ICS65.060

CCSB16

34

安徽省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB34/T5100—2025

小麥赤霉病菌抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)程

TechnicalregulationformonitoringthefungicideresistanceofFusariumspp.causing

wheatheadblight

2025-01-24發(fā)布2025-02-24實(shí)施

安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB34/T5100—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)提出。

本文件由安徽省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。

本文件起草單位：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)、安徽省植物保護(hù)總站、宿州市植檢植保站、碭山縣植保植檢服務(wù)

中心、宿州市埇橋區(qū)大店鎮(zhèn)閔亞東種植家庭農(nóng)場。

本文件主要起草人：潘月敏、鞠玉亮、閔亞東、何振輝、朱德慧、馬書芳、朱紀(jì)斐、王學(xué)良。

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DB34/T5100—2025

小麥赤霉病菌抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了小麥赤霉病菌抗藥性監(jiān)測的監(jiān)測對(duì)象、樣品采樣與病原菌分離、敏感性基線建立、敏

感性測定、抗藥性評(píng)價(jià)、抗藥性菌株及樣品處理。

本文件適用于小麥赤霉病菌對(duì)常用殺菌劑的抗藥性監(jiān)測。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

NY/T1156.1農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第1部分：抑制病原真菌孢子萌發(fā)試驗(yàn)凹玻片

法

NY/T1156.2農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則殺菌劑第2部分：抑制病原真菌菌絲生長試驗(yàn)平皿法

NY/T1859.6農(nóng)藥抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估第6部分：灰霉病菌抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

區(qū)分劑量criticalconcentration

能夠有效區(qū)別抗藥性菌株和敏感菌株的藥劑濃度。

抗藥性指數(shù)resistancefactor

抗藥性菌株對(duì)某種藥劑的敏感性（以EC50或MIC表示）與其親本菌株敏感性或與敏感基線（EC50或

MIC）的比值。

4監(jiān)測對(duì)象

吡唑酰胺類殺菌劑

氟唑菌酰羥胺。

苯并咪唑類殺菌劑

多菌靈，甲基硫菌靈。

三唑硫酮類殺菌劑

丙硫菌唑。

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DB34/T5100—2025

三唑類殺菌劑

戊唑醇，葉菌唑，丙環(huán)唑，三唑酮，己唑醇，氟環(huán)唑，苯醚甲環(huán)唑。

甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑

嘧菌酯，吡唑醚菌酯，醚菌酯，烯肟菌酯，肟菌酯。

咪唑類殺菌劑

咪鮮胺。

氰基丙烯酸酯類殺菌劑

氰烯菌酯。

5樣品采集與病原菌分離

樣品采集

小麥?zhǔn)斋@前在各區(qū)縣監(jiān)測點(diǎn)采集小麥赤霉病病穗，每個(gè)樣品分別存放于紙質(zhì)樣品袋，記錄采樣人及

聯(lián)系方式、小麥品種、用藥情況及采集地點(diǎn)。

病穗樣品干燥保存防止霉變。

病原菌分離

無菌條件下，挑取具有典型赤霉病癥狀的病穗粒，置于含50μg/mL五氯硝基苯和100μg/mL硫

酸鏈霉素的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上，分離小麥赤霉病病原菌。

6敏感性基線建立

小麥赤霉病菌對(duì)殺菌劑敏感性基線建立參照NY/T1859.6的方法。

7敏感性測定

藥劑配制

根據(jù)不同殺菌劑原藥選擇溶劑，將有效含量90％以上的原藥溶解，配制成10mg/mL的母液，母

液現(xiàn)配現(xiàn)用。

菌絲生長速率測定法

將分離的小麥赤霉病菌接種至含區(qū)分劑量藥劑培養(yǎng)基上，25℃黑暗培養(yǎng)3天，觀察菌株生長情況，

能生長的即為抗性菌株，不生長的即為敏感菌株。

菌絲生長速率測定流程可按照NY/T1156.2的規(guī)定執(zhí)行。

孢子萌發(fā)測定法

適用于小麥赤霉病菌對(duì)甲氧基丙烯酸脂類和吡唑酰胺類殺菌劑的抗藥性監(jiān)測。制備菌株的分生孢

子或子囊孢子，用無菌水稀釋至約104～105個(gè)/mL孢子液，吸取100μL孢子液均勻涂布在含有不同

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DB34/T5100—2025

藥劑濃度的水瓊脂平板上，25℃黑暗培養(yǎng)6h～8h。顯微鏡下檢查孢子的萌發(fā)情況，芽管長度達(dá)孢子

寬度的1/2即為萌發(fā)，統(tǒng)計(jì)孢子萌發(fā)率，計(jì)算各菌株的EC50值和抗藥性指數(shù)。

孢子萌發(fā)測定流程按照NY/T1156.1的規(guī)定執(zhí)行。

8抗藥性評(píng)價(jià)

抗藥性頻率

其中：

——抗藥性頻率5％以下，為低等風(fēng)險(xiǎn)；

——抗藥性頻率5％～10％，為中等風(fēng)險(xiǎn)；

——抗藥性頻率10％以上，為高等風(fēng)險(xiǎn)。

抗藥性指數(shù)

抗藥性群體的抗藥性指數(shù)越大，抗性風(fēng)險(xiǎn)越大。其中：

——抗藥性指數(shù)5～20，為低等抗性水平；

——抗藥性指數(shù)20～100，為中等抗性水平；

——抗藥性指數(shù)大于100，為高等抗性水平。

9抗藥性菌株及樣品處理

將抗藥性菌株置于含馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的凍存管中。

將分離后的樣品高溫滅活處理。