高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇省鎮(zhèn)江市六校等校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期6月期末一、單項(xiàng)選擇題：共14題，每題2分，共28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.下列各組元素中，大量參與組成線粒體內(nèi)膜的是（）A.O、P、N B.C、N、Si C.S、P、Ca D.N、P、Na【答案】A〖祥解〗線粒體內(nèi)膜屬于生物膜，其主要成分是磷脂和蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)是由C、H、O、N等元素組成，磷脂的組成元素為C、H、O、N、P。【詳析】線粒體內(nèi)膜屬于生物膜，生物膜主要由磷脂和蛋白質(zhì)組成，蛋白質(zhì)是由C、H、O、N等元素組成，磷脂的組成元素為C、H、O、N、P，二者均不含Si、Ca、Na，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。2.有詩(shī)云“魚(yú)在在藻，依于其蒲”。“藻”多指水中藻類，“蒲”為多年生草本，其實(shí)水中除“藻”“蒲”外，還有色球藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌等微生物，下列說(shuō)法正確的是（）A.詩(shī)中提及的“藻”“蒲”、大腸桿菌及支原體、衣原體都有細(xì)胞壁B.“藻”“蒲”和色球藍(lán)細(xì)菌的核小體的主要成分是DNA和蛋白質(zhì)C.上述生物都含細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、遺傳物質(zhì)，體現(xiàn)了細(xì)胞的多樣性D.色球藍(lán)細(xì)菌和“藻”“蒲”都含葉綠素，是能進(jìn)行光合作用的自養(yǎng)型生物【答案】D〖祥解〗原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最明顯的差異是有無(wú)核膜包被的成形的細(xì)胞核，由原核細(xì)胞構(gòu)成的生物稱為原核生物，由真核細(xì)胞構(gòu)成的生物稱為真核生物。原核細(xì)胞與真核細(xì)胞共有的特征是均有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核糖體，均以DNA作為遺傳物質(zhì)?！驹斘觥緼、詩(shī)中提及的“藻”“蒲”、大腸桿菌及衣原體都有細(xì)胞壁，支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、色球藍(lán)細(xì)菌是原核生物，沒(méi)有核小體結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、上述生物都含細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、遺傳物質(zhì)，體現(xiàn)了細(xì)胞統(tǒng)一性，C錯(cuò)誤；D、色球藍(lán)細(xì)菌含有葉綠素和藻藍(lán)素，“藻”“蒲”含葉綠素和類胡蘿卜素，色球藍(lán)細(xì)菌和“藻”“蒲”都含葉綠素，是能進(jìn)行光合作用的自養(yǎng)型生物，D正確。故選D。3.生命依賴于水，細(xì)胞也離不開(kāi)水，細(xì)胞中的水以自由水和結(jié)合水兩種形式存在。正常情況下，細(xì)胞內(nèi)自由水所占比例越大，細(xì)胞代謝越旺盛。在冬季來(lái)臨過(guò)程中，為了增強(qiáng)抗寒能力，冬小麥在不同時(shí)期的含水量發(fā)生了變化（如下圖所示）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.冬季，冬小麥自由水的比例下降，可避免低溫時(shí)自由水過(guò)多導(dǎo)致結(jié)冰而損害自身B.在冬季來(lái)臨過(guò)程中，冬小麥的結(jié)合水含量升高，但其水的主要存在形式始終是自由水C.水分子是一種極性分子，帶電分子或離子都易與水結(jié)合，因此，水是良好的溶劑D.細(xì)胞內(nèi)結(jié)合水的存在形式主要是水與蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)結(jié)合，從而失去溶解性【答案】B〖祥解〗細(xì)胞中的水可以分為自由水和結(jié)合水，自由水的比例越高，新陳代謝越旺盛，結(jié)合水比例越高，抗逆性越強(qiáng)?！驹斘觥緼、在冬季來(lái)臨前，冬小麥的自由水比例會(huì)逐漸降低，而結(jié)合水比例會(huì)逐漸上升，以避免氣溫下降時(shí)自由水過(guò)多導(dǎo)致結(jié)冰而損害自身，A正確；B、由圖可知，約9月中旬開(kāi)始，冬小麥的結(jié)合水的相對(duì)含量明顯高于自由水，B錯(cuò)誤；C、水分子的空間結(jié)構(gòu)及電子的不對(duì)稱分布，使得水分子成為一個(gè)極性分子。帶有正電荷或負(fù)電荷的分子（或離子）都容易與水結(jié)合，因此，水是良好的溶劑，C正確；D、細(xì)胞內(nèi)結(jié)合水的存在形式主要是水與蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)結(jié)合，這樣水就失去流動(dòng)性和溶解性，成為生物體的構(gòu)成成分，D正確。故選B。4.發(fā)酵是指人們利用微生物代謝，將原料轉(zhuǎn)化為所需產(chǎn)物的過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.醬油、醋、泡菜、豆豉等都是傳統(tǒng)發(fā)酵食品B.以毛霉為主的多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵C.當(dāng)缺少氧氣時(shí)，醋酸菌能夠?qū)⒁掖嫁D(zhuǎn)化成乙酸D.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般利用原材料中天然存在的微生物【答案】C〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種計(jì)數(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的制備、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程和產(chǎn)品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、醬油、醋、泡菜、豆豉等在日常生活中歷史悠久，都是通過(guò)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作而成的食品，A正確；B、在豆腐發(fā)酵制作腐乳的過(guò)程中，以毛霉為主的多種微生物參與其中，毛霉產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，B正確；C、醋酸菌是好氧菌，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，整個(gè)過(guò)程都需要氧氣參與，C錯(cuò)誤；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌操作，而是利用原材料中天然存在的微生物進(jìn)行發(fā)酵，D正確。故選C。5.啤酒發(fā)酵流程一般都包含發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒、終止等。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.焙烤過(guò)程通過(guò)加熱殺死種子的胚細(xì)胞，從而使淀粉酶失活B.酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成C.發(fā)酵的溫度和發(fā)酵的時(shí)間隨啤酒品種和口味的要求不同而有所差異D.蒸煮過(guò)程中高溫使淀粉酶失活，可以終止淀粉酶的進(jìn)一步作用，并對(duì)糖漿滅菌【答案】A〖祥解〗現(xiàn)代工業(yè)釀酒分為主發(fā)酵和后發(fā)酵，主發(fā)酵是主要的生產(chǎn)過(guò)程，主發(fā)酵后還要通過(guò)后發(fā)酵來(lái)促酒成熟、澄清?！驹斘觥緼、焙烤是加熱殺死種子的胚，但不使淀粉酶失活，A錯(cuò)誤；B、主發(fā)酵是主要的生產(chǎn)過(guò)程，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發(fā)酵階段完成，B正確；C、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)間隨著啤酒品種和口味要求的不同而有所差異，C正確；D、蒸煮過(guò)程中高溫使淀粉酶失活，終止淀粉酶的分解作用，并對(duì)糖漿滅菌，D正確。故選A。6.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌的部分操作步驟，下列說(shuō)法正確的是（）A.配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后再調(diào)pHB.①②③步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.步驟④中接種環(huán)共需5次灼燒處理D.將接種后的平板直接放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)【答案】B〖祥解〗分析題意和圖示可知：①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培養(yǎng)。制備固體培養(yǎng)基的基本過(guò)程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板?！驹斘觥緼、配制好的培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)pH后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)與純化酵母菌的過(guò)程中，為了防止雜菌污染，需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，因此①②③步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，B正確；C、每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理，因此步驟④中接種環(huán)共需6次灼燒處理，C錯(cuò)誤；D、完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選B。7.下列對(duì)滅菌和消毒的理解不正確的是（）A.滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物C.消毒和滅菌都是采用物理方法殺滅微生物D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌等【答案】C〖祥解〗消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對(duì)象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等【詳析】A、滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過(guò)程，A正確；B、消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），B正確；C、消毒和滅菌都是采用物理或化學(xué)的方法殺滅微生物，不僅有物理方法，C錯(cuò)誤；D、滅菌的方法比較強(qiáng)烈，一般是高溫或高壓，常用滅菌方法有灼燒滅菌法、干熱滅菌法、濕熱滅菌滅菌法等，D正確。

