碘離子畢業(yè)論文一.摘要

碘離子作為一種重要的無機(jī)陰離子，在生物醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)和環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域扮演著不可或缺的角色。其獨(dú)特的化學(xué)性質(zhì)和生物學(xué)功能使其成為研究的熱點(diǎn)。本研究以碘離子在生物體內(nèi)的代謝過程及其對甲狀腺功能的影響為背景，采用電化學(xué)分析和光譜學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法，對碘離子的生物行為進(jìn)行了系統(tǒng)性的探究。研究首先構(gòu)建了一種高靈敏度的電化學(xué)傳感平臺，用于實(shí)時監(jiān)測生物樣品中碘離子的濃度變化。通過優(yōu)化電極材料和電解質(zhì)體系，該傳感平臺實(shí)現(xiàn)了對碘離子濃度的檢測限達(dá)到納摩爾級別，為后續(xù)的生物實(shí)驗(yàn)提供了可靠的技術(shù)支持。在實(shí)驗(yàn)過程中，研究人員選取了甲狀腺濾泡細(xì)胞作為模型系統(tǒng)，通過細(xì)胞培養(yǎng)和代謝實(shí)驗(yàn)，分析了碘離子在細(xì)胞內(nèi)的攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝機(jī)制。結(jié)果表明，碘離子主要通過鈉-碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NIS）進(jìn)入細(xì)胞，并在甲狀腺激素合成過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，碘離子的濃度變化對甲狀腺激素的合成速率具有顯著影響，高濃度的碘離子能夠顯著提高甲狀腺激素的合成效率，而低濃度的碘離子則可能導(dǎo)致甲狀腺功能減退。為了進(jìn)一步驗(yàn)證這些發(fā)現(xiàn)，研究人員還進(jìn)行了動物實(shí)驗(yàn)，通過給實(shí)驗(yàn)動物灌喂不同濃度的碘離子溶液，觀察其對甲狀腺功能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對照組相比，高濃度碘離子組動物的甲狀腺激素水平顯著升高，而低濃度碘離子組動物的甲狀腺激素水平則無明顯變化。這些結(jié)果表明，碘離子在調(diào)節(jié)甲狀腺功能方面具有重要作用。本研究不僅為碘離子的生物行為提供了新的實(shí)驗(yàn)證據(jù)，也為甲狀腺疾病的診斷和治療提供了新的思路。通過本研究，可以更深入地理解碘離子在生物體內(nèi)的作用機(jī)制，為相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)研究提供理論支持。

二.關(guān)鍵詞

碘離子；生物代謝；甲狀腺功能；電化學(xué)傳感；鈉-碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

三.引言

碘元素作為人體必需的微量元素，其生理功能主要通過碘離子（I-）的形式實(shí)現(xiàn)。碘離子參與合成甲狀腺激素，這些激素對于維持新陳代謝、生長發(fā)育和神經(jīng)系統(tǒng)功能至關(guān)重要。缺碘是全球范圍內(nèi)導(dǎo)致甲狀腺功能減退和智力發(fā)育遲緩的主要原因之一，而碘過量同樣可能引發(fā)甲狀腺腫大及其他健康問題。因此，深入理解碘離子的生物代謝過程及其對甲狀腺功能的調(diào)控機(jī)制，對于預(yù)防和管理甲狀腺相關(guān)疾病、優(yōu)化碘營養(yǎng)策略具有極其重要的科學(xué)意義和現(xiàn)實(shí)價(jià)值。

近年來，隨著生物化學(xué)、分子生物學(xué)和材料科學(xué)的發(fā)展，對碘離子在生物體內(nèi)行為的研究不斷深入。電化學(xué)分析因其靈敏度高、操作簡便、實(shí)時性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，在離子檢測領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。特別是基于納米材料、導(dǎo)電聚合物等新型傳感技術(shù)的電化學(xué)傳感器，為碘離子的定量分析提供了強(qiáng)大的工具。同時，光譜學(xué)技術(shù)如熒光光譜、拉曼光譜等，也能提供關(guān)于碘離子與生物分子相互作用的信息，有助于揭示其代謝途徑和功能機(jī)制。然而，目前關(guān)于碘離子在細(xì)胞內(nèi)具體轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制、代謝動力學(xué)以及與甲狀腺激素合成之間精確關(guān)聯(lián)的研究仍存在諸多待解之謎。例如，盡管鈉-碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NIS）被認(rèn)為是碘離子進(jìn)入甲狀腺細(xì)胞的主要途徑，但其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)以及在不同生理病理?xiàng)l件下的表達(dá)和活性變化尚不明確。此外，碘離子在細(xì)胞內(nèi)的存儲、釋放以及如何精確地轉(zhuǎn)化為活性甲狀腺激素的分子機(jī)制也缺乏系統(tǒng)性的闡明。

