2024年高中生物新教材同步選擇性必修第三冊(cè)第1章發(fā)酵

工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用第2節(jié)微生物的培

養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

第1課時(shí)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

課程內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)核心素養(yǎng)對(duì)接

1科.學(xué)思維—根據(jù)微生物的代謝類型

1.概述培養(yǎng)基的配制方法和微生物純培

分析培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組成。

養(yǎng)的基本操作要求。

2科.學(xué)探究一設(shè)計(jì)制備馬鈴薯固體培

2.掌握無(wú)菌技術(shù)的操作.

養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)步驟，并嘗試運(yùn)用平板劃線

3.掌握酵母菌純培養(yǎng)的方法及步躲。

法進(jìn)行純化酵母菌。

「課前?自主予頁(yè)習(xí)自主梳理夯基礎(chǔ)

知識(shí)點(diǎn)1培養(yǎng)基的配制

1.培養(yǎng)基的概念、用途和類型

年、人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物用的不同需求.

配制出供其生K紫流的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)

￡用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積

累其儂物病E3叱胞中”生生

.........治,不能用節(jié)逢塔,基來(lái)培Jk

鬻現(xiàn)下/液入體凝培養(yǎng)固基劑,如瓊脂不房能提需件

性質(zhì)分詞體培養(yǎng)基二有就

2.培養(yǎng)基的配方

(1)主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：水、碳遮、氮源、無(wú)機(jī)鹽。

⑵其他條件：pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。如下表:

微生物乳酸桿菌霉菌細(xì)菌厭氧微生物

DH調(diào)至中性或

特殊需求添加維生素pH調(diào)至酸性無(wú)氧

弱堿性

知識(shí)點(diǎn)2無(wú)菌技術(shù)

1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵：防止雜菌污奧。

2.消毒和滅菌

:‘消毒、;：'滅菌!

vV

較為溫和的物理、

化學(xué)或生物等方法強(qiáng)烈的理化方法

殺死物體表面或內(nèi)殺死物體內(nèi)外

部一部分微生物近且微，匕物

一般不能殺滅能殺滅

操作的空間、操作微生物培養(yǎng)的器

者衣著和雙手皿、接種用具和

培養(yǎng)基等

邈消毒法、小麗嘿盟F、

消:法」二一般矗

還有涵籽強(qiáng)斗法.毛.外線曲斗法--

3.注意事項(xiàng)

（1）實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。

⑵為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)上并在酒精燈

火焰附近進(jìn)行。

知識(shí)點(diǎn)3微生物的純培養(yǎng)

1.純培養(yǎng)的概念

,、在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，

（培養(yǎng)物—在合適條件下形成的含特定種類微生

物的群體

?--------

［純培養(yǎng)物—由單一個(gè)體繁殖所?得的微生物群體

［純?養(yǎng)F獲得純培養(yǎng)物的過(guò)程

2.純培養(yǎng)的過(guò)程（以酵母菌為例）

包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。

（1）制備培養(yǎng)基

培養(yǎng)基斤稱取一煮沸一過(guò)濾一加瓊脂一定容

培養(yǎng)基:高壓蒸汽滅菌

培養(yǎng)皿:「?熱滅菌

魚強(qiáng)A如卜?圖

庖過(guò)約現(xiàn)又西，防立機(jī)匕的微生秒污果培為基

①拔出錐形

②將瓶

瓶的棉塞

口迅速

&港料行通過(guò)火

火后玲］\庭一

①

③用拇指和食'④

指將培養(yǎng)皿打

開一條梢大干④等待培養(yǎng)基冷卻

瓶口的縫隙.凝固后，將培養(yǎng)皿

將培養(yǎng)基(1。~熙逑放置J

防工玲流水一滴落￡玲

20EL)倒入培養(yǎng)皿，立即蓋

上皿蓋洋弟上引發(fā)污果

(2)平板劃線法接種和分離酵母菌

_通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基衣面連續(xù)劃線

逸虹的操作,將聚集的菌種逐步稀稀分散到

培養(yǎng)基的表面經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可

以分離得到單菌落

(步蛆

畬

將

③試

①冷接種環(huán)放②在火焰旁冷卻雀

口

通

在火焰上灼燒,種環(huán)。同時(shí)，拔出管

火

焰

由

直到接種環(huán)的裝有酵母菌培養(yǎng)液

金屬絲燒紅C的試管的棉塞。

法奎號(hào)年劃破塔外基表面

⑥在火焰附近將皿蓋打⑤將試管

④在火焰

開一條縫隙JH接種環(huán)在口通過(guò)火

培養(yǎng)基表面迅速劃三至焰.并塞附近用接

種環(huán)蘸取，

五條平行線，蓋上恥蓋。上棉塞。

一環(huán)菌液。

以免玨科環(huán)溫度太氤東無(wú)函鐘T

一、⑦灼燒接種環(huán)，待其途理后,從第一

修⑥次劃線的末端開始作第二次劃線里

復(fù)以上操作，作第三、四、五次劃線。

T%.不車將吳育一次的不雋,與第一次的對(duì)囁和得

(3)培養(yǎng)酵母菌

將接種后的平板和一個(gè)耒接種的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

24-48ho

?自查自糾

(1)培養(yǎng)基中的碳源物質(zhì)有可能同時(shí)是氮源(J)

