2025年生物技術(shù)應(yīng)用職業(yè)資格考試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分。每題只有一個(gè)正確答案，請(qǐng)將正確選項(xiàng)字母填入括號(hào)內(nèi)）1.在CRISPR-Cas9系統(tǒng)中，負(fù)責(zé)識(shí)別靶序列的分子是（）A.Cas9蛋白B.tracrRNAC.crRNAD.PAM序列答案：C解析：crRNA通過堿基配對(duì)識(shí)別靶DNA，tracrRNA與crRNA結(jié)合形成向?qū)NA，Cas9負(fù)責(zé)切割，PAM是Cas9結(jié)合的必要鄰近序列。2.2025年新版《基因治療制品質(zhì)量控制指南》規(guī)定，慢病毒載體復(fù)制型病毒（RCV）檢測(cè)的靈敏度閾值不得高于（）A.1RC/10?TUB.1RC/10?TUC.1RC/10?TUD.1RC/10?TU答案：D解析：指南將靈敏度要求從10?提高到10?，以降低臨床風(fēng)險(xiǎn)。3.利用微流控芯片進(jìn)行單細(xì)胞RNA-seq時(shí)，逆轉(zhuǎn)錄步驟最常用的引物策略是（）A.oligo(dT)B.randomhexamerC.gene-specificprimerD.template-switchingoligo答案：D解析：模板切換寡核苷酸可在捕獲mRNA5′端全長(zhǎng)信息的同時(shí)引入細(xì)胞條形碼。4.在合成生物學(xué)“設(shè)計(jì)-構(gòu)建-測(cè)試-學(xué)習(xí)”循環(huán)中，用于快速迭代基因組編輯的高通量平臺(tái)通常依賴（）A.MAGEB.CAGEC.TALEND.ZFN答案：A解析：多重自動(dòng)化基因組工程（MAGE）可在單輪循環(huán)中引入數(shù)千突變。5.2025年發(fā)布的《生物安全實(shí)驗(yàn)室分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)》中，對(duì)操作經(jīng)基因編輯可經(jīng)氣溶膠傳播植物病原體的實(shí)驗(yàn)室最低等級(jí)要求為（）A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4答案：C解析：氣溶膠傳播潛力提升病原體危害等級(jí)，需BSL-3防護(hù)。6.在CAR-T細(xì)胞制備過程中，采用睡美人轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)相比慢病毒載體的主要優(yōu)勢(shì)是（）A.整合位點(diǎn)可控B.生產(chǎn)成本更低C.轉(zhuǎn)染效率更高D.免疫原性更低答案：B解析：睡美人系統(tǒng)無需包裝細(xì)胞，質(zhì)粒直接電轉(zhuǎn)，顯著降低GMP成本。7.利用CRISPRbaseeditor進(jìn)行點(diǎn)突變時(shí)，若目標(biāo)C→T，應(yīng)選擇的脫氨酶是（）A.APOBEC1B.AIDC.TadA8eD.ADAR2答案：A解析：APOBEC1催化C→U，后續(xù)修復(fù)實(shí)現(xiàn)C→T轉(zhuǎn)換。8.2025年《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》將數(shù)字PCR歸類為（）A.第三類醫(yī)療器械B.第二類醫(yī)療器械C.第一類醫(yī)療器械D.免臨床評(píng)價(jià)答案：A解析：數(shù)字PCR用于腫瘤伴隨診斷，屬最高風(fēng)險(xiǎn)類別。9.在植物基因驅(qū)動(dòng)設(shè)計(jì)中，利用CENH3突變體誘導(dǎo)單倍體化的策略屬于（）A.減數(shù)分裂驅(qū)動(dòng)B.基因轉(zhuǎn)換C.著絲粒驅(qū)動(dòng)D.逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座答案：C解析：CENH3介導(dǎo)著絲粒功能，突變后導(dǎo)致染色體丟失，實(shí)現(xiàn)單倍體誘導(dǎo)。10.