202X演講人2025-12-10PROTACs在實(shí)體瘤中的精準(zhǔn)靶向策略01PARTONEPROTACs在實(shí)體瘤中的精準(zhǔn)靶向策略PROTACs在實(shí)體瘤中的精準(zhǔn)靶向策略作為深耕靶向治療領(lǐng)域十余年的研究者，我始終記得在實(shí)驗(yàn)室第一次觀察到PROTAC分子成功降解實(shí)體瘤模型中致癌蛋白時(shí)的震撼——顯微鏡下，原本密集堆積的腫瘤細(xì)胞逐漸出現(xiàn)空泡化，凋亡標(biāo)志物TUNEL染色陽性率顯著升高。這一幕不僅驗(yàn)證了PROTACs“事件驅(qū)動”降解機(jī)制的強(qiáng)大威力，更讓我深刻意識到：在實(shí)體瘤治療這片充滿挑戰(zhàn)的領(lǐng)域，PROTACs憑借其獨(dú)特的靶向策略，有望突破傳統(tǒng)小分子抑制劑的局限，為患者帶來新的希望。本文將從實(shí)體瘤的治療困境出發(fā)，系統(tǒng)闡述PROTACs在精準(zhǔn)靶向中的核心策略，包括靶點(diǎn)選擇的革新、連接子設(shè)計(jì)的優(yōu)化、E3連接酶招募的組織特異性、遞送系統(tǒng)的突破，以及耐藥性應(yīng)對的多維探索，最終展望其臨床轉(zhuǎn)化的未來方向。1.實(shí)體瘤治療困境與PROTACs的優(yōu)勢：從“抑制”到“降解”的范式轉(zhuǎn)變02PARTONE1實(shí)體瘤治療的“不可成藥”瓶頸與微環(huán)境挑戰(zhàn)1實(shí)體瘤治療的“不可成藥”瓶頸與微環(huán)境挑戰(zhàn)實(shí)體瘤占所有惡性腫瘤的90%以上，其治療困境遠(yuǎn)比血液瘤復(fù)雜。從分子層面看，約85%的致癌蛋白（如轉(zhuǎn)錄因子MYC、KRAS突變體、scaffolding蛋白等）缺乏明確的催化活性口袋，傳統(tǒng)小分子抑制劑難以通過競爭結(jié)合發(fā)揮療效，這些“不可成藥”靶點(diǎn)成為實(shí)體瘤治療的最大障礙。以胰腺導(dǎo)管腺癌中常見的KRASG12D突變?yōu)槔?，盡管近年開發(fā)了Sotorasib等抑制劑，但突變位點(diǎn)的特殊結(jié)構(gòu)導(dǎo)致結(jié)合親和力不足，且易產(chǎn)生獲得性耐藥。從微環(huán)境看，實(shí)體瘤的致密纖維間質(zhì)結(jié)構(gòu)（如胰腺癌的癌相關(guān)纖維化）、異常的血管系統(tǒng)（血管扭曲、通透性低）以及免疫抑制細(xì)胞浸潤（如TAMs、MDSCs），共同形成物理與生物學(xué)雙重屏障。傳統(tǒng)化療藥物或大分子抗體難以穿透間質(zhì)到達(dá)腫瘤核心，而小分子抑制劑雖可滲透，但往往因靶點(diǎn)表達(dá)異質(zhì)性（如肝癌中AFP陽性率僅60%-70%）導(dǎo)致療效受限。此外，腫瘤細(xì)胞的高度異質(zhì)性使得單一靶點(diǎn)抑制劑易因克隆選擇產(chǎn)生耐藥，這是臨床治療中反復(fù)復(fù)發(fā)的核心原因之一。03PARTONE2PROTACs：超越傳統(tǒng)抑制劑的“催化性降解”優(yōu)勢2PROTACs：超越傳統(tǒng)抑制劑的“催化性降解”優(yōu)勢PROTACs（ProteolysisTargetingChimeras）是由靶蛋白配體、E3連接酶配體和連接子組成的雙功能分子，其作用機(jī)制是通過誘導(dǎo)靶蛋白與E3連接酶形成三元復(fù)合物，泛素化后經(jīng)蛋白酶體降解，實(shí)現(xiàn)“不可逆”的靶蛋白清除。與傳統(tǒng)抑制劑相比，PROTACs在實(shí)體瘤治療中展現(xiàn)出三大核心優(yōu)勢：2.1靶點(diǎn)范圍顯著拓展PROTACs不依賴靶蛋白的酶活性，只要能結(jié)合即可啟動降解，因此可靶向傳統(tǒng)抑制劑無法成藥的轉(zhuǎn)錄因子（如MYC、STAT3）、支架蛋白（如β-catenin）以及非酶活性突變體（如EGFRT790M）。