(2)只要培養(yǎng)基中的物質(zhì)含有氮元素，就可作為氮源(X)

(3)微生物在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)可形成菌落(義)

(4)滅菌相比消毒對(duì)微生物的殺滅更徹底(J)

(5)只要是沒有生物活性的材料均可進(jìn)行高壓蒸汽滅菌(X)

(6)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)UI后再進(jìn)行濕熱滅菌(X)

(7)為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落(X)

?教材邊角

教材Pu“資料卡”拓展

1.將無(wú)菌技術(shù)類型、常用方法和適用對(duì)象用線連起來(lái)。

域型，：方法，河生

VV

產(chǎn)灼燒滅菌^——1.接種針(環(huán))

U—二jb.干熱滅菌

/II.操作空間(接種室)

阿可.巴氏消毒<ID.培養(yǎng)皿

卜.紫外線消毒彳：

、IV'.牛奶等不耐高溫

p/\c.化學(xué)藥物\液體

鋰郵\(酒精).V.操作者雙手

\f.高壓蒸汽一一

培養(yǎng)基

滅菌\\口.試管口

教材Pl1圖示拓展訓(xùn)練

2.下圖為接種環(huán)灼燒滅菌的示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

/￡/

A①②③

(1)酒精燈火焰A、B代表充分燃燒層的是

(2)滅菌先后的正常順序是③一①一②(用序號(hào)和箭頭表示)。

I教材P2“探究?實(shí)驗(yàn)”拓展

3.下圖表示倒平板的正確操作步驟是③f④f②f①(用序號(hào)和箭頭表示)。

①②③④

門課中?合作探究任務(wù)驅(qū)動(dòng)重思維

探究點(diǎn)一培養(yǎng)基的配制

■情境探疑

1.下表是某培養(yǎng)基的配方，分析回答：

材料牛肉膏蛋白陳NaCl瓊脂水

用量5g10g5g20g定容至1()00mL

(1)根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于哪類培養(yǎng)基，理由是什么？

提示固體培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的配方中含有凝固劑瓊脂。

⑵該培養(yǎng)基中提供碳源和氮源的物質(zhì)是什么？屬于有機(jī)物還是無(wú)機(jī)物？為什么

培養(yǎng)基需要氮源？

提示牛肉膏和蛋白豚提供碳源和氮源。二者均屬于有機(jī)物。培養(yǎng)基中的氮元素

是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)必需的。

(3)該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是_______,理由是什么？。

提示異養(yǎng)型微生物該微生物的碳源和氮源是有機(jī)物。

2.下表是某微生物培養(yǎng)基的成分，請(qǐng)分析該培養(yǎng)基可用來(lái)培養(yǎng)哪種微生物？若除

去①，此培養(yǎng)基可用來(lái)培養(yǎng)圓褐固氮菌嗎？

編號(hào)?@@⑤

成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaChH2O

含量/g0.44.0().5().5100mL

提示此培養(yǎng)基可用來(lái)培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物。圓褐固氮菌雖可以固氮，但其同化作

用類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中必須提供含碳有機(jī)物，所以該培養(yǎng)基不能用來(lái)培養(yǎng)圓

褐固氮菌。

名師批注

1.幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)和能量來(lái)源

微生物j:氮源：:能源：

VVVV

藍(lán)細(xì)菌>CO2NH；、NO：等光能

1

硝化細(xì)菌>CO,NH,NH,的氧化（

1

根瘍菌糖類等為機(jī)物用機(jī)物

N2

1

糖類、蛋白蛋白質(zhì)等有機(jī)物

大腸桿菌>

質(zhì)等有機(jī)物

2.巧記培養(yǎng)基的種類和作用

按物理狀態(tài)分類

,商：舒看萬(wàn)王

V▼V

不加凝固劑?（液體培養(yǎng)基）■工業(yè)生產(chǎn)

加凝固劑半固體觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分

（如晾脂）培養(yǎng)基類鑒定

加凝固劑微生物的分離、鑒定，

*固體培養(yǎng)基

（如瓊脂）活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏等

［例1］下列有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是（）

A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源

BJ股生物的培養(yǎng)都需要提供碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽，缺一不可

C.牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)全面

D.液體培養(yǎng)基有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，可用于微生物的擴(kuò)增培養(yǎng)

