)育場(chǎng)所為保護(hù)瀕危郊狼，科研人員將其體細(xì)胞核移植到家犬去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建重構(gòu)胚，最終獲得健康克隆個(gè)體。下列相關(guān)操作錯(cuò)誤的是（）A.去核方法可采用顯微操作法或梯度離心法，需保證卵母細(xì)胞遺傳物質(zhì)完全去除B.重構(gòu)胚激活可使用Ca2?載體處理，以模擬受精過(guò)程中的鈣離子內(nèi)流信號(hào)C.受體家犬需經(jīng)同期發(fā)情處理使其子宮環(huán)境與胚胎發(fā)育同步，但無(wú)需免疫抑制D.選擇郊狼胚胎干細(xì)胞作為核供體，可降低體細(xì)胞核移植中表觀遺傳修飾的障礙下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植技術(shù)的敘述，正確的是（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中需添加抗生素抑制細(xì)菌污染，添加血清提供天然營(yíng)養(yǎng)B.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞核移植均涉及細(xì)胞融合，且融合原理完全相同C.核移植受體細(xì)胞需選擇減數(shù)第一次分裂中期的卵母細(xì)胞，以確保細(xì)胞周期同步D.克隆動(dòng)物的培育體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性，其性狀與供體動(dòng)物完全一致利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素時(shí)，通過(guò)核移植技術(shù)加速轉(zhuǎn)基因個(gè)體繁育。下列流程分析錯(cuò)誤的是（）A.供體細(xì)胞需經(jīng)胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，再進(jìn)行原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)B.重組細(xì)胞構(gòu)建可采用顯微注射法將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞，再用電融合法誘導(dǎo)融合C.重組胚胎移植前需進(jìn)行性別鑒定，選擇雌性胚胎以保證轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物的乳腺特異性表達(dá)D.代孕母牛對(duì)移入的胚胎存在免疫排斥反應(yīng)，需長(zhǎng)期使用免疫抑制劑維持妊娠科學(xué)家將黑色小鼠囊胚細(xì)胞嵌入白色小鼠囊胚中，發(fā)育成黑白相間的嵌合體小鼠。下列分析正確的是（）A.該技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞核移植，利用了細(xì)胞核的全能性B.嵌合體毛色差異是由于不同細(xì)胞中基因發(fā)生選擇性表達(dá)C.注入的黑色小鼠細(xì)胞應(yīng)來(lái)自囊胚滋養(yǎng)層，以參與胚胎發(fā)育D.嵌合體小鼠體細(xì)胞中染色體數(shù)目為40條（2n=40），與供受體一致治療性克隆技術(shù)可通過(guò)核移植構(gòu)建重組細(xì)胞，誘導(dǎo)分化為特定細(xì)胞用于疾病治療。下列流程表述錯(cuò)誤的是（）A.過(guò)程①需用促性腺激素處理供體，以獲取更多去核卵母細(xì)胞B.過(guò)程②通過(guò)顯微操作去除卵母細(xì)胞細(xì)胞核，需保留部分細(xì)胞質(zhì)以支持核全能性C.過(guò)程③中，重組細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化為胰島B細(xì)胞，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D.該技術(shù)可避免免疫排斥反應(yīng)，但其應(yīng)用需嚴(yán)格遵守胚胎研究的倫理規(guī)范關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞核移植與胚胎工程的結(jié)合應(yīng)用，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.胚胎分割技術(shù)可將桑椹胚均等分割為4等份，提高核移植胚胎的利用率B.重組胚胎移植前需培養(yǎng)至原腸胚期，以確保胚胎具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力C.核移植技術(shù)與轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合，可培育出含目的基因的克隆動(dòng)物作為生物反應(yīng)器D.同期發(fā)情處理的目的是使受體動(dòng)物子宮環(huán)境與胚胎發(fā)育階段同步化下列關(guān)于克隆猴培育過(guò)程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.