ICS67.050

CCSB04

2204

遼源市地方標準

DB22/T6-2022

雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留的測定

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

Determinationofeightquinolonesresiduesineggpowderbyliquidchromatography-

massspectrometry/massspectrometry

2022-12-26發(fā)布2023-01-26實施

遼源市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB2204/T6—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。

本文件由遼源市食品質(zhì)量安全檢測中心提出，由遼源市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本文件起草單位:遼源市食品質(zhì)量安全檢測中心、長春海關(guān)技術(shù)中心、長春市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院。

本文件主要起草人:張威、胡婷婷、秦培余、陳露、隋佳琪、王銀月。

本文件主要參編人:王振雷、姜珊、孫舒、宋清蓮、李燕鷺、王巖、陸鳴、宮世平、張鳳棟、姚心

茹、姜爽。

I

DB2204/T6—2022

雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留的測定

液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法

1范圍

本文件規(guī)定了雞蛋粉中8種喹諾酮類藥物殘留液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法的原理、試劑和材料、

儀器設(shè)備、試驗步驟、試驗數(shù)據(jù)處理、精密度。

本文件適用于雞蛋粉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、沙拉沙

星、依諾沙星等8種喹諾酮藥物的測定。

本方法雞蛋粉中恩諾沙星、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、沙拉沙星、依

諾沙星等8種喹諾酮藥物的檢出限為1.0μg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。凡是注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4檢驗原理

試樣中的喹諾酮類藥物用2%甲酸-乙腈提取，經(jīng)QuEChERSSPE凈化管凈化，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜

儀測定，外標法定量。

5試劑和材料

除另有規(guī)定，僅用分析純試劑。

5.1水，符合GB/T6682規(guī)定的一級水。

5.28種喹諾酮類藥物混合標準物質(zhì):恩諾沙星CAS號:93106-60-6、環(huán)丙沙星CAS號:85721-33-1、諾

氟沙星CAS號:70458-96-7、培氟沙星CAS號:6159-55-3、沙拉沙星CAS號:98105-99-8、洛美沙星CAS

號:98079-51-7、依諾沙星CAS號:74011-58-8、氧氟沙星CAS號:82419-36-1。（純度≥95%）

5.3乙腈（CH3CN）:色譜純。

5.4甲酸（HCOOH）:優(yōu)級純。

5.5甲醇（CH3OH）:色譜純。

5.62%甲酸-乙腈溶液:量取2mL甲酸（5.4）和98mL乙腈（5.3），混勻備用。

1

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5.70.1%甲酸-水溶液:量取1mL甲酸（5.4）和999mL水（5.1），混勻備用。

