2025年高職生物技術(shù)（細(xì)胞培養(yǎng)）模擬試題

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______一、單項選擇題（總共10題，每題3分，每題只有一個正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)）1.細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的培養(yǎng)基是（）A.DMEM培養(yǎng)基B.RPMI-1640培養(yǎng)基C.MEM培養(yǎng)基D.F12培養(yǎng)基2.細(xì)胞培養(yǎng)時，對培養(yǎng)箱內(nèi)氣體環(huán)境要求最高的是（）A.二氧化碳B.氧氣C.氮氣D.氫氣3.用于細(xì)胞計數(shù)的儀器是（）A.電子天平B.酸度計C.血細(xì)胞計數(shù)板D.離心機4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，防止微生物污染最常用的方法是（）A.紫外線照射B.過濾除菌C.抗生素添加D.高溫滅菌5.下列哪種細(xì)胞屬于原代細(xì)胞（）A.293T細(xì)胞B.HeLa細(xì)胞C.小鼠胚胎成纖維細(xì)胞D.CHO細(xì)胞6.細(xì)胞培養(yǎng)時，血清的作用不包括（）A.提供營養(yǎng)物質(zhì)B.促進細(xì)胞貼壁C.調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝D.維持細(xì)胞滲透壓7.細(xì)胞凍存時，常用的保護劑是（）A.DMSOB.甘油C.乙醇D.以上都是8.細(xì)胞傳代培養(yǎng)時，一般選擇細(xì)胞處于（）時進行傳代A.潛伏期B.對數(shù)生長期C.平臺期D.衰退期9.下列哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)常用于大規(guī)模生產(chǎn)生物制品（）A.懸浮培養(yǎng)B.貼壁培養(yǎng)C.微載體培養(yǎng)D.以上都是10.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，檢測細(xì)胞活力最常用的方法是（）A.臺盼藍(lán)染色法B.中性紅染色法C.MTT法D.流式細(xì)胞術(shù)二、多項選擇題（總共5題，每題4分，每題至少有兩個正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)）1.細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本條件包括（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.合適的氣體環(huán)境D.無菌的操作環(huán)境E.合適的pH值2.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，可能導(dǎo)致細(xì)胞污染的因素有（）A.操作不規(guī)范B.培養(yǎng)基污染C.血清污染D.培養(yǎng)箱污染E.細(xì)胞本身帶菌3.細(xì)胞培養(yǎng)常用的器皿有（）A.培養(yǎng)瓶B.培養(yǎng)皿C.多孔板D.離心管E.移液器4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，用于細(xì)胞消化的酶有（）A.胰蛋白酶B.膠原酶C.鏈霉蛋白酶D.木瓜蛋白酶E.胃蛋白酶5.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在哪些領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用（）A.生物制藥B.細(xì)胞生物學(xué)研究C.基因治療D.組織工程E.疫苗生產(chǎn)三、填空題（總共10題，每題2分，請將正確答案填寫在橫線上）1.細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程包括細(xì)胞復(fù)蘇、______、傳代培養(yǎng)、細(xì)胞凍存。2.培養(yǎng)基的主要成分包括氨基酸、維生素、______、無機鹽、生長因子等。3.細(xì)胞培養(yǎng)時，常用的消毒方法有______、化學(xué)消毒、過濾除菌等。4.細(xì)胞計數(shù)時，計數(shù)板的計數(shù)室邊長為______mm。5.原代細(xì)胞培養(yǎng)的方法主要有組織塊培養(yǎng)法和______。6.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長曲線包括潛伏期、______、平臺期和衰退期。7.細(xì)胞凍存時，一般采用______的降溫速率進行凍存。8.細(xì)胞傳代培養(yǎng)時，接種細(xì)胞的密度一般為______個/ml。9.用于細(xì)胞培養(yǎng)的水一般要求是______。10.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常用的細(xì)胞活力檢測方法有______、MTT法、CCK-8法等。四、簡答題（總共2題，每題10分）1.簡述細(xì)胞培養(yǎng)過程中防止微生物污染的措施。2.請描述細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的操作步驟及注意事項。五、材料分析題（總共1題，每題20分）某實驗室在進行細(xì)胞培養(yǎng)實驗時，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長緩慢，且出現(xiàn)了部分細(xì)胞死亡的現(xiàn)象。經(jīng)過檢查，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的pH值偏低，血清質(zhì)量也有所下降。請分析可能導(dǎo)致這些問題的原因，并提出相應(yīng)的解決措施。答案：一、1.A2.A3.C4.B5.C6.D7.D8.B9.D10.A二、1.ABCDE2.ABCDE3.ABCD4.ABCDE5.ABCDE三、1.細(xì)胞接種2.碳水化合物3.物理消毒4.15.消化培養(yǎng)法6.對數(shù)生長期7.慢凍速融8.1×10^5-1×10^69.三蒸水10.臺盼藍(lán)染色法四、1.防止微生物污染的措施包括：嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范，如在超凈工作臺內(nèi)進行操作，操作人員穿戴工作服、口罩、帽子等；對培養(yǎng)基、血清等進行嚴(yán)格的過濾除菌處理；定期對培養(yǎng)箱、移液器等培養(yǎng)器皿進行消毒；對細(xì)胞進行定期的支原體檢測等。2.細(xì)胞凍存操作步驟：收集對數(shù)生長期細(xì)胞，離心去除培養(yǎng)液；用凍存液重懸細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度至合適濃度；將細(xì)胞懸液分裝至凍存管中，密封；先將凍存管置于4℃冰箱中1-2小時，然后轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中2小時，最后放入-80℃冰箱過夜或直接投入液氮中保存。注意事項：凍存液要新鮮配制，現(xiàn)用現(xiàn)配；凍存細(xì)胞密度要合適，一般為1×10^6-1×10^7個/ml；降溫速率要慢，避免細(xì)胞內(nèi)形成冰晶損傷細(xì)胞。細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟：從液氮中取出凍存管，迅速放入37℃水浴中，快速晃動使其在1分鐘內(nèi)完全融化；將融化后的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中，加入適量培養(yǎng)液，離心5-10分鐘，棄上清；用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，接種至培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項：復(fù)蘇過程要迅速，避免細(xì)胞長時間暴露在高溫環(huán)境中；培養(yǎng)液要預(yù)熱至37℃；復(fù)蘇后的細(xì)胞要及時更換培養(yǎng)液，去除凍存液中的毒性成分。五、可能導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢和部分細(xì)胞死亡的原因及解決措施如下：原因：培養(yǎng)基pH值偏低可能是由于培養(yǎng)基中緩沖體系失效或細(xì)胞代謝產(chǎn)生過多酸性物質(zhì)導(dǎo)致；血清質(zhì)量下降可能是由于血清保存不當(dāng)、過期或受到污染。解決措施：更換新的培