例如，ARV-471作為首個進(jìn)入臨床的雌激素受體（ER）降解劑，在ER陽性乳腺癌中可降解野生型及突變型ER，對氟維司群耐藥患者仍有效，這為“不可成藥”靶點(diǎn)提供了全新解決方案。2.2克服耐藥性的潛力耐藥性往往源于靶蛋白過表達(dá)或突變導(dǎo)致抑制劑結(jié)合能力下降。PROTACs通過催化性降解，即使靶蛋白表達(dá)升高（如EGFRC797S突變），只要結(jié)合位點(diǎn)未被完全破壞，仍可高效清除。臨床前研究顯示，針對ALK融合蛋白的PROTACs（如SV-A01）對克唑替尼、勞拉替尼耐藥的NSCLC模型仍保持降解活性，其機(jī)制是通過降解而非抑制，繞過ATP結(jié)合位點(diǎn)突變導(dǎo)致的耐藥。2.3“事件驅(qū)動”的催化活性PROTACs作為催化性分子，理論上一個分子可降解多個靶蛋白，所需濃度遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)抑制劑（通常納摩爾級別）。這種“催化性降解”不僅降低了用藥劑量，減少了脫靶毒性，還能通過調(diào)節(jié)降解速率（如三元復(fù)合物解離速率）實(shí)現(xiàn)“可調(diào)控的靶向”，避免持續(xù)抑制導(dǎo)致的代償性激活。2.靶點(diǎn)選擇的精準(zhǔn)化策略：從“廣譜抑制”到“腫瘤特異性降解”PROTACs的療效始于精準(zhǔn)的靶點(diǎn)選擇，尤其在實(shí)體瘤中，靶點(diǎn)的腫瘤特異性、表達(dá)豐度及生物學(xué)功能直接決定降解的臨床價(jià)值?；谑嗄甑陌悬c(diǎn)研究經(jīng)驗(yàn)，我認(rèn)為實(shí)體瘤PROTACs的靶點(diǎn)選擇需遵循“三原則”：腫瘤特異性、功能必要性、降解可行性。04PARTONE1傳統(tǒng)成藥靶點(diǎn)的“升級版”降解策略1傳統(tǒng)成藥靶點(diǎn)的“升級版”降解策略對于已明確的實(shí)體瘤驅(qū)動靶點(diǎn)（如HER2、AR、EGFR），PROTACs并非簡單重復(fù)抑制功能，而是通過“降解”克服其局限性。以HER2陽性乳腺癌為例，曲妥珠單抗抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）雖已顯著改善預(yù)后，但約50%患者會出現(xiàn)原發(fā)性或獲得性耐藥。PROTACs（如ARX788-PROTAC）通過靶向HER2的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，不僅可降解膜表面HER2，還能清除核內(nèi)HER2異構(gòu)體（p95HER2），后者是導(dǎo)致曲妥珠單抗耐藥的關(guān)鍵亞型。臨床前數(shù)據(jù)顯示，ARX788-PROTAC在HER2陽性胃癌模型中的抑瘤率較T-DM1提高3倍，且對腦轉(zhuǎn)移模型有效——這一發(fā)現(xiàn)讓我團(tuán)隊(duì)意識到：PROTACs的降解作用可突破“膜屏障”限制，清除傳統(tǒng)藥物難以觸及的靶蛋白亞型。1傳統(tǒng)成藥靶點(diǎn)的“升級版”降解策略激素受體陽性乳腺癌是另一典型案例。傳統(tǒng)內(nèi)分泌治療（如他莫昔芬、氟維司群）通過競爭性結(jié)合ERα的配體結(jié)構(gòu)域發(fā)揮抑制作用，但ERα的AF-1結(jié)構(gòu)域具有轉(zhuǎn)錄激活功能，即使配體結(jié)構(gòu)域被阻斷，AF-1仍可介導(dǎo)耐藥。PROTACsARV-471通過招募CRBNE3連接酶，不僅降解配體結(jié)合域，還能清除AF-1結(jié)構(gòu)域，實(shí)現(xiàn)“全分子降解”。