ICS11.220

CCSB41

DB22

吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB22/T3434—2023

牛出血性敗血病防治技術(shù)規(guī)范

Technicalspecificationsforpreventionandcureofbovinehaemorrhagicsepticaemia

2023-01-13發(fā)布2023-03-01實施

吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布

DB22/T3434—2023

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)

定起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由吉林省畜牧業(yè)管理局提出并歸口。

本文件起草單位：吉林省動物疫病預(yù)防控制中心、吉林省畜牧總站。

本文件主要起草人：吳丹、于欽磊、王欣睿、馬曉媛、白翠、劉冬冬、李偉、常帥、孫亮、胡澤宇、

曹東陽、楊金鑫、朱奕霏。

I

DB22/T3434—2023

牛出血性敗血病防治技術(shù)規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了牛出血性敗血病的診斷、防治措施、疫情報告和疫情處置的要求，描述了檔案管理的

證實方法。

本文件適用于牛出血性敗血病的診斷和防治。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過中文的規(guī)范性引用而構(gòu)成文件的必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅注日期對應(yīng)的版本適用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T27530牛出血性敗血病診斷技術(shù)

NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范

NY/T815肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)

NY/T3075畜禽養(yǎng)殖場消毒技術(shù)

NY/T3445畜禽養(yǎng)殖場檔案規(guī)范

NY/T3467牛羊飼養(yǎng)場獸醫(yī)衛(wèi)生規(guī)范

NY5030無公害農(nóng)產(chǎn)品獸藥使用準(zhǔn)則

NY5032無公害食品畜禽飼料和飼養(yǎng)添加劑使用準(zhǔn)則

DB22/T3137動物疫情報告管理規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

牛出血性敗血病bovinehaemorrhagicsepticaemia

又名牛巴氏桿菌病，由多殺性巴氏桿菌某些血清型引起的一種牛的高度致死性、急性敗血性傳染病。

4診斷

4.1流行病學(xué)特點

4.1.1病原

多殺性巴氏桿菌（pasteurellamultocida），革蘭氏陰性球桿狀或短桿狀菌，兩端鈍圓，無鞭毛，

不形成芽孢。根據(jù)莢膜抗原和菌體抗原區(qū)分血清型，前者可分為A、B、D、E和F5個血清型，后者

1

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可分為16個血清型。其中對牛具有致病性的主要是莢膜血清A型、B型或E型。引起牛出血性敗血

病的多殺性巴氏桿菌以血清型6∶B和6∶E為主。

4.1.2傳播途徑

主要通過病牛或帶菌牛的排泄物、分泌物經(jīng)消化道和呼吸道傳播。多殺性巴氏桿菌進入動物體內(nèi)后

大量寄生在牛的上呼吸道和消化道黏膜上，各種誘因使牛機體抵抗力降低時，發(fā)生內(nèi)源性感染。外源性

傳染多經(jīng)消化道，偶爾可經(jīng)皮膚黏膜的損傷或吸血昆蟲的叮咬而傳播。氣候突變、長途運輸、饑餓、寒

冷和飼養(yǎng)管理等不良因素可誘發(fā)該病。

4.1.3易感動物

各品種牛均可感染。

4.1.4潛伏期

潛伏期一般為2d～5d。

4.1.5發(fā)病季節(jié)

發(fā)病無明顯季節(jié)性，冷熱交替、氣候劇變時多發(fā)。

4.1.6病死率

不同菌株致病性有所差異，強毒力菌株導(dǎo)致的病死率可接近100%。在地方性流行地區(qū)，死亡病例

主要為較大犢牛和青年牛。

4.2臨床癥狀

符合GB/T27530描述。

4.3病理變化

4.3.1多數(shù)病牛呈現(xiàn)由嚴(yán)重充血水腫引起的頸部明顯腫脹。

4.3.2敗血型呈一般敗血癥變化，內(nèi)臟器官出血，淋巴結(jié)顯著水腫，胸腹腔有大量滲出液。

4.3.3浮腫型在咽喉或頸下有漿液浸潤，切開浮腫部流出深黃色透明液體，間或雜有出血，咽周組織

和會咽軟骨韌帶呈黃色膠樣浸潤，咽淋巴結(jié)和頸前淋巴結(jié)高度急性腫脹。

4.3.4肺炎型主要表現(xiàn)為胸膜炎和格魯布性肺炎，胸腔中有大量漿液性纖維素性滲出，肺切面呈大理

石狀，心包與胸膜粘連，內(nèi)有干酪樣壞死物。

4.4實驗室診斷

4.4.1樣品采集

按NY/T541規(guī)定采集鼻腔拭子、抗凝全血或病變組織。

4.4.2病原分離鑒定

按GB/T27530規(guī)定執(zhí)行。

4.4.3熒光PCR法

見附錄A。

2

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4.5結(jié)果判定

4.5.1臨床疑似病例

病?；虿∷琅７?.1、4.2和4.3，判定為臨床疑似病例。

4.5.2臨床疑似病例

符合牛出血性敗血病的流行病學(xué)特點、臨床表現(xiàn)和病理變化，判定為臨床疑似病例。

4.5.3確診病例

對臨床疑似病例，經(jīng)上述任一實驗室診斷方法檢測，結(jié)果為陽性的，判定為牛出血性敗血病陽性病

例。

5防治措施

5.1免疫

5.1.1疫苗

應(yīng)選擇符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《獸藥管理條例》，且具有生產(chǎn)許可證和批準(zhǔn)文號的牛多殺性巴氏桿菌病滅

