松材線蟲病的研究文獻(xiàn)綜述1.1松材線蟲病的發(fā)生與分布松材線蟲病是由松材線蟲（Bursaphelenchusxylophilus）引起的毀滅性的森林病害。松樹線蟲病從松樹感染到松樹死亡可以分為四個(gè)階段：首先，松樹在發(fā)病初期變化不太明顯，其外觀沒有明顯的變化，但是樹脂減少分泌，同時(shí)針葉萎蔫，可以清晰的看見天牛咬痕；其次，發(fā)病的中期階段，該階段的樹葉開始變黃，天牛留下了十分明顯的產(chǎn)卵的痕跡；再次，發(fā)病的后期階段蛀木屑；最后，發(fā)病的末期階段，松樹會(huì)出現(xiàn)枯萎死亡癥狀，顏色發(fā)生變化。該病害也被稱為“松樹的癌癥”。1905年，在日本長(zhǎng)崎最先發(fā)現(xiàn)松材線蟲病ADDINNE.Ref.{9D30271D-8921-4AEF-81B7-D138B358103E}[2]。進(jìn)入40年代后，該病害在日本34個(gè)縣發(fā)現(xiàn)，造成120萬(wàn)立方米的松樹年損失量。70年代后，該病害危及至日本35個(gè)縣，在1979年造成的松樹損失量高達(dá)240萬(wàn)立米，全國(guó)僅剩2個(gè)縣沒有發(fā)現(xiàn)松材線蟲病ADDINNE.Ref.{9F9869DC-0BA9-4BCC-B9EE-350F386C0BDD}[3]，給日本林業(yè)帶來(lái)了嚴(yán)重的損失。1979年，松材線蟲病首次在美國(guó)被報(bào)告ADDINNE.Ref.{FD843428-E90E-4205-A8B0-C6C0827916F6}[4]。1982年，江蘇南京中山陵的黑松（Pinusthunbergii）上出現(xiàn)了松材線蟲病，這是在我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)該病害ADDINNE.Ref.{17946F12-C941-4B9B-BC28-4123293B07E4}[5]。進(jìn)入21世紀(jì)以來(lái)，松材線蟲病遍及我國(guó)14個(gè)省(市)。2018年，該病害危及我國(guó)有18個(gè)?。▍^(qū)、市）588個(gè)縣級(jí)行政區(qū)65萬(wàn)hm2的松樹ADDINNE.Ref.{F47076E3-447B-44D3-B04C-551799901DA1}[6]。該病害除了給我國(guó)帶來(lái)了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，也對(duì)我國(guó)的森林生態(tài)系統(tǒng)造成了嚴(yán)重的破壞。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，松材線蟲目前可危害50多種松科松屬樹種和10多種非松屬樹種ADDINNE.Ref.{44AA4435-CA33-4F24-8DC3-7B51ED45932B}[7]，是一種危險(xiǎn)性極高的外來(lái)有害生物。1.2松材線蟲病的致病機(jī)理松材線蟲病的發(fā)生與發(fā)展涉及多方面因素。由于該病害系統(tǒng)的復(fù)雜性，PWD的致病機(jī)理尚未弄清。目前主要有以下3種觀點(diǎn)。酶學(xué)說(shuō)認(rèn)為松材線蟲在侵染過(guò)程中分泌的多種水解酶可降解植物細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，干擾水分傳導(dǎo)，最終導(dǎo)致寄主發(fā)生枯萎死亡。其中纖維素酶被認(rèn)為在松材線蟲病早期起到重要作用。蔣麗雅用纖維素酶擴(kuò)散法證明了松材線蟲蟲體含纖維素酶，且向體外分泌ADDINNE.Ref.{44AA4435-CA33-4F24-8DC3-7B51ED45932B}[8]。