答案D

解析同一種物質(zhì)可以既作碳源又作氮源，如牛肉膏，A錯(cuò)誤；不同的微生物所

需的條件不同，如培養(yǎng)自生固氮菌時(shí)不需要加入氮源，B錯(cuò)誤；牛肉膏蛋白陳培

養(yǎng)基屬于天然培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)全面，C錯(cuò)誤；液體培養(yǎng)基有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，

可用于微生物的擴(kuò)增培養(yǎng)，D正確。

［例2］回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問(wèn)題。

（1）在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是_______（填“蛋白

月東”“葡萄糖”或“NaNCh"）。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不司來(lái)

調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是o

硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上_______（填“能夠”或“不能”）生長(zhǎng)，原因是

⑵用平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)一般需要將平板（填“倒置”或“正置”）。

⑶單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通?？筛鶕?jù)菌落的形狀、大小、顏

色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是

______________________________________________________________________0

（4）有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過(guò)_______處理，這種處理可以殺死丟

棄物中所有的微生物。

答案（1）蛋白陳不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可

以利用空氣中的CO2作為碳源（2）倒置

⑶在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征

（4）滅菌

解析（1）細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)常用牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷

酸鹽、維生素，蛋白陳能提供碳源、氮源、維生素，而葡萄糖不能提供氮源，

NaNCh不能為微生物提供碳源。不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的最適pH是不同的，

應(yīng)該根據(jù)培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。硝化細(xì)菌是化能自養(yǎng)型細(xì)菌，可

以利用空氣中的CO2為碳源，因此在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠生長(zhǎng)。（2）在平板

培養(yǎng)基上培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需將平板倒置，這樣可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)

基造成污染。（3）不同種類的細(xì)菌所形成的菌落，在大小、形狀、光澤度、顏色、

硬度、透明度等方面具有一定的特征，不同種細(xì)菌在一定培養(yǎng)條件下表現(xiàn)出各自

穩(wěn)定的菌落特征，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。（4）使用后的培養(yǎng)基在丟棄前

需進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。

學(xué)霸感悟

1.微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落。

2.擴(kuò)大培養(yǎng)獲得大量菌種時(shí)常用液體培養(yǎng)基。

3.不是所有微生物的培養(yǎng)基中都需要加入碳源、氮源。

（1）自養(yǎng)型微生物能利用無(wú)機(jī)碳源（如空氣中的CCh）,故培養(yǎng)基中不用添加碳源。

（2）固氮微生物可利用N2作為氮源，故培養(yǎng)基中不用加入氮源。

氨是硝化細(xì)菌的氮源，硝化細(xì)菌利用、氧化環(huán)境占的氫所釋放的化學(xué)能，將C02

最終還原為儲(chǔ)存能量的有機(jī)物，進(jìn)行化能合成作用。

對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、0、N的有機(jī)化合物（尿素除外）既可能是碳源，又

可能是氮源和能源。

探究點(diǎn)二無(wú)菌技術(shù)

＞情境探疑

1.通過(guò)學(xué)習(xí)無(wú)菌技術(shù)，關(guān)注生活中的現(xiàn)象和人類健康。

（1）“無(wú)菌操作”與人們的生活休戚相關(guān)，無(wú)時(shí)無(wú)處不在。在日常生活、生產(chǎn)實(shí)

踐、自身健康防護(hù)中，分別有哪些“無(wú)菌操作”的例子？

提示在日常生活、生產(chǎn)實(shí)踐、自身健康防護(hù)中“無(wú)菌操作”的例子分別有：

①被褥、鞋襪要常曬；肉制品儲(chǔ)存時(shí)用鹽腌等。②家畜閹割后，要在其傷口處涂

抹一些酒精或白酒；初冬楊樹樹干涂刷生石灰水等。③打針時(shí)，注射部位要用酒

精棉球擦拭；在皮膚傷口處涂抹一些碘酒。

⑵常用酒精擦拭雙手是預(yù)防新冠肺炎的日常防護(hù)措施之一，這是消毒還是滅

菌？體積分?jǐn)?shù)為70%和95%的酒精，哪種效果更好？為什么？

提示酒精擦拭屬于消毒。酒精消毒時(shí)，70%的酒精殺菌效果最好。濃度過(guò)高，

使菌體表面蛋白質(zhì)凝固成一層保護(hù)膜，酒精分子不能滲入其中；濃度過(guò)低，殺菌

能力減弱。

2.對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)者的雙手、空氣和牛奶常采用的滅菌或消毒

方法分別是什么？

提示分別為高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)藥物消毒、紫外線消毒、

巴氏消毒法。

3.消毒和滅菌的原理是什么？能否殺死所有的微生物？

提示消毒和滅菌都是使微生物的蛋白質(zhì)變性，借此殺死微生物。滅菌可殺死處

理材料中的全部微生物（包括芽泡和抱子）。而消毒僅殺死部分微生物（一般不包括

芽袍和抱子）。

名師批注

1.不同消毒方法的特點(diǎn)