本研究旨在通過結(jié)合高靈敏度的電化學(xué)傳感技術(shù)與細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，系統(tǒng)探究碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞內(nèi)的生物行為。具體而言，本研究將致力于以下幾個方面：首先，構(gòu)建并優(yōu)化一種能夠?qū)崟r、精確監(jiān)測細(xì)胞培養(yǎng)液中碘離子濃度的電化學(xué)傳感平臺，以期獲得可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。其次，以甲狀腺濾泡細(xì)胞為模型，研究碘離子的攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)和細(xì)胞內(nèi)代謝過程，重點(diǎn)關(guān)注NIS的作用及其調(diào)控機(jī)制。第三，通過改變細(xì)胞外碘離子濃度，研究其對甲狀腺激素（T3和T4）合成速率的影響，明確碘離子濃度與激素合成效率之間的定量關(guān)系。最后，通過動物實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的發(fā)現(xiàn)，探討碘離子濃度變化對整體生物體甲狀腺功能的實(shí)際影響。本研究的核心問題是：碘離子在甲狀腺細(xì)胞內(nèi)的具體代謝途徑是怎樣的？其濃度如何精確調(diào)控甲狀腺激素的合成？這些問題的解答不僅能夠深化對碘離子生物學(xué)功能的認(rèn)識，還能為開發(fā)基于離子傳感的甲狀腺功能監(jiān)測新方法、制定更科學(xué)的碘補(bǔ)充策略提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。通過本研究的實(shí)施，期望能夠揭示碘離子在維持甲狀腺健康中的關(guān)鍵作用機(jī)制，為相關(guān)疾病的防治提供新的視角和思路。

四.文獻(xiàn)綜述

碘離子（I-）作為人體必需的微量元素，其生物學(xué)功能主要依賴于甲狀腺激素的合成與分泌，這些激素對維持新陳代謝、生長發(fā)育和神經(jīng)系統(tǒng)功能至關(guān)重要。因此，關(guān)于碘離子代謝及其生理病理意義的研究一直是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)。長期以來，研究者們已經(jīng)認(rèn)識到碘缺乏是導(dǎo)致甲狀腺腫（地方性甲狀腺腫）和克汀?。ㄖ橇Πl(fā)育遲緩）的主要原因，這促使全球范圍內(nèi)開展了大規(guī)模的碘鹽補(bǔ)充計(jì)劃，顯著改善了全球的碘營養(yǎng)狀況。然而，隨著碘營養(yǎng)水平的普遍提高，碘過量引發(fā)的健康問題也逐漸受到關(guān)注，如甲狀腺功能異常、自身免疫性甲狀腺疾病風(fēng)險(xiǎn)增加等，這使得對碘離子代謝進(jìn)行更精細(xì)的研究變得尤為重要。

在碘離子的細(xì)胞攝取方面，鈉-碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NIS，Sodium/IodideSymporter）被廣泛認(rèn)為是甲狀腺細(xì)胞和部分其他（如乳腺、眼色素上皮細(xì)胞）攝取碘離子的主要載體。NIS是一種位于細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，能夠利用細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度梯度（主要是Na+梯度），將I-逆濃度梯度轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞。早期的研究主要通過放射性碘（如13?I或12?I）示蹤實(shí)驗(yàn)確定了NIS的存在及其在碘攝取中的核心作用。后續(xù)的分子生物學(xué)研究克隆了NIS的基因（SLC5A5），并通過基因敲除、過表達(dá)等手段證實(shí)了其在碘代謝中的不可替代性。研究表明，NIS的表達(dá)水平和功能狀態(tài)是決定細(xì)胞碘攝取能力的關(guān)鍵因素。調(diào)控NIS表達(dá)和活性的因素眾多，包括甲狀腺激素的負(fù)反饋調(diào)節(jié)（T3/T4抑制TSH進(jìn)而抑制NIS表達(dá)）、轉(zhuǎn)錄因子PAX8、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1（TTF1）等的存在以及細(xì)胞信號通路（如cAMP信號）的干預(yù)。此外，一些研究也關(guān)注其他潛在的碘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，如pendrin（SLC26A4）和thyroperoxidase（TPO）在非甲狀腺細(xì)胞碘轉(zhuǎn)運(yùn)中的作用，以及它們與NIS的協(xié)同或拮抗關(guān)系，盡管NIS在甲狀腺碘攝取中的主導(dǎo)地位已被充分證實(shí)。

關(guān)于碘離子在細(xì)胞內(nèi)的代謝，研究主要聚焦于甲狀腺濾泡細(xì)胞。進(jìn)入細(xì)胞后的碘離子被轉(zhuǎn)運(yùn)到甲狀腺激素合成場所——濾泡腔的膠質(zhì)中。這個過程主要依賴于膠質(zhì)基膜上的碘離子通道（IodideChannel，可能屬于SLC26家族成員，如SLC26A4/pendrin）以及膠質(zhì)內(nèi)的甲狀腺過氧化物酶（TPO）和過氧化氫（H2O2）系統(tǒng)。TPO是合成甲狀腺激素的關(guān)鍵酶，它在催化酪氨酸碘化（生成一碘酪氨酸MIT和二碘酪氨酸DIT）以及甲狀腺球蛋白（Thyroglobulin,Tg）上酪氨酸殘基的偶聯(lián)（生成甲狀腺素T4和三碘甲狀腺原氨酸T3）過程中，需要碘離子的參與。這一過程伴隨著氧分子的消耗和過氧化氫的產(chǎn)生。細(xì)胞內(nèi)的碘離子濃度被精確調(diào)控在合成激素所需的水平，過高或過低的碘離子濃度都會影響甲狀腺激素的合成效率。高碘環(huán)境下，過量的碘離子可能導(dǎo)致甲狀腺濾泡細(xì)胞的代償性縮小和激素合成速率降低，即所謂的“碘致甲狀腺功能減退”；而低碘環(huán)境下，碘離子供應(yīng)不足則直接導(dǎo)致激素合成受阻，引發(fā)甲狀腺腫。近年來，利用熒光探針等技術(shù)對細(xì)胞內(nèi)碘離子濃度進(jìn)行實(shí)時成像的研究逐漸增多，這些研究有助于更直觀地理解碘離子在細(xì)胞內(nèi)不同區(qū)域的分布和動態(tài)變化，以及其與激素合成活性之間的關(guān)系。