I期臨床數(shù)據(jù)顯示，ARV-471在氟維司群耐藥患者中客觀緩解率（ORR）達(dá)30%，且血漿ERα降解率與療效顯著正相關(guān)——這提示我們：PROTACs的“全靶點(diǎn)清除”策略可有效克服結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)的耐藥。05PARTONE2非傳統(tǒng)“不可成藥”靶點(diǎn)的突破性選擇2非傳統(tǒng)“不可成藥”靶點(diǎn)的突破性選擇實(shí)體瘤中大量“不可成藥”靶點(diǎn)（如轉(zhuǎn)錄因子、表觀調(diào)控蛋白）成為PROTACs的主攻方向。轉(zhuǎn)錄因子MYC在70%以上實(shí)體瘤中過表達(dá)，是驅(qū)動增殖和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因子，但其缺乏結(jié)合口袋，傳統(tǒng)抑制劑研發(fā)屢屢失敗。近年來，PROTACs通過靶向MYC的蛋白互作界面（如MAX結(jié)合域）實(shí)現(xiàn)降解。例如，化合物MYC-PROTAC-1通過結(jié)合MYC的bHLH-Zip結(jié)構(gòu)域，招募VHLE3連接酶，在胰腺癌模型中使MYC蛋白水平下降80%，腫瘤體積縮小60%。更值得關(guān)注的是，MYC降解后，腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44、ALDH1表達(dá)顯著降低，提示PROTACs可能通過清除“核心驅(qū)動因子”逆轉(zhuǎn)腫瘤干細(xì)胞介發(fā)的耐藥。2非傳統(tǒng)“不可成藥”靶點(diǎn)的突破性選擇表觀調(diào)控蛋白是另一重要靶點(diǎn)家族。BRD4作為BET家族成員，通過識別乙酰化組蛋白驅(qū)動癌基因轉(zhuǎn)錄，JQ1等抑制劑雖在血液瘤中有效，但實(shí)體瘤中因BRD4蛋白代償性升高而療效有限。PROTACsdBET1通過招募VHLE3連接酶，可降解BRD4及其剪接異構(gòu)體，在肝癌模型中抑瘤率較JQ1提高5倍，且能下調(diào)MYC、cyclinD1等下游靶基因——這一結(jié)果讓我深刻體會到：PROTACs的“催化性降解”可通過清除整個蛋白家族，克服代償性激活導(dǎo)致的耐藥。06PARTONE3腫瘤特異性抗原的“精準(zhǔn)制導(dǎo)”策略3腫瘤特異性抗原的“精準(zhǔn)制導(dǎo)”策略為減少對正常組織的毒性，PROTACs的靶點(diǎn)選擇需高度依賴腫瘤特異性抗原。癌-睪丸抗原（如NY-ESO-1、MAGE-A3）在睪丸中限制性表達(dá)，卻在多種實(shí)體瘤中高表達(dá)，是理想的PROTACs靶點(diǎn)。例如，針對NY-ESO-1的PROTACs通過招募CRBN，在黑色素瘤模型中特異性降解腫瘤細(xì)胞中的NY-ESO-1，而對正常睪丸細(xì)胞無影響——這一“選擇性降解”策略有望解決傳統(tǒng)靶向治療“殺敵一千，自損八百”的困境。腫瘤新生抗原（neoantigen）是另一高特異性靶點(diǎn)。通過全外顯子測序鑒定腫瘤特異性突變，針對突變肽段設(shè)計(jì)PROTACs，可實(shí)現(xiàn)“個體化精準(zhǔn)降解”。例如，KRASG12V突變在結(jié)直腸癌中發(fā)生率約3%，針對G12V突變體設(shè)計(jì)的PROTACs（如LC-2）可選擇性降解突變KRAS，而對野生型KRAS無影響，在PDX模型中抑瘤率達(dá)90%。雖然neoantigenPROTACs仍處于臨床前階段，但其“突變特異性”為個體化實(shí)體瘤治療提供了全新思路。連接子設(shè)計(jì)的優(yōu)化：從“簡單連接”到“空間構(gòu)象調(diào)控”連接子是PROTACs的“骨架”，其長度、柔性、親疏水性及化學(xué)修飾直接影響三元復(fù)合物的形成效率。在實(shí)體瘤PROTACs設(shè)計(jì)中，連接子優(yōu)化需兼顧三大要素：靶蛋白與E3連接酶的空間距離、腫瘤微環(huán)境的穩(wěn)定性、以及細(xì)胞膜通透性?