高溫避高溫可以使菌體細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸變

消毒7性失活，從而達(dá)到消毒的目的

巴氏L”與貳沸消毒法相比，巴氏消毒法的優(yōu)點(diǎn)是

消兼》達(dá)到消毒目的的同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少

I體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精殺菌放果最好，

而劇70%若酒精濃度過(guò)高，菌體表面蛋白質(zhì)變性

消毒前過(guò)快而凝固成一層保護(hù)膜，酒精不能滲

入其中；濃度過(guò)低，殺菌能力減弱

I紫外線主要是通過(guò)對(duì)微生物的輻射損傷和

紫外］破壞核酸的功能使微生物致死，從而達(dá)到

線消卜消毒的目的.在用紫外線照射前，適量噴

毒I灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加

強(qiáng)消毒效果

2.高壓蒸汽濕熱滅菌問(wèn)題分析

(I)高壓蒸汽滅菌開始之前要將鍋內(nèi)的冷空氣排盡。滅菌完畢后，要待壓力降到0

時(shí)才能打開排氣閥。

(2)在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大。

(3)在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí)，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排出是否完全極為重要，

因?yàn)榭諝獾呐蛎泬捍笥谒魵獾呐蛎泬?，所以，?dāng)水蒸氣中含有空氣時(shí)，在同一

壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。

(4)如果在壓力未降到0時(shí)打開排氣閥，會(huì)導(dǎo)致鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的

培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生

污染。

［例3］在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，關(guān)于滅菌和消毒的理解，錯(cuò)誤的是()

A.消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物

B.滅菌是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽胞和泡子

C.實(shí)驗(yàn)中使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行消毒處理，以免污染環(huán)境

D.吸管和培養(yǎng)皿可以采用干熱滅菌法

答案C

解析消毒只能殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物，不能殺死抱子和芽抱，A

正確；滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，在經(jīng)過(guò)滅菌后

的物體中，不再存在任何活著的生命，包括芽狗和狗子，B正確：實(shí)驗(yàn)中使用后

的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境，C錯(cuò)誤；常用的滅菌方法

有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌等，吸管和培養(yǎng)皿可以采用干熱滅菌法，D正

確。

［例4］在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染?；?/p>

答下列問(wèn)題：

⑴在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具（填“可以”或“不可以”）

放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。

（2）牛奶的消毒常采用巳氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩

種方法的優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________

⑶密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能

0在照射前，適量噴灑,可強(qiáng)化消毒效果.

（4）水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)_______（填“氯氣”“乙醇”或“高鎰酸鉀”）

消毒的。

答案（1）可以（2）在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少（3）破壞微生物

DNA結(jié)構(gòu)消毒液（4）氯氣

解析（1）在實(shí)驗(yàn)室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬

材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。（2）巴氏消毒法或高溫

瞬時(shí)消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點(diǎn)表現(xiàn)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損

失較少。（3）紫外線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細(xì)胞中的DNA分子。

在利用紫外線照射前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。（4）自來(lái)水通常采用

氯氣消毒。

探究點(diǎn)三微生物的純培養(yǎng)

＞情境探疑

1.結(jié)合倒平板的操作程序請(qǐng)?zhí)骄浚?/p>

圖一圖二

（1）如圖一所示，為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？

提示通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基C

(2汝I圖二所示，從防止雜菌污染的角度思考，為什么培養(yǎng)基冷卻凝固后將平板

倒置？

提示可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

(3)培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到5()°C左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板?？捎檬裁崔k法來(lái)

估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？

提示可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺溫度下降到剛剛不燙手即可。

2.下圖是平板劃線操作的示意圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

小婪*廣

abcd

efgh

(1)用字母和箭頭表示平板劃線操作的正確步驟：

提示d—b-f—a—e—c—h-g

(2)為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束

時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？

提示操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培

養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種,

使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次

數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。劃線結(jié)束后

需要灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操

作者。

⑶在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃

線？

提示劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末

端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)

菌繁殖而來(lái)的菌落。

(4)接種結(jié)束后，為什么要將一個(gè)未接種的培養(yǎng)基和一個(gè)己接種的培養(yǎng)基放在一

起培養(yǎng)，未接種的培養(yǎng)基表面如果有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明了什么？

?o

①②

將接種后的平板①和一個(gè)

未接種的平板②倒置，

放入28C左右的恒溫培

養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h

提示培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對(duì)照，未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1?2d

后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基的制備是成功的。若有菌落形成，說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不