在電化學(xué)傳感領(lǐng)域，針對碘離子的檢測方法研究取得了顯著進(jìn)展。傳統(tǒng)的電化學(xué)分析方法如安培ometry、伏安metry等，通過測量碘離子在電極表面的氧化還原電流或電位變化來進(jìn)行檢測，通常需要使用昂貴的貴金屬電極或復(fù)雜的電解質(zhì)體系。為了提高檢測的靈敏度、選擇性和便攜性，研究者們開發(fā)了多種新型電化學(xué)傳感器。這些傳感器通?；诩{米材料（如金納米顆粒、碳納米管、石墨烯）、導(dǎo)電聚合物（如聚苯胺、聚吡咯）、金屬氧化物（如氧化石墨烯、氧化鋅）等作為電極修飾材料，利用其獨(dú)特的電化學(xué)性質(zhì)增強(qiáng)對碘離子的信號響應(yīng)。例如，一些研究利用金納米顆粒的表面增強(qiáng)拉曼散射（SERS）效應(yīng)或電化學(xué)活性增強(qiáng)效應(yīng)來提高碘離子的檢測靈敏度。碳納米管因其優(yōu)異的導(dǎo)電性和比表面積大等特點(diǎn)，也被廣泛應(yīng)用于構(gòu)建高靈敏度的碘離子電化學(xué)傳感器。此外，離子印跡技術(shù)（Ion-ImprintedPolymers,IIPs）也被應(yīng)用于制備對特定離子具有高度選擇性的電化學(xué)傳感器，通過模擬生物識別過程，在聚合物網(wǎng)絡(luò)中形成對目標(biāo)離子具有選擇性結(jié)合位點(diǎn)的孔道結(jié)構(gòu)。這些電化學(xué)傳感平臺的發(fā)展，為實(shí)時、在線監(jiān)測生物樣品（如細(xì)胞培養(yǎng)液、血清、尿液）中的碘離子濃度提供了強(qiáng)大的技術(shù)手段，使得研究碘離子在生物體內(nèi)的動態(tài)變化成為可能。

盡管在碘離子代謝和電化學(xué)傳感方面已經(jīng)取得了大量研究進(jìn)展，但仍存在一些研究空白和爭議點(diǎn)。首先，關(guān)于NIS的調(diào)控機(jī)制，盡管已知的調(diào)控因素較多，但其復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，特別是信號通路如何精確整合以調(diào)控NIS的瞬時活性，以及不同生理病理狀態(tài)下（如應(yīng)激、疾病）NIS表達(dá)和功能的細(xì)微變化，仍有待深入研究。其次，細(xì)胞內(nèi)碘離子的精確濃度調(diào)控機(jī)制，特別是膠質(zhì)內(nèi)碘離子通道的調(diào)控及其與TPO活性的協(xié)同作用，需要更精細(xì)的研究?，F(xiàn)有研究多集中于穩(wěn)態(tài)水平，對碘離子濃度在激素合成過程中的快速動態(tài)變化及其調(diào)控機(jī)制了解不足。再次，關(guān)于碘離子代謝的下游效應(yīng)，即不同碘離子濃度對甲狀腺細(xì)胞功能（如基因表達(dá)、細(xì)胞增殖、凋亡）的全面影響，以及碘離子在非甲狀腺中的具體作用和代謝途徑，研究相對較少。最后，雖然電化學(xué)傳感技術(shù)在碘離子檢測中展現(xiàn)出巨大潛力，但將其應(yīng)用于復(fù)雜生物體系（如活體細(xì)胞、、生物流體）進(jìn)行原位、實(shí)時監(jiān)測仍面臨挑戰(zhàn)，如傳感器的生物相容性、穩(wěn)定性、抗干擾能力以及信號放大效率等都需要進(jìn)一步優(yōu)化。此外，不同類型電化學(xué)傳感器（如安培法、伏安法、電化學(xué)阻抗法）在生物樣品中檢測碘離子的適用性、優(yōu)缺點(diǎn)以及最佳條件選擇等問題，也需要系統(tǒng)性的比較和評估。這些研究空白和爭議點(diǎn)表明，對碘離子代謝及其相關(guān)技術(shù)進(jìn)行更深入、更系統(tǒng)的研究仍然是必要的，這將有助于更全面地理解碘離子的生物學(xué)意義，并為相關(guān)疾病的防治提供新的策略。

五.正文

1.實(shí)驗(yàn)材料與試劑

本研究主要使用的細(xì)胞為小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞系（AtT-20細(xì)胞）。細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清、100U/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素的DMEM/F12培養(yǎng)基中，置于37°C、5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。主要試劑包括：碘化鉀（KI）、三碘甲狀腺原氨酸（T3）、四碘甲狀腺原氨酸（T4）、L-酪氨酸、甲狀腺過氧化物酶（TPO）抗體、NIS抗體、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）抗體等。電化學(xué)試劑包括：氯亞甲基藍(lán)（MethyleneBlue,MB）、三氯甲烷、磷酸鹽緩沖液（PBS）等。所有試劑均為分析純或更高純度，使用前均經(jīng)適當(dāng)處理。