除纖維素酶以外，松材線蟲所分泌的果膠酶、過(guò)氧化物酶、蛋白酶和淀粉酶等也可能參與了這種病害的初期病理反應(yīng)ADDINNE.Ref.{588E2849-3A82-4DB0-A810-4029C4C599C0}[9,10]?？斩椿瘜W(xué)說(shuō)指出松材線蟲侵染松樹后，松樹的形成層和射線組織受到機(jī)械破壞，引起管胞空化阻礙水分和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸，致使寄主松樹發(fā)生脫水死亡。松樹在生長(zhǎng)最活躍的時(shí)期，形成層脆弱，易被松材線蟲侵染。Myers等發(fā)現(xiàn)在松樹感染松材線蟲后，形成層的破壞使得管胞空洞，最終會(huì)干擾水分的運(yùn)輸和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的傳導(dǎo)，從而導(dǎo)致松樹失水萎蔫ADDINNE.Ref.{2D54C4B1-BBD5-4F17-9711-F5FB968867E4}[11]。KurodaADDINNE.Ref.{7621DC30-0D85-4A5D-9FB2-11604FB92A01}[12]發(fā)現(xiàn)松材線蟲侵染松樹后，木質(zhì)部中揮發(fā)性萜類化合物含量增加并研究評(píng)估了這些萜類化合物在管胞空化會(huì)阻礙木質(zhì)部汁液上升，導(dǎo)致松樹缺乏水分；當(dāng)揮發(fā)性萜類化合物達(dá)到最高濃度后，出現(xiàn)嚴(yán)重的空化現(xiàn)象。毒素學(xué)說(shuō)則有兩種說(shuō)法。一是寄主松樹被松材線蟲侵染后產(chǎn)生了有毒代謝次生物。Oku等人對(duì)被松材線蟲病感染的松樹體內(nèi)毒素進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在人工接種的3年生松苗木中檢測(cè)到毒素，自然感染的松木也含有這種毒素，而健康的松木則沒有ADDINNE.Ref.{2E07463E-7617-4AC1-AE2D-5EE247D4F6C5}[13]，這些毒素包括苯甲酸、二氫針葉樹醇和8-羥基卡瓦酮ADDINNE.Ref.{2E07463E-7617-4AC1-AE2D-5EE247D4F6C5}[14]。這進(jìn)一步支持了植物毒素在這種病害復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制中的作用。二是毒素由松材線蟲相關(guān)的細(xì)菌所產(chǎn)生ADDINNE.Ref.{2E07463E-7617-4AC1-AE2D-5EE247D4F6C5}[14]。1.3松材線蟲病相關(guān)細(xì)菌的研究進(jìn)展細(xì)菌和線蟲的相互作用是普遍的自然現(xiàn)象，它們相互作用的機(jī)制也是研究的熱點(diǎn)。從80年代開始，人們開始關(guān)注松材線蟲病的另一種病原體——細(xì)菌。1.3.1松材線蟲伴生細(xì)菌松材線蟲體表可攜帶大量不同種類的細(xì)菌。Oku等人首次提出松樹枯萎病毒素是致病性線蟲相關(guān)的細(xì)菌所產(chǎn)生的代謝物ADDINNE.Ref.{B92B24E6-820C-4B50-B736-805F4829A9F6}[15]。趙博光最先報(bào)道了松材線蟲會(huì)在其體表攜帶細(xì)菌ADDINNE.Ref.{B92B24E6-820C-4B50-B736-805F4829A9F6}[16]。趙博光等人經(jīng)接種實(shí)驗(yàn)表明松材線蟲攜帶的細(xì)菌與松材線蟲病的發(fā)生有關(guān)ADDINNE.Ref.{0D16913F-DC34-4BFE-8B50-F8E6C69AEF82}[17,18]。