徹底，或培養(yǎng)基被污染了，需要重新制備。

?歸納提升

1.平板劃線操作及培養(yǎng)結(jié)果

接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步分散到培養(yǎng)基的表面。平

板劃線示意圖(A)及培多后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。

AB

2.平板劃線操作的注意事項(xiàng)

(1)蘸取菌液前及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)，劃線操作結(jié)束后仍需灼燒接

種環(huán)，三種灼燒的目的不同。

目的項(xiàng)目

慈取菌液前灼燒避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染菌種

殺死上一次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃

每次劃線前灼燒

線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上一次劃線的末端

及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免菌種污染環(huán)境和感染

劃線操作結(jié)束后灼燒

操作者

(2)在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免溫度過(guò)高殺死菌種。

(3)除第一次劃線外，每次劃線都從上一次劃線的末端開始，這樣能使細(xì)菌的數(shù)

目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。

(4)劃線時(shí)用力大小要適當(dāng)，防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破。

［例5］下列關(guān)于制備固體培養(yǎng)基時(shí)倒平板的敘述，正確的是（）

A.倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行干熱滅菌

B.應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上

C.為防止微生物侵入培養(yǎng)基，要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作

D.倒好培養(yǎng)基后，立即將平板倒過(guò)來(lái)放置，不需要冷凝

答案C

解析應(yīng)該在倒平板之前將培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，將培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌，

A錯(cuò)誤；倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶

中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)瓜，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯(cuò)誤；為防止微生物侵

入培養(yǎng)基，要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作，C正確；倒好培養(yǎng)基后，等培養(yǎng)基冷凝

后再將平板倒過(guò)來(lái)放置，D錯(cuò)誤。

［例6］為純化菌種，在固體培養(yǎng)基上劃線接種分解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所

示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.為保證無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌

B.倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整

C.圖中I、II區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從III區(qū)挑取單菌落

D.該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因出現(xiàn)單菌落，能達(dá)到菌種純化的目的

答案B

解析為保證無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，A正確；倒平板時(shí)

需左三圈，右三圈的輕輕晃動(dòng)，以保證表面平整，B錯(cuò)誤；圖中I、H區(qū)的細(xì)菌

數(shù)量均太多，應(yīng)從ni區(qū)挑取單菌落，c正確；該實(shí)驗(yàn)的in區(qū)已經(jīng)出現(xiàn)由單個(gè)細(xì)菌

繁殖而形成的菌落，因此已經(jīng)達(dá)到菌種純化的目的，D正確。

I課堂小結(jié)

思維導(dǎo)圖晨讀必背

1.培養(yǎng)基中一般都含有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

2.消毒的目的是殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物；滅菌則

是殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽抱和抱子。

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3.實(shí)驗(yàn)室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用化學(xué)藥劑或紫

?網(wǎng):

外線進(jìn)行消毒，常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和

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濕熱滅菌等。

4.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培

養(yǎng)等步驟。

隨堂檢測(cè)

1.微生物培養(yǎng)過(guò)程中，要十分重視無(wú)菌操作，現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的許多方面也要

進(jìn)行無(wú)菌操作，防止雜菌污染。請(qǐng)分析下列操作中錯(cuò)誤的是（）

A.自來(lái)水常用氯氣進(jìn)行消毒

B.接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行

C.大多數(shù)培養(yǎng)基要進(jìn)行濕熱滅菌

D.加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌

答案D

解析水源常用氯氣消毒，A正確；酒精燈火焰附近存在一個(gè)無(wú)菌區(qū)，為了避免

雜菌污染，接種操作要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，B正確；大多數(shù)培養(yǎng)基要進(jìn)行濕

熱滅菌，C正確；加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料也需要滅菌，D錯(cuò)誤。

2.下列是對(duì)四種微生物的能源、碳源、氮源、新陳代謝類型的描述，正確的一組

是（）

選項(xiàng)微生物種類乳酸菌根瘤菌硝化細(xì)菌衣藻

能源糖類光能光能

ANH3

B碳源糖類CO2CO2CO2

C氮源NOJN2NH?NCh

D代謝類型異養(yǎng)厭氧型自養(yǎng)好氧型自養(yǎng)好氧型自養(yǎng)好氧型

答案C

解析根瘤菌不能利用光能，A錯(cuò)誤；根瘤菌能固氮，但不能自己制造有機(jī)物，

它的碳源不是CO2,B錯(cuò)誤；乳酸菌的氮源是NO"根瘤菌能固氮、氮源是N2,

硝化細(xì)菌的氮源是NFh,衣藻的氮源是NCK,C正確；根瘤菌的代謝類型是異

養(yǎng)好氧型，D錯(cuò)誤。

3.A?D依次表示倒平板、接種的位置，以及劃線法接種的路徑示意圖，錯(cuò)誤的

是（）

答案D

解析倒平板時(shí)，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大干瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中