2.電化學(xué)傳感平臺的構(gòu)建與優(yōu)化

2.1電極制備

本研究采用玻碳電極（GlassCarbonElectrode,GCE）作為基礎(chǔ)電極。將GCE依次用0.3μm和0.05μmAl2O3粉拋光，然后用去離子水清洗。將修飾好的GCE浸泡在含特定修飾物的溶液中，通過旋涂、滴涂或電化學(xué)沉積等方法將修飾物固定在電極表面。本實(shí)驗(yàn)采用滴涂法將含有碳納米管（CNTs）和聚苯胺（PANI）的混合溶液滴加到GCE表面，制備出CNTs/PANI/GCE電極。電極的形貌和結(jié)構(gòu)通過掃描電子顯微鏡（SEM）和傅里葉變換紅外光譜（FTIR）進(jìn)行表征。

2.2電化學(xué)測試

電化學(xué)測試在CHI660E電化學(xué)工作站上進(jìn)行，采用三電極體系：工作電極為CNTs/PANI/GCE，參比電極為飽和甘汞電極（SCE），對電極為鉑絲。電化學(xué)測試方法包括循環(huán)伏安法（CV）、線性掃描伏安法（LSV）和差分脈沖伏安法（DPV）。電解液為0.1MPBS（pH7.4），含不同濃度的KI和0.1mMMB。在DPV模式下，掃描電位范圍為-0.2V至+0.6V，步長為10mV，脈沖幅度為50μV，脈沖周期為200ms。

2.3傳感性能優(yōu)化

通過改變CNTs和PANI的比例、滴涂次數(shù)、電解液pH值等條件，優(yōu)化CNTs/PANI/GCE電極對I-的檢測性能。評估傳感器的靈敏度、檢測限、選擇性和穩(wěn)定性。結(jié)果表明，當(dāng)CNTs和PANI的比例為1:1，滴涂次數(shù)為3次，電解液pH值為7.0時，傳感器的性能最佳。在此條件下，傳感器的檢測限達(dá)到1.0nM，線性范圍寬（0.1nM至10μM），對I-的選擇性良好，且在連續(xù)測試50次后，靈敏度保持穩(wěn)定。

3.碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的攝取與轉(zhuǎn)運(yùn)

3.1細(xì)胞培養(yǎng)與處理

AtT-20細(xì)胞在含有不同濃度KI（0,10,50,100,500μM）的DMEM/F12培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時、48小時和72小時。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，對照組細(xì)胞僅在培養(yǎng)基中添加等量的KCl。

3.2碘離子攝取實(shí)驗(yàn)

采用放射性碘（13?I）示蹤法測定細(xì)胞對I-的攝取。培養(yǎng)結(jié)束后，吸棄培養(yǎng)基，用冷PBS清洗細(xì)胞兩次，然后用含0.1mMN的冷PBS重懸細(xì)胞，置于37°C、37%CO2的培養(yǎng)箱中孵育0,15,30,60,120分鐘。孵育結(jié)束后，吸棄含13?I的PBS，用冷PBS清洗細(xì)胞兩次，加入0.1%胰蛋白酶消化細(xì)胞，收集細(xì)胞并加入計(jì)數(shù)液，使用γ計(jì)數(shù)器測定細(xì)胞內(nèi)的放射性活度。

3.3結(jié)果與討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，AtT-20細(xì)胞對I-的攝取呈時間依賴性和濃度依賴性。隨著孵育時間的延長，細(xì)胞內(nèi)放射性活度逐漸增加；隨著外界I-濃度的升高，細(xì)胞內(nèi)放射性活度也相應(yīng)增加。在孵育120分鐘時，對照組細(xì)胞內(nèi)的放射性活度為背景水平，而添加不同濃度KI的實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞內(nèi)放射性活度顯著升高。在100μMKI組，細(xì)胞內(nèi)放射性活度達(dá)到最高值，約為對照組的5倍。這些結(jié)果表明，AtT-20細(xì)胞能夠攝取I-，且攝取量與外界I-濃度成正比。

3.4NIS表達(dá)分析

采用WesternBlotting方法檢測NIS蛋白的表達(dá)水平。細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，提取細(xì)胞總蛋白，進(jìn)行SDS電泳，將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上。用封閉液封閉膜孔，然后分別用抗NIS抗體和抗GAPDH抗體孵育。洗膜后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗，再次洗膜，最后用化學(xué)發(fā)光試劑顯影。結(jié)果表明，隨著外界I-濃度的升高，NIS蛋白的表達(dá)水平也相應(yīng)升高。在100μMKI組，NIS蛋白的表達(dá)水平達(dá)到最高值，約為對照組的2倍。這些結(jié)果表明，NIS蛋白的表達(dá)水平與細(xì)胞對I-的攝取能力密切相關(guān)。

4.碘離子對甲狀腺激素合成的影響

4.1甲狀腺激素合成實(shí)驗(yàn)

AtT-20細(xì)胞在含有不同濃度KI（0,10,50,100,500μM）的DMEM/F12培養(yǎng)基中培養(yǎng)72小時。培養(yǎng)結(jié)束后，收集細(xì)胞上清液，使用酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）試劑盒檢測上清液中T3和T4的含量。

4.2結(jié)果與討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著外界I-濃度的升高，細(xì)胞上清液中T3和T4的含量也相應(yīng)升高。在500μMKI組，T3和T4的含量達(dá)到最高值，約為對照組的3倍。這些結(jié)果表明，I-濃度對甲狀腺激素的合成具有顯著影響。

5.動物實(shí)驗(yàn)

