ICS65.020.20

CCSB05

23

黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB23/T3111—2022

大豆抗灰斑病盆栽鑒定技術(shù)規(guī)程

Technicalspecificationfortheresistanceidentificationofsoybeancultivarsagainst

Cercosporasojinainpots

2022-03-03發(fā)布2022-04-02實施

黑龍江省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB23/T3111—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由黑龍江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。

本文件起草單位：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院大豆研究所、黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所、黑龍江

省植檢植保站

本文件主要起草人：張瑞萍、王家軍、高明杰、張必弦、于鎮(zhèn)華、張武、欒曉燕、李寶英、王廣金、

韓新春、何雯瑾、唐曉飛、王雪揚、劉鑫磊、任洪雷、張豐屹、李鵬、吳黎

I

DB23/T3111—2022

大豆抗灰斑病盆栽鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大豆灰斑病盆栽抗性鑒定技術(shù)的術(shù)語和定義、大豆灰斑菌的繁殖、盆栽抗性鑒定、病

情調(diào)查及記載、抗性評價和試驗檔案等。

本文件適用于栽培大豆種質(zhì)資源和野生大豆種質(zhì)資源對灰斑病盆栽抗性評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T3114.2大豆抗病蟲性鑒定技術(shù)規(guī)范第2部分

3術(shù)語和定義

NY/T3114.2界定的術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

菌種純化

挑取大豆灰斑病菌的單個分生孢子，將其放置于新鮮的PDA平板上，以獲得新生菌落的方法。

3.2

活化培養(yǎng)

將中、長期低溫保存的大豆灰斑病菌菌種，重新在新鮮PDA平板上培養(yǎng)的過程。

3.3

菌種擴繁

將活化的大豆灰斑病菌菌種接種在新鮮的高粱粒培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得大量分生孢子的過程。

3.4

鑒定圃

按完全隨機區(qū)組排列的供試大豆種質(zhì)的盆栽試驗小區(qū)。

4大豆灰斑病菌的繁殖

4.1菌種活化

1

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取4℃下保存的供試大豆灰斑病菌生理小種菌株，用接種針挑取小塊菌體至新鮮PDA平板上，25℃培

養(yǎng)7d～10d，備用。

4.2菌種擴繁

取活化培養(yǎng)的大豆灰斑病菌菌塊（一級培養(yǎng)），移接于滅菌的高梁粒培養(yǎng)基上，25℃～28℃暗培養(yǎng)，

每間隔2d充分晃動高粱粒接種瓶，保證每個高粱粒均被感染。15d～20d后洗去高粱粒表面的菌絲，陰

干后裝入布袋通風(fēng)干燥處保存?zhèn)溆谩?/p>

5盆栽抗性鑒定

5.1鑒定場地的設(shè)施條件

溫室、盆栽場地或人工氣候室應(yīng)具有可控灌溉、光照和通風(fēng)的條件。

5.2鑒定圃的試驗設(shè)計

供試大豆種質(zhì)設(shè)接種處理和未接種處理，每處理3次重復(fù)，完全隨機區(qū)組排列，并使用當(dāng)?shù)赜写?/p>

性的抗、感大豆品種作對照。

5.3播種

播種時間根據(jù)試驗需要而定，采用人工點播，株距3～5cm，盆栽盆宜選用口徑30cm、桶深30cm的盆

缽，每盆播種3～5株，或根據(jù)實際盆缽大小，每處理保苗至少10株。

5.4接種

5.4.1孢子懸浮液制備

取陰干保存的二級菌種，用無菌水浸泡2h～3h后，洗凈高粱粒表面的菌絲體，將其置于鋪有滅菌

濾紙的托盤中攤平，覆6層無菌紗布，噴灑無菌水保濕，25℃下培養(yǎng)48h。待高粱粒表面長出灰黑色分生

孢子后，用無菌水沖洗，再用4層紗布過濾得孢子懸浮液，配制成濃度為1.0×105個/mL的分生孢子懸浮

液，添加3%蔗糖粉（增強孢子懸浮液的附著性）充分混勻，用于噴霧接種。

5.4.2接種時期與方法

在大豆花前期至花初期，選擇陰天或無風(fēng)天的傍晚，用配制好的孢子懸浮液噴灑葉面1～2次，時間

間隔為7d～10d，噴霧量以在葉片上形成均勻分布霧滴為宜。

5.5接種前后管理

接種前6h對盆栽苗灑水澆透，沖去葉片表面灰塵，接種后立即遮陰48h～72h。

6病情調(diào)查及記載

6.1調(diào)查時間

感病對照的葉片充分顯癥后（接種14d左右），調(diào)查并記載葉部發(fā)病情況。

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6.2調(diào)查方法

根據(jù)大豆灰斑病病情分級標(biāo)準(zhǔn)，調(diào)查每份大豆種質(zhì)全部植株的全部葉片發(fā)病情況，記載病情級別，

計算病情指數(shù)(DI)。

病情指數(shù)(DI)=各級病株數(shù)相應(yīng)的發(fā)病級別/調(diào)查總株數(shù)最大級別

大豆灰斑病病情分級標(biāo)準(zhǔn)：0級：免疫，葉部無病斑；1級：病斑面積1%以下；3級：病斑面積1%～

5%；5級：病斑面積6%～20%；7級：病斑面積21%～50%；9級：病斑面積51%以上。

6.3發(fā)病率記載

每一份大豆種質(zhì)隨機調(diào)查50片葉，計數(shù)發(fā)病葉片數(shù)，并計算發(fā)病率，公式如下：

發(fā)病率（）（發(fā)病葉片數(shù)調(diào)查總?cè)~片數(shù)）

7抗性評價

7.1鑒定有效性判別

當(dāng)鑒定圃中的感病/高感對照品種發(fā)病率達到60%以上，該批次抗灰斑病鑒定視為有效。

7.2重復(fù)鑒定

初次鑒定中表現(xiàn)為高抗、中抗的大豆種質(zhì)，應(yīng)用相同的病原菌進行重復(fù)鑒定。

7.3抗性評價標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)調(diào)查結(jié)果，計算病情指數(shù)，并根據(jù)病情指數(shù)進行大豆種質(zhì)的抗病性評價（表1）。

表1大豆對灰斑病抗性評價標(biāo)準(zhǔn)

病情指數(shù)(DI)抗性評價

－免疫Immune（I）

≤20%高抗HighlyResistant（HR）

21%～40%抗病Resistant（R）

41%～60%中抗Moderatelyresistant（MR）

61%～80%感病Susceptible（S）

＞80%