的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，防止空氣中的雜菌污染，A

正確；接種時(shí)，在酒精燈火焰附近，左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將沾有菌

種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，B正確；劃線時(shí)要從上一次劃線的末端開始進(jìn)行，

讓菌種來(lái)源于上一次劃線末端，C正確、D錯(cuò)誤c

4.下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是

)

④

A.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

B.步驟①中待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋

C.步驟③中，每次劃線前后都需對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理

D.劃線結(jié)束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

答案B

解析分析題圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)蘸取菌液，③是進(jìn)行平板劃線,

④是培養(yǎng)。①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，以防止雜菌污染，A正

確；倒完平板后應(yīng)立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，以防止雜菌污染，B錯(cuò)誤；每次劃線

前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線

時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使

每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單菌落，C正確；劃線結(jié)束后，將平

板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，可以避免培養(yǎng)基中的水分過(guò)快地?fù)]發(fā)和防止皿蓋上

的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，D正確。

課后?分層訓(xùn)練

（時(shí)間:30分鐘）

基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)

知識(shí)點(diǎn)1培養(yǎng)基的配制

1.關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)，下列說(shuō)法正確的是（）

A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源

B.除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽

CJL是碳源都能提供能量

D.無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量

答案D

解析對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、0、N的化合物既是碳源，又是氮源，如

牛肉膏，A錯(cuò)誤；CO2和N2是無(wú)機(jī)物，也是某些微生物的碳源和氮源，B錯(cuò)誤;

有機(jī)碳源能提供能量，無(wú)機(jī)碳源不能提供能量，C錯(cuò)誤；硝化細(xì)菌可利用體外

NH3氧化獲得能量，D正確。

2.下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A.制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先滅菌后定容再倒平板

B.培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性

C.培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素

D.培養(yǎng)破傷風(fēng)芽抱桿菌時(shí)需要提供有氧的條件

答案C

解析制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)先定容后滅菌再倒平板，A錯(cuò)誤；培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)

基的pH調(diào)至酸性，B錯(cuò)誤；維生素是乳酸桿菌生長(zhǎng)繁殖所必需的，但其自身不

能合成，因此培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添和維生素，C正確：破傷風(fēng)芽狗

桿菌屬于厭氧菌，培養(yǎng)破傷風(fēng)芽泡桿菌時(shí)需要提供無(wú)氧的條件，D錯(cuò)誤。

知識(shí)點(diǎn)2無(wú)菌技術(shù)

3.防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯(cuò)誤

的是（）

A.實(shí)驗(yàn)室里可用化學(xué)藥物或紫外線對(duì)物體表面或空氣進(jìn)行消毒

B.實(shí)驗(yàn)室里不可吃東西，離開時(shí)一定要洗手以防被微生物感染

C.接種環(huán)、接種針等用具應(yīng)在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌

D.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境

答案C

解析實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒，A正確；實(shí)驗(yàn)室中，不可吃

東西、喝水，離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手，以防被微生物感染，B正確；接種環(huán)、

接種針等金屬用具，應(yīng)在酒精燈火焰的充分燃燒層（外焰）灼燒滅菌，C錯(cuò)誤；使

用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境，D正確。

4.金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的致病力，可能引起食物中毒，利用該菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)

束后的做法不正確的是（）

A.對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理

B.帶菌培養(yǎng)基經(jīng)高壓蒸汽鍋滅菌后倒掉

C.帶菌培養(yǎng)基經(jīng)加熱后才能倒掉

D.接種后雙手必須用肥皂洗凈，再用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精棉球擦拭

答案C

解析接種環(huán)屬于金屬用具，所以要用灼燒滅菌的方法進(jìn)行滅菌處理，A正確；

為了避免對(duì)環(huán)境造成污染，帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)過(guò)高壓蒸汽滅菌后才能被倒掉，加

熱后不一定能將細(xì)菌殺死，B正確、C錯(cuò)誤；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)實(shí)驗(yàn)者的雙手必須

進(jìn)行消毒，一般用洗滌劑洗滌或者酒精擦拭，D上確。

5.下列有關(guān)無(wú)菌技術(shù)的說(shuō)法，正確的是（）

A.無(wú)菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實(shí)驗(yàn)室中所有的微生物

B.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

C.經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，不能在常溫下長(zhǎng)期保存

D.在無(wú)菌技術(shù)中，若處理對(duì)象為液體，則只能消毒，不能滅菌

答案c

解析無(wú)菌技術(shù)的關(guān)鍵是防止雜菌的污染，A錯(cuò)誤；培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基一般用

高壓蒸汽滅菌，微生物的接種工具，如接種針、接種環(huán)或其他金屬用具一般通過(guò)

酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒來(lái)滅菌，B錯(cuò)誤；經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生

物未被徹底消滅，不能在常溫下長(zhǎng)期保存，C正確；在無(wú)菌技術(shù)中，若處理對(duì)象

為液體，可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌，D錯(cuò)誤。

知識(shí)點(diǎn)3微生物的純培養(yǎng)

6.如圖是實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌過(guò)程中的部分操作步驟，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是

()

①②③④

A.①步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌

B.①②③步驟操作時(shí)均需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

C.④在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需要將平板倒置

D.④操作過(guò)程中，需灼燒接種環(huán)5次

答案D

解析①為倒平板，該步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌，A正確；①②③步驟操作時(shí)

需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止被雜菌污染，B正確；④在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)

需要將平板倒置，防止冷凝水滴入培養(yǎng)基，造成污染，C正確；每次劃線前后都

要灼燒接種環(huán)，因此④操作過(guò)程中，需灼燒接種環(huán)6次，D錯(cuò)誤。

7.如圖是倒平板的操作，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

甲乙丙丁

A.正確的操作順序應(yīng)該是丙一乙一甲一丁

B.甲在酒精燈火焰附近進(jìn)行可以避免雜菌污染

C.丁操作必須要等待平板冷卻凝固后才能進(jìn)行

D.培養(yǎng)基應(yīng)冷卻到50C倒平板是因?yàn)樵摐囟认虏灰资茈s菌污染

答案D

解析倒平板正確的操作順序應(yīng)該是丙一乙一甲一丁，A正確；將培養(yǎng)基倒入培

養(yǎng)皿（甲），在酒精燈火焰附近進(jìn)行可以避免雜菌污染，B正確；丁操作為將培養(yǎng)

基倒置，必須要等待平板冷卻凝固后才能進(jìn)行，C正確；培養(yǎng)基冷卻到5（）C時(shí)

既不燙手，也不發(fā)生凝固，適宜進(jìn)行倒平板，而不是防止雜菌污染，D錯(cuò)誤。

8.下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染

B.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落造成污染

C.倒平板時(shí)將培養(yǎng)皿的蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿

D.檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中

培養(yǎng)

答案C

解析倒平板時(shí)用食指和拇指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，使其恰好能

讓錐形瓶瓶口伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤。

綜合提升

9.接種微生物的方法很多，平板劃線法是最常用的一利％如圖是平板劃線示意圖,

劃線的順序?yàn)棰佗冖邰堋２僮鞣椒ㄖ绣e(cuò)誤的是（）

A.劃線操作時(shí)，將沾有菌種的接種環(huán)插入培養(yǎng)基

B.平板劃線后培養(yǎng)微生物時(shí)要倒置培養(yǎng)

C.不能將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連

D.在②?④區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌

答案A

解析將沾有菌種的接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，而不能插入培

養(yǎng)基；用平板劃線法培養(yǎng)微生物時(shí)，為防止水蒸氣凝集滴入培養(yǎng)基造成干擾或污

染，應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置培養(yǎng)；劃線時(shí)要避免最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連，因

為最后一區(qū)的細(xì)菌最稀少，而第一區(qū)的細(xì)菌最致密，如果連在一起則有可能影響

單個(gè)菌落的分離效果；在②?④區(qū)域中劃線前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，保證

每次劃線的菌種來(lái)自上一區(qū)域的末端，劃線結(jié)束灼燒接種環(huán)是為了防止菌種污染

環(huán)境和感染操作者。

1（）.如圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化醋酸菌的部分操作步驟，請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

（1）步驟①是制備培養(yǎng)基時(shí)的操作，該操作需待培養(yǎng)基冷卻至

左右時(shí)進(jìn)行O

⑵該實(shí)驗(yàn)中純化醋酸菌的接種方法是_________:完成步驟④的操作，接種環(huán)共

需要次灼燒處理，其中最后一次灼燒的目的是

（3）劃線的某個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后，第一次劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落,

第二次劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落，造成劃線上無(wú)菌落可

能的操作失誤有_________________________________________________________

____________________________________________________________（回答2個(gè)即可）。

⑷接種結(jié)束后，將步驟④中的培養(yǎng)犯倒置培養(yǎng)，皿底標(biāo)注

答案（1）倒平板50℃（2）平板劃線法6殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)

