ICS65.020.20

B0505B

DB45

廣西壯族自治區(qū)地方標準

DBDB1659—201745/T

何首烏組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程何首烏組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationsforforregulationsTechnicalofseedingculturetissuemultiflorFallopiaa

2017-12-30發(fā)布2018-01-30實施

廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB45/T1659DB45/T—2017

前前言

本標準按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標準按照GB/T

本標準由廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。

本標準起草單位：廣西作物遺傳改良生物技術(shù)重點開放實驗室。

本標準主要起草人：曾文丹、嚴華兵、陸柳英、謝向譽、肖亮、賴大欣。

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何首烏組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程何首烏組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

11范圍

本標準規(guī)定了何首烏組培苗生產(chǎn)的組織培養(yǎng)、組培苗移栽、苗期管理和出圃等技術(shù)內(nèi)容。

本標準適用于廣西境內(nèi)何首烏組培苗生產(chǎn)。

22組織培養(yǎng)

2.12.1培養(yǎng)基配制及滅菌

各階段培養(yǎng)基配方參見附錄A。滅菌溫度為121℃，滅菌時間為22min。

2.22.2外植體

2.2.12.2.1母本圃種植

將優(yōu)良種源種植在溫室內(nèi)，加強肥水管理，確保植株健壯。

2.2.22.2.2外植體的采集

宜選擇連續(xù)2d以上的晴天上午進行。從健康植株上選擇生長健壯、無病蟲害的優(yōu)良單株幼嫩莖段，

用消毒的枝剪去除葉片后剪成帶一個芽的單芽莖段。

2.2.32.2.3外植體表面滅菌

2.2.3.12.2.3.1預(yù)處理

將帶芽莖段放入加有0.2％洗潔精的溶液中浸泡并振蕩5min～10min，用軟毛刷清洗表面污垢，在

流水中沖洗30min～60min后備用。

2.2.3.22.2.3.2消毒處理

在超凈工作臺上，將已清洗干凈的外植體轉(zhuǎn)移至無菌培養(yǎng)瓶中，倒入75％酒精使之沒過外植體，并

輕輕震蕩15s～30s后將酒精倒去，用無菌水沖洗3～5次。隨后，用0.1％升汞溶液浸泡處理6min～8min，

并輕搖以除去外植體表面氣泡，倒出升汞后用無菌水沖洗4～5次，用無菌濾紙吸干外植體表面水分后待

用。

2.32.3初代培養(yǎng)

在超凈工作臺上，將表面滅菌處理的單芽莖段接入初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。培養(yǎng)周期為45d～55d。

培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度為23℃～25℃，光照強度為1500lx～2000lx，光周期14h～16h。

2.42.4增殖培養(yǎng)

在超凈工作臺上，將初代培養(yǎng)的無菌苗切成單芽莖段轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。培養(yǎng)周期為

30d～35d。培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)。

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2.52.5壯苗生根培養(yǎng)

在超凈工作臺上，將繼代增殖培養(yǎng)的不定芽切成單芽莖段轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)周期

為25d～30d。培養(yǎng)條件同初代培養(yǎng)。

33組培苗移栽

3.13.1煉苗

生根培養(yǎng)25d～30d后，將株高3cm～5cm、生長健壯、根系發(fā)達的無污染瓶苗從培養(yǎng)室移入溫室，

煉苗3d～5d，去除瓶蓋后再煉苗1d～2d。

3.23.2清洗

用鑷子將小苗夾出，用清水洗去生根苗根部的培養(yǎng)基，置于0.05％高錳酸鉀溶液浸泡1min～2min

或50％多菌靈可濕性粉劑800～1000倍溶液浸泡8min～10min。

3.33.3移栽

3.3.13.3.1時間

以春季3～4月為宜。

3.3.23.3.2基質(zhì)

以泥炭土：珍珠巖：黃土體積比為2:2:1的基質(zhì)為宜。組培苗移栽前24h～48h用0.5％高錳酸鉀溶

液對移栽基質(zhì)進行消毒。

3.3.33.3.3移植

將清洗干凈的組培苗移栽于盛滿基質(zhì)并消毒的15cm×15cm塑料營養(yǎng)缽中，每一個營養(yǎng)缽種植1株，

種植后澆透定根水。

44苗期管理

組培苗移栽2～3周內(nèi)宜用薄膜小拱棚保濕，相對濕度控制在80％～90％，光照控制在5000lx～

10000lx。4周后逐漸打開薄膜，并增大光照強度。移栽15d～20d后，每隔10d～15d淋濕或噴濕尿素，

噴施濃度以0.2％～0.5％為宜。

55出圃

5.15.1出圃苗要求

苗高15cm～25cm，葉片5～10片，根長3cm以上，苗木完整，長勢好、葉色深綠、無病害。

5.25.2苗木運輸

運輸苗木時，用塑料筐或泡沫箱成捆裝箱，勿擠壓。

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AA

附附錄A

（資料性附錄）（資料性附錄）

培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配方

A.1A.1培養(yǎng)基配方

A.1.1A.1.1初代培養(yǎng)基配方

MS＋0.02BAmg0.02AA/L＋Nmg/30L＋蔗糖g/L＋6.0g/L瓊脂，pH5.8～6.0。

A.1.2A.1.2繼代增殖培養(yǎng)基配方

MS＋2.00BAmg0.02AA/L＋Nmg/30L＋蔗糖g/L＋6.0g/L瓊脂，pH5.8～6.0。

A.1.3A.1.3生根培養(yǎng)基配方

MS＋N1/20.1AAmg/30L＋蔗糖g/L＋6.0g/L瓊脂，pH5.8～6.0。

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