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文檔簡(jiǎn)介
ICS65.020.30
CCSB43
15
內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)
DB15/T2508—2022
絨山羊鮮精稀釋液配方
Formulaofcashmeregoatsfreshsemendiluent
2022-01-25發(fā)布2022-02-25實(shí)施
內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布
DB15/T2508—2022
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAM/TC19)歸口。
本文件起草單位:內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、巴彥淖爾市農(nóng)牧科學(xué)研究所、鄂托克旗農(nóng)牧技術(shù)推
廣中心、阿拉善白絨山羊種羊場(chǎng)、內(nèi)蒙古億維白絨山羊有限責(zé)任公司、鄂爾多斯市立新實(shí)業(yè)有限公司。
本文件主要起草人:劉斌、馬躍軍、吳鐵成、特日格勒、王濤、趙若陽(yáng)、胥福勛、蘇日娜、烏蘭其
其格、王娜、高玉林、何云梅、李玉榮。
I
DB15/T2508—2022
絨山羊鮮精稀釋液配方
1范圍
本文件規(guī)定了絨山羊鮮精稀釋液配方的術(shù)語(yǔ)和定義,器械和藥品試劑,要求,稀釋液,稀釋,分裝
與標(biāo)記,保存、運(yùn)輸和檢查等技術(shù)內(nèi)容。
本文件適用于絨山羊人工授精的鮮精稀釋、保存及精液處理。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
NY/T2893絨山羊飼養(yǎng)管理技術(shù)規(guī)范
DB15/T2244.3絨山羊繁殖技術(shù)規(guī)范第3部分:人工授精
3術(shù)語(yǔ)和定義
下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。
原精originalsemen
采自絨山羊公羊未經(jīng)處理的精液。
鮮精freshsemen
原精稀釋后未經(jīng)冷凍的精液。
精子活力spermmotility
在37℃環(huán)境下前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子占總精子數(shù)的百分率。
精子密度spermdensity
每毫升精液中含有的精子數(shù)量。
1
DB15/T2508—2022
精子畸形率abnormalspermpercentage
畸形精子占總精子數(shù)的百分率。
4器械和藥品試劑
器械
電子天平(精度小于等于0.01g),普通生物顯微鏡,水浴鍋,羊用假陰道,開膣器,溫度計(jì),采
精架,輸精器,恒溫箱,燒杯,容量瓶(100ml),量筒,錐形瓶,玻璃漏斗,玻璃棒,鑷子。
藥品試劑
無(wú)水葡萄糖,檸檬酸鈉,乙二胺四乙酸(EDTA),蔗糖,青霉素,鏈霉素,新鮮雞蛋,生理鹽水,
蒸餾水,酒精,凡士林等,稀釋液基礎(chǔ)液所用試劑均為分析純。
消毒
根據(jù)材質(zhì)特點(diǎn),做好清洗、消毒、烘干處理,金屬及玻璃器械需進(jìn)行高溫消毒,假陰道內(nèi)胎清潔干
凈后用75%酒精棉球消毒、待酒精揮發(fā)完全后再用生理鹽水棉球擦拭備用。
5要求
供精種羊
體質(zhì)健康,無(wú)遺傳病,不允許有已發(fā)布的動(dòng)物防疫法中所明確的疾病,日常飼養(yǎng)管理按照NY/T2893
的規(guī)定。
采精季節(jié)
最優(yōu)的采精時(shí)間是8月下旬至11月下旬,也可在4月至5月。
精液品質(zhì)
按照DB15/T2244.3的相關(guān)要求進(jìn)行采精,精液品質(zhì)要求見附錄A。
6稀釋液
配方
配方參見附錄B。
配制
按稀釋液配方,配制100ml基礎(chǔ)液,過(guò)濾消毒后,加入新鮮卵黃、青霉素、鏈霉素并混勻。所有稀
釋液需現(xiàn)用現(xiàn)配。
標(biāo)記
2
DB15/T2508—2022