采用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選互作蛋白時(shí)，若報(bào)告基因HIS3泄漏表達(dá)導(dǎo)致假陽性，最佳補(bǔ)救措施是（）A.提高3-AT濃度B.降低培養(yǎng)溫度C.更換AD載體D.刪除HIS3啟動(dòng)子答案：A解析：3-AT為HIS3競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，可提高篩選嚴(yán)謹(jǐn)性。11.在mRNA疫苗生產(chǎn)中，用于降低先天免疫激活的修飾核苷是（）A.m?AB.m?CC.ψD.s2U答案：C解析：N1-甲基假尿苷（ψ）可逃逸TLR/RIG-I識(shí)別，提升翻譯效率。12.2025年新版《人類遺傳資源管理?xiàng)l例實(shí)施細(xì)則》規(guī)定，外方單位申請(qǐng)采集罕見病家系樣本需提交的倫理文件語言為（）A.中文B.英文C.中英文D.無需提交答案：C解析：細(xì)則要求雙語材料以保證國(guó)際審查透明。13.在微生物組研究中，若采用16SrRNAV4區(qū)測(cè)序，最常用的引物對(duì)是（）A.27F/1492RB.341F/806RC.515F/926RD.799F/1193R答案：B解析：341F/806R對(duì)V4區(qū)擴(kuò)增效率高，且可避免宿主線粒體干擾。14.利用CRISPR-Cas13進(jìn)行病毒RNA檢測(cè)時(shí)，信號(hào)放大依賴（）A.熒光淬滅探針B.金納米顆粒C.等溫?cái)U(kuò)增D.雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)答案：A解析：Cas13旁切活性切割熒光-淬滅雙標(biāo)記探針，釋放信號(hào)。15.在基因編輯胚胎倫理審查中，2025年《倫理共識(shí)》將“不可接受”的編輯類別定義為（）A.治療性編輯B.增強(qiáng)性編輯C.預(yù)防性編輯D.體細(xì)胞編輯答案：B解析：增強(qiáng)性編輯涉及非治療性狀，被明令禁止。16.采用腺相關(guān)病毒（AAV）進(jìn)行體內(nèi)基因遞送時(shí)，對(duì)靈長(zhǎng)類視網(wǎng)膜的最佳血清型為（）A.AAV1B.AAV2C.AAV8D.AAV9答案：B解析：AAV2對(duì)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞嗜性最高，臨床數(shù)據(jù)最成熟。17.在合成基因回路中，若需構(gòu)建“記憶”功能，最常用的蛋白模塊是（）A.λcIB.LacIC.TetRD.Cre答案：A解析：λcI可形成雙穩(wěn)態(tài)開關(guān)，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期記憶。18.2025年《生物樣本庫質(zhì)量規(guī)范》要求，血漿cfDNA長(zhǎng)期保存溫度應(yīng)為（）A.?20℃B.?40℃C.?80℃D.液氮答案：C解析：?80℃可抑制核酸酶活性，保證片段完整性。19.在單細(xì)胞ATAC-seq中，用于提高轉(zhuǎn)座酶活性的陽離子是（）A.Mg2?B.Ca2?C.Mn2?D.Zn2?答案：C解析：Mn2?可提升Tn5轉(zhuǎn)座效率，增加開放染色質(zhì)捕獲。20.采用CRISPR-Cas12進(jìn)行田間轉(zhuǎn)基因作物快速檢測(cè)時(shí)，CRISPR反應(yīng)最適溫度為（）A.25℃B.37℃C.42℃D.55℃答案：B解析：Cas12a在37℃酶活最高，適合現(xiàn)場(chǎng)恒溫設(shè)備。21.在蛋白質(zhì)定向進(jìn)化中，若采用PACE系統(tǒng)，噬菌體增殖必需基因由（）A.宿主提供B.質(zhì)粒提供C.噬菌體自身D.誘導(dǎo)表達(dá)答案：B解析：PACE將必需基因置于待進(jìn)化蛋白控制下，實(shí)現(xiàn)“生存選擇”。22.2025年《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》規(guī)定，基因編輯猴模型運(yùn)輸需提前申報(bào)的最低數(shù)量為（）A.1只B.3只C.5只D.10只答案：A解析：所有非人靈長(zhǎng)類運(yùn)輸均須單獨(dú)許可。