5.80.1%甲酸-乙腈溶液:量取1mL甲酸（5.4）和999mL乙腈（5.3），混勻備用。

5.90.1%甲酸-水溶液+0.1%甲酸-乙腈溶液（9+1）:量取90mL0.1%甲酸-水溶液（5.7）和10mL

0.1%甲酸-乙腈溶液（5.8），混勻備用。

5.10混合標準儲備液:準確量取8種喹諾酮類藥物混合標準品（5.2）1.0mL，用乙腈（5.3）溶解并

定容于100mL棕色容量瓶中，配制成濃度為1.0μg/mL的混合標準儲備液，4℃條件下可使用3個

月。

5.11混合標準工作液:將8種喹諾酮類藥物混合標準儲備液（5.10）用乙腈（5.3）稀釋，配置適用濃

度的混合標準工作液?，F(xiàn)用現(xiàn)配。

5.12濾膜:0.22μm，有機系。

5.13QuEChERSSPE凈化管。

6儀器設(shè)備

6.1液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀:配備電噴霧離子源（ESI）。

6.2天平:感量為0.01g和0.0001g。

6.3高速離心機:6000r/min。

6.4超聲波清洗機。

6.5渦旋混合器。

6.6氮吹儀。

7試驗步驟

7.1提取

稱取2g（精確至0.01g）雞蛋粉樣品于50mL具塞離心管中，加入10mL2%甲酸-乙腈溶液

（5.6）渦旋30s，超聲提取10min后，于6000r/min離心10min，上清液待凈化。

7.2凈化

取上清液2mL于QuEChERSSPE凈化管（5.13）中，渦旋30s，于6000r/min離心5min，取

上清液1mL，于40℃水浴氮氣吹至近干，加入1mL0.1%甲酸-水溶液+0.1%甲酸-乙腈溶液（9+1）

（5.9）定容，超聲波震蕩5min,過0.22μm微孔濾膜，供HPLC-MS/MS測定。

7.3空白試驗

除不加樣品外，采用完全相同的測定步驟進行平行操作。

7.4測定

7.4.1色譜參考條件

色譜參考條件如下：

a)色譜柱:C18色譜柱，100mm×2.1mm，2μm;

b)流動相:A:0.1%甲酸-水溶液；B：0.1%甲酸-乙腈；梯度洗脫條件參見表1;

c)流速:0.1mL/min;

d)進樣量:20μL;

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e)柱溫:40℃。

表1梯度洗脫條件

時間（min）A%B%

0.19010

29010

307030

357030

407030

459010

7.4.2質(zhì)譜參考條件

本標準所使用的質(zhì)譜參考條件如下:

a)電離方式:電噴霧離子源（ESI）;

b)掃描方式:正離子掃描，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）;

c)電離電壓:5.5kV;

d)離子源溫度:550℃;

e)氣簾氣壓力（CUR）:10psi;

f)霧化氣壓力:50psi;

g)輔助氣壓力:50psi;

h)定性離子、定量離子、去簇電壓、碰撞能量、保留時間見表2。

表28種喹諾酮類藥物定性離子、定量離子、去簇電壓、碰撞能量、保留時間

母離子子離子碰撞能量去簇電壓保留時間

化合物分子式分子量

m/zm/zVVmin

316.1*2580

恩諾沙星CHFNO359.35360.020.04

192233245.13580

245.1*3380

環(huán)丙沙星CHFNO331.34332.117.58

171833288.12580

318.3*2654

氧氟沙星CHFNO361.37362.316.59

182034261.33848

302.3*2648

諾氟沙星CHFNO319.33320.216.60

161833276.32566

290.4*2570

培氟沙星CHFNO333.36334.317.08

172033233.22755

CHFNO265.2*3170

洛美沙星171923351.35352.318.79

3308.22355

CHFNO342.3*2460

沙拉沙星201723385.36386.422.91

3299.23560

303.3*2450

依諾沙星CHFNO320.32321.415.20

151743234.13050

*:定量離子注：對不同質(zhì)譜儀器，儀器參數(shù)可能存在差異，測定前應(yīng)將質(zhì)譜參數(shù)優(yōu)化到最佳

3

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7.4.3標準工作曲線的制備

將混合標準儲備液（5.10）用初始流動相逐級稀釋成濃度為2.5μg/L～100.0μg/L的標準系列工

作溶液，參考色譜和質(zhì)譜條件測定。分別以8種喹諾酮類藥物質(zhì)量濃度為橫坐標，相應(yīng)的峰面積響應(yīng)值

為縱坐標，進行線性回歸分析。

7.4.4定性分析

在同一色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件下進行標準溶液和樣品溶液的測定，如果樣品溶液中檢出的色譜峰的保

留時間與標準物質(zhì)色譜峰的保留時間一致，所選擇的兩對子離子的質(zhì)荷比也一致，而且樣品定性離子的

相對豐度與濃度相當標準工作溶液的定性離子的相對豐度相比較，相對偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則

可判定樣品中存在該物質(zhì)。

表3定性時相對離子豐度的最大允許偏差

相對離子豐度>50%>20%-50%>10%-20%≦10%

允許的相對誤差±20%±25%±30%±50%

7.4.5定量