從卵巢采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至MⅡ期，此時(shí)細(xì)胞核位于第一極體附近B.核移植時(shí)需通過(guò)顯微操作將供體細(xì)胞核注入去核卵母細(xì)胞，避免損傷細(xì)胞膜C.重構(gòu)胚激活后需在含血清的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，直至形成囊胚后進(jìn)行胚胎移植D.克隆猴的成功證明了體細(xì)胞核具有全能性，為人類(lèi)疾病模型研究提供支撐生物技術(shù)安全性與倫理問(wèn)題備受關(guān)注，下列觀點(diǎn)正確的是（）A.治療性克隆涉及早期胚胎破壞，違背生命倫理，應(yīng)全面禁止B.克隆動(dòng)物技術(shù)可用于瀕危物種保護(hù)，但可能導(dǎo)致遺傳多樣性降低C.生殖性克隆與治療性克隆本質(zhì)相同，均屬于無(wú)性繁殖技術(shù)D.利用核移植技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，不會(huì)產(chǎn)生生物安全風(fēng)險(xiǎn)二、多選題（每題8分，共24分）利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆嵌合體小鼠的流程如下，下列敘述正確的有（）A.過(guò)程①需用胰蛋白酶處理供體組織，獲得分散的胚胎干細(xì)胞B.過(guò)程②中，囊胚期胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有發(fā)育全能性，可用于嵌合C.過(guò)程③需對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證胚胎著床和發(fā)育D.嵌合體小鼠的毛色由供體和受體細(xì)胞共同決定，體現(xiàn)基因的選擇性表達(dá)關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與核移植的操作要點(diǎn)，下列說(shuō)法正確的有（）A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，貼壁細(xì)胞需定期用胰蛋白酶處理，以解除接觸抑制B.核移植時(shí)，供體細(xì)胞需培養(yǎng)至10代以?xún)?nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型C.重構(gòu)胚培養(yǎng)時(shí)，需在培養(yǎng)液中添加維生素、激素等，模擬體內(nèi)胚胎發(fā)育環(huán)境D.克隆動(dòng)物的線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供體細(xì)胞核，核DNA來(lái)自受體卵母細(xì)胞核移植技術(shù)中，影響重構(gòu)胚發(fā)育的關(guān)鍵因素包括（）A.供體細(xì)胞核的分化程度，分化越低全能性表達(dá)潛力越強(qiáng)B.受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)環(huán)境，需提供啟動(dòng)核基因表達(dá)的信號(hào)C.重構(gòu)胚的激活方式，需模擬自然受精過(guò)程中的鈣信號(hào)變化D.胚胎移植后的妊娠管理，代孕母體的營(yíng)養(yǎng)狀況影響克隆效率三、非選擇題（共66分）（18分）2025年海南某科研團(tuán)隊(duì)利用野化單峰駱駝體細(xì)胞克隆技術(shù)，成功繁育出瀕危駱駝后代。下圖為其技術(shù)流程，請(qǐng)回答：（1）過(guò)程①中，從雌性駱駝卵巢中采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至______期，此時(shí)細(xì)胞中染色體處于______（填“復(fù)制后”或“未復(fù)制”）狀態(tài)。去核時(shí)需去除細(xì)胞核與______，以避免殘留遺傳物質(zhì)影響克隆個(gè)體純度。（2）過(guò)程②中，供體體細(xì)胞培養(yǎng)需控制培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)氣體環(huán)境為_(kāi)_____，目的是______。若需長(zhǎng)期保存供體細(xì)胞，可在______條件下冷凍儲(chǔ)存。（3）過(guò)程③重組細(xì)胞構(gòu)建可采用______法將供體細(xì)胞核注入去核卵母細(xì)胞，再通過(guò)______（填具體方法）激活重構(gòu)胚。（4）與自然繁殖相比，克隆技術(shù)在瀕危動(dòng)物保護(hù)中的優(yōu)勢(shì)是______（答出2點(diǎn)）。（24分）克隆猴“中中”和“華華”的培育標(biāo)志著我國(guó)非人靈長(zhǎng)類(lèi)研究進(jìn)入國(guó)際領(lǐng)先水平。