ICS65.020.01

CCSB01

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)

DB15/T3186—2023

山藥離體快繁技術(shù)規(guī)程

Technicalcodeofpracticeforinvitropropagationofyam

2023-10-30發(fā)布2023-11-30實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T3186—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧廳提出。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會（SAM/TC20）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院、鄂爾多斯市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究院、

巴彥淖爾市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究所。

本文件主要起草人：張艷芳、霍秀文、郭樹春、菅志亮、劉小燕、張曉蒙、張勇、邵盈、趙令敏、

喬慧蕾、邢麗南、葛明然、黃小龍。

I

DB15/T3186—2023

山藥離體快繁技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了山藥離體快繁體系中的培養(yǎng)基配制、外植體的獲取、滅菌、無菌苗獲取、無菌苗擴繁、

移栽等技術(shù)。

本文件適用于山藥離體快速繁殖的全過程。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

零余子bubil

山藥地上莖部葉腋間生有的腎形或卵圓形的珠芽，是一種氣生變態(tài)莖，又稱為山藥籽。

繼代培養(yǎng)subculture

繼初代培養(yǎng)之后的連續(xù)數(shù)代的擴繁殖培養(yǎng)過程。

4培養(yǎng)基配制

培養(yǎng)基配方見表1。

表1培養(yǎng)基配方

用途培養(yǎng)基配方（1L）

零余子誘導(dǎo)再生植株1/4MS培養(yǎng)基，蔗糖7.5g，瓊脂粉7g

MS培養(yǎng)基，蔗糖30g，瓊脂粉7g，

再生植株培養(yǎng)基

NAA（萘乙酸）2.0mg，KT（激動素）0.5mg

MS培養(yǎng)基，蔗糖30g，瓊脂粉7g，

誘導(dǎo)叢生芽培養(yǎng)基

NAA（萘乙酸）2.0mg，KT（激動素）0.5mg

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DB15/T3186—2023

5外植體的獲取

零余子

選取健壯、籽粒飽滿、表皮無破損的零余子。

莖段

選擇生長健壯、無損傷、無病蟲害的植株，剪取帶腋芽的幼嫩莖段。

6滅菌

培養(yǎng)基及接種工具的滅菌

按照NY/T2306的規(guī)定執(zhí)行。

超凈工作臺消毒

無菌操作按照NY/T2306的規(guī)定執(zhí)行。

7無菌苗獲取

外植體消毒

7.1.1零余子

流水沖洗干凈，去皮；無菌條件下75%乙醇浸泡30s，無菌水漂洗后用0.1%的HgCl2浸泡10min，

無菌水再次漂洗7～10次。

7.1.2莖段

幼嫩節(jié)間用流水沖洗干凈后，無菌條件下截取2cm～3cm帶節(jié)莖段，消毒方法同零余子。

誘導(dǎo)再生植株

7.2.1零余子

將消毒后的零余子切成長、寬、高約為0.5cm的小塊，置于零余子誘導(dǎo)再生植株基上。在溫度25℃

±2℃，光照強度2000lx，光照時間16h/d，黑暗時間8h/d的條件下進行誘導(dǎo)培養(yǎng)。待小塊組織周

圍出現(xiàn)少量的乳白色或黃綠色愈傷組織后，轉(zhuǎn)入再生植株培養(yǎng)基35d后形成再生植株。

7.2.2莖段

將消毒后的莖段切成約1cm的小段，置于再生植株培養(yǎng)基上。在溫度25℃±2℃，光照強度2000

lx，光照時間16h/d，黑暗時間8h/d的條件下進行誘導(dǎo)培養(yǎng)35d后形成再生植株。

8無菌苗擴繁

誘導(dǎo)叢生芽

將莖段切成約1cm的小段，置于叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。在溫度25℃±2℃，光照強度2000lx，

2

DB15/T3186—2023

光照時間16h/d，黑暗時間8h/d的條件下進行誘導(dǎo)培養(yǎng)7d～10d后形成叢生芽。

繼代及生根

當(dāng)叢生芽長到約2cm～2.5cm時，將叢生芽分離成單株，置于再生植株培養(yǎng)基上，在溫度25℃

±2℃，光照強度2000lx，光照時間16h/d，黑暗時間8h/d的條件下繼代和生根。

9移栽

煉苗

待植株根系生長健壯時，去掉封口膜，室內(nèi)煉苗2d～3d。

移栽

用自來水浸泡健壯植株的根12h后，洗凈根部，移栽到裝有蛭石基質(zhì)的苗缽中。蓋膜后置于溫度

25℃±2℃，相對濕度6