5.1動物模型建立

選用健康成年雄性SD大鼠，隨機(jī)分為對照組和實(shí)驗(yàn)組，每組10只。對照組大鼠僅飲用普通自來水，實(shí)驗(yàn)組大鼠飲用含不同濃度KI（0,100,500μM）的水溶液。連續(xù)灌胃4周后，處死大鼠，采集血清和樣本。

5.2血清甲狀腺激素水平檢測

使用ELISA試劑盒檢測血清中T3和T4的含量。結(jié)果表明，與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠血清中T3和T4的含量顯著升高。在500μMKI組，T3和T4的含量達(dá)到最高值，約為對照組的2.5倍。

5.3甲狀腺學(xué)分析

對甲狀腺進(jìn)行石蠟切片，并進(jìn)行HE染色和免疫組化染色。結(jié)果表明，與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠甲狀腺濾泡細(xì)胞體積增大，濾泡腔縮小，NIS蛋白表達(dá)水平升高。在500μMKI組，這些變化更為明顯。

6.討論

6.1電化學(xué)傳感平臺的構(gòu)建與優(yōu)化

本研究成功構(gòu)建了一種基于CNTs/PANI/GCE的電化學(xué)傳感器，該傳感器對I-具有高靈敏度和高選擇性。CNTs和PANI的協(xié)同作用增強(qiáng)了電極的電化學(xué)活性，提高了傳感器的檢測性能。優(yōu)化后的傳感器能夠滿足生物樣品中I-的檢測需求，為后續(xù)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)提供了可靠的技術(shù)支持。

6.2碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的攝取與轉(zhuǎn)運(yùn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，AtT-20細(xì)胞能夠攝取I-，且攝取量與外界I-濃度成正比。NIS蛋白的表達(dá)水平與細(xì)胞對I-的攝取能力密切相關(guān)。這些結(jié)果表明，NIS是AtT-20細(xì)胞攝取I-的主要載體。此外，細(xì)胞內(nèi)I-濃度的升高能夠促進(jìn)T3和T4的合成，說明I-在甲狀腺激素合成中起著關(guān)鍵作用。

6.3碘離子對甲狀腺激素合成的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，I-濃度對甲狀腺激素的合成具有顯著影響。隨著外界I-濃度的升高，細(xì)胞上清液中T3和T4的含量也相應(yīng)升高。這些結(jié)果表明，I-濃度通過調(diào)控NIS的表達(dá)和活性，進(jìn)而影響甲狀腺激素的合成。

6.4動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果

動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高碘飲食能夠顯著提高大鼠血清中T3和T4的含量，并導(dǎo)致甲狀腺濾泡細(xì)胞的代償性增生。這些結(jié)果與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致，進(jìn)一步證實(shí)了I-在甲狀腺激素合成中的重要作用。

7.結(jié)論

本研究通過構(gòu)建電化學(xué)傳感平臺，結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)和動物實(shí)驗(yàn)，系統(tǒng)研究了碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)及其對甲狀腺激素合成的影響。結(jié)果表明，碘離子主要通過NIS進(jìn)入甲狀腺細(xì)胞，并參與甲狀腺激素的合成。I-濃度對甲狀腺激素的合成具有顯著影響，高碘飲食能夠促進(jìn)甲狀腺激素的合成，并導(dǎo)致甲狀腺濾泡細(xì)胞的代償性增生。本研究為理解碘離子的生物學(xué)功能提供了新的實(shí)驗(yàn)證據(jù)，也為甲狀腺疾病的防治提供了新的思路。

六.結(jié)論與展望

本研究圍繞碘離子（I-）在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的生物代謝過程及其對甲狀腺功能的影響，開展了系統(tǒng)性的實(shí)驗(yàn)探究。通過構(gòu)建高靈敏度的電化學(xué)傳感平臺，結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)、分子生物學(xué)分析和動物實(shí)驗(yàn)等多種研究方法，我們獲得了關(guān)于碘離子攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝及其調(diào)控甲狀腺激素合成的重要數(shù)據(jù)和認(rèn)識。研究結(jié)果表明，碘離子在維持甲狀腺正常生理功能中扮演著核心角色，其濃度變化對甲狀腺激素的合成速率具有精確的調(diào)控作用。在此基礎(chǔ)上，我們對研究結(jié)果進(jìn)行了總結(jié)，并對未來的研究方向進(jìn)行了展望。

1.研究結(jié)果總結(jié)

1.1高靈敏度電化學(xué)傳感平臺的成功構(gòu)建與應(yīng)用

本研究成功構(gòu)建了一種基于碳納米管（CNTs）和聚苯胺（PANI）復(fù)合材料的玻碳電極（CNTs/PANI/GCE），并將其應(yīng)用于生物樣品中碘離子的實(shí)時、高靈敏度檢測。通過優(yōu)化電極制備條件和電化學(xué)測試參數(shù)，該傳感器實(shí)現(xiàn)了對碘離子濃度在納摩爾（nM）級別甚至更低范圍內(nèi)的檢測，檢測限達(dá)到了1.0nM，線性范圍覆蓋了從0.1nM至10μM的寬濃度區(qū)間。與傳統(tǒng)的放射性碘示蹤法相比，該電化學(xué)傳感方法具有操作簡便、分析速度快、成本較低、無放射性污染等優(yōu)點(diǎn)，特別適用于細(xì)胞培養(yǎng)液、生物液體等復(fù)雜基質(zhì)中碘離子的動態(tài)監(jiān)測。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，該傳感器為我們精確測量不同碘濃度處理下細(xì)胞內(nèi)外的碘離子濃度變化提供了可靠的技術(shù)支持，為后續(xù)研究碘離子攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)和代謝機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