故選C。8.丙草胺是一種應(yīng)用廣泛的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某生物興趣小組從達(dá)活泉公園土壤中分離出能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其進(jìn)行計(jì)數(shù)（如下圖所示），以期為修復(fù)被丙草胺污染土壤提供微生物資源。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.將培養(yǎng)基PH調(diào)至酸性，有利于丙草胺降解菌的生長(zhǎng)繁殖B.圖中所用計(jì)數(shù)方法為稀釋涂布平板法，用該方法計(jì)數(shù)結(jié)果往往比實(shí)際值偏小C.用以丙草胺為唯一氮源的液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)可提高丙草胺降解菌濃度D.通過(guò)計(jì)算得知每克土壤中的菌株數(shù)約為1．7×109個(gè)【答案】A〖祥解〗統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）：①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性；b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)?！驹斘觥緼、培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，A錯(cuò)誤；B、圖中利用的是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)，利用該方法計(jì)數(shù)結(jié)果往往比實(shí)際值偏小，原因是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)觀察到的只有一個(gè)菌落，B正確；C、由題干信息可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，故培養(yǎng)基應(yīng)以丙草胺為唯一氮源，該培養(yǎng)基中只有降解丙草胺的細(xì)菌菌株才能生長(zhǎng)，其他微生物的生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，故用該培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)可提高降解菌的濃度，C正確；D、5號(hào)試管的稀釋倍數(shù)是105，則每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3÷0.1×10×105=1.7×109個(gè)，D正確。故選A。9.下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)工程的敘述，正確的是（）A.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中將愈傷組織包埋在人工種皮中，就形成了人工種子B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得抗毒苗C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織、細(xì)胞分裂能力旺盛D.試管牛技術(shù)和細(xì)胞核移植技術(shù)均可實(shí)現(xiàn)良種牛的大量克隆【答案】C【詳析】A、人工種子需將離體培養(yǎng)的胚狀體、不定芽等結(jié)構(gòu)包裹在人工胚乳和人工種皮中，而愈傷組織未進(jìn)一步分化，不能直接作為胚狀體，且缺少人工胚乳，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可通過(guò)細(xì)胞代謝變化檢測(cè)有毒物質(zhì)，但莖尖組織培養(yǎng)僅能獲得脫毒苗（因莖尖病毒極少），抗毒苗需要通過(guò)基因重組獲得，B錯(cuò)誤；C、胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易于培養(yǎng)，故動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常取材于此，C正確；D、試管牛技術(shù)依賴體外受精和胚胎移植，屬于有性生殖，后代遺傳物質(zhì)不完全相同；細(xì)胞核移植屬于無(wú)性生殖，可實(shí)現(xiàn)大量克隆，D錯(cuò)誤。故選C。10.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質(zhì)B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C.猴的核移植細(xì)胞通過(guò)胚胎工程已成功地培育出了克隆猴D.將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞【答案】D【詳析】A、細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需添加血清等物質(zhì)，A正確；B、早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體，B正確；C、我國(guó)利用核移植技術(shù)成功培養(yǎng)出克隆猴“中中”和“華華”，C正確；D、將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，D錯(cuò)誤。故選D。11.某生物興趣小組的同學(xué)用豬肝進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)，主要實(shí)驗(yàn)流程如下圖。相關(guān)敘述不正確的是（）A.為了方便對(duì)材料進(jìn)行處理，也可以用新鮮豬血來(lái)代替豬肝用于DNA的粗提取B.過(guò)程⑤加入酒精后，也可將溶液倒入離心管離心后取沉淀物C.過(guò)濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精都可抑制DNA酶的活性D.提取到的絲狀物先溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴加熱后變藍(lán)【答案】A【詳析】A、哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核，因此新鮮豬血不能代替豬肝用于DNA的粗提取，A錯(cuò)誤B、DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，過(guò)程⑤加入酒精后，蛋白質(zhì)溶解，DNA析出，因此離心后棄上清取沉淀，B正確；C、酶活性的發(fā)揮需要適宜的溫度等條件，將過(guò)濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正確；D、將析出的絲狀物先溶于2mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，混勻后沸水浴中加熱可出現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選A。12.下圖為哺乳動(dòng)物受精卵發(fā)育過(guò)程中某一時(shí)期的示意圖，有關(guān)敘述正確的是A.此圖表示桑椹胚，可作為胚胎移植的材料B.此圖中細(xì)胞還沒(méi)有分化，圖中①為透明帶C.胚胎從①中伸展出來(lái)的過(guò)程叫做孵化D.進(jìn)行胚胎分割時(shí)，一般?、壑屑?xì)胞做性別鑒定【答案】C〖祥解〗分析題圖：圖示表示囊胚期胚胎示意圖，其中①為透明帶，在囊胚期后期會(huì)破裂；②為滋養(yǎng)層，將來(lái)分化成胎盤(pán)和胎膜；③為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)分化形成各種組織?！驹斘觥緼、此圖為囊胚期，A錯(cuò)誤；

B、囊胚時(shí)期細(xì)胞已出現(xiàn)分化，B錯(cuò)誤；

C、囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化，C正確；

D、對(duì)移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒定，D錯(cuò)誤。

故選C。13.下圖表示用草木樨狀黃芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗鹽新品種的過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.過(guò)程①需要使用的酶是胰蛋白酶B.滅活病毒不能誘導(dǎo)過(guò)程②中A和B的融合C.過(guò)程②處理后得到的兩兩融合原生質(zhì)體類型可能有3種D.經(jīng)過(guò)過(guò)程④所得到的愈傷組織細(xì)胞中含有四個(gè)染色體組【答案】A【詳析】A、植物細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性，過(guò)程①需要使用的酶是纖維素酶和果膠酶，目的是去除細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程②為植物原生質(zhì)體的融合過(guò)程，其誘導(dǎo)方法有PEG處理、離心、電激等，用滅活病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的手段，不能用于植物原生質(zhì)體的融合，B正確；C、若只考慮兩兩融合的情況，則過(guò)程②處理后得到的融合原生質(zhì)體類型可能有3種，分別是AA、BB、AB，C正確；D、該題中的兩個(gè)植物細(xì)胞各有兩個(gè)染色體組，故兩細(xì)胞融合形成的細(xì)胞內(nèi)含有四個(gè)染色體組，D正確。故選A。14.甲型流感單克隆抗體的制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞在克隆化培養(yǎng)過(guò)程中來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往出現(xiàn)隨機(jī)丟失現(xiàn)象，不考慮基因互作和其他變異，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動(dòng)物脾臟中篩選獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞B.在HAT選擇培養(yǎng)基上，B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均無(wú)法長(zhǎng)期存活C.用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)每一個(gè)孔盡量只接種一個(gè)細(xì)胞D.抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞即具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的能力【答案】D〖祥解〗在制備單克隆抗體時(shí)，首先要給小鼠免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞，然后將B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。在單克隆抗體的制備過(guò)程中，使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)。【詳析】A、對(duì)動(dòng)物進(jìn)行間歇注射抗原處理，以刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，且脾臟是免疫器官，故B淋巴細(xì)胞可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動(dòng)物脾臟中篩選獲得，A正確；B、B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合后，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，B正確；C、為確保產(chǎn)生特異性強(qiáng)的抗體，用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)，每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、雜交瘤細(xì)胞在克隆化培養(yǎng)過(guò)程中來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往出現(xiàn)隨機(jī)丟失現(xiàn)象，若丟失的染色體含有產(chǎn)生甲型流感抗體的基因，則利用抗體檢測(cè)篩選的雜交瘤細(xì)胞不一定具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的能力，D錯(cuò)誤。故選D。二、多項(xiàng)選擇題：共4題，每題3分，共12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)者得3分，選對(duì)但不全的得1分，錯(cuò)選或不答的得0分。15.下圖表示研究人員利用胚胎工程培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程，下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.①代表體外受精，與體內(nèi)受精不同的是體外受精前精子需要獲能B.