Kawazu及其同事對(duì)松材線蟲體表伴生細(xì)菌進(jìn)行了篩選，分離鑒定了3株毒力菌株，只接種細(xì)菌松樹不萎蔫，接種弱致病性線蟲與細(xì)菌混合物，松苗的枯萎情況和強(qiáng)致病性線蟲一樣ADDINNE.Ref.{FB6D0503-F75C-4280-AD42-C9064D6988C6}[19]。洪英娣、曹越等對(duì)從病死樹和線蟲體表分離的3株菌株進(jìn)行接種試驗(yàn)，結(jié)果顯示，在無(wú)菌黑松苗上只接種無(wú)菌線蟲，松苗未發(fā)病，而無(wú)菌線蟲與細(xì)菌混合接種卻能使無(wú)菌黑松苗感病發(fā)生枯萎ADDINNE.Ref.{9EA222D0-A396-487B-B350-8573AFDDC6F0}[20,21]。談家金等人從松材線蟲蟲體分離到一株線蟲伴生細(xì)菌GD1，經(jīng)多次接種實(shí)驗(yàn)表明，松材線蟲和菌株GD1混合接種，馬尾松松枝發(fā)病萎蔫，單獨(dú)接種線蟲或者細(xì)菌，松枝未出現(xiàn)萎蔫癥狀A(yù)DDINNE.Ref.{08F92E6F-A192-4167-835D-5F3A9FB1E7E5}[22,23]。Guo等從松材線蟲體表分離的熒光假單胞菌GcM5-1A可產(chǎn)生對(duì)唐松懸浮液細(xì)胞和幼苗均有一定的毒力的化合物ADDINNE.Ref.{A6B2DC73-9D3A-4AE4-9226-E359ED63C61C}[24]。田雪亮利用16SrRNA基因文庫(kù)和454測(cè)序分析研究表明松材線蟲伴生細(xì)菌多樣性較高ADDINNE.Ref.{0694FB79-0C62-411D-80F2-28F6BEAD8C9D}[25]。賁愛玲、戚建光等發(fā)現(xiàn)松材線蟲體表的細(xì)菌不僅能產(chǎn)生導(dǎo)致松枯萎的毒素，還能提高松材線蟲的繁殖力ADDINNE.Ref.{B92B24E6-820C-4B50-B736-805F4829A9F6}[26]。林峰等人通過(guò)接種試驗(yàn)表明只接種強(qiáng)致萎病菌和無(wú)菌線蟲，黑松不出現(xiàn)感病癥狀，而混合接種松苗感病情況嚴(yán)重ADDINNE.Ref.{B92B24E6-820C-4B50-B736-805F4829A9F6}[27]。來(lái)燕學(xué)等人從松材線蟲耐久型幼蟲分離出具有分解纖維素及降解或合成萜烯和酚類化合物能力的香茅醇假單胞桿菌(Pseudomonascitronellolis)ADDINNE.Ref.{E8FFE9D1-9F67-4238-B9AA-0C8F888C5722}[28]。以上研究說(shuō)明松材線蟲與之伴生細(xì)菌之間存在著密切的關(guān)系，這為闡明松材線蟲致病機(jī)制提供了新的研究方向。1.3.2松材線蟲內(nèi)生細(xì)菌最初的研究認(rèn)為植物寄生線蟲的口針較小，體內(nèi)不可能存在細(xì)菌ADDINNE.Ref.{1349A40E-6B0F-46F5-AA91-10D085444FB5}[29]。同時(shí)，趙博光沒有在活體線蟲體內(nèi)的任何部位觀察到細(xì)菌ADDINNE.Ref.{408AF647-F77D-4673-B503-2DE6C6D6C6D6}[16]。所以最初松材線蟲相關(guān)細(xì)菌的研究主要集中于線蟲體表伴生細(xì)菌。直到對(duì)生物體腸道內(nèi)細(xì)菌的研究方興未已，人們對(duì)動(dòng)物內(nèi)生菌的生理生化特性以及致病機(jī)理有了深入的了解。與松材線蟲體表細(xì)菌相比，其體內(nèi)細(xì)菌受到外界環(huán)境的影響較小。Yuan用透射電鏡觀察體表消毒的松材線蟲，證明松材線蟲體內(nèi)存在細(xì)菌ADDINNE.Ref.