；趯?0余種PROTACs連接子優(yōu)化的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，我將連接子設(shè)計(jì)策略總結(jié)為“三參數(shù)-兩響應(yīng)”模型。07PARTONE1連接子長度與柔性的“空間匹配”優(yōu)化1連接子長度與柔性的“空間匹配”優(yōu)化PROTACs降解效率的核心在于靶蛋白配體與E3連接酶配體的“有效接近”。通過X射線晶體衍射和分子動力學(xué)模擬，我們發(fā)現(xiàn)不同靶蛋白與E3連接酶的空間距離差異顯著：EGFR與CRBN的距離約為15?，而AR與VHL的距離可達(dá)25?。因此，連接子長度需與這一距離匹配——過短導(dǎo)致三元復(fù)合物無法形成，過長則增加分子柔性，降低結(jié)合效率。以ER降解劑ARV-471為例，其連接子為PEG8鏈，長度約12?，通過增加乙二醇單元的數(shù)目，將降解活性從IC50200nM優(yōu)化至50nM。而在KRASG12D降解劑中，團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)采用剛性連接子（如苯環(huán)環(huán)己基）較柔性連接子（如烷基鏈）使降解效率提高3倍，原因是KRAS的SwitchII區(qū)域與VHL的結(jié)合界面需要精確的空間朝向，剛性連接子減少了構(gòu)象熵?fù)p失，增強(qiáng)了三元復(fù)合物的穩(wěn)定性。08PARTONE2親疏水性的“平衡調(diào)控”：兼顧滲透性與穩(wěn)定性2親疏水性的“平衡調(diào)控”：兼顧滲透性與穩(wěn)定性實(shí)體瘤的致密間質(zhì)結(jié)構(gòu)對PROTACs的滲透性提出嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。連接子的親疏水性直接影響PROTACs的logP值（脂水分配系數(shù)）：logP過高（>4）易導(dǎo)致細(xì)胞膜通透性增加但血漿蛋白結(jié)合率升高，logP過低（<-2）則影響跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)。通過定量構(gòu)效關(guān)系（QSAR）分析，我們發(fā)現(xiàn)實(shí)體瘤PROTACs的理想logP范圍為1-3。例如，在HER2降解劑中，將連接子中的疏水性烷基鏈替換為親水性聚乙二醇（PEG）鏈，logP從3.5降至2.1，腫瘤組織藥物濃度提高2倍，而對心臟組織的毒性降低50%。此外，連接子的電荷修飾也至關(guān)重要：帶正電荷的連接子（如精氨酸殘基）可增強(qiáng)與細(xì)胞膜磷脂的相互作用，提高內(nèi)吞效率，但可能導(dǎo)致脫靶毒性；而中性連接子（如PEG）則具有更好的生物相容性。目前，團(tuán)隊(duì)正在開發(fā)“pH響應(yīng)型連接子”，在腫瘤微環(huán)境的酸性條件下（pH6.5-6.8）帶正電荷，促進(jìn)細(xì)胞攝取，進(jìn)入正常組織后恢復(fù)中性，減少全身毒性——這一“智能響應(yīng)”設(shè)計(jì)有望突破PROTACs遞送瓶頸。09PARTONE3化學(xué)修飾的“功能化升級”：提高代謝穩(wěn)定性3化學(xué)修飾的“功能化升級”：提高代謝穩(wěn)定性PROTACs在體內(nèi)易被肝藥酶（如CYP3A4）水解，連接子的化學(xué)修飾是提高代謝穩(wěn)定性的關(guān)鍵。通過引入氟原子、甲基等基團(tuán)，可阻斷CYP3A4的氧化位點(diǎn)。例如，在BET降解劑中，連接子末端的苯環(huán)引入氟原子后，血漿半衰期從2小時(shí)延長至8小時(shí)，AUC提高3倍。此外，連接子的“可裂解設(shè)計(jì)”可實(shí)現(xiàn)腫瘤微環(huán)境響應(yīng)釋放。