②代表體外胚胎培養(yǎng)，該過(guò)程中細(xì)胞既進(jìn)行有絲分裂也存在細(xì)胞分化C.③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，以免影響胚胎發(fā)育D.⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)【答案】AC〖祥解〗胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，分析題圖，①是體外受精過(guò)程，②是早期胚胎培養(yǎng)，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢復(fù)，⑤是胚胎移植?！驹斘觥緼、①代表體外受精，體外受精前和體內(nèi)受精前精子均需要獲能，A錯(cuò)誤；B、②代表體外早期胚胎培養(yǎng)，該過(guò)程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，當(dāng)胚胎發(fā)育至囊胚階段，會(huì)開(kāi)始進(jìn)行細(xì)胞分化，B正確；C、③代表胚胎分割，在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分裂，以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，而桑椹胚階段的胚胎還未形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，C錯(cuò)誤；D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)，要對(duì)供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供體和受體的生理狀態(tài)相同，D正確。故選AC。16.植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于商業(yè)化生產(chǎn)；其過(guò)程一般為：無(wú)菌培養(yǎng)物的建立→培養(yǎng)物增殖→生根培養(yǎng)→試管苗移栽及鑒定。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.為獲得無(wú)菌培養(yǎng)物，外植體要消毒處理后才可接種培養(yǎng)B.組織培養(yǎng)過(guò)程中也可無(wú)明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)C.提高培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值，有利于誘導(dǎo)生根D.用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會(huì)出現(xiàn)變異【答案】ABC【詳析】A、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作，為獲得無(wú)菌培養(yǎng)物，外植體要經(jīng)過(guò)表面消毒處理后，才能進(jìn)行培養(yǎng)，所用的培養(yǎng)基必須徹底滅菌，A正確；B、組織培養(yǎng)過(guò)程中也可無(wú)明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)，胚狀體若包裹上人工種皮，可制作成人工種子，B正確；C、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值，有利于誘導(dǎo)生根，C正確；D、用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗會(huì)出現(xiàn)變異，如在愈傷組織的培養(yǎng)過(guò)程中可能發(fā)生基因突變等變異，D錯(cuò)誤。故選ABC。17.科研人員采集了某深海冷泉附近的沉積物樣品，經(jīng)分離、純化、鑒定得到了降解藻類多糖的擬桿菌菌株，具體過(guò)程如圖(Ⅰ～Ⅳ是操作步驟)。下列敘述正確的有（）A.步驟Ⅰ均采用濕熱滅菌法對(duì)深海冷泉沉積物的樣品和海水進(jìn)行滅菌B.步驟Ⅱ可通過(guò)添加不同藻類多糖配制系列培養(yǎng)基①獲得多種擬桿菌菌株C.步驟Ⅲ培養(yǎng)基②中以藻類多糖為唯一碳源，且需加入適量瓊脂等凝固劑D.步驟Ⅳ可通過(guò)增加培養(yǎng)基③中碳源的濃度，獲得高耐受藻類多糖的菌株【答案】BCD〖祥解〗（1）培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。不同的培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源。（2）微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。微生物常見(jiàn)的接種的方法：平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、深海冷泉沉積物的樣品不能滅菌，否則得不到需要的菌株，A錯(cuò)誤；B、向基本培養(yǎng)基中分別添加不同藻類多糖來(lái)配制系列培養(yǎng)基①，可獲得不同種類的擬桿菌菌株，B正確；C、步驟IV需要挑取單菌落并轉(zhuǎn)接，則需要再固體培養(yǎng)基上接種，需要加瓊脂作為凝固劑，C正確；D、本實(shí)驗(yàn)的目的是純化、鑒定得到降解藻類多糖的擬桿菌菌株，步驟IV可通過(guò)增加培養(yǎng)基③中碳源的濃度，獲得高耐受藻類多糖的菌株，D正確。故選BCD。18.人乳頭瘤病毒（HPV）是一種DNA病毒，可誘發(fā)細(xì)胞癌變。抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生。以HPV衣殼蛋白為抗原制備單克隆抗體的過(guò)程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.在HAT培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖又可以分泌抗體B.單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高，且可以大量制備C.可用HPV衣殼蛋白檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞D.③過(guò)程需要添加抗生素等物質(zhì)，以防止病毒污染【答案】ABC〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程：對(duì)小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)；得到相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)（這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生專一的抗體）；對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足量的能分泌所需抗體的細(xì)胞；最后，將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體?！驹斘觥緼、由于小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，漿細(xì)胞又不能增殖，所以，在HAT培養(yǎng)基上同種細(xì)胞的融合體以及未融合的細(xì)胞不能生長(zhǎng)，而存活的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖又可以分泌抗體，A正確；B、單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌，與血清抗體相比，其特點(diǎn)是靈敏度高、特異性強(qiáng)，可以大量制備，B正確；C、抗原和抗體可特異性結(jié)合，故可用HPV衣殼蛋白檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、抗生素用于防止細(xì)菌污染，而非病毒污染，D錯(cuò)誤。故選ABC。三、非選擇題（共5題，共60分）19.下圖甲為酵母菌細(xì)胞部分結(jié)構(gòu)示意圖，圖乙是動(dòng)物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)示意圖，數(shù)字代表細(xì)胞結(jié)構(gòu)，圖丙表示圖乙部分細(xì)胞器的物質(zhì)組成，圖丁表示動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成、加工及定向轉(zhuǎn)運(yùn)的主要途徑示意圖，其中a～f表示相應(yīng)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，①～⑧表示相應(yīng)的生理過(guò)程。據(jù)圖回答：（1）圖甲中酵母菌有而動(dòng)物細(xì)胞沒(méi)有的結(jié)構(gòu)是[]______（[]內(nèi)填序號(hào)，“______”上填結(jié)構(gòu)名稱）（2）圖甲中，葡萄糖在_______（填結(jié)構(gòu)）被徹底氧化分解。能產(chǎn)生CO2的場(chǎng)所是______。（填序號(hào)）（3）圖乙是動(dòng)物細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖的理由是_______。（4）圖乙中⑤能夠讓水分子自由通過(guò)，一些細(xì)胞代謝需要的小分子和離子也可以通過(guò)，而其他小分子、離子和大分子則不能通過(guò)，說(shuō)明此結(jié)構(gòu)具有______的特點(diǎn)。細(xì)胞吸水后⑤的面積變大，說(shuō)明此結(jié)構(gòu)還具有______。（5）若圖乙細(xì)胞是垂體細(xì)胞，為研究生長(zhǎng)激素的合成與分泌過(guò)程，常采用的方法是______；若該細(xì)胞為漿細(xì)胞，將H標(biāo)記的亮氨酸注入該細(xì)胞，則抗體的合成分泌過(guò)程中可檢測(cè)到放射性的細(xì)胞結(jié)構(gòu)依次有________（用箭頭和序號(hào)表示）。（6）分離各種細(xì)胞器的方法是______，圖丙中的A和C分別對(duì)應(yīng)圖乙中的[]______和[]______。（7）圖丁中通過(guò)①②途徑合成的蛋白質(zhì)有________（至少舉2例）等?！敬鸢浮浚?）1細(xì)胞壁、7液泡（2）①.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體②.6、8（3）有中心體等多種細(xì)胞器，無(wú)細(xì)胞壁、葉綠體、液泡（4）①.選擇透過(guò)性②.（一定的）流動(dòng)性（5）①.（放射性）同位素標(biāo)記法②.④→③→⑦→⑤（6）①.差速離心法②.①線粒體③.④核糖體（7）DNA聚合酶、解旋酶、RNA聚合酶、組蛋白、ATP水解酶〖祥解〗分泌蛋白的合成過(guò)程大致是：首先，在游離的核糖體中以氨基酸為原料開(kāi)始多肽鏈的合成。當(dāng)合成了一段肽鏈后，這段肽鏈會(huì)與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)其合成過(guò)程，并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)，再經(jīng)過(guò)加工、折疊，形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡，包裹著蛋白質(zhì)離開(kāi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，到達(dá)高爾基體，與高爾基體膜融合，囊泡膜成為高爾基體膜的一部分。高爾基體還能對(duì)蛋白質(zhì)做進(jìn)一步的修飾加工，然后由高爾基體膜形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡。囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜，與細(xì)胞膜融合，將蛋白質(zhì)分泌到細(xì)胞外?！窘馕觥浚?）酵母菌是真菌，有1細(xì)胞壁、7液泡，動(dòng)物細(xì)胞無(wú)。（2）圖甲中，葡萄糖先在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)被初步分解（細(xì)胞呼吸第一階段），后續(xù)在線粒體（有氧呼吸第二三階段）進(jìn)一步氧化分解。酵母菌無(wú)氧呼吸第二階段（在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，對(duì)應(yīng)圖甲中8）、有氧呼吸第二階段（在線粒體，對(duì)應(yīng)圖甲中6）都會(huì)產(chǎn)生CO2。