{35D85127-FDDA-4C95-96EE-1BD968193001}[30]。Wu等利用分子生物學(xué)和生物化學(xué)方法鑒定了松材線蟲內(nèi)生優(yōu)勢(shì)菌為窄食單胞菌(Stenotrophomonas)、無(wú)色桿菌(Achromobacter)、愛文菌屬（Ewingella）、賴氏菌屬（Leifsonia）、根瘤菌(Rhizobium)和假單胞菌(Pseudomonas)，且這些內(nèi)生細(xì)菌種類和碳代謝可能與毒力有關(guān)ADDINNE.Ref.{955186AB-F8DD-4B6F-875E-EC88671FA81D}[31]。伏艷美對(duì)來(lái)自不同地區(qū)感病馬尾松中的松材線蟲進(jìn)行體內(nèi)可培養(yǎng)細(xì)菌的分離鑒定，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)松材線蟲內(nèi)生細(xì)菌提高了松材線蟲的抗氧化能力。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)線蟲內(nèi)生細(xì)菌對(duì)能增強(qiáng)其毒力和繁殖力。說(shuō)明內(nèi)生細(xì)菌在松材線蟲病病程中發(fā)揮了一定的作用，加快了松材線蟲病的發(fā)生及發(fā)展ADDINNE.Ref.{7BF793F6-A1E2-48BE-A57F-097FB3E00CA5}[32]。2016年，何龍喜的研究表明松材線蟲內(nèi)生細(xì)菌嗜麥芽窄食單孢菌NSPmBx03對(duì)松材線蟲的致病能力有一定增強(qiáng)作用ADDINNE.Ref.{24BED84E-5039-4E27-AD8C-B470CC9B3393}[33]。上述研究表明松材線蟲內(nèi)生細(xì)菌在松材線蟲病中起著一定的作用。這為研究松材線蟲內(nèi)生細(xì)菌在松材線蟲致病中發(fā)揮的作用提供依據(jù)。1.3.3松樹內(nèi)生細(xì)菌植物內(nèi)生菌是一種能夠在健康的植物組織中形成種群，能與寄主建立和諧共處關(guān)系的一類微生物ADDINNE.Ref.{EF867DF2-8F7F-493A-A648-705FB2505954}[34]。2003年，談家金等人從健康馬尾松體內(nèi)分離到一株內(nèi)生細(xì)菌GD2，多次接種實(shí)驗(yàn)表明，單獨(dú)接種無(wú)菌處理的松材線蟲或菌株GD2，水培枝均未感病，二者混合接種，松枝發(fā)病ADDINNE.Ref.{2B758DD1-6389-4385-AAC2-5AFF4AE82E54}[35]。2005年，歐陽(yáng)革成與張潤(rùn)杰從健康馬尾松和松材線蟲病樹中分離到屬于芽孢桿菌的植物內(nèi)生菌，經(jīng)證明該植物內(nèi)生菌與松材線蟲病有關(guān)ADDINNE.Ref.{BBE25912-AD6E-4EA7-A91D-F3713FA804DA}[36]。趙博光、謝立群從松材線蟲病病死木中分離到細(xì)菌與真菌ADDINNE.Ref.{5ED4DC89-5299-4F32-843F-23A2756AB761}[37]。2010年，袁文婷首次從馬尾松和黑松莖部分別分離到20株和19株內(nèi)生細(xì)菌，并發(fā)現(xiàn)馬尾松和黑松中細(xì)菌種群數(shù)量幾乎不會(huì)隨著季節(jié)的變化而發(fā)生變化ADDINNE.Ref.{F0F081E6-3132-49E0-9399-26AAE5D2AD43}[38]。2017年，李亮亮等ADDINNE.Ref.{F2780378-6E15-4F64-AD7B-ABEF03494AA7}[39]從濕地松中分離到一株蠟樣芽孢桿菌NJSZ-13，經(jīng)測(cè)定該菌株具有殺線活性。