ICS65.020.20

CCSB05

DB23

黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB23/T3055—2021

燕子花組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

2021-12-24發(fā)布2022-01-23實(shí)施

黑龍江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB23/T3055—2021

前言

本文件依據(jù)GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)

定起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。

本文件由黑龍江省林業(yè)和草原局提出。

本文件起草單位：東北林業(yè)大學(xué)、遜克縣新立林場(chǎng)、東寧市林業(yè)和草原局、中國(guó)建筑西南設(shè)計(jì)研究

院有限公司山東分院、國(guó)營(yíng)明水縣明水林場(chǎng)。

本文件主要起草人：王玲、趙蕊陽(yáng)、葉王斌、梁國(guó)爽、劉澤宇、弓悅、任昆侖、王磊、閆蕾、呂汝

彤、史恭發(fā)、付海靜、劉桂伶、楊娟、李鳳儀、周晟、裴艷春。

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燕子花組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定燕子花（IrislaevigataFisch.）組培苗生產(chǎn)的環(huán)境與設(shè)備消毒、培養(yǎng)基配制、外植體制備、

誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、練苗、移栽和生產(chǎn)檔案。

本文件適用于燕子花組培苗生產(chǎn)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用性文

件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用

于本文件。

LY/T1882—2010林木組織培養(yǎng)育苗技術(shù)規(guī)程

NY/T2306—2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

4環(huán)境與設(shè)備消毒

4.1接種室消毒

接種室消毒按NY/T2306—2013中8.6的規(guī)定執(zhí)行。

4.2培養(yǎng)室消毒

培養(yǎng)室消毒按NY/T2306—2013中8.7的規(guī)定執(zhí)行。

4.3超凈工作臺(tái)消毒

超凈工作臺(tái)消毒按NY/T2306—2013中8.5和8.6的規(guī)定執(zhí)行。

4.4接種器具消毒

接種器具按NY/T2306—2013中8.4的規(guī)定執(zhí)行。

5培養(yǎng)基配制

5.1母液配制

培養(yǎng)基母液配制按NY/T2306—2013中7.3的規(guī)定執(zhí)行。

5.2培養(yǎng)基配制

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5.2.1培養(yǎng)基配方

培養(yǎng)基配方如下：

a）誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS＋0.5mg/LIBA＋1.5mg/L6-BA＋1.0mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋固化劑，固化

劑可采用9.0g/L瓊脂粉，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制pH5.8～pH6.0；

b)增殖培養(yǎng)基：MS＋0.5mg/LIBA＋1.5mg/L6-BA＋1.0mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋固化劑，固化

劑可采用9.0g/L瓊脂粉，培養(yǎng)基滅菌前調(diào)制pH5.8～pH6.0；

c）生根培養(yǎng)基：MS＋0.2mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋固化劑，固化劑可采用7.0?g/L瓊脂粉，培養(yǎng)基

滅菌前調(diào)制pH5.8～pH6.0。

5.2.2培養(yǎng)基配制方法

培養(yǎng)基配制方法按NY/T2306—2013中7.4執(zhí)行。

5.3培養(yǎng)基滅菌及保存

培養(yǎng)基滅菌及保存方法按LY/T1882—2010中4.2進(jìn)行。

6外植體制備

6.1種子選擇與層積

宜選取當(dāng)年秋季采集的飽滿(mǎn)種子。10?月下旬土壤結(jié)凍前（土壤溫度＞0℃），將種子與濕沙按1:3

體積比混合，種沙混合物含水量60%～65%，裝入編織袋埋藏在室外土壤中層積，埋藏深度為20?cm～

30?cm。60d后取出備用。

6.2種子消毒

種子在稀釋的洗滌劑水中浸泡10?min，置于流水下沖洗30?min，室溫下清水浸種24?h。在超凈工

作臺(tái)中，先用75?%乙醇溶液消毒10?s后，用無(wú)菌水沖洗3?遍，再用2?%次氯酸鈉溶液浸泡并震蕩25?min，

后用無(wú)菌水沖洗≥5遍。

6.3種子萌發(fā)

在超凈工作臺(tái)中，將消毒后的種子放入培養(yǎng)皿中（內(nèi)墊一層用無(wú)菌水浸透的濾紙作發(fā)芽床），水深

應(yīng)達(dá)種子厚度的2/3，蓋好培養(yǎng)皿蓋放入培養(yǎng)室培養(yǎng)。培養(yǎng)室溫度為24℃～26℃、光照周期16h/d，光

照強(qiáng)度為2000Lux～3000Lux。

6.4外植體的獲取

將發(fā)芽的種子繼續(xù)培養(yǎng)≥10d，在超凈工作臺(tái)中，選取長(zhǎng)出2片～3片葉子的健壯幼苗，將葉子剪至

2cm～3cm、根部修剪至0.2cm后，作為外植體備用。

7誘導(dǎo)培養(yǎng)

外植體葉片向上，莖基部垂直接入不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，深度0.5cm，培養(yǎng)35d～45d，光照周

期12h/d～14h/d、光照強(qiáng)度3000Lux～5000Lux、培養(yǎng)溫度22℃～28℃，空氣相對(duì)濕度70%～80%。

8增殖培養(yǎng)

將分化的不定芽單獨(dú)切離下來(lái)接入增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)35d～45d，光照周期12h/d～14h/d、

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光照強(qiáng)度3000Lux～5000Lux，培養(yǎng)溫度22℃～28℃，空氣相對(duì)濕度70%～80%。待形成芽叢，分割新

長(zhǎng)出的不定芽，可按需求重復(fù)繼代培養(yǎng)，繼代次數(shù)應(yīng)≤3次。

9生根培養(yǎng)

選取培養(yǎng)瓶中高度≥2cm、生長(zhǎng)健壯的叢生芽，單個(gè)分割后，將葉片修剪至1.5cm～2cm，接種至

生根培養(yǎng)基中，光照培養(yǎng)≥30d。光照周期12h/d～14h/d、光照強(qiáng)度3000Lux～5000Lux，培養(yǎng)溫

度22℃～28℃，空氣相對(duì)濕度70%～80%。

10煉苗

組培苗高度3cm～4cm，基部長(zhǎng)出≥3條、長(zhǎng)2cm～3cm的新根時(shí)，將組培瓶蓋打開(kāi)，倒入無(wú)菌

水覆蓋在培養(yǎng)基表面，在室內(nèi)敞口煉苗3d后，取出組培苗，用清水沖干凈根部殘余培養(yǎng)基，修剪不健

康的根和枯黃的葉片，放入水中水培20d。

11移栽

11.1移栽準(zhǔn)備

將草炭土和蛭石按體積比3:1混合，裝入50孔的穴盤(pán)中，壓實(shí)。穴孔的尺寸為540mm×280mm。

將穴盤(pán)浸入0.5?g/L的多菌靈溶液中消毒備用。

11.2移栽方法

取出水培的組培苗，輕度修剪不健康的根和枯黃的葉片，移栽至育苗盤(pán)中。

11.3移栽后管理

移栽初期，保持空氣濕度≥85%，適時(shí)澆水，保持基質(zhì)濕潤(rùn)，溫度控制在18℃～25℃。生長(zhǎng)期每2