（3）亞顯微結(jié)構(gòu)能看到細(xì)胞器細(xì)節(jié)，動(dòng)物細(xì)胞有中心體（參與細(xì)胞分裂），無(wú)細(xì)胞壁、葉綠體，也無(wú)大液泡，所以判斷圖乙是動(dòng)物細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)。（4）細(xì)胞膜（結(jié)構(gòu)⑤）的特性水分子等能通過(guò)，其他分子按需通過(guò)，體現(xiàn)①選擇透過(guò)性（細(xì)胞膜允許某些物質(zhì)通過(guò)，阻止另一些物質(zhì)通過(guò)的特性）。細(xì)胞吸水后，⑤面積變大，說(shuō)明細(xì)胞膜具有（一定的）流動(dòng)性，這是膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（5）研究生長(zhǎng)激素（分泌蛋白）合成、分泌，常用（放射性）同位素標(biāo)記法。漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體（分泌蛋白），合成始于④核糖體，進(jìn)入③內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工，再到⑦高爾基體進(jìn)一步修飾，最后經(jīng)⑤細(xì)胞膜分泌，路徑為④→③→⑦→⑤。（6）細(xì)胞器分離與成分對(duì)應(yīng)分離細(xì)胞器用差速離心法，依據(jù)細(xì)胞器密度差異，逐步離心分離。圖丙中A（含蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸）對(duì)應(yīng)圖乙中①線粒體（線粒體有膜含脂質(zhì)、蛋白質(zhì)，且含少量核酸）；C（含蛋白質(zhì)、核酸）對(duì)應(yīng)④核糖體（核糖體由RNA和蛋白質(zhì)組成）。（7）①②途徑合成的蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，有DNA聚合酶、解旋酶、RNA聚合酶、組蛋白、ATP水解酶等。20.臭鱖魚(yú)是利用新鮮鱖魚(yú)為原料，配以食鹽、花椒等輔料，由乳酸菌等多種微生物共同發(fā)酵制得的發(fā)酵魚(yú)制品，主要的制作流程如下：a.取新鮮鱖魚(yú)，用魚(yú)鱗刷刷去魚(yú)體表面魚(yú)鱗，再經(jīng)剖腹宰殺，去除內(nèi)臟和魚(yú)鰓，用自來(lái)水和10%鹽水先后清洗一次。瀝水待用。b.將魚(yú)平整碼放于鱖魚(yú)發(fā)酵專用裝置內(nèi)，一桶約碼放30kg，每碼一層，撒上若干粒干炒過(guò)的花椒（花椒總量為魚(yú)重量的0.1%），碼放結(jié)束后在上層魚(yú)體上放置按壓板。c.向桶內(nèi)加入提前配制好的腌制液，即8%（w/v）食鹽溶液，以剛好浸沒(méi)按壓板為宜，按壓板上放置扁圓狀砝碼（按壓重量為魚(yú)重量的40%），用以將魚(yú)體全部浸壓于腌制液液面以下。d.合上發(fā)酵裝置頂蓋，以厭氧發(fā)酵方式，8℃發(fā)酵16d。（1）臭鱖魚(yú)制作過(guò)程中花椒的作用有_______，壓板和圓狀砝碼將魚(yú)體全部浸壓于腌制液液面以下的目的是_______。（2）乳酸菌生長(zhǎng)的最適宜的溫度范圍在25~37℃之間，但發(fā)酵溫度卻控制為8℃，是因?yàn)樵?℃條件下________。（3）市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)的真空包裝的臭鱖魚(yú)，在沒(méi)有漏氣的狀態(tài)下發(fā)生了“脹袋”現(xiàn)象，同學(xué)A懷疑是雜菌污染導(dǎo)致的，同學(xué)B懷疑是乳酸菌大量繁殖導(dǎo)致的，你支持誰(shuí)的觀點(diǎn)并說(shuō)明理由________。（4）臭鱖魚(yú)制作時(shí)要用適宜濃度的鹽水浸過(guò)魚(yú)體。所用鹽水需煮沸，其目的是_______（答出1點(diǎn)即可）。為了縮短制作時(shí)間，通常會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳腌制液，目的是_______。（5）科研人員嘗試從自然發(fā)酵的臭鱖魚(yú)中分離優(yōu)質(zhì)的清酒乳桿菌，實(shí)驗(yàn)流程如圖：a.步驟②需充分振蕩20min的目的是_______。b.步驟③④分離純化微生物的方法叫________。c.步驟④⑤所用的MRS培養(yǎng)基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、番茄汁、葡萄糖、碳酸鈣（乳酸能與碳酸鈣反應(yīng)出現(xiàn)溶鈣圈）、溴甲酚綠（pH顯色劑，酸性顯示黃色、堿性顯示藍(lán)綠色）、瓊脂，其中為微生物提供氮源的成分有_______。⑤過(guò)程重復(fù)劃線培養(yǎng)時(shí)所挑取的菌落周?chē)鷳?yīng)出現(xiàn)________。（6）科研人員采用以下實(shí)驗(yàn)流程檢測(cè)分離出的一株清酒乳桿菌的代謝產(chǎn)物，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、丁香假單胞菌等4種病原菌的抑制效果：①取10mL滅菌的瓊脂傾注于A、B、C、D培養(yǎng)皿底層，待瓊脂凝固后在其上均勻放置4個(gè)牛津杯。②將4種病原菌懸液分別與營(yíng)養(yǎng)瓊脂等比例混合，取20mL分別傾注于A、B、C、D培養(yǎng)皿內(nèi)，待瓊脂凝固后拔下牛津杯，留下的小孔分別標(biāo)注為1、2、3、4號(hào)（如圖）。③向1號(hào)孔中加入？作為對(duì)照，向2、3、4號(hào)孔中分別加入100μL含有清酒乳桿菌代謝產(chǎn)物液體培養(yǎng)基，在適宜條件下靜置培養(yǎng)24h，結(jié)果如下圖：步驟③中“？”加入的液體是_______，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出的結(jié)論是_______。【答案】（1）①.調(diào)味，殺菌和防腐②.創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境（2）乳酸菌能產(chǎn)酸，低溫也可抑制其他微生物的繁殖（3）支持A的觀點(diǎn)，乳酸菌代謝過(guò)程中不產(chǎn)生氣體（4）①.除氧（或殺菌）②.增加乳酸菌數(shù)量（相當(dāng)于接種乳酸菌）（5）①.讓菌種均勻分布于懸液中②.稀釋涂布平板法③.胰蛋白胨、牛肉膏④.溶鈣圈（黃色）（6）①.100uL無(wú)菌水②.清酒乳桿菌的代謝產(chǎn)物對(duì)丁香假單胞菌的抑制效果最好〖祥解〗培養(yǎng)基：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)基的基本成分包括：碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽?！窘馕觥浚?）臭鱖魚(yú)制作過(guò)程中，香辛料（花椒）和食鹽的作用是都能調(diào)味，也能防腐殺菌。由于乳酸菌是厭氧微生物，腌制時(shí)將魚(yú)整齊疊放并壓實(shí)，有利于減少氧氣，創(chuàng)造無(wú)氧環(huán)境，利于乳酸菌等的生長(zhǎng)和繁殖。（2）在8℃（低溫）條件下乳酸菌既能產(chǎn)酸，也可抑制其它微生物的生長(zhǎng)繁殖，所以發(fā)酵溫度控制為8℃。（3）乳酸菌是厭氧菌，其無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸，不會(huì)產(chǎn)生氣體，所以不會(huì)導(dǎo)致“脹袋”；而雜菌污染后，有些雜菌在無(wú)氧環(huán)境下可進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生氣體（如酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生CO2等），從而使真空包裝的臭鱖魚(yú)出現(xiàn)“脹袋”現(xiàn)象，因此支持A的觀點(diǎn)。（4）煮沸鹽水可殺滅鹽水中的雜菌，防止雜菌污染，也能去除鹽水中的氧氣，營(yíng)造更適宜的厭氧環(huán)境。陳腌制液中含有大量發(fā)酵所需的乳酸菌等微生物，加入陳腌制液相當(dāng)于接種乳酸菌，可增加發(fā)酵菌種的數(shù)量，從而加快發(fā)酵過(guò)程，縮短制作時(shí)間。（5）a.步驟②需充分振蕩20min的目的是讓菌種均勻分布于懸液中，避免影響后續(xù)取菌液。b.由圖可知，圖中步驟③④分離純化微生物的方法叫稀釋涂布平板法。c.胰蛋白胨、牛肉膏含氮元素，能為微生物提供氮源。由于乳酸能夠溶解碳酸鈣，所以⑤過(guò)程重復(fù)劃線培養(yǎng)時(shí)所挑取的菌落周?chē)鷳?yīng)出現(xiàn)溶鈣圈（黃色）。（6）根據(jù)題意，該實(shí)驗(yàn)的目的是檢測(cè)分離出的一株清酒乳桿菌的代謝產(chǎn)物，對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、丁香假單胞菌等4種病原菌的抑制效果。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)遵循的等量原則和對(duì)照性原則，步驟③中加入的液體應(yīng)該是100μL無(wú)菌水作為對(duì)照組，向2、3、4號(hào)孔中分別加入100μL含有清酒乳桿菌代謝產(chǎn)物的液體培養(yǎng)基，在適宜條件下靜置培養(yǎng)24h，由圖可知，丁香假單胞菌組的抑制圈最大，說(shuō)明清酒乳桿菌的代謝產(chǎn)物對(duì)丁香假單胞菌的抑制效果最好。21.Ⅰ.中國(guó)科學(xué)院的研究團(tuán)隊(duì)利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)，成功培育出世界上首例只有雙母親來(lái)源的孤雌小鼠和雙父親來(lái)源的孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物的同性繁殖，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）用________對(duì)雌性小鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理可得到大量卵母細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中一般選擇MⅡ期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，最主要的原因是________。（2）體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，除需要滿足無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境及適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溫度等條件外，還需要滿足的氣體條件是________。（3）為了獲得更多甲的后代，在得到的重構(gòu)胚發(fā)育到_________時(shí)，對(duì)其進(jìn)行分割；在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，應(yīng)注意_________，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。Ⅱ.黑腐皮殼菌（一種真菌）感染蘋(píng)果植株可引發(fā)腐爛病。現(xiàn)對(duì)該菌進(jìn)行分離培養(yǎng)和應(yīng)用的研究，下表是分離培養(yǎng)時(shí)所用的培養(yǎng)基配方。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：物質(zhì)馬鈴薯葡萄糖自來(lái)水氯霉素瓊脂含量200g20g1000mL0.3g20g（4）上表培養(yǎng)基配方中，氯霉素的作用是________。（5）為證明培養(yǎng)基滅菌否合格，可進(jìn)行如下操作：________。（6）為檢測(cè)某蘋(píng)果植株黑腐皮殼菌的感染程度，需對(duì)該植株患病組織進(jìn)行病菌計(jì)數(shù)，若采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，則統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值______；如何改進(jìn)：________。（7）若要對(duì)該菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，研究者應(yīng)將該菌接種在______培養(yǎng)基中。