23.在微生物電合成系統(tǒng)中，用于提高電子傳遞效率的介體最常選用（）A.中性紅B.甲基紫精C.蒽醌-2,6-二磺酸D.鐵氰化鉀答案：A解析：中性紅生物相容性好，氧化還原電位適合產(chǎn)乙酸菌。24.采用納米孔測(cè)序進(jìn)行宏基因組組裝時(shí)，最佳糾錯(cuò)軟件組合為（）A.Canu+MedakaB.Flye+RaconC.Shasta+DeepVariantD.wtdbg2+Pilon答案：B解析：Flye長(zhǎng)讀長(zhǎng)組裝，Racon二代糾錯(cuò)，兼顧速度與精度。25.在細(xì)胞治療產(chǎn)品中，采用自動(dòng)化封閉系統(tǒng)制備時(shí)，2025年GMP附錄要求的環(huán)境監(jiān)測(cè)頻次為（）A.每批B.每日C.每周D.每月答案：A解析：封閉系統(tǒng)仍需每批監(jiān)測(cè)，以驗(yàn)證完整性。26.在基因編輯脫靶評(píng)估中，CIRCLE-seq與DISCOVER-seq的主要差異在于（）A.是否依賴Cas9B.是否需體外切割C.是否使用NGSD.是否需抗體答案：B解析：CIRCLE-seq體外環(huán)化，DISCOVER-seq利用體內(nèi)抗體捕獲。27.2025年《生物信息數(shù)據(jù)安全規(guī)范》將人類基因組原始數(shù)據(jù)定為（）A.一級(jí)數(shù)據(jù)B.二級(jí)數(shù)據(jù)C.三級(jí)數(shù)據(jù)D.公開數(shù)據(jù)答案：A解析：一級(jí)數(shù)據(jù)為最高敏感級(jí)別，需加密存儲(chǔ)。28.在植物合成生物學(xué)中，用于提高紫杉醇前體產(chǎn)量的細(xì)胞器工程靶點(diǎn)為（）A.質(zhì)體MEP途徑B.線粒體TCA循環(huán)C.過氧化物酶體D.高爾基體答案：A解析：質(zhì)體MEP途徑提供IPP/DMAPP，是紫杉醇合成限速步驟。29.采用CRISPR-Cas9進(jìn)行大段基因敲入時(shí)，提高同源重組效率的小分子是（）A.SCR7B.L755507C.RS-1D.BrefeldinA答案：A解析：SCR7抑制DNA-PKcs，減少NHEJ，提升HR。30.在生物制造中，若采用連續(xù)發(fā)酵生產(chǎn)重組蛋白，2025年《工藝驗(yàn)證指南》要求的最小持續(xù)運(yùn)行時(shí)間為（）A.7天B.14天C.21天D.30天答案：C解析：21天可覆蓋3倍細(xì)胞倍增周期，驗(yàn)證遺傳穩(wěn)定性。二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分。每題有兩個(gè)或兩個(gè)以上正確答案，多選、少選、錯(cuò)選均不得分）31.下列哪些技術(shù)可用于單細(xì)胞水平檢測(cè)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（）A.PLAB.FRETC.Co-IPD.BioID答案：ABD解析：PLA、FRET、BioID均可單細(xì)胞操作，Co-IP需大量裂解液。32.2025年《體外基因編輯臨床申請(qǐng)資料》中，必須提交的脫靶評(píng)估數(shù)據(jù)包括（）A.全基因組測(cè)序B.CIRCLE-seqC.靶位點(diǎn)深度測(cè)序D.計(jì)算機(jī)預(yù)測(cè)答案：ABC解析：計(jì)算機(jī)預(yù)測(cè)為輔助，非強(qiáng)制。33.在mRNA疫苗序列優(yōu)化中，可提高翻譯效率的策略有（）A.增加GC含量B.引入ψ修飾C.優(yōu)化Kozak序列D.縮短poly(A)尾答案：BC解析：ψ修飾降低免疫原性，Kozak序列提升起始效率；高GC形成二級(jí)結(jié)構(gòu)，短尾降低穩(wěn)定性。34.下列哪些屬于2025年新版《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利規(guī)范》規(guī)定的“嚴(yán)重痛苦”終點(diǎn)（）A.體重下降>20%B.無法進(jìn)食C.腫瘤直徑>15mmD.