ICS65.020CCSB3043CodeofpracticeforavianleukemiaeradicationinbreedingchickenfaIDB43/T2966—2024前言 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 14基本要求 15凈化流程 16凈化周期 37凈化效果評估 38無害化處理 39檔案記錄 4附錄A（規(guī)范性）禽白血病凈化評估 5參考文獻 6DB43/T2966—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由湖南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本文件由湖南省農(nóng)業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：湖南省畜牧獸醫(yī)研究所、湖南省動物疫病預防控制中心、湖南生物機電職業(yè)技術(shù)學院、常德市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局、長沙市望城區(qū)動物疫病預防控制中心、永州職業(yè)技術(shù)學院、湘西州畜牧水產(chǎn)事務中心、張家界市永定區(qū)畜牧水產(chǎn)事務中心、零陵區(qū)動物疫病預防控制中心。本文件主要起草人：王慧、楊俊、劉俊琦、杜麗飛、王紅兵、彭苗苗、陳一峰、張潔、趙小剛、馮小花、朱立軍、宋武、周望平、范仲鑫、楊佳亮、文星星、賈偉華、隋國光、于桂陽、黃祥元、秦茂、涂雷、周卓燦、周衛(wèi)國、王靜、陳立軍。DB43/T2966—20241種雞場禽白血病凈化技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了種雞場禽白血病凈化的基本要求、凈化流程、凈化周期、凈化效果評估、無害化處理和檔案記錄等技術(shù)要求。本文件適用于種雞場禽白血病凈化。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T26436禽白血病診斷技術(shù)GB/T36873原種雞群禽白血病凈化檢測規(guī)程NY/T680禽白血病病毒p27抗原酶聯(lián)免疫吸附試驗方法3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。禽白血病凈化avianleukemiaeradication在特定場群或區(qū)域內(nèi)，進行持續(xù)監(jiān)測發(fā)現(xiàn)禽白血病患病種雞或帶毒種雞，并通過淘汰、無害化處理等措施，實現(xiàn)清除禽白血病的過程。禽白血病病毒p27抗原avianleukosisvirusp27antigen禽白血病病毒基因組中核衣殼蛋白基因編碼的群特異性抗原。4基本要求4.1生物安全要求4.1.1選址應符合種雞場選址要求。4.1.2場區(qū)布局應分區(qū)，分為生產(chǎn)區(qū)、管理區(qū)、隔離區(qū)、無害化處理區(qū)、污糞處理區(qū)、生活區(qū)等。4.1.3制定完整的生物安全管理制度。4.2疫苗及免疫操作要求4.2.1凈化雞群使用的弱毒疫苗，按批次依照GB/T26436規(guī)定的檢測方法進行病原檢測。4.2.2免疫接種應做好消毒措施，避免交叉污染。5凈化流程2DB43/T2966—20245.1本底調(diào)查與評估5.1.1本底調(diào)查以10%的比例取雛雞胎糞樣品和公、母雞泄殖腔拭子樣本或血清，按GB/T36873的規(guī)定檢測胎糞和泄殖腔拭子禽白血病抗原，采用A、B和J亞群抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測試劑盒檢測血清禽白血病抗體。5.1.2評估根據(jù)本底調(diào)查結(jié)果，初步評估其群體健康狀況和陽性率，制定凈化方案。5.2出殼雛雞胎糞的檢測與淘汰5.2.1孵化要求將作好標記的種蛋置于經(jīng)清洗和消毒后的孵化器中孵化，孵化至18d，轉(zhuǎn)移至經(jīng)清洗和消毒后的出雛器中出雛，同一母雞的種蛋需置于相互隔離的同一孵化器和出雛器中，并作好記號,以防孵化過程中橫向傳播。5.2.2采樣與檢測胎糞樣品的采集、處理與檢測參考GB/T36873的規(guī)定。