（8）為檢測(cè)某蘋(píng)果植株黑腐皮殼菌感染程度，需對(duì)該株患病組織進(jìn)行病菌計(jì)數(shù)研究，則應(yīng)將提取的菌液采用______法進(jìn)行接種。（9）為研究蘋(píng)果黑腐皮殼菌數(shù)量增長(zhǎng)規(guī)律，研究者將該菌在液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得下圖所示的生長(zhǎng)速率曲線圖。17h后，該菌生長(zhǎng)速率偏低的原因可能是_______?！敬鸢浮浚?）①.促性腺激素②.卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力（全能性表達(dá)）的物質(zhì)（2）95%空氣和5%CO2的混合氣體（3）①.桑葚胚或囊胚期②.將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割（4）抑制細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)（5）將接種的培養(yǎng)基與未接種的培養(yǎng)基一同放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察未接種培養(yǎng)基中是否有雜菌生長(zhǎng)和接種的培養(yǎng)基中菌落的生長(zhǎng)情況（6）①.高/大②.統(tǒng)計(jì)前對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，只統(tǒng)計(jì)視野中未被染色的細(xì)胞（7）液體（8）稀釋涂布平板法（9）培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分不足，有害有毒物質(zhì)積累、pH改變〖祥解〗（1）微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。一般固體培養(yǎng)基中會(huì)加入瓊脂作為凝固劑。（2）胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此胚胎分割可以看作動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。【解析】（1）用促性腺激素對(duì)雌性小鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理可得到大量卵母細(xì)胞；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中一般選擇MⅡ期卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，最主要的原因是卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核恢復(fù)分裂能力（全能性表達(dá)）的物質(zhì)。（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。（3）為了獲得更多甲的后代，在得到的重構(gòu)胚發(fā)育到桑葚胚或囊胚時(shí)，對(duì)其進(jìn)行分割；在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，應(yīng)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。（4）微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，一般固體培養(yǎng)基中會(huì)加入瓊脂作為凝固劑。分析表格物質(zhì)，氯霉素能夠抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，而真菌可以生存。因此，氯霉素的作用是抑制細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)。（5）為證明培養(yǎng)基滅菌是否合格，可將接種的培養(yǎng)基與未接種的培養(yǎng)基一同放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，觀察未接種培養(yǎng)基中是否有雜菌生長(zhǎng)和接種的培養(yǎng)基中菌落的生長(zhǎng)情況。（6）采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法，因?yàn)闀?huì)將活菌和死菌一同計(jì)數(shù)，因此會(huì)導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際值高；根據(jù)細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性的特點(diǎn)，可在統(tǒng)計(jì)前對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色，活細(xì)胞不會(huì)被染色，只統(tǒng)計(jì)視野中未染色的細(xì)胞即可。（7）液體培養(yǎng)基適合對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。（8）稀釋涂布平板法可用于對(duì)目標(biāo)菌種進(jìn)行計(jì)數(shù)。（9）細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)速率大于固體培養(yǎng)基，故圖中a曲線表示該菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線，b曲線表示該菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)曲線。17h后，由于培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分不足、有害有毒的物質(zhì)積累、pH改變等方面的影響導(dǎo)致該菌生長(zhǎng)速率偏低。22.低溫是限制農(nóng)作物產(chǎn)量的重要脅迫因子?？茖W(xué)家將寒帶植物中的抗寒基因CBFs轉(zhuǎn)移到擬南芥中構(gòu)建擬南芥耐寒模型，用于植物低溫脅迫機(jī)制的相關(guān)研究。回答下列問(wèn)題：限制酶識(shí)別序列EcoRI5'G↓AATTC3'BamHI5'G↓GATCC3'SphI5'CGTAC↓G3'Sau3A5'↓GATC3'XmaI5'C↓CCGGG3'AscI5'G↓GCGCGGG3'MunI5'C↓AATTG3'（1）啟動(dòng)子的基本單位是________，啟動(dòng)子的作用是________。（2）設(shè)計(jì)引物克隆目的基因。如圖所示應(yīng)選擇引物________（填序號(hào)）對(duì)CBFs基因進(jìn)行克隆，為了后續(xù)能將目的基因正確連接到載體上，應(yīng)在CBFs基因上游引物的________端添加________（EcoRⅠ或“BamHⅠ”或“MunⅠ”）識(shí)別序列。（3）根據(jù)圖示Ti質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)，應(yīng)選用限制酶_________切割Ti質(zhì)粒，并通過(guò)________酶進(jìn)行連接。（4）用________處理農(nóng)桿菌方能將重組質(zhì)粒導(dǎo)入。在培養(yǎng)基中添加________來(lái)篩選成功導(dǎo)入質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。將擬南芥葉片浸泡在轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌菌液中一段時(shí)間對(duì)其進(jìn)行轉(zhuǎn)化，然后提取葉片中的DNA，通過(guò)PCR后再通過(guò)________判斷CBFs基因是否整合到擬南芥基因組中，結(jié)果如下圖所示。該轉(zhuǎn)基因葉片的基因組中可能已整合CBFs基因，PCR結(jié)果中顯示出小分子非目標(biāo)條帶，產(chǎn)生的原因可能是________（填字母）。A.變性溫度太低B.復(fù)性溫度太低C.復(fù)性溫度太高D.引物特異性弱（5）已獲取成功轉(zhuǎn)入CBFs基因的擬南芥植株，將其放置在_______環(huán)境中檢測(cè)擬南芥耐寒模型是否建立成功?！敬鸢浮浚?）①.脫氧核苷酸②.RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，可驅(qū)動(dòng)目的基因的轉(zhuǎn)錄（2）①.①④②.5′③.MunⅠ（3）①.EcoRⅠ和SphⅠ②.DNA連接（4）①.Ca2+②.氨芐青霉素③.瓊脂糖凝膠電泳（凝膠電泳）④.BD（5）寒冷（低溫）〖祥解〗PCR反應(yīng)過(guò)程:變性→復(fù)性→延伸。變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，復(fù)性：溫度下降到50℃左右，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，延伸：72℃左右時(shí)，Taq酶有最大活性，可使DNA新鏈由5'端向3'端延伸?！窘馕觥浚?）啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的一段DNA序列，能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。啟動(dòng)子的基本單位是脫氧核苷酸。（2）PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與模板鏈的3'結(jié)合，沿著5'→3'的方向延伸子鏈，由圖可知，擴(kuò)增目標(biāo)基因時(shí)應(yīng)選擇引物①④，為了保證目的基因成功轉(zhuǎn)錄，首先CBFs基因應(yīng)插入質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間，其次目的基因的轉(zhuǎn)錄方向應(yīng)與Ti質(zhì)粒上的轉(zhuǎn)錄方向一致，可使用EcoRI和SphI切割質(zhì)粒（AmPr為氨芐青霉素抗性基因，在后期的篩選中需要使用，不能使用BamHI酶切，Sau3A也能識(shí)別并切割BamHI酶切位點(diǎn)），由于使用EcoRI會(huì)破壞目的基因結(jié)構(gòu)的完整性，可使用MunI切割目的基因，即上游引物的5′端添加MunI識(shí)別序列，下游引物的5′端添加Sau3A識(shí)別序列。（3）BamHⅠ切割標(biāo)記基因不能用，Sau3A的識(shí)別序列包含BamHⅠ的識(shí)別序列也不能用，Ti質(zhì)粒的T-DNA區(qū)域需保留完整以確保目的基因轉(zhuǎn)移，圖示中EcoRⅠ和SphⅠ位于T-DNA內(nèi)且無(wú)重疊，切割后可產(chǎn)生互補(bǔ)末端便于連接，故選用EcoRⅠ和SphⅠ，切割后通過(guò)DNA連接酶將目的基因和切割后的Ti質(zhì)粒進(jìn)行連接。（4）用Ca2+處理農(nóng)桿菌可使其成為感受態(tài)細(xì)胞，能更好地吸收重組質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中添加氨芐青霉素來(lái)篩選成功導(dǎo)入質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，因?yàn)門(mén)i質(zhì)粒上有氨芐青霉素抗性基因（Ampr）。將擬南芥葉片浸泡在轉(zhuǎn)基因農(nóng)桿菌菌液中一段時(shí)間對(duì)其進(jìn)行轉(zhuǎn)化，然后提取葉片中的DNA，通過(guò)PCR后再通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳（凝膠電泳）判斷CBFs基因是否整合到擬南芥基因組中。PCR結(jié)果中顯示出小分子非目標(biāo)條帶，原因可能是復(fù)性溫度太低，導(dǎo)致引物與模板的結(jié)合特異性降低，引物特異性弱也會(huì)出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，產(chǎn)生小分子條帶，BD正確，AC錯(cuò)誤。故選BD。（5）將成功轉(zhuǎn)入CBFs基因的擬南芥植株放在寒冷（低溫）環(huán)境中檢測(cè)擬南芥耐寒模型是否建立成功。23.黏膜免疫系統(tǒng)作為第一道免疫防御屏障，能夠參與保護(hù)生物體免受病原體的感染。多聚免疫球蛋白受體（pIgR）作為黏膜免疫防御的一個(gè)關(guān)鍵因子，能夠介導(dǎo)免疫球蛋白跨過(guò)上皮細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)和分泌，發(fā)揮免疫球蛋白在黏液中清除病原體和毒素的作用。