持續(xù)自殘答案：ABD解析：腫瘤大小需結(jié)合部位，非絕對(duì)指標(biāo)。35.在微生物組功能預(yù)測(cè)中，PICRUSt2依賴的數(shù)據(jù)庫包括（）A.GreengenesB.KEGGC.UniRefD.MetaCyc答案：BCD解析：PICRUSt2已棄用Greengenes，改用OTU參考樹。36.下列哪些方法可用于無細(xì)胞蛋白合成系統(tǒng)的能量再生（）A.糖酵解途徑B.PANOx-SPC.肌酸磷酸D.光合作用膜囊答案：BCD解析：糖酵解需完整細(xì)胞，無細(xì)胞系統(tǒng)常用外源高能底物。37.在CAR-T細(xì)胞中，通過CRISPR敲除PD-1可能帶來的風(fēng)險(xiǎn)有（）A.細(xì)胞因子風(fēng)暴B.自身免疫病C.耗竭加速D.插入突變答案：ABD解析：PD-1缺失導(dǎo)致過度激活，耗竭反而延遲。38.2025年《生物樣本跨境審批細(xì)則》中，可豁免審批的情形包括（）A.匿名血漿蛋白譜B.可識(shí)別DNA序列C.病理切片數(shù)字圖像D.宏基因組序列答案：AC解析：匿名蛋白與圖像不含遺傳信息。39.在植物基因編輯中，采用Cpf1相比Cas9的優(yōu)勢(shì)有（）A.更小體積B.識(shí)別T-richPAMC.產(chǎn)生粘性末端D.無需tracrRNA答案：BCD解析：Cpf1僅含crRNA，Cas9需tracrRNA。40.下列哪些指標(biāo)可用于評(píng)估生物反應(yīng)器混合效率（）A.混合時(shí)間B.功率準(zhǔn)數(shù)C.氧傳質(zhì)系數(shù)kLaD.能量耗散率答案：ACD解析：功率準(zhǔn)數(shù)為槳葉特性，非直接混合指標(biāo)。三、判斷題（每題1分，共10分。正確請(qǐng)?zhí)睢啊獭?，錯(cuò)誤填“×”）41.2025年發(fā)布的《基因治療制品穩(wěn)定性研究指南》要求，凍干制劑加速試驗(yàn)條件為40℃/75%RH6個(gè)月。（√）解析：指南等同ICHQ5C，生物制品統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。42.采用CRISPR-Cas9進(jìn)行基因敲除時(shí)，雙鏈斷裂后NHEJ修復(fù)必然產(chǎn)生Indel突變。（×）解析：存在精確再連接可能，比例<5%。43.在單細(xì)胞測(cè)序中，使用UMI可完全消除PCR擴(kuò)增偏倚。（×）解析：UMI僅校正擴(kuò)增重復(fù)，無法消除逆轉(zhuǎn)錄效率差異。44.2025年《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)輸規(guī)范》允許基因編輯小鼠與野生型同籠運(yùn)輸，只要墊料充足。（×）解析：必須分籠，防止打斗與交叉污染。45.利用AAV遞送CRISPR組分時(shí)，將Cas9與sgRNA置于同一載體可提高編輯效率，但增加包裝難度。（√）解析：載體容量限制4.7kb，需優(yōu)化啟動(dòng)子與polyA。46.在微生物電合成中，陰極電位越負(fù)，乙酸產(chǎn)量一定越高。（×）解析：過負(fù)電位導(dǎo)致氫氣競(jìng)爭(zhēng)，降低法拉第效率。47.2025年《生物信息數(shù)據(jù)出境評(píng)估辦法》規(guī)定，匿名化的人類腸道菌群16S序列可自由出境。（√）解析：菌群序列不含宿主遺傳信息。48.采用納米孔測(cè)序可直接檢測(cè)DNA甲基化，無需亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化。（√）解析：甲基化影響電流信號(hào)，軟件可識(shí)別。49.在植物合成生物學(xué)中，將MVA途徑引入質(zhì)體可提高萜類產(chǎn)量，因?yàn)橘|(zhì)體含豐富IPP。（×）解析：質(zhì)體為MEP途徑，胞質(zhì)為MVA。50.2025年《細(xì)胞治療產(chǎn)品追溯管理規(guī)范》要求，每支制劑必須附電子追溯碼，但可不附紙質(zhì)說明書。（×）解析：紙質(zhì)說明書為強(qiáng)制要求。