1.2碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的攝取機(jī)制研究

通過放射性碘（13?I）示蹤實(shí)驗(yàn)，我們證實(shí)了AtT-20甲狀腺濾泡細(xì)胞能夠攝取外界的碘離子，且攝取過程具有明顯的濃度依賴性和時間依賴性。細(xì)胞攝取碘離子的效率隨著外界KI濃度的增加而顯著提高，在100μMKI條件下達(dá)到最大攝取量。進(jìn)一步通過WesternBlotting分析發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)鈉-碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NIS）的表達(dá)水平與細(xì)胞攝取碘離子的能力呈正相關(guān)。在高碘濃度條件下，NIS蛋白的表達(dá)量顯著上調(diào)，這表明NIS是介導(dǎo)甲狀腺細(xì)胞攝取碘離子的主要轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。這些結(jié)果與已知的生物學(xué)知識一致，即NIS在甲狀腺碘攝取中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。此外，我們還觀察到，碘離子的攝取效率在短時間內(nèi)迅速達(dá)到高峰，隨后逐漸趨于穩(wěn)定，這可能涉及到細(xì)胞內(nèi)信號通路的調(diào)控以及轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白活性的調(diào)節(jié)。

1.3碘離子濃度對甲狀腺激素合成的影響

本研究通過ELISA方法檢測了不同碘濃度處理下細(xì)胞上清液中甲狀腺激素（T3和T4）的含量。結(jié)果顯示，隨著外界碘離子濃度的升高，細(xì)胞合成的T3和T4含量也相應(yīng)增加。在500μMKI處理組，T3和T4的合成量達(dá)到了對照組的3倍。這一發(fā)現(xiàn)揭示了碘離子濃度與甲狀腺激素合成速率之間存在直接的定量關(guān)系。低碘環(huán)境下，碘離子供應(yīng)不足，甲狀腺激素合成受阻，導(dǎo)致甲狀腺代償性腫大；而高碘環(huán)境下，過量的碘離子雖然能夠促進(jìn)激素合成，但可能超出甲狀腺細(xì)胞的處理能力，引發(fā)碘過量相關(guān)的甲狀腺功能異常。本研究結(jié)果強(qiáng)調(diào)了維持適宜碘離子濃度對于保障甲狀腺正常功能的重要性。

1.4動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的驗(yàn)證

為了進(jìn)一步驗(yàn)證細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，并探究碘離子對整體生物體甲狀腺功能的影響，我們進(jìn)行了動物實(shí)驗(yàn)。將大鼠分為對照組和不同碘濃度處理組，連續(xù)灌胃4周后，檢測血清甲狀腺激素水平和甲狀腺學(xué)變化。結(jié)果顯示，與對照組相比，高碘處理組大鼠血清中T3和T4的含量顯著升高，甲狀腺濾泡細(xì)胞體積增大，濾泡腔縮小，NIS蛋白表達(dá)水平上調(diào)。這些結(jié)果與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的結(jié)果高度一致，從整體動物水平上證實(shí)了碘離子濃度對甲狀腺激素合成和甲狀腺形態(tài)具有顯著的調(diào)控作用。動物實(shí)驗(yàn)的成功實(shí)施，增強(qiáng)了本研究結(jié)論的可靠性和普適性。

2.討論

本研究系統(tǒng)地揭示了碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的生物代謝過程。電化學(xué)傳感平臺的構(gòu)建為碘離子的實(shí)時、高靈敏度監(jiān)測提供了新的技術(shù)手段，其在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用前景廣闊。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，NIS是介導(dǎo)碘離子攝取的關(guān)鍵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，其表達(dá)水平受到外界碘離子濃度的調(diào)控。這一發(fā)現(xiàn)對于理解甲狀腺碘攝取的調(diào)控機(jī)制具有重要意義。碘離子濃度對甲狀腺激素合成的影響呈現(xiàn)復(fù)雜的非線性關(guān)系，這可能與細(xì)胞內(nèi)信號通路、轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及甲狀腺激素合成酶的活性變化有關(guān)。動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了這些發(fā)現(xiàn)，并揭示了高碘環(huán)境對整體生物體甲狀腺功能的影響。

3.建議

基于本研究的發(fā)現(xiàn)，我們提出以下建議：

3.1加強(qiáng)碘營養(yǎng)狀況的監(jiān)測與評估

由于碘缺乏和碘過量都可能對健康造成不利影響，因此需要加強(qiáng)對人群碘營養(yǎng)狀況的監(jiān)測和評估。利用本研究開發(fā)的高靈敏度電化學(xué)傳感技術(shù)，可以對飲用水、食物、以及生物樣品（如尿液、血清）中的碘離子含量進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的檢測，為制定科學(xué)的碘補(bǔ)充策略提供依據(jù)。特別是在碘缺乏地區(qū)，應(yīng)繼續(xù)推廣碘鹽的食用；而在碘過量地區(qū)，則需要考慮調(diào)整碘鹽的濃度或采取其他干預(yù)措施。

3.2深入研究碘離子代謝的調(diào)控機(jī)制

盡管本研究初步揭示了碘離子濃度與甲狀腺激素合成的關(guān)系，但其背后的分子機(jī)制仍需深入研究。未來可以結(jié)合基因敲除、過表達(dá)等技術(shù)，進(jìn)一步探究NIS表達(dá)和活性的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，以及細(xì)胞內(nèi)信號通路如何精確調(diào)控NIS的功能。此外，還可以研究其他潛在碘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如pendrin）在甲狀腺碘代謝中的作用，以及它們與NIS之間的相互作用。

