ICS65.020.01

CCSB05

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB15/T2445—2021

向日葵黃萎病田間抗性鑒定技術(shù)規(guī)程

Technicalcodeofpracticeforresistantidentificationtosunflower

Verticilliumwiltinfield

2021-11-15發(fā)布2021-12-15實(shí)施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T2445—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC20）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)、內(nèi)蒙古自治區(qū)科學(xué)技術(shù)戰(zhàn)略研究中心。

本文件主要起草人：周洪友、王東、張鍵、趙君、孟煥文、張笑宇、喬旭。

I

DB15/T2445—2021

向日葵黃萎病田間抗性鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了向日葵黃萎病抗性鑒定的前期準(zhǔn)備、鑒定程序、結(jié)果的計(jì)算、黃萎病抗性評(píng)價(jià)等技術(shù)

要求。

本文件適用于內(nèi)蒙古自治區(qū)向日葵產(chǎn)區(qū)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4407.2經(jīng)濟(jì)作物種子第2部分：油料類。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

向日葵黃萎病sunflowerVerticilliumwilt

由大麗輪枝孢菌引起的一種土傳病害。田間的癥狀多從植株下層葉片顯癥，葉尖葉肉部分呈現(xiàn)褪綠、

黃化的癥狀。隨后，病部邊緣向葉內(nèi)的脈間組織發(fā)展導(dǎo)致整個(gè)葉片的葉肉組織褪綠，變褐，干枯。發(fā)病

重的植株下部葉片全部枯死，中位葉片呈斑駁狀。剖開病莖觀察，可見莖部的維管束變褐。

4前期準(zhǔn)備

4.1病原菌的選擇與培養(yǎng)

4.1.1病原菌的選擇

根據(jù)所鑒定品種推廣應(yīng)用區(qū)域選擇能代表該區(qū)域病原菌致病力水平的優(yōu)勢菌系。

4.1.2病原菌的培養(yǎng)

在超凈臺(tái)上，將分離純化的向日葵黃萎病菌，從PDA平板上的菌落邊緣挑取直徑5mm的新鮮菌塊，

接種到查比克液體培養(yǎng)基（NaNO3：2.0g；K2HPO4：1.0g；KCl：0.5g；MgSO4?7H2O：0.50g；FeSO4:0.01

g；蔗糖:30.0g；用水定容至1000mL）中，置于25℃下，150r/min，黑暗培養(yǎng)6d備用。

制作麥麩培養(yǎng)基，加入適量的水，裝入三角瓶,0.1MPa，高壓濕熱滅菌30min，冷卻到室溫備用；

吸取上述液體培養(yǎng)的向日葵黃萎病菌菌液15mL轉(zhuǎn)接至裝有麥麩沙粒培養(yǎng)基的三角瓶中，隨后放入到

25℃培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)7d，待黃萎病菌的菌絲布滿后，將培養(yǎng)物掏出，自然條件下風(fēng)干備用。

1

DB15/T2445—2021

4.2病圃的建立

向日葵黃萎病病圃應(yīng)建立在有利于黃萎病發(fā)生的地區(qū)，選擇具有一定隔離條件的地塊建立病圃，病

圃地勢平坦，土壤以沙壤土為宜。按每平方米45g的接種量，將培養(yǎng)好的菌種均勻地撒入病圃，再翻耕

2～3遍，使病菌與土壤混合均勻，使正常年份感病對照的病情指數(shù)達(dá)到35.0以上。

4.3對照品種的選擇

鑒定中選用一個(gè)感病對照和一個(gè)抗病對照。感病對照要求高度感病，選擇標(biāo)準(zhǔn)為正常年份病情指數(shù)

能達(dá)到35.0左右，且感病性穩(wěn)定；抗病對照選用已推廣應(yīng)用的抗黃萎病品種，且抗病性穩(wěn)定。

5鑒定程序

5.1材料的處理

鑒定的向日葵品種或材料應(yīng)為未包衣的種子，發(fā)芽率應(yīng)符合GB4407.2。

5.2材料的種植

鑒定材料種植在病圃中，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，3次重復(fù)，每小區(qū)2壟4行、行長不少于5m、株數(shù)不少于50