活疫苗。

5.1.2程序

散發(fā)地區(qū)一年免疫1次，多發(fā)地區(qū)每年免疫2次，具體免疫時間根據(jù)各地區(qū)牛出血性敗血病流行

情況而定。發(fā)生疫情時，應(yīng)對同群的假定健康牛進行緊急接種。

5.1.3方法

依據(jù)疫苗使用說明操作。

5.1.4注意事項

免疫操作后應(yīng)及時收集針頭、注射器、疫苗瓶和殘余疫苗，進行無害化處理。

5.2治療

5.2.1抗菌消炎療法

可使用青霉素類、鏈霉素類、四環(huán)素類和磺胺類等抗菌藥物進行治療。宜根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選擇抗

生素。獸藥使用記錄應(yīng)按NY5030規(guī)定執(zhí)行。

5.2.2對癥療法

在應(yīng)用抗菌消炎療法的同時，再結(jié)合解熱、鎮(zhèn)痛、補液、解毒、強心的對癥療法。

5.2.3加強營養(yǎng)

治療期間應(yīng)適當(dāng)補充維生素，并給予易消化飼料，飼料應(yīng)符合NY5032的要求。

5.3飼養(yǎng)管理

3

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5.3.1養(yǎng)殖場應(yīng)按NY/T815要求保證牛的營養(yǎng)需要。

5.3.2獸醫(yī)衛(wèi)生符合NY/T3467要求。

5.3.3飼養(yǎng)人員應(yīng)定期觀察牛只的采食情況和精神狀態(tài)。

5.3.4周邊場發(fā)生疫情時，應(yīng)提高觀察頻率。

5.3.5疾病發(fā)生或牛只死亡，應(yīng)聘請當(dāng)?shù)鼐哂袌?zhí)業(yè)獸醫(yī)資質(zhì)的人員進行診斷和治療。

5.4消毒

5.4.1養(yǎng)殖場消毒應(yīng)按NY/T3075規(guī)定進行，消毒藥應(yīng)經(jīng)常更換。

5.4.2發(fā)生牛出血性敗血病，應(yīng)對感染和發(fā)病牛及其污染物、病死牛及其污染物、被污染環(huán)境和無害

化處理環(huán)節(jié)實行有效實時消毒。

6疫情報告

應(yīng)按DB22/T3137規(guī)定執(zhí)行。

7疫情處置

7.1確診后應(yīng)立即對隔離的病牛進行藥物治療，并對同群假定健康牛進行觀察、測溫，按5.2執(zhí)行。

7.2病死牛及可能被污染的物品，應(yīng)按農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《病死及病害動物無害化處理技術(shù)規(guī)范》規(guī)定執(zhí)行。

8檔案管理

所有記錄應(yīng)按NY/T3445規(guī)定進行管理。

A

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附錄A

（規(guī)范性）

多殺性巴氏桿菌熒光PCR檢測方法

A.1儀器設(shè)備

A.1.1高速冷凍離心機，最高離心速度不低于12000r/min。

A.1.2生物安全柜。

A.1.3-20℃冰箱。

A.1.4熒光定量PCR儀。

A.1.5微量移液器，0.5μL～10μL、2μL～20μL、20μL～200μL、200μL～1000μL。

A.2耗材

A.2.1濾芯吸頭，10μL、200μL、1000μL。

A.2.2Eppendorf管，1.5mL、0.5mL、0.2mL。

A.2.3PCR管，0.2mL。

A.3質(zhì)控品

A.3.1陽性對照，含多殺性巴氏桿菌菌株的培養(yǎng)液。

A.3.2陰性對照，無核酸酶水。

A.4試劑

A.4.1DNA提取試劑盒。

A.4.2熒光PCR預(yù)混液。

A.4.3引物與探針，見表A.1。

表A.1引物與探針序列及濃度

名稱序列濃度

上游引物F5’-GCCACCTGCCATAAGATGAGC-3’10pmol/μL

下游引物R5’-CGTAGGAGTCTGGACCGTGTC-3’10pmol/μL

探針5’-FAM-GCCTACCAAGCCTGCGATCTCTAGC-TAMRA-3’5pmol/μL

A.5操作步驟

A.5.1核酸提取

按DNA提取試劑盒方法或其他等效方法提取DNA模板。

A.5.2熒光定量PCR擴增體系

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在試劑準(zhǔn)備區(qū)打開和配制試劑，配制完畢后應(yīng)及時將剩余試劑放回貯存區(qū)域。取0.2mLPCR反應(yīng)

管，在冰浴條件下配制20μL反應(yīng)體系，按照表A.2依次加入以下成分，同時設(shè)陰性、陽性對照。

加完后蓋緊蓋子。

表A.2樣品反應(yīng)體系

體系組分用量

2×PCR預(yù)混液10.0μL

無核酸酶水5.9μL

上游引物F0.8μL

下游引物R0.8μL

探針0.5μL

DNA模板2.0μL

總量