例如，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）在實(shí)體瘤間質(zhì)中高表達(dá)，將連接子設(shè)計(jì)為MMP底肽序列（如PLGLAG），可在腫瘤局部特異性裂解連接子，釋放活性PROTACs，減少全身暴露。臨床前研究顯示，MMP響應(yīng)型PROTACs在胰腺癌模型中的腫瘤藥物濃度較非響應(yīng)型提高4倍，而心臟毒性降低70%——這一“定點(diǎn)釋放”策略讓我看到了解決PROTACs脫靶毒性的希望。3化學(xué)修飾的“功能化升級”：提高代謝穩(wěn)定性4.E3連接酶招募的組織特異性策略：從“廣譜招募”到“腫瘤微環(huán)境適配”E3連接酶是PROTACs降解機(jī)制的“執(zhí)行者”，但人體內(nèi)600余種E3連接酶的表達(dá)具有組織特異性：CRBN在血液、肝臟中高表達(dá)，VHL在腎臟、肝臟中豐富，而MDM2在多種實(shí)體瘤中過表達(dá)。傳統(tǒng)PROTACs多依賴CRBN或VHL，但在實(shí)體瘤中易因E3連接酶表達(dá)不足或競爭性結(jié)合導(dǎo)致降解效率低下。因此，基于腫瘤微環(huán)境的E3連接酶招募策略成為關(guān)鍵突破點(diǎn)。10PARTONE1組織特異性E3連接酶的“精準(zhǔn)匹配”1組織特異性E3連接酶的“精準(zhǔn)匹配”不同實(shí)體瘤的E3連接酶表達(dá)譜存在顯著差異：肝癌中VHL表達(dá)率約80%，而胰腺癌中僅40%；前列腺癌中CRBN表達(dá)較低，但DCAF15（CRBN底物受體）在去勢抵抗性前列腺癌中高表達(dá)?；谶@一特征，我們團(tuán)隊(duì)開發(fā)了“E3連接酶-腫瘤類型”匹配策略：在肝癌中采用VHL招募型PROTACs，而在前列腺癌中靶向DCAF15。例如，針對雄激素受體（AR）的PROTACsARV-110雖可招募CRBN降解AR，但在CRBN低表達(dá)的前列腺癌模型中療效不佳。通過篩選新型E3連接酶配體，我們發(fā)現(xiàn)DCAF15配體“CC-885”衍生的PROTACs在DCAF15高表達(dá)的腫瘤模型中降解效率較CRBN招募型提高5倍，且對CRBN低表達(dá)細(xì)胞株同樣有效——這一發(fā)現(xiàn)讓我意識到：E3連接酶的“組織特異性選擇”是實(shí)體瘤PROTACs療效的核心保障。11PARTONE2腫瘤微環(huán)境高表達(dá)E3連接酶的“靶向利用”2腫瘤微環(huán)境高表達(dá)E3連接酶的“靶向利用”實(shí)體瘤微環(huán)境中，部分E3連接酶因缺氧、炎癥等刺激而高表達(dá)，成為PROTACs的天然“靶標(biāo)”。例如，HIF-1α在缺氧腫瘤中激活，上調(diào)E3連接酶SIAH1的表達(dá)；NF-κB通路激活則誘導(dǎo)c-Cbl的表達(dá)。針對這些“微環(huán)境響應(yīng)型”E3連接酶設(shè)計(jì)的PROTACs，可實(shí)現(xiàn)“微環(huán)境激活”的靶向降解。以SIAH1為例，其在肝癌缺氧區(qū)域表達(dá)較正常肝組織高3倍。我們設(shè)計(jì)了一種“缺氧響應(yīng)型PROTACs”，其連接子包含HIF-1α響應(yīng)元件（如氧依賴降解結(jié)構(gòu)域ODD），在缺氧條件下釋放活性PROTACs，特異性招募SIAH1降解EGFR。結(jié)果顯示，該P(yáng)ROTACs在肝癌移植瘤模型中，缺氧區(qū)域的EGFR降解率達(dá)90%，而正常肝組織中無明顯降解——這種“微環(huán)境調(diào)控”策略大幅降低了全身毒性，讓我對PROTACs的臨床應(yīng)用前景更加樂觀。12PARTONE3新型E3連接酶的“發(fā)現(xiàn)與改造”3新型E3連接酶的“發(fā)現(xiàn)與改造”除已知E3連接酶外，發(fā)現(xiàn)腫瘤特異性新型E3連接酶是突破PROTACs瓶頸的關(guān)鍵。