株，適當(dāng)提早播種。

5.3鑒定圃田間管理

播種后，確保全苗，保持田間的適宜濕度，以利于黃萎病的發(fā)生，各項(xiàng)田間管理保持一致。

5.4病情的調(diào)查記載

向日葵出苗后，實(shí)時(shí)監(jiān)測感病對照的發(fā)病情況，當(dāng)感病對照病情指數(shù)高于35.0時(shí)，進(jìn)行第一次全面

調(diào)查，每10d左右調(diào)查一次，整個(gè)生育期調(diào)查次數(shù)不少于3次。感病對照病情指數(shù)低于35.0時(shí)，鑒定無

效。在病情調(diào)查記載中采用5級(jí)法表述病情。根據(jù)植株黃萎病發(fā)生嚴(yán)重程度分成1～5五個(gè)病級(jí)，代表值

分別為0～4：

a)1級(jí)（代表值0）：植株健康，無病葉，生長正常；

b)2級(jí)（代表值1）：植株三分之一以下葉片表現(xiàn)病狀；

c)3級(jí)（代表值2）：植株三分之一以上，三分之二以下葉片表現(xiàn)病狀；

d)4級(jí)（代表值3）：植株三分之二以上葉片表現(xiàn)病狀；

e)5級(jí)（代表值4）：植株枯死。

6結(jié)果的計(jì)算

6.1病株率（Ri）

見公式（1）：

式中：

2

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ni——發(fā)病株數(shù)；

nt——總株數(shù)。

6.2病情指數(shù)（DI）

見公式（2）：

式中：

dc——相應(yīng)病級(jí)；

nc——各病級(jí)病株數(shù)；

nt——總株數(shù)。

6.3相對病情指數(shù)

將感病對照病情指數(shù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，以標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)（50.0）對試驗(yàn)品種病情指數(shù)進(jìn)行校正，校正結(jié)

果即為相對病情指數(shù)。感病對照病情指數(shù)在35.1～65.0之間可采用相對病情指數(shù)，超出范圍不宜采用相

對病情指數(shù)。

校正系數(shù)（K）：

式中：

50.0——感病對照標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)；

DICK——本次鑒定感病對照病情指數(shù)。

相對病情指數(shù)（RDI）：

式中：

DI——被鑒定品種病情指數(shù)；

K——校正系數(shù)。

7黃萎病抗性評(píng)價(jià)

7.1相對病情指數(shù)均值

整個(gè)生育期每次（不少于3次）調(diào)查結(jié)果的相對病情指數(shù)算術(shù)平均值，作為供試品種的最終相對病

情指數(shù)。

相對病情指數(shù)均值（ARDI）：

式中：

RDIi——第i次相對病情指數(shù)；

n——整個(gè)生育期計(jì)算相對病情指數(shù)的次數(shù)。

3

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7.2抗性鑒定結(jié)論

根據(jù)被鑒定品種的相對病情指數(shù)均值（ARDL）的大小評(píng)定品種的抗性級(jí)別，抗性級(jí)別的劃分標(biāo)準(zhǔn)見

附錄A。

4

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A

A

附錄A

（規(guī)范性）

向日葵品種抗性級(jí)別的劃分標(biāo)準(zhǔn)

向日葵品種抗性級(jí)別的劃分標(biāo)準(zhǔn)見表A.1。

表A.1向日葵品種抗性級(jí)別的劃分標(biāo)準(zhǔn)

級(jí)別抗性類別英文縮寫相對病情指數(shù)均值

1免疫IARDI=0

2高抗HR0＜ARDI≤10.0

3抗病R10.1＜ARDI≤20.0

4耐病T20.1＜ARDI≤35.0