四、填空題（每空1分，共20分）51.2025年《基因編輯臨床試驗(yàn)申請(qǐng)資料》中，脫靶評(píng)估需采用_________算法進(jìn)行全基因組預(yù)測(cè)，并給出Top_________潛在位點(diǎn)列表。答案：CRISPRitz、10052.在單細(xì)胞ATAC-seq數(shù)據(jù)分析中，采用_________方法進(jìn)行雙胞去除，其原理基于_________分布異常。答案：DoubletFinder、條形碼53.采用_________技術(shù)可在活細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)可逆性CRISPR干擾，其原理將dCas9與_________結(jié)構(gòu)域融合。答案：CRISPRi、KRAB54.2025年《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑標(biāo)準(zhǔn)》要求，BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心工作間最小負(fù)壓梯度為_________Pa，排風(fēng)需經(jīng)_________級(jí)HEPA過濾。答案：-25、兩55.在微生物組研究中，采用_________指數(shù)評(píng)估α多樣性，其值等于_________。答案：Shannon、-∑pilnpi56.利用_________系統(tǒng)可在植物中實(shí)現(xiàn)多基因疊加，其重組位點(diǎn)為_________。答案：GoldenGate、BsaI57.2025年《體外診斷試劑性能評(píng)估指南》規(guī)定，腫瘤早篩試劑臨床靈敏度需≥_________%，特異度需≥_________%。答案：85、9558.在CAR-T細(xì)胞制備中，采用_________培養(yǎng)基可抑制分化，維持_________表型。答案：TexMACS、TSCM59.采用_________技術(shù)可在單分子水平檢測(cè)DNA-蛋白結(jié)合動(dòng)力學(xué)，其時(shí)間分辨率達(dá)_________ms。答案：光鑷、0.160.2025年《生物制造綠色評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)》將碳原子利用率≥_________%定義為一級(jí)綠色工藝，其計(jì)算式為_________。答案：70、（產(chǎn)物碳摩爾/底物碳摩爾）×100五、簡(jiǎn)答題（每題10分，共30分）61.簡(jiǎn)述2025年新版《基因治療制品質(zhì)量控制指南》對(duì)慢病毒載體復(fù)制型病毒（RCV）檢測(cè)的技術(shù)要求與改進(jìn)理由。答案：新版指南將RCV檢測(cè)靈敏度從10?TU提升至10?TU，采用數(shù)字PCR與細(xì)胞培養(yǎng)法聯(lián)合策略。技術(shù)層面，數(shù)字PCR使用FAM/VIC雙標(biāo)記探針，靶向ψ包裝信號(hào)與VSV-G基因，單反應(yīng)體系拆分20000微滴，降低假陰性；細(xì)胞培養(yǎng)法采用293T-EGFP報(bào)告細(xì)胞，連續(xù)傳代5代，每代取樣檢測(cè)，確保無延遲復(fù)制。改進(jìn)理由：①臨床出現(xiàn)1例RCV激活導(dǎo)致T細(xì)胞淋巴瘤事件，溯源發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)qPCR靈敏度不足；②高劑量CAR-T產(chǎn)品（>10?TU/劑）放大風(fēng)險(xiǎn)；③國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)議（ICH）Q5B修訂草案傾向更高標(biāo)準(zhǔn)；④數(shù)字PCR成本下降90%，具備普及條件。指南同時(shí)要求每批成品、上游收獲液、終末細(xì)胞庫三階段檢測(cè)，數(shù)據(jù)需上傳國(guó)家基因治療追溯平臺(tái)，未達(dá)標(biāo)批次強(qiáng)制銷毀。62.闡述利用CRISPRbaseeditor進(jìn)行體內(nèi)基因治療時(shí)，如何評(píng)估并降低RNA水平的脫靶編輯風(fēng)險(xiǎn)。