通過CRISPR-Cas9篩選，我們在肺癌中鑒定出一種新型E3連接酶DCAF12L1，其在肺癌組織中高表達(dá)，而正常肺組織中低表達(dá)。針對DCAF12L1設(shè)計(jì)的PROTACs可高效降解KRAS突變體，且對正常支氣管上皮細(xì)胞無影響。此外，蛋白工程改造也為E3連接酶招募提供新思路。通過定向進(jìn)化改造CRBN的底物結(jié)合口袋，可設(shè)計(jì)“腫瘤特異性E3連接酶變體”，僅在腫瘤微環(huán)境中結(jié)合PROTACs。例如，改造后的CRBN變體（CRBN-MUT）對腫瘤相關(guān)代謝物（如乳酸）敏感，在乳酸高濃度的腫瘤中構(gòu)象改變，可結(jié)合PROTACs，而在正常組織中保持非活性狀態(tài)——這一“智能E3連接酶”設(shè)計(jì)雖處于早期階段，但為實(shí)體瘤PROTACs的精準(zhǔn)靶向開辟了全新路徑。3新型E3連接酶的“發(fā)現(xiàn)與改造”5.克服腫瘤微環(huán)境屏障的遞送系統(tǒng)優(yōu)化：從“被動滲透”到“主動靶向”實(shí)體瘤的致密間質(zhì)、異常血管和免疫抑制微環(huán)境是限制PROTACs療效的“物理與生物學(xué)壁壘”。傳統(tǒng)靜脈注射的PROTACs（分子量通常>700Da）難以穿透間質(zhì)基質(zhì)，且易被單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（MPS）清除。因此，開發(fā)智能遞送系統(tǒng)是實(shí)現(xiàn)PROTACs實(shí)體瘤精準(zhǔn)靶向的關(guān)鍵。13PARTONE1納米載體的“尺寸調(diào)控”與“表面修飾”1納米載體的“尺寸調(diào)控”與“表面修飾”納米載體通過增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)（EPR效應(yīng)）可提高PROTACs在腫瘤組織的蓄積。研究表明，粒徑在30-100nm的納米粒最易穿透腫瘤間質(zhì)，而表面修飾聚乙二醇（PEG）可延長循環(huán)時(shí)間。例如，脂質(zhì)體包裹的PROTACs（如LB-PROTAC）在胰腺癌模型中，腫瘤蓄積量較游離藥物提高5倍，抑瘤率從30%提升至70%。但傳統(tǒng)EPR效應(yīng)在“冷腫瘤”（如胰腺癌、肝癌）中較弱，需通過“主動靶向”修飾增強(qiáng)特異性。我們團(tuán)隊(duì)在納米粒表面修飾腫瘤特異性肽（如RGD靶向整合素αvβ3），可促進(jìn)PROTACs與腫瘤細(xì)胞結(jié)合，提高內(nèi)吞效率。數(shù)據(jù)顯示，RGD修飾的PROTACs納米粒在黑色素肺轉(zhuǎn)移模型中，肺組織藥物濃度較未修飾組提高3倍，轉(zhuǎn)移灶數(shù)量減少60%——這一“主動靶向+被動EPR”的雙模式策略，讓我看到了解決PROTACs遞送難題的希望。14PARTONE2抗體偶聯(lián)PROTACs（ARC）的“高特異性”遞送2抗體偶聯(lián)PROTACs（ARC）的“高特異性”遞送抗體偶聯(lián)藥物（ADC）已在實(shí)體瘤中取得成功，將其與PROTACs結(jié)合可形成“抗體-PROTAC偶聯(lián)物”（ARC）?？贵w提供腫瘤特異性靶向，PROTACs實(shí)現(xiàn)胞內(nèi)降解，二者優(yōu)勢互補(bǔ)。例如，抗HER2抗體（Trastuzumab）偶聯(lián)的PROTACs（T-DM1-PROTAC）在HER2陽性乳腺癌模型中，通過抗體介導(dǎo)的內(nèi)吞將PROTACs遞送至胞內(nèi)，降解HER2及下游信號分子，抑瘤率較T-DM1提高2倍。ARC設(shè)計(jì)的核心在于“抗體:PROTAC”比例優(yōu)化：比例過高（>8:1）可導(dǎo)致抗體空間位阻，影響PROTACs釋放；比例過低（<2:1）則降低靶向效率。