自身免疫檢驗課件演講人：日期:目錄CONTENTS01自身免疫基礎(chǔ)知識02檢測方法分類03典型疾病應(yīng)用04實驗技術(shù)原理05結(jié)果判讀原則06質(zhì)量控制要點01自身免疫基礎(chǔ)知識免疫耐受與病理機制免疫耐受定義指對抗原特異性應(yīng)答的T細胞與B細胞，在抗原刺激下，不能被激活，不能產(chǎn)生特異性免疫效應(yīng)細胞及特異性抗體。免疫耐受形成機制包括中樞性免疫耐受和外周性免疫耐受，前者發(fā)生在免疫細胞發(fā)育成熟過程中，后者發(fā)生在免疫細胞與外界抗原接觸后。免疫耐受與自身免疫病的關(guān)系免疫耐受的破壞是自身免疫病發(fā)生的重要原因之一，正常情況下，免疫耐受機制可防止對自身成分的免疫反應(yīng)。病理機制自身免疫病的發(fā)生與自身抗體產(chǎn)生、免疫復合物形成、細胞免疫應(yīng)答等多種因素有關(guān)。常見自身抗體類型抗核抗體（ANA）主要針對細胞核成分，見于多種自身免疫病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關(guān)節(jié)炎等。抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體（ANCA）主要針對中性粒細胞胞質(zhì)成分，見于血管炎、腎小球腎炎等疾病?？沽字贵w主要針對磷脂成分，與動靜脈血栓、血小板減少癥等疾病相關(guān)?？菇M織細胞抗體主要針對特定組織細胞，如抗甲狀腺球蛋白抗體、抗胰島細胞抗體等，與相應(yīng)器官自身免疫病相關(guān)。疾病相關(guān)抗原概述自身抗原01指自身組織成分，在正常情況下免疫系統(tǒng)不會對其產(chǎn)生免疫應(yīng)答，但在某些情況下可能被免疫系統(tǒng)錯誤地識別為外來抗原。自身抗原的種類02包括隱蔽抗原、組織相容性抗原、變性抗原等。自身抗原與自身免疫病的關(guān)系03自身抗原的異常表達、免疫系統(tǒng)對自身抗原的識別異?；蛎庖哒{(diào)節(jié)功能異常，均可導致自身免疫病的發(fā)生。疾病相關(guān)自身抗原舉例04如類風濕關(guān)節(jié)炎中的類風濕因子、系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的dsDNA等。02檢測方法分類間接免疫熒光法（IIF）原理優(yōu)點缺點應(yīng)用范圍用特異性抗體與標本中相應(yīng)抗原反應(yīng)后，再用熒光素標記的第二抗體（抗抗體）與抗原-抗體復合物中第一抗體結(jié)合，洗滌后在熒光顯微鏡下觀察特異性熒光，以檢測未知抗原或抗體。比直接法敏感度提高5-10倍，且一種熒光二抗可檢測多種不同的抗體。操作復雜，需要熒光顯微鏡。廣泛用于各種自身抗體和免疫復合物的檢測，如抗核抗體、抗線粒體抗體等。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）原理將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。01優(yōu)點操作簡便、快速、易于自動化和大規(guī)模檢測。02缺點靈敏度略低于IIF法，且存在非特異性結(jié)合的問題。03應(yīng)用范圍廣泛應(yīng)用于各種蛋白質(zhì)、激素、藥物等小分子物質(zhì)的檢測。04根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該技術(shù)將蛋白質(zhì)樣品先通過凝膠電泳進行分離，再轉(zhuǎn)印至固相膜上，最后通過特異性抗體進行檢測。免疫印跡具有高通量、高靈敏度、高特異性的優(yōu)點，可一次性檢測多種目標物質(zhì)。優(yōu)點利用不同的抗原抗體反應(yīng)原理，在同一檢測體系中同時檢測多種不同的目標物質(zhì)。多重檢測技術(shù)010302免疫印跡與多重檢測技術(shù)操作復雜，需要昂貴的儀器設(shè)備和專業(yè)的技術(shù)人員。缺點0403典型疾病應(yīng)用類風濕性關(guān)節(jié)炎檢測類風濕因子（RF）檢測01RF是類風濕性關(guān)節(jié)炎的重要血清學標志，可用于早期診斷和病情監(jiān)測。抗角蛋白抗體譜（AKA、APF、AFA）檢測02對于類風濕性關(guān)節(jié)炎的早期診斷和鑒別診斷具有重要價值。關(guān)節(jié)液檢查03關(guān)節(jié)液分析可鑒別關(guān)節(jié)炎的類型，類風濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液表現(xiàn)為炎性改變。關(guān)節(jié)影像學檢查04X線、CT、MRI等影像學檢查有助于發(fā)現(xiàn)關(guān)節(jié)早期病變。系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷抗核抗體（ANA）檢測ANA是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的最佳篩選試驗，陽性率可高達95%。