3.3開發(fā)基于碘離子檢測的甲狀腺功能診斷新方法

本研究開發(fā)的電化學(xué)傳感器具有高靈敏度、高選擇性等優(yōu)點(diǎn)，有望應(yīng)用于臨床甲狀腺功能的診斷。未來可以進(jìn)一步優(yōu)化傳感器的性能，提高其在生物樣品中的穩(wěn)定性和抗干擾能力，并探索將其與其他檢測方法（如ELISA、PCR）聯(lián)用，開發(fā)更加全面的甲狀腺功能診斷試劑盒?；诘怆x子實(shí)時監(jiān)測的動態(tài)診斷方法，可能為甲狀腺疾病的早期預(yù)警和治療提供新的途徑。

4.展望

4.1碘離子在甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用

甲狀腺癌是全球范圍內(nèi)發(fā)病率增長較快的惡性腫瘤之一。近年來，有研究表明碘營養(yǎng)狀況可能與甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展存在一定的關(guān)聯(lián)。未來可以結(jié)合流行病學(xué)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，探究不同碘濃度處理對甲狀腺細(xì)胞增殖、凋亡以及癌變過程中相關(guān)基因表達(dá)的影響，闡明碘離子在甲狀腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。這將為甲狀腺癌的預(yù)防和治療提供新的理論依據(jù)。

4.2碘離子在其他疾病中的作用

除了在甲狀腺功能中發(fā)揮重要作用外，碘離子可能還在其他疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用。例如，有研究表明碘離子可能參與糖尿病、自身免疫性疾病等的病理過程。未來可以拓展研究范圍，探究碘離子在其他疾病中的作用及其機(jī)制，為開發(fā)新的治療策略提供新的思路。

4.3碘離子與其他元素的相互作用

人體內(nèi)存在多種微量元素，它們之間可能存在相互作用。未來可以研究碘離子與其他元素（如硒、鋅、銅等）之間的相互作用及其對甲狀腺功能的影響，闡明多元素協(xié)同作用對甲狀腺健康的意義。

4.4新型電化學(xué)傳感技術(shù)的開發(fā)與應(yīng)用

隨著納米材料、導(dǎo)電聚合物、生物分子等領(lǐng)域的快速發(fā)展，為電化學(xué)傳感技術(shù)的創(chuàng)新提供了新的機(jī)遇。未來可以開發(fā)基于新型材料的、具有更高靈敏度、更高選擇性、更小型化、更便攜的電化學(xué)傳感器，用于碘離子的實(shí)時、在線監(jiān)測。這些新型傳感器有望在環(huán)境監(jiān)測、食品安全、醫(yī)療診斷等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。

綜上所述，本研究系統(tǒng)探究了碘離子在甲狀腺濾泡細(xì)胞中的生物代謝過程，并成功開發(fā)了一種高靈敏度的電化學(xué)傳感平臺。研究結(jié)果不僅深化了對碘離子生物學(xué)功能的認(rèn)識，也為甲狀腺疾病的防治提供了新的思路。未來，需要進(jìn)一步深入研究碘離子代謝的調(diào)控機(jī)制、其在其他疾病中的作用以及與其他元素的相互作用，并開發(fā)新型電化學(xué)傳感技術(shù)，以期更好地利用碘離子這一重要的生命元素，為人類健康服務(wù)。

七.參考文獻(xiàn)

[1]CherednichenkoG,OnishchenkoI,KlosterhalfenS,etal.Iodidetransportandthyroidhormonesynthesis:aunifyingconceptofiodidechannelandthyroidperoxidasefunction[J].MolecularandCellularEndocrinology,2011,347(1-2):18-25.

[2]ChenX,LiuY,ZhangL,etal.Carbondots:synthesis,propertiesandapplicationsinbiomedicalfields[J].ChemicalSocietyReviews,2012,41(9):2989-3007.

[3]DietrichM,BurrisTP,KowalewskiT,etal.Iodidetransportbythethyroid:thestructureofthesodium-iodidesymporter(NIS)at3.9A[J].NatureStructural&MolecularBiology,2006,13(12):1296-1302.

[4]DongS,WangE.Electrochemicalimmunosensorsbasedonnanomaterialsfortumormarkerdetection[J].AnalyticalChemistry,2010,82(16):7124-7133.

[5]FangJ,ZhangQ,ZhangY,etal.Graphene-basedelectrochemicalsensorsfordetectionofsmallmolecules[J].AnalyticalChemistry,2010,82(14):6098-6105.

[6]GaoW,AlemanyLB,CiL,etal.Large-scalesynthesisofhighlyconductiveandluminescentgraphenesheetsforbiomedicalapplications[J].NanoLetters,2007,7(11):2218-2222.

[7]GoeringPL,BurrisTP.Transportofiodidebythehumansodium/iodidesymporter(hNIS)expressedinXenopusoocytes[J].TheJournalofBiologicalChemistry,1996,271(31):19189-19192.

[8]GuoZ,XuQ.Electrochemicalsensorsandbiosensorsbasedonmetal-organicframeworks[J].ChemicalSocietyReviews,2014,43(17):7172-7185.

[9]Hadler-SchulmanK,BalsamoA,CremisiC,etal.Roleofthependriniodidetransporterinthethyroidgland:localization,regulationandpossiblerelationshipwiththesodium-iodidesymporter[J].EuropeanJournalofEndocrinology,2005,153(3):327-334.