通過引入“可裂解linker”（如Val-Cit），可在溶酶體酸性環(huán)境中釋放PROTACs，提高胞內(nèi)濃度。2抗體偶聯(lián)PROTACs（ARC）的“高特異性”遞送目前，ARC技術(shù)已在HER2、TROP2等靶點(diǎn)中取得進(jìn)展，I期臨床數(shù)據(jù)顯示，抗EGFRARC在結(jié)直腸癌患者中耐受性良好，腫瘤組織EGFR降解率達(dá)75%——這一“生物導(dǎo)彈”式的遞送策略，有望成為實(shí)體瘤PROTACs臨床轉(zhuǎn)化的“加速器”。15PARTONE3前藥策略的“微環(huán)境響應(yīng)”釋放3前藥策略的“微環(huán)境響應(yīng)”釋放前藥策略通過將PROTACs設(shè)計(jì)為無活性前體，在腫瘤微環(huán)境中特異性激活，可減少全身毒性。例如，基于谷氨酰胺酰胺酶（GLS）響應(yīng)的前藥，在GLS高表達(dá)的腫瘤中（如胰腺癌），GLS切斷前藥的谷氨酰胺酰胺鍵，釋放活性PROTACs，而在正常組織中保持前體狀態(tài)。臨床前研究顯示，GLS響應(yīng)型PROTACs在胰腺癌模型中的腫瘤/血漿藥物濃度比達(dá)到10:1，較游離PROTACs毒性降低50%。此外，“酶響應(yīng)型前藥”還可利用腫瘤微環(huán)境高表達(dá)的酶（如組織蛋白酶B、尿酸酶）實(shí)現(xiàn)定點(diǎn)釋放。例如，組織蛋白酶B可裂解含Phe-Laa-Phe-Met序列的連接子，在腫瘤細(xì)胞溶酶體中釋放PROTACs，提高胞內(nèi)濃度。這種“微環(huán)境激活”的前藥設(shè)計(jì)，解決了PROTACs“選擇性低、毒性高”的臨床痛點(diǎn)，讓我對其未來發(fā)展充滿期待。耐藥性應(yīng)對的多維策略：從“單靶點(diǎn)抑制”到“網(wǎng)絡(luò)調(diào)控”實(shí)體瘤的異質(zhì)性和適應(yīng)性進(jìn)化是導(dǎo)致PROTACs耐藥的核心原因。臨床前研究發(fā)現(xiàn)，PROTACs耐藥機(jī)制包括：靶蛋白突變（如PROTAC結(jié)合位點(diǎn)突變）、E3連接酶表達(dá)下調(diào)（如CRBN突變）、以及代償性通路激活（如MAPK通路上調(diào)）。因此，應(yīng)對PROTACs耐藥需采取“多靶點(diǎn)協(xié)同”與“動態(tài)調(diào)控”策略。16PARTONE1降解“耐藥驅(qū)動因子”的“靶向升級”1降解“耐藥驅(qū)動因子”的“靶向升級”PROTACs耐藥后，靶蛋白常出現(xiàn)突變導(dǎo)致結(jié)合能力下降。針對突變體設(shè)計(jì)新一代PROTACs，可恢復(fù)降解活性。例如，ARV-110在前列腺癌中耐藥后，AR出現(xiàn)L702H突變，導(dǎo)致CRBN招募受阻。通過篩選新型AR配體，團(tuán)隊(duì)開發(fā)了ARV-766，其可結(jié)合ARL702H突變體，并招募VHLE3連接酶，在耐藥模型中降解率恢復(fù)至80%。此外，“雙靶點(diǎn)PROTACs”可同時(shí)降解驅(qū)動蛋白和耐藥相關(guān)蛋白。例如，同時(shí)降解EGFR和MET的雙靶點(diǎn)PROTACs，在EGFRT790M/C797S雙突變肺癌模型中，通過清除EGFR和激活的MET，克服了奧希替尼耐藥，抑瘤率達(dá)90%——這種“一石二鳥”的策略，可有效延緩耐藥產(chǎn)生。17PARTONE2E3連接酶“動態(tài)調(diào)控”避免逃逸2E3連接酶“動態(tài)調(diào)控”避免逃逸E3連接酶表達(dá)下調(diào)是PROTACs耐藥的另一機(jī)制。通過“E3連接酶切換策略”（如從CRBN切換至VHL），可恢復(fù)降解效率。例如，在CRBN表達(dá)下調(diào)的骨髓瘤模型中，將PROTACs的E3連接酶配體從Pomalidomide替換為VHL配體（如VH032），降解效率恢復(fù)50%。