配制的稀釋液在使用前要標(biāo)記稀釋液配方代號(hào)、配制時(shí)間和配制人員。
保存
稀釋液冰箱4℃保存,超過(guò)有效貯存期的變質(zhì)稀釋液應(yīng)廢棄。
稀釋
6.5.1原精采集后應(yīng)盡快稀釋。
6.5.2稀釋倍數(shù)的確定:根據(jù)精子密度、活力,配種母羊數(shù)而定稀釋比例,稀釋后的精液,精子密度
大于等于6×108個(gè),精子活力大于等于65%。采用配方一,最大稀釋比例為2倍;采用配方二和配方
三,可以稀釋到5~15倍。
6.5.3稀釋液與原精要求等溫稀釋,以原精溫度為標(biāo)準(zhǔn),來(lái)調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,不能反過(guò)來(lái)操作。
6.5.4稀釋時(shí),將稀釋液沿盛精液的杯(瓶)壁緩慢加入到原精中,然后輕輕搖動(dòng)或用消毒玻璃棒攪拌,
使之混合均勻。
6.5.5如作高倍稀釋(10倍以上)時(shí),分兩步進(jìn)行,先加入稀釋液總量的1/3,混合均勻,靜置2min~
5min后再將余下的稀釋液沿壁緩慢加入,以防造成“稀釋打擊”。
6.5.6稀釋后靜置2min~5min再作精子活力檢查,檢查合格后,即可進(jìn)行分裝與保存。
6.5.7不同配方稀釋液不應(yīng)隨意混合使用。
7分裝與標(biāo)記
分裝
原精稀釋后采用試管等容器分裝,容器材質(zhì)應(yīng)對(duì)精子無(wú)害并經(jīng)清洗、干燥和滅菌處理,容器分裝精
液時(shí)應(yīng)與精液等溫。
標(biāo)記
原精稀釋、分裝后,標(biāo)明生產(chǎn)單位、品種、公羊號(hào)、生產(chǎn)日期、稀釋液配方代號(hào)和操作人。
8保存、運(yùn)輸及檢查
保存
鮮精用8~12層紗布包裹再置于0℃~5℃恒溫箱中存放,每隔8h,將精液重新輕輕混勻。
運(yùn)輸
運(yùn)輸過(guò)程中,將鮮精放置在0℃~5℃的恒溫箱中,避免劇烈震動(dòng)。
檢查
輸精前按照附錄A對(duì)鮮精進(jìn)行檢查,檢查合格后方可用于輸精。
3
DB15/T2508—2022
A
A
附錄A
(規(guī)范性)
絨山羊精液品質(zhì)評(píng)估方法
A.1原精量
用帶有刻度的集精杯直接讀取原精量。
A.2色澤
絨山羊的精液正常呈乳白色或淺乳黃色,如果顏色異常,應(yīng)該棄掉。
A.3精子密度
用血細(xì)胞計(jì)數(shù)法測(cè)定每毫升中精子數(shù)量,將20μL原精液用3%NaCl溶液稀釋100倍。在200倍鏡下
計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)室5個(gè)大方格(四個(gè)角和中間處)內(nèi)精子總數(shù)N,將該數(shù)乘以500萬(wàn),最終精子數(shù)等于5×106N個(gè)
/ml。精子密度大于等于6×108個(gè)/ml為合格。
A.4精子活力
用稀釋液將原精液加以稀釋,取一滴于載玻片上,蓋上蓋玻片,置于37℃顯微鏡恒溫臺(tái)上,在200~
400倍下觀察每個(gè)精液樣本3個(gè)視野下的運(yùn)動(dòng)狀態(tài),主觀評(píng)估范圍為0%~100%。精子活力大于等于65%
為合格。
A.5精子畸形率
將精液樣本用稀釋液稀釋100倍,取一滴制成抹片。自然干燥后,用95%的酒精固定3min,然后用
伊紅染色5min,再經(jīng)水洗,自然風(fēng)干后用相差顯微鏡觀察,計(jì)數(shù)200個(gè)精子計(jì)算出精子畸形率,精子畸
形率小于等于20%為合格。
4
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B
B
附錄B
(資料性)
稀釋液配方
稀釋液配方見表B.1。
表B.1稀釋液配方
成分配方一配方二配方三
基礎(chǔ)液
生理鹽水(ml)100
無(wú)水葡萄糖(g)3.03.0
檸檬酸鈉(g)1.41.4
EDTA(g)0.12
蔗糖(g)1.8
蒸餾水(ml)100100
稀釋液
基礎(chǔ)液(容量%)100100
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