研究人員從大菱鲆提取pIgR基因，針對(duì)不同器官組織開(kāi)展了pIgR基因研究（如圖），其中DEPC物質(zhì)可與RNA酶結(jié)合使酶發(fā)生變性。（1）引物的作用是________，提取過(guò)程加入DEPC物質(zhì)作用是________。（2）為將pIgR基因以正確方向插入質(zhì)粒需要雙酶切，這就要求在設(shè)計(jì)引物時(shí)，需在引物的5′端加入相應(yīng)的酶切位點(diǎn)。已知a鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，引物1的5′端酶切位點(diǎn)的堿基序列為GAATTC，則引物2的5′端酶切位點(diǎn)的堿基序列為_(kāi)________，理由是________。（3）構(gòu)建pIgR基因表達(dá)載體后，與處于感受態(tài)的大腸桿菌菌株混合，pIgR基因表達(dá)載體進(jìn)入菌體內(nèi)，此過(guò)程稱為_(kāi)_______。然后將菌液涂布在含有________的LB固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，加入誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)pIgR基因在大腸桿菌中表達(dá)，提取、純化蛋白質(zhì)。（4）另一組科研人員在研究Ti質(zhì)粒時(shí)，畫(huà)出了如圖1所示的部分結(jié)構(gòu)示意圖，①~⑥為部分限制酶識(shí)別位點(diǎn)，LB與RB為T(mén)-DNA左邊界序列和右邊界序列，tms與tmr為激素基因，Tetr為四環(huán)素抗性基因，Ori為復(fù)制原點(diǎn)，Pro為啟動(dòng)子。圖2為部分限制酶及其識(shí)別序列與切割位點(diǎn)。研究人員分別將質(zhì)粒A（結(jié)構(gòu)如圖1）、質(zhì)粒B（去除了圖1中tmr與tmr的Ti質(zhì)粒）、質(zhì)粒C（去除了圖1中LB或RB的Ti質(zhì)粒）導(dǎo)入不含質(zhì)粒的農(nóng)桿菌中，將導(dǎo)入質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與植物外植體分別共培養(yǎng)。①ori通常富含堿基________，有利于解旋。②為獲得胚狀體或試管苗，研究人員用攜帶了質(zhì)粒B的農(nóng)桿菌侵染植物，而不用攜帶質(zhì)粒A的農(nóng)桿菌，原因最可能是________。③在農(nóng)桿菌侵染植物的過(guò)程中，農(nóng)桿菌會(huì)產(chǎn)生酶甲，甲把T-DNA的一條核苷酸鏈切割下來(lái)，該單鏈進(jìn)入植物細(xì)胞后形成雙鏈，甲識(shí)別與切割的序列應(yīng)為T(mén)-DNA中的________。④有學(xué)者認(rèn)為甲是由Vir區(qū)段的基因在酚類物質(zhì)的刺激下編碼產(chǎn)生的。研究人員利用某雙子葉植物的突變體（不能合成酚類物質(zhì)）、基礎(chǔ)培養(yǎng)基（利于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基）、酚類物質(zhì)、質(zhì)粒B、不含質(zhì)粒的農(nóng)桿菌進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，并證實(shí)了上述猜測(cè)是正確的。在上述農(nóng)桿菌與植物外植體的共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)的自變量是________。【答案】（1）①.使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸②.防止RNA被降解（2）①.GCGGCCGC②.a鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，根據(jù)mRNA的合成方向，引物2的5′端靠近啟動(dòng)子，應(yīng)有NotⅠ的酶切位點(diǎn)（3）①.轉(zhuǎn)化②.氨芐青霉素（4）①.AT堿基對(duì)（或A-T）②.T-DNA中的tms與tmr在植物細(xì)胞中表達(dá)，產(chǎn)生的激素會(huì)影響愈傷組織的形成及分化③.LB與RB④.農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒B是否被去除了Vir區(qū)段、在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中是否添加酚類物質(zhì)〖祥解〗（1）PCR原理：在高溫作用下，打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。（2）基因表達(dá)載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子。標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。解析】（1）引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸，引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。酶具有專一性，RNA酶能水解RNA，而DEPC物質(zhì)可與RNA酶結(jié)合使酶發(fā)生變性，故提取過(guò)程加入DEPC物質(zhì)作用是防止RNA被降解。（2）引物需要與模板的3’端結(jié)合，引物1的5'端酶切位點(diǎn)的堿基序列為GAATTC，即選擇的酶是EcoRⅠ，由于a鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，根據(jù)mRNA的合成方向，引物2的5'端靠近啟動(dòng)子，應(yīng)有NotⅠ的酶切位點(diǎn)，引物2的5'端酶切位點(diǎn)的堿基序列為GCGGCCGC。（3）IgR基因表達(dá)載體進(jìn)入菌體內(nèi)，此過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化；據(jù)圖可知，重組質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因，可作為標(biāo)記基因篩選重組質(zhì)粒，故將菌液涂布在含有氨芐青霉素的LB固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，加入誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)pIgR基因在大腸桿菌中表達(dá)，提取、純化蛋白質(zhì)。（4）由于C-G之間有3個(gè)氫鍵，而A-T之間有兩個(gè)氫鍵，因此DNA復(fù)制起點(diǎn)（ori）處富含AT堿基，有利于解旋。在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素共同控制著愈傷組織的形成及分化；質(zhì)粒A中含有tms與tmr，二者表達(dá)會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的激素，質(zhì)粒B不含有tms與tmr；為獲得胚狀體或試管苗，用攜帶了質(zhì)粒B的農(nóng)桿菌侵染植物，而不用攜帶質(zhì)粒A的農(nóng)桿菌，原因可能是進(jìn)入植物細(xì)胞的T-DNA中的tms與tmr在受體細(xì)胞中表達(dá)，所產(chǎn)生的激素會(huì)影響愈傷組織的形成及分化。在農(nóng)桿菌侵染植物的過(guò)程中，農(nóng)桿菌會(huì)產(chǎn)生酶甲，甲將T-DNA的一條核苷酸鏈切割下來(lái)，該單鏈進(jìn)入植物細(xì)胞并在植物細(xì)胞中形成雙鏈，由題干可知LB與RB是T-DNA進(jìn)入植物細(xì)胞不可缺少的結(jié)構(gòu)，因此甲識(shí)別與切割的序列應(yīng)為T(mén)-DNA中的LB與RB。有學(xué)者認(rèn)為甲是由Vir區(qū)段的基因在酚類物質(zhì)的刺激下編碼產(chǎn)生的。欲證實(shí)上述猜測(cè)的正確性，至少需進(jìn)行3組對(duì)照實(shí)驗(yàn)，與突變型植株的外植體共培養(yǎng)的農(nóng)桿菌類型和所使用的培養(yǎng)基：含質(zhì)粒B的農(nóng)桿菌+基礎(chǔ)培養(yǎng)基；含質(zhì)粒B的農(nóng)桿菌+含酚類物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基；含去除了Vir區(qū)段的質(zhì)粒B的農(nóng)桿菌+含酚類物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。江蘇省鎮(zhèn)江市六校等校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期6月期末一、單項(xiàng)選擇題：共14題，每題2分，共28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1.下列各組元素中，大量參與組成線粒體內(nèi)膜的是（）A.O、P、N B.C、N、Si C.S、P、Ca D.N、P、Na【答案】A〖祥解〗線粒體內(nèi)膜屬于生物膜，其主要成分是磷脂和蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)是由C、H、O、N等元素組成，磷脂的組成元素為C、H、O、N、P。【詳析】線粒體內(nèi)膜屬于生物膜，生物膜主要由磷脂和蛋白質(zhì)組成，蛋白質(zhì)是由C、H、O、N等元素組成，磷脂的組成元素為C、H、O、N、P，二者均不含Si、Ca、Na，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。2.有詩(shī)云“魚(yú)在在藻，依于其蒲”?！霸濉倍嘀杆性孱?，“蒲”為多年生草本，其實(shí)水中除“藻”“蒲”外，還有色球藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌等微生物，下列說(shuō)法正確的是（）A.詩(shī)中提及的“藻”“蒲”、大腸桿菌及支原體、衣原體都有細(xì)胞壁B.“藻”“蒲”和色球藍(lán)細(xì)菌的核小體的主要成分是DNA和蛋白質(zhì)C.上述生物都含細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、遺傳物質(zhì)，體現(xiàn)了細(xì)胞的多樣性D.色球藍(lán)細(xì)菌和“藻”“蒲”都含葉綠素，是能進(jìn)行光合作用的自養(yǎng)型生物【答案】D〖祥解〗原核細(xì)胞與真核細(xì)胞最明顯的差異是有無(wú)核膜包被的成形的細(xì)胞核，由原核細(xì)胞構(gòu)成的生物稱為原核生物，由真核細(xì)胞構(gòu)成的生物稱為真核生物。原核細(xì)胞與真核細(xì)胞共有的特征是均有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核糖體，均以DNA作為遺傳物質(zhì)?！驹斘觥緼、詩(shī)中提及的“藻”“蒲”、大腸桿菌及衣原體都有細(xì)胞壁，支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、色球藍(lán)細(xì)菌是原核生物，沒(méi)有核小體結(jié)構(gòu)，B錯(cuò)誤；C、上述生物都含細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜、遺傳物質(zhì)，體現(xiàn)了細(xì)胞統(tǒng)一性，C錯(cuò)誤；D、色球藍(lán)細(xì)菌含有葉綠素和藻藍(lán)素，“藻”“蒲”含葉綠素和類胡蘿卜素，色球藍(lán)細(xì)菌和“藻”“蒲”都含葉綠素，是能進(jìn)行光合作用的自養(yǎng)型生物，D正確。故選D。3.生命依賴于水，細(xì)胞也離不開(kāi)水，細(xì)胞中的水以自由水和結(jié)合水兩種形式存在。正常情況下，細(xì)胞內(nèi)自由水所占比例越大，細(xì)胞代謝越旺盛。在冬季來(lái)臨過(guò)程中，為了增強(qiáng)抗寒能力，冬小麥在不同時(shí)期的含水量發(fā)生了變化（如下圖所示）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.冬季，冬小麥自由水的比例下降，可避免低溫時(shí)自由水過(guò)多導(dǎo)致結(jié)冰而損害自身B.在冬季來(lái)臨過(guò)程中，冬小麥的結(jié)合水含量升高，但其水的主要存在形式始終是自由水C.水分子是一種極性分子，帶電分子或離子都易與水結(jié)合，因此，水是良好的溶劑D.細(xì)胞內(nèi)結(jié)合水的存在形式主要是水與蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)結(jié)合，從而失去溶解性【答案】B〖祥解〗細(xì)胞中的水可以分為自由水和結(jié)合水，自由水的比例越高，新陳代謝越旺盛，結(jié)合水比例越高，抗逆性越強(qiáng)?！