菌污染環(huán)境和感染操作者（3）接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一次劃線末端

開始（4）菌種及接種日期等信息

解析（1）步驟①是制備培養(yǎng)基時(shí)倒平板的操作，需要將培養(yǎng)基冷卻到50℃左右

時(shí)進(jìn)行。（2）根據(jù)步驟④可知，該實(shí)驗(yàn)純化醋酸菌的接種方法是平板劃線法，平

板劃線時(shí)，每次劃線后接種環(huán)都要進(jìn)行灼燒，第一次劃線前也要進(jìn)行灼燒，因此

完成步驟④的操作，接種環(huán)共需要6次灼燒處理，其中最后一次灼燒的目的是殺

死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。（3）造成劃線上無(wú)菌

落可能的操作失誤有接種環(huán)灼燒后未冷卻或劃線未從第一次劃線末端開始。

（4）為了防止培養(yǎng)皿蓋二的水珠滴落到培養(yǎng)基上引發(fā)污染，需要將培養(yǎng)皿倒置培

養(yǎng)，且同時(shí)在培養(yǎng)皿底標(biāo)注菌種及接種日期等信息。

11.下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方式，回答相關(guān)問(wèn)題:

甲乙

⑴圖甲是利用法進(jìn)行微生物接種的，圖乙是利用法進(jìn)行微生

物接種的，這兩種方法所用的接種工具分別是_________和;對(duì)這兩種接

種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是和酒精消毒。

⑵平板劃線時(shí)，為保證微生物的數(shù)目隨劃線次數(shù)的增加而逐步減少，每次劃線

都要從開始，平板劃線結(jié)束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線

（3）接種操作為什么一定要在酒精燈火焰附近進(jìn)行?

（4）下圖是接種后培養(yǎng)的效果圖解，其接種方法是_________（填“圖甲”或“圖

乙”）所示方法。

⑸假設(shè)用圖乙所示方法接種培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的

原因是O

答案（1）平板劃線稀釋涂布平板接種環(huán)涂布器灼燒滅菌（2）上一次劃

線的末端相連（或相接、相交、交叉等）（3）酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域

⑷圖乙（5）稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高

解析（1）分析題圖可知，圖甲和圖乙分別是利用平板劃線法和稀釋涂布平板法

進(jìn)行微生物接種的，這兩種方法所用的接種工具分別是接種環(huán)和涂布器。對(duì)這兩

種接種工具進(jìn)行滅菌和消毒的方法依次是灼燒滅菌和酒精消毒。（2）平板劃線時(shí),

每次劃線前都要從上一次劃線的末端開始，最后一次的劃線不能與第一次的劃線

相連。（3）在酒精燈火焰附近存在著無(wú)菌區(qū)域，因此接種常在酒精燈火焰附近進(jìn)

行。（4）分析題圖可知，培養(yǎng)基上的菌落分布均勻，則其接種方法為稀釋涂布平

板法。（5）采用稀釋涂布平板法進(jìn)行菌種分離時(shí)，稀釋度要足夠高，否則會(huì)導(dǎo)致

微生物不能分散成單個(gè)細(xì)胞。

第2課時(shí)微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

課程內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)核心素養(yǎng)對(duì)接

U闡明微生物選擇培養(yǎng)的原理.。1.科學(xué)思維—根據(jù)微生物的代謝特征配制選

2.概述測(cè)定微生物數(shù)量的方法。擇培養(yǎng)基。

3.進(jìn)行土壤中分解尿素的細(xì)菌的2.科學(xué)探究——設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分離土壤中的尿素分

分離與計(jì)數(shù)。解菌，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析與評(píng)價(jià)。

門課前?自主預(yù)習(xí)自主梳理夯基礎(chǔ)

知識(shí)點(diǎn)1選擇培養(yǎng)基及微生物的選擇培養(yǎng)

1.選擇培養(yǎng)基

在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物

生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止■他種類微生物生

?長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基

麻水人為提供有利于旦止逋生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)

［向理)養(yǎng)'溫度和PH等),同時(shí)抑制或阻止其他

微生物的生長(zhǎng)

分離尿素分解菌:以尿素為唯一氮源的選擇

培養(yǎng)暴~

能產(chǎn)生豚靜分部￡吉生族人仁為學(xué)生長(zhǎng)挑停氣源

2.微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法)

(1)系列稀釋操作

1mL1mL1mL1mL1mL1mL

、/—、/—―/—、/---、“---、

QQQQQQQ

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1X10；1X10“1X105IXIO11X1(P1X1O29°mL

均盛有9mL無(wú)菌水無(wú)菌水

將10g土樣加入盛有2QmL無(wú)菌水的錐形瓶中，充分搖勻。取1mL上清液加入

盛有9mL無(wú)菌水的試管中，依次等比稀釋。

(2)涂布平板操作

微格波區(qū)的槍頭中倭過(guò)又函，并且操作應(yīng)在

凈出燈乂靖附血史氐

福而］_取匹1mL菌液.滴加到

菌液廠培養(yǎng)基表面

涂

將涂布器浸在盛有迺趟布

器

的燒杯中

.?…?取力潦布區(qū)鳥，成遺兔沿樣滴落

將涂布