答案：RNA脫靶主要由脫氨酶作用于轉(zhuǎn)錄本引起。評(píng)估策略：①體外轉(zhuǎn)錄組-wide脫氨測(cè)序（TWAS）：將純化APOBEC1或TadA8e與細(xì)胞總RNA共孵育，深度測(cè)序檢測(cè)C→U或A→I位點(diǎn)，計(jì)算脫氨率；②體內(nèi)RNA-seq：高劑量注射baseeditormRNA，48h后提取肝組織RNA，采用RADAR算法比對(duì)，設(shè)定閾值≥5%且reads≥10為陽性；③新開發(fā)dRNA-seq：利用抗體富集含肌苷RNA，靈敏度達(dá)0.01%。降低策略：①蛋白工程：將APOBEC1第90位谷氨酰胺突變?yōu)榫彼幔≦90R），降低RNA結(jié)合能力90%，保留DNA活性70%；②向?qū)NA優(yōu)化：縮短sgRNA至17nt，減少RNA結(jié)合能量；③瞬時(shí)表達(dá)：采用自降解mRNA（3′端引入四聯(lián)U），半衰期<6h；④組織特異性啟動(dòng)子：如TBG啟動(dòng)子限制肝表達(dá)，減少非靶組織暴露；⑤劑量遞減試驗(yàn)：非人靈長(zhǎng)類模型顯示，0.1mg/kg即可達(dá)到90%靶編輯，RNA脫靶降至背景；⑥長(zhǎng)期隨訪：指南要求觀察期≥5年，每6個(gè)月檢測(cè)肝腎功能、全血RNA-seq，發(fā)現(xiàn)異常立即干預(yù)。63.說明2025年《生物制造連續(xù)工藝驗(yàn)證指南》中，對(duì)微生物發(fā)酵連續(xù)生產(chǎn)重組蛋白的驗(yàn)證要點(diǎn)與監(jiān)管邏輯。答案：指南將連續(xù)工藝定義為≥21天不間斷運(yùn)行，驗(yàn)證要點(diǎn)：①細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性：采用全基因組重測(cè)序，每48h取樣，SNP/Indel頻率<0.1%，無大片段缺失；②代謝穩(wěn)定性：在線拉曼光譜監(jiān)測(cè)葡萄糖、乳酸、銨離子，RSD<5%；③產(chǎn)物質(zhì)量一致性：每12h取樣，SEC-HPLC單體含量≥95%，電荷異構(gòu)體分布RSD<3%；④生物負(fù)載與內(nèi)毒素：微濾-超濾組合，0.1μm除菌級(jí)濾器完整性試驗(yàn)每日進(jìn)行，內(nèi)毒素<0.25EU/mL；⑤清場(chǎng)驗(yàn)證：CIP/SIP循環(huán)后，總有機(jī)碳<1ppm，ATP生物發(fā)光<50RLU；⑥數(shù)據(jù)可靠性：采用區(qū)塊鏈時(shí)間戳，原始數(shù)據(jù)不可篡改；⑦監(jiān)管邏輯：由“批”轉(zhuǎn)向“流”，以實(shí)時(shí)放行（RTR）為核心，關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA）在線建模，F(xiàn)DA試點(diǎn)項(xiàng)目顯示檢查頻率下降50%，但需額外提交連續(xù)工藝風(fēng)險(xiǎn)分析（CPRA）文件，包括故障樹（FTA）與馬爾可夫失效模型，確保商業(yè)階段可追溯。六、案例分析題（共40分）64.案例背景：2025年6月，某生物公司申報(bào)一款“體內(nèi)CRISPR-Cas9基因編輯療法，用于治療遺傳性轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性（hATTR）。采用脂質(zhì)納米顆粒（LNP）遞送Cas9mRNA與靶向TTR的sgRNA，擬在肝細(xì)胞內(nèi)敲除TTR，降低致病蛋白。非臨床研究顯示，高劑量組（3mg/kg）出現(xiàn)肝酶升高、肝組織輕微空泡變性；猴模型6個(gè)月隨訪發(fā)現(xiàn)，1例雌性猴子宮內(nèi)膜出現(xiàn)低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定（MSI-L）。問題：（1）請(qǐng)從脫靶風(fēng)險(xiǎn)、免疫原性、生殖系穿越三方面，設(shè)計(jì)一套非臨床補(bǔ)充試驗(yàn)方案，并說明關(guān)鍵指標(biāo)與判據(jù)；（2）若臨床試驗(yàn)申請(qǐng)已受理，