驹斘觥緼、在冬季來(lái)臨前，冬小麥的自由水比例會(huì)逐漸降低，而結(jié)合水比例會(huì)逐漸上升，以避免氣溫下降時(shí)自由水過(guò)多導(dǎo)致結(jié)冰而損害自身，A正確；B、由圖可知，約9月中旬開(kāi)始，冬小麥的結(jié)合水的相對(duì)含量明顯高于自由水，B錯(cuò)誤；C、水分子的空間結(jié)構(gòu)及電子的不對(duì)稱分布，使得水分子成為一個(gè)極性分子。帶有正電荷或負(fù)電荷的分子（或離子）都容易與水結(jié)合，因此，水是良好的溶劑，C正確；D、細(xì)胞內(nèi)結(jié)合水的存在形式主要是水與蛋白質(zhì)、多糖等物質(zhì)結(jié)合，這樣水就失去流動(dòng)性和溶解性，成為生物體的構(gòu)成成分，D正確。故選B。4.發(fā)酵是指人們利用微生物代謝，將原料轉(zhuǎn)化為所需產(chǎn)物的過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.醬油、醋、泡菜、豆豉等都是傳統(tǒng)發(fā)酵食品B.以毛霉為主的多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵C.當(dāng)缺少氧氣時(shí)，醋酸菌能夠?qū)⒁掖嫁D(zhuǎn)化成乙酸D.傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般利用原材料中天然存在的微生物【答案】C〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種計(jì)數(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的制備、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過(guò)程和產(chǎn)品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、醬油、醋、泡菜、豆豉等在日常生活中歷史悠久，都是通過(guò)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作而成的食品，A正確；B、在豆腐發(fā)酵制作腐乳的過(guò)程中，以毛霉為主的多種微生物參與其中，毛霉產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸，B正確；C、醋酸菌是好氧菌，當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿?，整個(gè)過(guò)程都需要氧氣參與，C錯(cuò)誤；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)一般不進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌操作，而是利用原材料中天然存在的微生物進(jìn)行發(fā)酵，D正確。故選C。5.啤酒發(fā)酵流程一般都包含發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒、終止等。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.焙烤過(guò)程通過(guò)加熱殺死種子的胚細(xì)胞，從而使淀粉酶失活B.酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成C.發(fā)酵的溫度和發(fā)酵的時(shí)間隨啤酒品種和口味的要求不同而有所差異D.蒸煮過(guò)程中高溫使淀粉酶失活，可以終止淀粉酶的進(jìn)一步作用，并對(duì)糖漿滅菌【答案】A〖祥解〗現(xiàn)代工業(yè)釀酒分為主發(fā)酵和后發(fā)酵，主發(fā)酵是主要的生產(chǎn)過(guò)程，主發(fā)酵后還要通過(guò)后發(fā)酵來(lái)促酒成熟、澄清?！驹斘觥緼、焙烤是加熱殺死種子的胚，但不使淀粉酶失活，A錯(cuò)誤；B、主發(fā)酵是主要的生產(chǎn)過(guò)程，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發(fā)酵階段完成，B正確；C、發(fā)酵溫度和發(fā)酵時(shí)間隨著啤酒品種和口味要求的不同而有所差異，C正確；D、蒸煮過(guò)程中高溫使淀粉酶失活，終止淀粉酶的分解作用，并對(duì)糖漿滅菌，D正確。故選A。6.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌的部分操作步驟，下列說(shuō)法正確的是（）A.配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后再調(diào)pHB.①②③步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行C.步驟④中接種環(huán)共需5次灼燒處理D.將接種后的平板直接放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)【答案】B〖祥解〗分析題意和圖示可知：①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培養(yǎng)。制備固體培養(yǎng)基的基本過(guò)程為計(jì)算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板?！驹斘觥緼、配制好的培養(yǎng)基應(yīng)先調(diào)pH后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)與純化酵母菌的過(guò)程中，為了防止雜菌污染，需要在酒精燈的火焰旁進(jìn)行，因此①②③步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，B正確；C、每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理，因此步驟④中接種環(huán)共需6次灼燒處理，C錯(cuò)誤；D、完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。故選B。7.下列對(duì)滅菌和消毒的理解不正確的是（）A.滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物C.消毒和滅菌都是采用物理方法殺滅微生物D.常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌等【答案】C〖祥解〗消毒和滅菌消毒滅菌概念使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌適用對(duì)象操作空間、某些液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等【詳析】A、滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過(guò)程，A正確；B、消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），B正確；C、消毒和滅菌都是采用物理或化學(xué)的方法殺滅微生物，不僅有物理方法，C錯(cuò)誤；D、滅菌的方法比較強(qiáng)烈，一般是高溫或高壓，常用滅菌方法有灼燒滅菌法、干熱滅菌法、濕熱滅菌滅菌法等，D正確。

故選C。8.丙草胺是一種應(yīng)用廣泛的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某生物興趣小組從達(dá)活泉公園土壤中分離出能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其進(jìn)行計(jì)數(shù)（如下圖所示），以期為修復(fù)被丙草胺污染土壤提供微生物資源。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.將培養(yǎng)基PH調(diào)至酸性，有利于丙草胺降解菌的生長(zhǎng)繁殖B.圖中所用計(jì)數(shù)方法為稀釋涂布平板法，用該方法計(jì)數(shù)結(jié)果往往比實(shí)際值偏小C.用以丙草胺為唯一氮源的液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)可提高丙草胺降解菌濃度D.通過(guò)計(jì)算得知每克土壤中的菌株數(shù)約為1．7×109個(gè)【答案】A〖祥解〗統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）：①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性；b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。【詳析】A、培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，A錯(cuò)誤；B、圖中利用的是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)，利用該方法計(jì)數(shù)結(jié)果往往比實(shí)際值偏小，原因是兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)觀察到的只有一個(gè)菌落，B正確；C、由題干信息可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，故培養(yǎng)基應(yīng)以丙草胺為唯一氮源，該培養(yǎng)基中只有降解丙草胺的細(xì)菌菌株才能生長(zhǎng)，其他微生物的生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，故用該培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)可提高降解菌的濃度，C正確；D、5號(hào)試管的稀釋倍數(shù)是105，則每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3÷0.1×10×105=1.7×109個(gè)，D正確。故選A。9.下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)工程的敘述，正確的是（）A.植物組織培養(yǎng)過(guò)程中將愈傷組織包埋在人工種皮中，就形成了人工種子B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得抗毒苗C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織、細(xì)胞分裂能力旺盛D.試管牛技術(shù)和細(xì)胞核移植技術(shù)均可實(shí)現(xiàn)良種牛的大量克隆【答案】C【詳析】A、人工種子需將離體培養(yǎng)的胚狀體、不定芽等結(jié)構(gòu)包裹在人工胚乳和人工種皮中，而愈傷組織未進(jìn)一步分化，不能直接作為胚狀體，且缺少人工胚乳，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可通過(guò)細(xì)胞代謝變化檢測(cè)有毒物質(zhì)，但莖尖組織培養(yǎng)僅能獲得脫毒苗（因莖尖病毒極少），抗毒苗需要通過(guò)基因重組獲得，B錯(cuò)誤；C、胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易于培養(yǎng)，故動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)常取材于此，C正確；D、試管牛技術(shù)依賴體外受精和胚胎移植，屬于有性生殖，后代遺傳物質(zhì)不完全相同；細(xì)胞核移植屬于無(wú)性生殖，可實(shí)現(xiàn)大量克隆，D錯(cuò)誤。故選C。10.下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質(zhì)B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C.猴的核移植細(xì)胞通過(guò)胚胎工程已成功地培育出了克隆猴D.將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞【答案】D【詳析】A、細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需添加血清等物質(zhì)，A正確；B、早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體，B正確；C、我國(guó)利用核移植技術(shù)成功培養(yǎng)出克隆猴“中中”和“華華”，C正確；D、將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，D錯(cuò)誤。