抗雙鏈DNA抗體（dsDNA）檢測dsDNA抗體與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的活動性密切相關(guān)，可用于病情監(jiān)測?？筍m抗體檢測Sm抗體是診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的標記抗體之一，特異性較高。腎功能及尿常規(guī)檢查系統(tǒng)性紅斑狼瘡易累及腎臟，需定期監(jiān)測腎功能。自身免疫性甲狀腺疾病甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）檢測01TPOAb是自身免疫性甲狀腺疾病的重要標志物，可用于診斷橋本甲狀腺炎等疾病。甲狀腺球蛋白抗體（TgAb）檢測02TgAb在自身免疫性甲狀腺疾病中具有較高的陽性率，有助于疾病的診斷和鑒別診斷。甲狀腺功能檢測03包括TSH、T3、T4等指標的檢測，可反映甲狀腺的功能狀態(tài)。甲狀腺超聲檢查04超聲檢查有助于發(fā)現(xiàn)甲狀腺的結(jié)節(jié)、腫大等異常病變。04實驗技術(shù)原理抗原抗體反應(yīng)特性抗原與抗體之間的結(jié)合具有高度特異性，即一種抗體只能與一種抗原結(jié)合，這種特異性是免疫學檢測的基礎(chǔ)。特異性敏感性親和性抗原抗體反應(yīng)非常靈敏，極微量的抗原與抗體結(jié)合即可產(chǎn)生可見的反應(yīng)?？乖c抗體結(jié)合后形成的復合物較為穩(wěn)定，不易受外界因素干擾。臨界值設(shè)置依據(jù)陰性對照通過設(shè)定陰性對照實驗，確定無待測物時的反應(yīng)情況，為臨界值提供基礎(chǔ)。01陽性對照通過設(shè)定陽性對照實驗，確定待測物存在時的反應(yīng)情況，驗證實驗的準確性。02統(tǒng)計分析根據(jù)陰性對照和陽性對照的結(jié)果，采用統(tǒng)計學方法確定臨界值，確保實驗結(jié)果的可靠性。03方法學性能驗證準確性可重復性精密度抗干擾性通過與實際已知結(jié)果的樣本進行比較，評估方法的準確性。對同一樣本進行多次檢測，評估方法的穩(wěn)定性和重復性。在不同實驗室或不同操作者之間進行實驗，評估方法的普遍適用性。通過添加干擾物質(zhì)，評估方法對干擾物的抗干擾能力。05結(jié)果判讀原則定性/定量報告解讀定性檢測基于免疫反應(yīng)的強弱程度，判斷待測物是否存在或超出一定閾值，結(jié)果通常以陰性或陽性表示。定量檢測灰區(qū)判讀測量待測物的具體濃度或含量，結(jié)果通常以數(shù)值或圖表形式表示，可反映待測物的量變情況。對于某些定量檢測，當結(jié)果處于臨界值附近時，需特別注意，可能需要多次檢測或結(jié)合其他檢測方法進行確認。123假陽性與假陰性分析指實際為陰性但檢測結(jié)果為陽性的情況，可能由非特異性反應(yīng)、干擾物質(zhì)、試劑或儀器誤差等因素引起。假陽性假陰性糾正措施指實際為陽性但檢測結(jié)果為陰性的情況，可能由待測物濃度過低、反應(yīng)體系不敏感、采樣不當或試劑失效等因素引起。對于假陽性和假陰性結(jié)果，應(yīng)盡可能通過重復檢測、使用不同試劑或方法、優(yōu)化實驗條件等方式進行糾正，以確保結(jié)果的準確性。動態(tài)監(jiān)測臨床意義通過動態(tài)監(jiān)測免疫指標的變化，可輔助判斷疾病的進程、嚴重程度和治療效果，為臨床決策提供重要依據(jù)。評估病情某些免疫指標的變化可能早于臨床癥狀的出現(xiàn)，通過動態(tài)監(jiān)測可及時發(fā)現(xiàn)潛在的風險，采取預防措施避免或減輕疾病的發(fā)生。預測風險根據(jù)免疫指標的變化情況，可調(diào)整治療方案，選擇更加針對性的治療措施，提高治療效果和患者的生存質(zhì)量。指導治療06質(zhì)量控制要點室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)范質(zhì)控品選擇質(zhì)控圖繪制質(zhì)控品檢測失控處理選擇與檢測項目匹配的質(zhì)控品，確保其穩(wěn)定性和可靠性。每天或每周進行質(zhì)控品檢測，記錄并分析結(jié)果，確保在控。根據(jù)質(zhì)控品檢測結(jié)果繪制質(zhì)控圖，觀察誤差分布和趨勢。當質(zhì)控結(jié)果超出控制限時，應(yīng)立即停止檢測，查找原因并采取糾正措施。室間質(zhì)評實施流程報名參與按照相關(guān)要求，向室間質(zhì)評組織報名參與。01樣本分發(fā)接收并妥善保管室間質(zhì)評樣本，確保樣本的完整性和一致性。02樣本檢測按照常規(guī)檢測方法對室間質(zhì)評樣本進行檢測，并保留檢測記錄。03結(jié)果上報將檢測結(jié)果按要求上報給室間質(zhì)評組織，進行結(jié)果比對和分