ICS65.020.01

CCSB20

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB15/T2665—2022

苜蓿草240小時(shí)體外消化率的測定

Determinationof240hourinvitrodigestibilityofalfalfa

2022-07-15發(fā)布2022-08-15實(shí)施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T2665—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SAM/TC19）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳綜合保障中心、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，蒙草生態(tài)環(huán)境

（集團(tuán)）股份有限公司、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)、內(nèi)蒙古自治區(qū)質(zhì)量和標(biāo)準(zhǔn)化研究院、呼和浩特市農(nóng)牧局綜合

保障中心、呼和浩特市農(nóng)牧技術(shù)推廣中心、呼和浩特市農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全中心、巴彥淖爾市畜牧業(yè)服務(wù)

中心、呼和浩特市農(nóng)牧業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊(duì)、土默特左旗農(nóng)牧業(yè)綜合服務(wù)保障中心。

本文件主要起草人：張福勝、金鹿、李勝利、張崇志、吳昊、畢超、張春華、桑丹、珊丹、郭大偉、

劉芳、張洋、胡曉曉、薩初拉、劉威、李長勝、寶華、楊鼎、張躍華、付強(qiáng)、王志軍、康長清、趙晨宇、

張麗平、王芳。

I

DB15/T2665—2022

苜蓿草240小時(shí)體外消化率的測定

1范圍

本文件規(guī)定了苜蓿草240小時(shí)體外消化率的測定方法。

本文件適用于不同生長期、不同品種的苜蓿草產(chǎn)品。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T3358.1統(tǒng)計(jì)學(xué)詞匯及符號(hào)第1部分：一般統(tǒng)計(jì)術(shù)語與用于概率的術(shù)語