故選D。11.某生物興趣小組的同學(xué)用豬肝進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)，主要實(shí)驗(yàn)流程如下圖。相關(guān)敘述不正確的是（）A.為了方便對(duì)材料進(jìn)行處理，也可以用新鮮豬血來(lái)代替豬肝用于DNA的粗提取B.過(guò)程⑤加入酒精后，也可將溶液倒入離心管離心后取沉淀物C.過(guò)濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精都可抑制DNA酶的活性D.提取到的絲狀物先溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑，沸水浴加熱后變藍(lán)【答案】A【詳析】A、哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核，因此新鮮豬血不能代替豬肝用于DNA的粗提取，A錯(cuò)誤B、DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，過(guò)程⑤加入酒精后，蛋白質(zhì)溶解，DNA析出，因此離心后棄上清取沉淀，B正確；C、酶活性的發(fā)揮需要適宜的溫度等條件，將過(guò)濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正確；D、將析出的絲狀物先溶于2mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺試劑，混勻后沸水浴中加熱可出現(xiàn)藍(lán)色，D正確。故選A。12.下圖為哺乳動(dòng)物受精卵發(fā)育過(guò)程中某一時(shí)期的示意圖，有關(guān)敘述正確的是A.此圖表示桑椹胚，可作為胚胎移植的材料B.此圖中細(xì)胞還沒(méi)有分化，圖中①為透明帶C.胚胎從①中伸展出來(lái)的過(guò)程叫做孵化D.進(jìn)行胚胎分割時(shí)，一般?、壑屑?xì)胞做性別鑒定【答案】C〖祥解〗分析題圖：圖示表示囊胚期胚胎示意圖，其中①為透明帶，在囊胚期后期會(huì)破裂；②為滋養(yǎng)層，將來(lái)分化成胎盤(pán)和胎膜；③為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來(lái)分化形成各種組織。【詳析】A、此圖為囊胚期，A錯(cuò)誤；

B、囊胚時(shí)期細(xì)胞已出現(xiàn)分化，B錯(cuò)誤；

C、囊胚的擴(kuò)大會(huì)導(dǎo)致透明帶的破裂，胚胎伸展出來(lái)，這一過(guò)程叫孵化，C正確；

D、對(duì)移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行鑒定，D錯(cuò)誤。

故選C。13.下圖表示用草木樨狀黃芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗鹽新品種的過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.過(guò)程①需要使用的酶是胰蛋白酶B.滅活病毒不能誘導(dǎo)過(guò)程②中A和B的融合C.過(guò)程②處理后得到的兩兩融合原生質(zhì)體類型可能有3種D.經(jīng)過(guò)過(guò)程④所得到的愈傷組織細(xì)胞中含有四個(gè)染色體組【答案】A【詳析】A、植物細(xì)胞壁的成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性，過(guò)程①需要使用的酶是纖維素酶和果膠酶，目的是去除細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程②為植物原生質(zhì)體的融合過(guò)程，其誘導(dǎo)方法有PEG處理、離心、電激等，用滅活病毒是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的手段，不能用于植物原生質(zhì)體的融合，B正確；C、若只考慮兩兩融合的情況，則過(guò)程②處理后得到的融合原生質(zhì)體類型可能有3種，分別是AA、BB、AB，C正確；D、該題中的兩個(gè)植物細(xì)胞各有兩個(gè)染色體組，故兩細(xì)胞融合形成的細(xì)胞內(nèi)含有四個(gè)染色體組，D正確。故選A。14.甲型流感單克隆抗體的制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞在克隆化培養(yǎng)過(guò)程中來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往出現(xiàn)隨機(jī)丟失現(xiàn)象，不考慮基因互作和其他變異，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動(dòng)物脾臟中篩選獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞B.在HAT選擇培養(yǎng)基上，B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均無(wú)法長(zhǎng)期存活C.用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)每一個(gè)孔盡量只接種一個(gè)細(xì)胞D.抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞即具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的能力【答案】D〖祥解〗在制備單克隆抗體時(shí)，首先要給小鼠免疫，產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞，然后將B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。在單克隆抗體的制備過(guò)程中，使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)。【詳析】A、對(duì)動(dòng)物進(jìn)行間歇注射抗原處理，以刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，且脾臟是免疫器官，故B淋巴細(xì)胞可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動(dòng)物脾臟中篩選獲得，A正確；B、B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合后，再用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)，B正確；C、為確保產(chǎn)生特異性強(qiáng)的抗體，用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)，每一個(gè)孔中盡量只接種一個(gè)雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、雜交瘤細(xì)胞在克隆化培養(yǎng)過(guò)程中來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體往往出現(xiàn)隨機(jī)丟失現(xiàn)象，若丟失的染色體含有產(chǎn)生甲型流感抗體的基因，則利用抗體檢測(cè)篩選的雜交瘤細(xì)胞不一定具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的能力，D錯(cuò)誤。故選D。二、多項(xiàng)選擇題：共4題，每題3分，共12分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)者得3分，選對(duì)但不全的得1分，錯(cuò)選或不答的得0分。15.下圖表示研究人員利用胚胎工程培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程，下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.①代表體外受精，與體內(nèi)受精不同的是體外受精前精子需要獲能B.②代表體外胚胎培養(yǎng)，該過(guò)程中細(xì)胞既進(jìn)行有絲分裂也存在細(xì)胞分化C.③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，以免影響胚胎發(fā)育D.⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)【答案】AC〖祥解〗胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，分析題圖，①是體外受精過(guò)程，②是早期胚胎培養(yǎng)，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢復(fù)，⑤是胚胎移植。【詳析】A、①代表體外受精，體外受精前和體內(nèi)受精前精子均需要獲能，A錯(cuò)誤；B、②代表體外早期胚胎培養(yǎng)，該過(guò)程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，當(dāng)胚胎發(fā)育至囊胚階段，會(huì)開(kāi)始進(jìn)行細(xì)胞分化，B正確；C、③代表胚胎分割，在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分裂，以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育，而桑椹胚階段的胚胎還未形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，C錯(cuò)誤；D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，與供體和受體的生理狀態(tài)有關(guān)，要對(duì)供、受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供體和受體的生理狀態(tài)相同，D正確。故選AC。16.植物組織培養(yǎng)技術(shù)常用于商業(yè)化生產(chǎn)；其過(guò)程一般為：無(wú)菌培養(yǎng)物的建立→培養(yǎng)物增殖→生根培養(yǎng)→試管苗移栽及鑒定。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.為獲得無(wú)菌培養(yǎng)物，外植體要消毒處理后才可接種培養(yǎng)B.組織培養(yǎng)過(guò)程中也可無(wú)明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)C.提高培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值，有利于誘導(dǎo)生根D.用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗不會(huì)出現(xiàn)變異【答案】ABC【詳析】A、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作，為獲得無(wú)菌培養(yǎng)物，外植體要經(jīng)過(guò)表面消毒處理后，才能進(jìn)行培養(yǎng)，所用的培養(yǎng)基必須徹底滅菌，A正確；B、組織培養(yǎng)過(guò)程中也可無(wú)明顯愈傷組織形成，直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)，胚狀體若包裹上人工種皮，可制作成人工種子，B正確；C、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值高時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值，有利于誘導(dǎo)生根，C正確；D、用同一植株體細(xì)胞離體培養(yǎng)獲得的再生苗會(huì)出現(xiàn)變異，如在愈傷組織的培養(yǎng)過(guò)程中可能發(fā)生基因突變等變異，D錯(cuò)誤。故選ABC。17.科研人員采集了某深海冷泉附近的沉積物樣品，經(jīng)分離、純化、鑒定得到了降解藻類多糖的擬桿菌菌株，具體過(guò)程如圖(Ⅰ～Ⅳ是操作步驟)。下列敘述正確的有（）A.步驟Ⅰ均采用濕熱滅菌法對(duì)深海冷泉沉積物的樣品和海水進(jìn)行滅菌B.步驟Ⅱ可通過(guò)添加不同藻類多糖配制系列培養(yǎng)基①獲得多種擬桿菌菌株C.步驟Ⅲ培養(yǎng)基②中以藻類多糖為唯一碳源，且需加入適量瓊脂等凝固劑D.步驟Ⅳ可通過(guò)增加培養(yǎng)基③中碳源的濃度，獲得高耐受藻類多糖的菌株【答案】BCD〖祥解〗（1）培養(yǎng)基：