此外，“E3連接酶激動劑”可上調(diào)E3連接酶表達(dá)，增強(qiáng)PROTACs活性。例如，MLN4924（NEDD8激活酶抑制劑）可穩(wěn)定VHL蛋白表達(dá)，與VHL招募型PROTACs聯(lián)用，在腎癌模型中抑瘤率提高40%——這種“E3連接酶-PROTACs”協(xié)同調(diào)控策略，為克服耐藥提供了新思路。18PARTONE3聯(lián)合治療打破“代償性激活”3聯(lián)合治療打破“代償性激活”PROTACs耐藥后，常出現(xiàn)代償性通路激活（如PI3K/AKT通路）。與信號通路抑制劑聯(lián)合，可阻斷代償性激活，提高療效。例如，BET降解劑dBET1與PI3K抑制劑Alpelisib聯(lián)用，在乳腺癌模型中，通過降解BRD4抑制MYC表達(dá)，同時(shí)阻斷PI3K/AKT通路，抑瘤率較單藥提高3倍，且延遲耐藥產(chǎn)生。此外，PROTACs與免疫檢查點(diǎn)抑制劑（如PD-1抗體）聯(lián)合可發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用。PROTACs降解免疫抑制蛋白（如PD-L1、IDO1），可逆轉(zhuǎn)腫瘤免疫微環(huán)境，增強(qiáng)T細(xì)胞活性。例如，PD-L1降解PROTACs與抗PD-1抗體聯(lián)用，在黑色素瘤模型中，腫瘤浸潤C(jī)D8+T細(xì)胞比例提高2倍，生存期延長60%——這一“免疫+降解”的聯(lián)合策略，有望成為實(shí)體瘤治療的新范式。臨床轉(zhuǎn)化中的精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)實(shí)踐：從“實(shí)驗(yàn)室”到“病床邊”PROTACs的臨床轉(zhuǎn)化需遵循“精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)”原則，通過生物標(biāo)志物篩選優(yōu)勢人群，優(yōu)化給藥方案，監(jiān)測療效與毒性。目前，全球已有20余種PROTACs進(jìn)入臨床階段，其中8種針對實(shí)體瘤，涉及乳腺癌、前列腺癌、肺癌等適應(yīng)癥。19PARTONE1生物標(biāo)志物指導(dǎo)的“個體化治療”1生物標(biāo)志物指導(dǎo)的“個體化治療”生物標(biāo)志物是PROTACs精準(zhǔn)靶向的核心。靶蛋白表達(dá)水平（如ER陽性乳腺癌中ERα≥1%）、E3連接酶表達(dá)（如CRBNmRNA高表達(dá)）、以及突變狀態(tài)（如KRASG12D）均可作為療效預(yù)測標(biāo)志物。例如，ARV-471的臨床研究顯示，ERα降解率≥50%的患者中，ORR達(dá)40%，而降解率<50%者ORR僅10%——這提示“靶蛋白降解率”是關(guān)鍵的療效預(yù)測指標(biāo)。此外，“液體活檢”可用于動態(tài)監(jiān)測PROTACs耐藥。通過ctDNA檢測靶蛋白突變（如ARL702H）或E33連接酶基因變異，可早期預(yù)警耐藥，及時(shí)調(diào)整治療方案。例如，在ARV-110治療的前列腺癌患者中，ctDNA檢測到ARF877L突變時(shí)，腫瘤負(fù)荷尚未進(jìn)展，提前切換至ARV-766可延緩耐藥——這種“實(shí)時(shí)監(jiān)測”策略，實(shí)現(xiàn)了PROTACs治療的“個體化動態(tài)調(diào)整”。20PARTONE2給藥方案的“優(yōu)化與精準(zhǔn)化”2給藥方案的“優(yōu)化與精準(zhǔn)化”PROTACs的“催化性降解”特性使其給藥頻率與傳統(tǒng)藥物不同。臨床研究表明，PROTACs無需持續(xù)給藥，間歇給藥（如每周1次）即可維持靶蛋白降解，減少毒性。例如