ICS65.020.20

B62

DB4201

武漢市地方標準

DB4201/T562—2018

紅掌組培育苗生產(chǎn)技術規(guī)程

2018-08-28發(fā)布2018-09-28實施

武漢市質(zhì)量技術監(jiān)督局發(fā)布

DB4201/T562—2018

前言

本標準按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本標準由武漢市農(nóng)業(yè)科學院提出并歸口。

本標準由武漢市農(nóng)業(yè)科學院作物研究所起草。

本標準主要起草人：王德歡、施先鋒、陳祖平、周謨兵、葛米紅、梁歡、孫玉宏、李愛成、張娜、

宋奎琳、楊皓瓊。

I

DB4201/T562-2018

紅掌組培育苗生產(chǎn)技術規(guī)程

1范圍

本標準規(guī)定了紅掌組培育苗生產(chǎn)的設施條件、試管苗的生產(chǎn)、穴盤苗的培育及出圃規(guī)格。

本標準適用于武漢地區(qū)紅掌組培苗的生產(chǎn)，其他地區(qū)可參考使用。

2范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準則

NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術規(guī)程

3設施條件

場地及主要設施應符合NY/T2306-2013。

4試管苗的生產(chǎn)

4.1物品準備

4.1.1培養(yǎng)基配制

4.1.1.1以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加瓊脂粉7.0g/L～8.0g/L，蔗糖20g/L～30g/L，并根據(jù)

不同培養(yǎng)階段添加適量植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，調(diào)節(jié)pH值為5.8～6.0。

4.1.1.2愈傷組織誘導培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5mg/L～2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L～1.5mg/L+NAA

0.1mg/L～0.5mg/L。

4.1.1.3不定芽分化培養(yǎng)基：MS+6-BA0.5mg/L～1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L～0.5mg/L+NAA

0.1mg/L～0.3mg/L。

4.1.1.4增殖與復壯培養(yǎng)基：MS+6-BA0.1mg/L～0.5mg/L+NAA0.1mg/L～0.2mg/L。

4.1.1.5生根培養(yǎng)基：MS+NAA0.1mg/L～0.3mg/L+IBA0.1mg/L～0.3mg/L。

4.1.1.6培養(yǎng)基配制完畢后，按每支組培瓶40mL～50mL容量及時分裝并進行高壓蒸汽滅菌。在121℃

下滅菌20min～30min，待滅菌鍋壓力表顯示為零后盡快取出冷卻備用，宜在30d內(nèi)使用。

4.1.2無菌水制備

用三角瓶分裝不超過1/2體積的蒸餾水，在121℃下滅菌20min～30min，待滅菌鍋壓力表顯示為零

后盡快取出冷卻備用，宜在7d內(nèi)使用。

4.1.3無菌盤準備

將直徑20cm的鐵盤裝入高溫消毒滅菌袋內(nèi)，在121℃下滅菌20min～30min，待滅菌鍋壓力表顯示

為零后取出烘干備用，宜在7d內(nèi)使用。

4.2接種操作準備

4.2.1接種室消毒

1

DB4201/T562-2018

接種前30min用75％酒精擦拭超凈工作臺，擺上所需培養(yǎng)基、酒精燈、酒精消毒液、鑷子、剪刀等

物品；開啟超凈工作臺吹風功能，打開超凈工作臺和接種室用紫外燈照射20min～30min。此外，接種

室應定期使用高錳酸鉀與甲醛溶液進行熏蒸消毒處理。

4.2.2操作人員的消毒

進入接種室前，操作人員應洗凈手（夏季露手臂操作還應洗凈手臂）、穿戴上經(jīng)過消毒的工作服、

帽子、口罩和鞋子等，并經(jīng)由配備風淋系統(tǒng)的緩沖間進入接種室。操作過程中要經(jīng)常使用75％酒精擦拭

手（夏季露手臂操作還應擦拭手臂）。

4.3愈傷組織誘導

4.3.1外植體選取和處理

4.3.1.1從生長健壯的植株上選擇幼嫩的葉柄或葉片作為外植體。外植體在加有適量洗潔精或洗衣粉

的自來水中浸泡15min，然后用自來水沖洗20min～30min，期間用手輕輕搓揉葉柄或葉片。沖洗結

束后，轉到75％酒精中浸泡30s～60s，再用無菌水沖洗2次～3次，接著用0.1％升汞溶液消毒

8min～10min，最后無菌水沖洗3次～5次。

4.3.1.2若選取葉柄為外植體，則將葉柄切割成1cm長度的小段；若選取葉片為外植體，則將葉片剔

除葉緣與葉脈后、切割成1cm2的方塊。

4.3.2誘導培養(yǎng)

將切割好的外植體接種于愈傷組織誘導培養(yǎng)基。培養(yǎng)條件宜控制在溫度25℃、光照強度2000lm/m2、

光照時間12h/d（前15d光照時間0h/d）。

4.4不定芽分化

培養(yǎng)60d后，將愈傷組織切割，轉接到不定芽分化培養(yǎng)基中。培養(yǎng)條件宜控制在溫度25℃、光照

強度2000lm/m2、光照時間12h/d。

4.5增殖與復壯

將分化的不定芽從愈傷組織上沿基部切下，插入芽增殖與復壯培養(yǎng)基中；宜30d～40d繼代1次。

培養(yǎng)條件宜控制在溫度25℃、光照強度2000lm/m2、光照時間12h/d。

4.6生根培養(yǎng)

將增殖的芽去除底部愈傷組織與老葉，插入生根培養(yǎng)基中；生根培養(yǎng)30d形成完整的根系。

5穴盤苗的培育

5.1煉苗

移栽前3d，打開組培瓶蓋，加注深宜0.5cm～1cm無菌水，置溫室中適當遮光煉苗，煉苗光強不

宜超過12000lm/m2。

5.25.2移栽

取出試管苗，洗凈培養(yǎng)基，用0.1％高錳酸鉀溶液浸泡試管苗10s。選用纖維直徑0mm～10mm的紅

掌專用基質(zhì)，將基質(zhì)經(jīng)凈化水浸泡攪拌濕潤后，填裝128孔穴盤。宜在光照強度小于12000lm/m2、溫

度18℃～28℃的環(huán)境中進行移栽。移栽后，宜用50％多菌靈可濕性粉劑1000倍溶液噴施1次。農(nóng)藥使

用應符合GB/T8321的要求。

5.3穴盤苗管理

5.3.1移栽后10d內(nèi)，宜控制溫度18℃～28℃、光照強度5000lm/m2～12000lm/m2、空氣相對濕

度60％～80％。

5.3.2移栽10d以后，控制溫室溫度在15℃～30℃、光照強度不超過20000lm/m2，當溫度

2

DB4201/T562-2018

15℃～28℃時、控制濕度在65％～70％，當溫度在28℃～30℃時、控制濕度在70％～85％。宜每

隔

2d～3d，澆灌1000倍復合肥（20-10-20）溶液。此外，宜每隔15d，噴施一次1000倍磷酸二氫鉀

葉面肥。

5.3.3穴盤苗培育期間，密切關注植株生長狀況，定期輪換使用土霉素與多菌靈或百菌清預防病害發(fā)

生。若發(fā)現(xiàn)感病植株，應及時剔除。農(nóng)藥使用應符合GB/T8321的要求。

6出圃規(guī)