下圖為其培育流程，請(qǐng)結(jié)合圖示回答：（1）圖中細(xì)胞A為_(kāi)_____，需從供體猴卵巢中采集并培養(yǎng)至______期，該時(shí)期細(xì)胞的顯著特點(diǎn)是______。（2）過(guò)程①核移植時(shí)，需通過(guò)______（儀器）將供體細(xì)胞核注入去核卵母細(xì)胞，判斷核移植成功的標(biāo)志是______。（3）過(guò)程②重構(gòu)胚激活常用______（舉2例）方法，激活的本質(zhì)是______。胚胎培養(yǎng)至______期進(jìn)行移植，此時(shí)胚胎包括______和滋養(yǎng)層兩部分結(jié)構(gòu)。（4）研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)供體細(xì)胞核進(jìn)行表觀遺傳修飾（如組蛋白去甲基化）可提高克隆成功率，原因是______。（24分）某興趣小組欲設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證“卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可重編程體細(xì)胞核”，實(shí)驗(yàn)材料包括：黑色小鼠成纖維細(xì)胞（核供體）、白色小鼠去核卵母細(xì)胞（受體）、代孕母鼠等。請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)方案并回答問(wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)思路：①取黑色小鼠耳部組織，用______處理獲得單細(xì)胞懸液，培養(yǎng)至第5代作為核供體；②從白色小鼠超數(shù)排卵的卵巢中獲取卵母細(xì)胞，培養(yǎng)至MⅡ期后，用______法去核；③通過(guò)顯微操作將黑色小鼠細(xì)胞核注入白色小鼠去核卵母細(xì)胞，構(gòu)建重構(gòu)胚；④用______法激活重構(gòu)胚，培養(yǎng)至______期移植到同期發(fā)情的代孕母鼠子宮；⑤觀察并記錄子代小鼠的______（至少2項(xiàng)）性狀。（2）預(yù)期結(jié)果：若子代小鼠表現(xiàn)為_(kāi)_____，則證明卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)可重編程體細(xì)胞核。（3）分析討論：①實(shí)驗(yàn)中選擇黑色和白色小鼠作為供受體，目的是______；②若部分子代小鼠出現(xiàn)毛色嵌合現(xiàn)象，可能原因是______；③與胚胎細(xì)胞核移植相比，體細(xì)胞核移植成功率較低的原因是______。四、實(shí)驗(yàn)分析題（共50分）（25分）某研究團(tuán)隊(duì)比較了不同核供體（胚胎干細(xì)胞vs成纖維細(xì)胞）對(duì)克隆豬胚胎發(fā)育率的影響，結(jié)果如下表：核供體類(lèi)型重構(gòu)胚數(shù)卵裂率（%）囊胚率（%）囊胚細(xì)胞數(shù)胚胎干細(xì)胞200854268±5成纖維細(xì)胞200782345±3（1）根據(jù)數(shù)據(jù)可知，作為核供體時(shí)克隆效率更高，原因是。（2）卵裂率反映重構(gòu)胚的______能力，囊胚率低可能與______（填“供體核”或“受體細(xì)胞質(zhì)”）的表觀遺傳修飾有關(guān)。（3）若要進(jìn)一步探究克隆胚胎的發(fā)育潛力，可對(duì)囊胚期______細(xì)胞進(jìn)行______鑒定，檢測(cè)其是否具有分化為三胚層的能力。（25分）克隆動(dòng)物常出現(xiàn)“大胎綜合征”，表現(xiàn)為胎兒過(guò)度生長(zhǎng)、胎盤(pán)異常等。研究發(fā)現(xiàn)，這與供體細(xì)胞核中印記基因（如Igf2、H19）的甲基化狀態(tài)異常有關(guān)。（1）印記基因的甲基化屬于______（填“可遺傳”或“不可遺傳”）變異，會(huì)導(dǎo)致基因表達(dá)______（填“激活”或“沉默”）。（2）在正常受精過(guò)程中，Igf2基因來(lái)自父方的等位基因表達(dá)，母方的因甲基化而沉默，此現(xiàn)象體現(xiàn)了______。（3）若克隆胚胎中父源Igf2基因被異常甲基化，會(huì)導(dǎo)致胎兒生長(zhǎng)______（填“遲緩”或“過(guò)度”），原因是______。參考答案及解析（部分）單選題D（解析：胃蛋白酶最適pH為1.5-2.0，不適用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；卵母細(xì)胞與體細(xì)胞培養(yǎng)條件中血清濃度、激素種類(lèi)不同；CO?作用僅為維持pH，細(xì)胞呼吸無(wú)需CO?刺激。）D（解析：克隆豬的核基因與供體一致，但線(xiàn)粒體基因來(lái)自受體卵母細(xì)胞，存在細(xì)胞質(zhì)遺傳差異。）D（解析：胚胎干細(xì)胞核移植成功率高于體細(xì)胞，但題干明確為“體細(xì)胞核移植”技術(shù)。）非選擇題14.（1）MⅡ中期；復(fù)制后；第一極體（2）95%空氣+5%CO?；