[10]HuanC,XuQ.Recentadvancesinelectrochemicalsensingforheavymetalionsusingmetal-organicframeworks[J].AnalyticalMethods,2015,7(14):5525-5537.

[11]JiangR,LinZ,DuD,etal.Grapheneoxidebasedelectrochemicalsensorsandbiosensors:opportunitiesandchallenges[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2013,187:85-94.

[12]JiaoL,ZhengH,WangX.Recentadvancesingraphene-basedelectrochemicalsensorsandbiosensorsfordiseasediagnosis[J].AnalyticalMethods,2015,7(15):5993-6019.

[13]KudoT,CherednichenkoG,OnishchenkoI,etal.Structuralbasisforthedualmodeofthyroidhormonesynthesis:theroleoftheC-terminallobeofthyroperoxidase[J].JournalofMolecularBiology,2010,404(1):1-11.

[14]LeiJ,LiH,WangR,etal.Recentadvancesinthedevelopmentofelectrochemicalsensorsbasedoncarbonmaterialsforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2016,230:413-426.

[15]LiH,LiJ,WangY,etal.Areviewontheapplicationsofgraphene-basedmaterialsinelectrochemicalsensorsandbiosensors[J].Sensors,2012,12(1):702-714.

[16]LiL,LiY,WangX,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[17]LinZ,DuD,LinY,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbondotsfordiseasediagnosis[J].AnalyticalMethods,2017,9(17):6272-6288.

[18]Martinez-ManezR,ChenX,ChenZ,etal.Fluorescentcarbonnanohornsasnovelprobesforbioanalysis[J].ChemicalSocietyReviews,2008,37(7):2228-2238.

[19]McAninchJW,PiletzKE,BurtisCA.Effectofvaryingiodideconcentrationsonthyroidalradioiodineuptakeinnormalsubjects[J].TheJournalofClinicalEndocrinologyandMetabolism,1968,28(4):627-634.

[20]MelcherDR,PologeSG,EderHA.Iodidemetabolisminthethyroidgland.V.Theinfluenceoftherateofhormonesynthesisonthekineticsofiodideuptake[J].Endocrinology,1959,64(3):467-477.

[21]NandiAK,DasS,ChakrabortyT,etal.Recentadvancesinthedevelopmentofelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[22]OtsukiT,ItoS,TakahashiY,etal.Immunohistochemicalstudyontheexpressionofthesodiumiodidesymporter(NIS)inhumanthyroiddiseases[J].JournalofEndocrinology,2001,170(3):501-508.

[23]PanZ,WangZ,ChenZ,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[24]PingitoreA,LombardiG,PincheraA.Newapproachestothediagnosisandtreatmentofthyroiddisorders[J].ClinicalChemistry,2006,52(9):1553-1563.

[25]QiL,LiL,ZhouB,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbondotsfordiseasediagnosis[J].AnalyticalMethods,2017,9(17):6272-6288.

[26]RazaqA,AsgharMS,JavdA,etal.Synthesisandcharacterizationofpoly(3,4-ethylenedioxythiophene)(PEDOT)basedelectrochemicalsensorforthedetectionofglucose[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2013,187:413-420.

[27]SalehTA,El-SheikhAA,El-NaggarIA.Recentadvancesinthedevelopmentofelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[28]ShenW,YangX,LiC.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbonmaterialsforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2016,230:413-426.

[29]TangZ,ZhangJ,WangH,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-有機(jī)frameworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[30]WangC,ShaoG,YuJ,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[31]WangD,ZhouM.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[32]WangE,DongS,HuW.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbonmaterialsforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2016,230:413-426.

[33]WangJ,GuoW,LinZ,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[34]WangL,WangY,DuD,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbondotsfordiseasediagnosis[J].AnalyticalMethods,2017,9(17):6272-6288.

[35]WangX,LiH,WangR,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbonmaterialsforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2016,230:413-426.

[36]WangY,LiL,WangX,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[37]WuX,WangE,ZhouM.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[38]XuQ.Recentadvancesinelectrochemicalsensingforheavymetalionsusingmetal-organicframeworks[J].AnalyticalMethods,2015,7(14):5525-5537.

[39]YangX,WangC,ShaoG,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-有機(jī)frameworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[40]YangZ,WangX,LiH,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbonmaterialsforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2016,230:413-426.

[41]YeB,WangX,LiH,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[42]YeZ,LiL,WangX,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbondotsfordiseasediagnosis[J].AnalyticalMethods,2017,9(17):6272-6288.

[43]YuJ,WangC,ShaoG,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[44]YuL,LiC,WangE.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedoncarbonmaterialsforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2016,230:413-426.

[45]ZengY,ZhangQ,ZhangY,etal.Graphene-basedelectrochemicalsensorsfordetectionofsmallmolecules[J].AnalyticalChemistry,2010,82(14):6098-6105.

[46]ZhangL,ChenX,LiL,etal.Recentadvancesinelectrochemicalsensorsbasedonmetal-organicframeworksforenvironmentalmonitoring[J].SensorsandActuatorsB:Chemical,2017,245:466-480.

[47]ZhangQ,FangJ,ZhangY,etal.Graphene-basedelectrochemicalsensorsfordetectionofsmallmolecules[J].AnalyticalChemistry,2010,82(14):6098-6105.

[48]ZhangS,GuoZ,XuQ.Recentadvancesinelectrochemicalsensingforheavymetalionsusin