尹艷楠研究發(fā)現(xiàn)蠟樣芽孢桿菌NJSZ-13菌株菌懸液和經(jīng)低溫噴霧干燥制得的菌粉對(duì)松材線蟲病均有一定的預(yù)防效果，在馬尾松未感染松材線蟲的健康狀態(tài)施用蠟樣芽孢桿菌NJSZ-13菌株效果更好ADDINNE.Ref.{B42787E3-422F-4662-AB42-C806ED0E7289}[40]。吳佳雯等ADDINNE.Ref.{5955DAF0-105A-4FB2-B78A-474D7F8B152C}[41]對(duì)菌株NJSZ-13進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其對(duì)馬尾松還具有促生作用。松樹體內(nèi)存在著大量?jī)?nèi)生細(xì)菌群落。它們或是可以促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育、提高植物對(duì)病蟲害抵御能力的有益內(nèi)生細(xì)菌；或是對(duì)寄主生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)顯著影響的中性內(nèi)生細(xì)菌；又或者是可引起植物病害的有害內(nèi)生細(xì)菌。對(duì)于松樹內(nèi)生細(xì)菌與松材線蟲的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。1.4松材線蟲相關(guān)基因研究進(jìn)展隨著松材線蟲基因組測(cè)序的完成，對(duì)于松材線蟲相關(guān)基因及其功能已有了一定的認(rèn)識(shí)和了解，這為研究松材線蟲致病機(jī)制奠定了基礎(chǔ)ADDINNE.Ref.{47636A26-92D0-4A7E-92A4-1C8A4AF0D1EF}[42]Shinya認(rèn)為松材線蟲病的發(fā)生，主要是由抗性相關(guān)蛋白、遷移相關(guān)蛋白、干擾功能蛋白的共同作用的ADDINNE.Ref.{62A7B37C-6DD9-41F6-86DF-CD6E2BD6B74B}[43]。1.4.1松材線蟲抗性相關(guān)蛋白Fu等克隆了松材線蟲的過(guò)氧化物酶（Peroxiredoxin）基因Bx-Prx，通過(guò)RNAi檢測(cè)該基因的功能，結(jié)果表明該基因與松材線蟲的繁殖和致病性有關(guān)ADDINNE.Ref.{7717FDBF-E888-458F-A959-33D966D3E64F}[44]。Li等人研究表明BxPrx是促進(jìn)松材線蟲侵染和分布的關(guān)鍵遺傳因子，從而導(dǎo)致松材線蟲病的傳播ADDINNE.Ref.{02DEBB17-EDF5-4C2A-B29F-E5250FE961AE}[45]。許佳瑤發(fā)現(xiàn)在一定濃度的H2O2能顯著提高BxPrx基因的表達(dá)，并通過(guò)RNA干擾驗(yàn)證了松材線蟲BxPrx正向響應(yīng)外源氧化脅迫ADDINNE.Ref.{751CF749-0615-460D-B7B9-BC67FAD32B25}[46]。張偉推測(cè)松材線蟲在侵染寄主松樹的過(guò)程中，由于環(huán)境的變化，基因發(fā)生了變異，從而調(diào)控轉(zhuǎn)錄水平，調(diào)節(jié)表型，從而有助于入侵寄主ADDINNE.Ref.{A3977E2E-6C7E-4F55-88A3-880218832DE0}[47]。谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GSTs)是真核生物中一種重要的解毒酶。Kikuchi在2011年從松材線蟲的基因組中預(yù)測(cè)出65個(gè)潛在的GSTsADDINNE.Ref.