檢測時限應控制在采樣后24h以內(nèi)完成。5.2.3淘汰禽白血病抗原陽性的雛雞，連同同一只母雞的所有雛雞一起做淘汰處理。同一公雞有2只或以上母雞的后代禽白血病抗原陽性雛雞，則該公雞及與其配種的所有母雞的后代一同淘汰。其他陰性雛雞維持小群隔離飼養(yǎng)。5.3育雛后期的檢測與淘汰5.3.1采樣與檢測5周齡～6周齡的后備種雞，每只雞無菌采集抗凝血，按照GB/T26436的規(guī)定程序接種DF-1細胞進行病毒分離，培養(yǎng)9d后取細胞培養(yǎng)上清液，按照GB/T36873的規(guī)定檢測禽白血病病毒p27抗原。5.3.2淘汰檢測為陽性的雞淘汰，陰性雞維持小群隔離飼養(yǎng)。5.4留種雞開產(chǎn)初期的檢測與淘汰5.4.1母雞采樣與檢測分別采集每只母雞開產(chǎn)后的初產(chǎn)蛋2枚～3枚的蛋清，按照NY/T680的規(guī)定檢測禽白血病病毒p27抗原。5.4.2公雞采樣與檢測公雞分別采集抗凝血和精液同時接種DF-1細胞，按照GB/T36873的規(guī)定方法進行禽白血病病毒分離鑒定。5.4.3淘汰DB43/T2966—20243檢測為陽性的初產(chǎn)蛋對應的母雞，以及抗凝血和精液雞任何一方為陽性的公雞均應及時淘汰，不再作為育種選育個體，對檢測為陰性的選留后備種雞，繼續(xù)維持小群隔離飼養(yǎng)。5.5留種前的檢測與淘汰5.5.1采樣與檢測取每只母雞所產(chǎn)種蛋2枚～3枚采集蛋清，檢測方法見5.4.1；公雞檢測方法見5.4.2。5.5.2淘汰檢測為陽性的雞應及時淘汰，不再作為育種選育個體。對檢測為陰性的選留后備種雞，繼續(xù)維持小群隔離飼養(yǎng)。5.6種蛋的選留與孵化按5.1～5.4規(guī)程淘汰所有陽性雞后，每只母雞僅選用1只檢測為陰性的公雞的精液進行人工受精或自然受精。按照育種規(guī)定時間收集種蛋并做好標記。將每只母雞的種蛋分別置于相應母雞標號的專用孵化器中，隔離出雛。5.7不同世代的持續(xù)檢測經(jīng)檢測合格的種蛋孵出的雛雞作為凈化后第二世代雞，繼續(xù)按5.1～5.5規(guī)定的程序?qū)嵤┑诙来臋z測和凈化。后續(xù)世代按此規(guī)程繼續(xù)循環(huán)進行，直至評估達到附錄A規(guī)定的凈化評估標準。5.8.1應從符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定且無禽白血病病毒感染的種雞場引種，優(yōu)先考慮從國家級禽白血病凈化場引種。5.8.2應要求供應商提供引種相關(guān)種雞群的禽白血病病毒血清抗體檢測報告和留種孵化前所產(chǎn)種蛋的蛋清抗原檢測報告，同時對引入的種雞、后備雞、使用的種蛋應進行白血病病原、抗體檢測。5.8.3對引入的種雞應在獨立的隔離舍中實行隔離，只有在臨床健康和白血病陰性時，才準許進入生產(chǎn)線。6凈化周期凈化時可根據(jù)種雞場所處育種時期，對照5.1～5.5的任何一個時間節(jié)點啟動凈化程序。不同種雞場可根據(jù)其技術(shù)條件分別選擇5.1～5.5的任何一個時間節(jié)點進行檢測，經(jīng)一個凈化周期檢測陰性種雞群的后代作為凈化后下一個世代雞，可繼續(xù)循環(huán)5.1～5.5的程序進行不斷凈化，直至達到附錄A規(guī)定的凈化評估標準。7凈化效果評估凈化效果評估應符合附錄A的規(guī)定。8無害化處理禽白血病病原陽性淘汰雞按照《病死及病害動物無害化處理技術(shù)規(guī)范》的規(guī)定處理。DB43/T2966—202449檔案記錄種雞場每個周期凈化數(shù)據(jù)和每批雞養(yǎng)殖檔案記錄應歸檔保存。記錄檔案保存至少3年。DB43/T2966—20245禽白血病凈化評估A.1凈化評估標準同時滿足以下要求，視為達到凈化標準：a)種雞群抽檢，禽白血病病原學檢測均為陰性；b)連續(xù)2年以上無臨床病例；c)現(xiàn)場綜合審查通過。A.2抽樣檢測方法按照表A.1的抽樣檢測方法進行。表A.1凈化評估抽樣檢測方法病毒分離（DF-1細A.3結(jié)果判定p27抗原檢測全部為陰性，實驗室檢測通過。p27抗原檢測陽性率高于1%，實驗室檢測不通過。檢出p27抗原陽性且陽性率1%以內(nèi)，采用病毒分離進行復測，病毒分離全部為陰性，實驗室檢測通過，病毒分離出現(xiàn)陽性，實驗室檢測不通過。DB43/T2966—20246參考文獻