GB/T6682-2008分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T14699.1飼料采樣

GB/T20195動(dòng)物飼料試樣的制備

DB15/T1583牧草中aNDFom的測定

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

中性洗滌纖維neutraldetergentfiber

用中性洗滌劑去除飼草中的脂肪、淀粉、蛋白質(zhì)和糖類等成分后，殘留的不溶解物質(zhì)的總稱。

苜蓿中性洗滌纖維體外降解率thedegradabilityofneutraldetergentfiberofalfalfa

invitro

瘤胃液體外降解的苜蓿中中性洗滌纖維含量占苜蓿原樣中中性洗滌纖維含量的百分比。

4試劑和溶液

如無特別說明，所用試劑均為分析純。

本文件所用水，應(yīng)符合GB/T6682-2008中三級(jí)水要求。

丙酮（100%）。

緩沖液A：將10.00g磷酸氫二鉀、0.50g七水硫酸鎂、0.50g氯化鈉、0.10g二水氯化鈣和

0.50g尿素加入到1000mL的容量瓶中，用蒸餾水定容。

1

DB15/T2665—2022

緩沖液B：將15.00g碳酸鈉和1.00g九水硫化鈉加入到1000mL的容量瓶中，用蒸餾水定容。

3%十二烷基硫酸鈉（中性洗滌劑）溶液：稱取18.60g乙二胺四乙酸二鈉和6.80g四硼酸鈉加入

到100mL燒杯中，加少量水加熱溶解后，再加入30.00g十二烷基硫酸鈉和20mL乙二醇乙醚。稱取

4.65g無水磷酸氫二鈉，置于另一燒杯中，加少量水，微微加熱溶解后倒入第一個(gè)燒杯中，稀釋至1000

mL。

5儀器和設(shè)備

實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)或研缽。

瘤胃液取樣器（長30cm，內(nèi)徑12.70mm，PPR管）。

分析天平（分度值0.0001g）。

烘干箱（室溫～300℃）。

磁力攪拌器（轉(zhuǎn)速為100r/min～1400r/min）。

纖維袋（ANKOMF57，25μm孔隙）。

封口機(jī)。

體外模擬培養(yǎng)箱（ANKOMDAISYⅡ型，美國）。

纖維分析儀（ANKOM220P，美國）。

量筒（100mL和1000mL）。

6樣品

取樣

按GB/T14699.1要求進(jìn)行采樣。

制備

樣品按GB/T20195的要求制備，置于烘箱內(nèi)于65℃烘干，研磨，過1mm篩后取篩下物。

7分析步驟

瘤胃液的制備

在晨飼前經(jīng)瘤胃瘺管利用瘤胃液取樣器采集體況健康的供試牛的瘤胃液，轉(zhuǎn)入預(yù)熱至39℃的保溫

容器中，混合均勻后經(jīng)4層紗布過濾，濾液持續(xù)通入CO2氣體，然后量取試驗(yàn)所需量的瘤胃液保溫備用。

體外消化步驟

7.2.1消化

稱取0.5000g樣品放置于纖維袋中，封口后平鋪放置于體外模擬培養(yǎng)箱中消化罐的分隔板兩側(cè)。取

兩個(gè)容器分別加入266mL緩沖液B和1330mL緩沖液A，于39℃條件下調(diào)節(jié)其pH達(dá)到6.80。于每個(gè)消化罐

中加入1600mL混合緩沖溶液后放置于體外模擬培養(yǎng)箱中，打開加熱和轉(zhuǎn)動(dòng)開關(guān)，使消化罐的溫度在20

min～30min內(nèi)達(dá)到平衡。取出消化罐加入提前預(yù)處理好的400mL瘤胃液，持續(xù)通入CO2然后蓋緊蓋子，

置于體外模擬培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)240h。

7.2.2洗滌

2

DB15/T2665—2022

培養(yǎng)完畢后取出消化罐倒掉液體，再將纖維袋取出，用流動(dòng)的自來水沖洗干凈。

7.2.3干燥

將纖維袋置于105℃烘箱中烘干6h，放入干燥器中冷卻30min后，稱重。然后再烘干30min，再

冷卻稱重，直至兩次稱量之差小于0.0020g為恒重。

中性洗滌纖維含量的測定

原樣樣品和殘?jiān)鼧悠分兄行韵礈炖w維含量按照DB15/T1583的規(guī)定進(jìn)行。

8結(jié)果計(jì)算

樣品中中性洗滌纖維含量按式（1）計(jì)算。

W?W

Y=32100………（1）

W1

式中：

Y——樣品中中性洗滌纖維的含量，單位為百分比(%)；

W3——洗滌后樣品和纖維袋的重量，單位為克（g）；

W2——纖維袋的重量，單位為克（g）；

W1——樣品的重量，單位為克（g）。

樣品中中性洗滌纖維體外降解率按式（2）計(jì)算。

W?W

Z=45100………（2）

W4

式中：

Z——樣品在240h時(shí)間點(diǎn)的中性洗滌纖維瘤胃液體外降解率，單位為百分比(%)；

W4——樣品中中性洗滌纖維的重量，單位為克（g）；

W5——經(jīng)過240h體外降解后殘?jiān)鼧悠分兄行韵礈炖w維的重量，單位為克（g）。

結(jié)果表示

取兩次測定結(jié)果的算數(shù)平均值，計(jì)算結(jié)果保留2位小數(shù)點(diǎn)。

不同苜蓿草NDF240h體外降解率的測定結(jié)果見附錄A。

重復(fù)性

按照GB/T3358.1的要求，在重復(fù)條件下同一樣品同時(shí)兩次平行測定所得結(jié)果相對(duì)相差小于等于10%。

3

DB15/T2665—2022

A

A

附錄A

（資料性）

苜蓿草NDF240h體外降解率的測定結(jié)果

苜蓿草NDF240h體外降解率的測定結(jié)果見表A.1。

表A.1苜蓿草NDF240h體外降解率的測定結(jié)果

DMNDF

采樣地點(diǎn)品種茬次NDFD(%NDF)uNDF(%NDF)

（%）（%）

呼倫貝爾農(nóng)墾三生產(chǎn)隊(duì)紫花苜蓿三茬95.8969.6750.5549.45

呼倫貝爾謝爾塔拉農(nóng)場雜花苜蓿三茬95.3836.8669.2930.71

呼倫貝爾牙克石農(nóng)墾雜花苜蓿三茬94.9963.6758.6341.37

呼和浩特市雜花苜蓿返青期96.7136.8681.0918.91

呼和浩特市黃花苜蓿返青期95.6432.2072.7527.25

達(dá)拉特旗紫花苜蓿二茬96.2262.1054.7845.22

烏審旗毛烏素基地龍牧801二茬93.8554.5258.2041.80

烏審旗毛烏素基地中苜3號(hào)二茬93.3852.9353.4846.52

烏審旗毛烏素基地草原3號(hào)二茬94.7958.0252.5947.41

烏審旗毛烏素基地中苜2號(hào)二茬96.0657.2654.3145.69

阿魯科爾沁旗康賽三茬93.9246.1755.5144.49

阿魯科爾沁旗WL2981162三茬94.8545.3857.9342.07

阿魯科爾沁旗WL343HQ三茬96.4845.1262.7037.30

阿魯科爾沁旗WL319HQ三茬96.7645.39