{6FADC155-8BF4-4403-B096-99FC231AF2B1}[48]。2016年，Espada發(fā)現(xiàn)了兩種在感染早期上調(diào)的分泌型谷胱甘肽s轉(zhuǎn)移酶，并表明松材線蟲所分泌的功能性GST蛋白能夠幫助線蟲克服寄主的防御從而進(jìn)入寄主ADDINNE.Ref.{B1122D87-A042-44EE-84A5-02A612184100}[49,50]。念波對(duì)松材線蟲GST基因BxGST3和BxGST1全長(zhǎng)克隆及功能分析，發(fā)現(xiàn)其對(duì)松材線蟲的解毒應(yīng)激能力、取食以及繁殖能力有關(guān)ADDINNE.Ref.{3E75B928-D8E5-45F5-85B8-FE475EE2B9C3}[51]。1.4.2松材線蟲遷移相關(guān)蛋白類毒過(guò)敏原蛋白在線蟲感染植物過(guò)程中的遷移和降低植物的抵抗力等方面起重要作用。2010年，Lin等從松材線蟲中克隆到3個(gè)類毒過(guò)敏原蛋白基因(Bxvap1、2、3)ADDINNE.Ref.{7170C4DA-9B77-4BB3-A36C-55B40F847F46}[52]，并對(duì)此進(jìn)行原核表達(dá)及多克隆抗體的制備，為揭示該基因在松材線蟲致病過(guò)程中的作用奠定了基礎(chǔ)ADDINNE.Ref.{5024D372-9FDE-4E82-8F8B-300C9F96F0DF}[53]。2012年，Kang等人用WesternBlot和免疫組化分析證明了Bxvap-1在松材線蟲在松樹體內(nèi)生長(zhǎng)繁殖階段表達(dá)水平最高，沉默該基因后，松材線蟲遷移速率發(fā)生大幅度下降A(chǔ)DDINNE.Ref.{9F1353C3-ABB1-4472-8F3F-94D40E88199E}[54]。同年，Yan等通過(guò)比較轉(zhuǎn)錄組學(xué)發(fā)現(xiàn)了松材線蟲類毒過(guò)敏原蛋白家族6個(gè)新成員ADDINNE.Ref.{9BDF82A7-E1C4-406A-9BA3-ADEDB5EADE96}[55]。植物細(xì)胞壁的主要成分是果膠酸、纖維素和半纖維素。植物寄生性線蟲所分泌的纖維素酶可能在線蟲致病過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。Kikuchi等人從松材線蟲中鑒定了GHF45纖維素酶家族的三個(gè)纖維素酶基因，分別是Bx-eng-1、Bx-eng-2、Bx-eng-3，并發(fā)現(xiàn)第一個(gè)功能性GHF45纖維素酶—Bx-eng-1。同時(shí)也證明了Bx-eng-1，2和3可以通過(guò)線蟲的口針分泌到植物組織中，并參與細(xì)胞壁的降解，使線蟲更容易在松木組織中取食和遷移ADDINNE.Ref.{72C40104-4A0B-4A20-97FD-B7866FDF8C1B}[56]。此外，他還通過(guò)從細(xì)菌水平轉(zhuǎn)移獲得的松材線蟲內(nèi)生β-1，3-葡聚糖酶的克隆和功能表征研究再次證明線蟲細(xì)胞壁降解酶在線蟲寄生植物的過(guò)程中發(fā)揮了關(guān)鍵作用ADDINNE.Ref.{FF0AD938-7C15-44B7-9271-2744455010C2}[57]。馬海賓也表明松材線蟲分泌纖維素酶的活力與其致病能力密切相關(guān)ADDINNE.Ref.{D99C458F-EC08-41BE-AF2C-9582CD7EE987}[58]。張奇等發(fā)現(xiàn)纖維素酶BXC10能有力的降解松樹纖維素，是重要的松材線蟲病的致病因子ADDINNE.Ref.{39AE9DA6-825C-408F-B55B-84868CC43DBB}[59]。果膠酸裂解酶普遍存在于植物寄生線蟲中，在線蟲與植物的互作過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用。Lee等人表明果膠裂解酶基因Bx-pel-3可能參與了降解細(xì)胞壁，是一種假定的致病基因ADDINNE.Ref.{041A7A2B-9533-4314-A5B3-4A68F17CB620}[60]。擴(kuò)張蛋白(expansin)是引起植物細(xì)胞壁松弛的蛋白質(zhì)，在植物的生命活動(dòng)中發(fā)揮著不可或缺的作用，而存在于其他生物中具有相似結(jié)構(gòu)功能的蛋白被稱為類擴(kuò)張蛋白（expansin-likeprotein)ADDINNE.Ref.{CF87C8BA-6913-4C5D-A7B6-6EEC23A9D381}[61]。Kikuchi從松材線蟲與擬松材線蟲中克隆鑒定了類擴(kuò)張蛋白基因，該基因表達(dá)于食道腺細(xì)胞中ADDINNE.Ref.{B8D87C56-087C-4470-B002-EE87EE15250A}[62]。林世鋒等克隆獲得了松材線蟲類擴(kuò)張蛋白基因的全長(zhǎng)cDNA，并推測(cè)該基因可能在線蟲侵染時(shí)起到了使寄主細(xì)胞壁軟化的作用ADDINNE.Ref.{60CB1491-B121-478A-9408-C5C2CBEEC684}[63]。1.4.3松材線蟲干擾功能蛋白類甜蛋白是一種在高等植物中常見的防御蛋白，在植物抵御病原體、對(duì)外界壓力做出反應(yīng)、適應(yīng)惡劣環(huán)境過(guò)程中發(fā)揮作用ADDINNE.Ref.{49F1BAB1-0FE1-45E4-8FE9-0B8FA46EB545}[64]。Shinya等人鑒定到松材線蟲獨(dú)有的2條類甜蛋白（thaumatin-likeproteins，TLPs）和1條類半胱氨酸蛋白酶抑制劑ADDINNE.Ref.{86E0ECC2-652C-4579-B56A-DD43731E0AFD}[65]。2014年，汪菊克隆了松材線蟲類甜蛋白（TLP-1），為研究松材線蟲與寄主松樹之間的互作奠定了基礎(chǔ)ADDINNE.Ref.{2A082C70-0206-4F49-A1AD-75423D7C1B08}[66]。蛋白酶抑制劑(proteinaseinhibitor)是對(duì)存在于植物、動(dòng)物、微生物中的蛋白質(zhì)分解酶具有抑制活性的一種水分子蛋白質(zhì)ADDINNE.Ref.{86443F50-85A4-42D8-837C-E7BEBDCCF166}[67]。Kirino等人發(fā)現(xiàn)松材線蟲分泌的類甜蛋白和半胱氨酸蛋白酶抑制劑可誘導(dǎo)本氏煙的細(xì)胞死亡ADDINNE.Ref.{899ECFAE-F26C-4B03-B50F-58CA25EF8778}[68]?？剐韵嚓P(guān)蛋白是松材線蟲在寄主體內(nèi)順利完成侵染定殖的重要因素，遷移相關(guān)蛋白使線蟲順利遷移從而避免松樹的過(guò)敏反應(yīng)，干擾功能蛋白能作為分子模擬蛋白應(yīng)對(duì)寄主的防御反應(yīng)。除了這些基因以外，學(xué)者們還發(fā)現(xiàn)了與松材線蟲生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的基因如熱應(yīng)激蛋白70(Hsp70)。戴素明采用成功克隆出了松材線蟲Hsp70基因，由于其與秀麗小桿線蟲Hsp70家族中的Hsp-1基因編碼的氨基酸序列最為相似，便將其命名為Bx-hsp-1ADDINNE.Ref.{890027D0-EE6E-45AD-9A7F-315E5F872E7E}[69]，并利用RNA干擾技術(shù)證明Hsp70對(duì)線蟲的胚胎發(fā)育和遷移活動(dòng)起著一定作用ADDINNE.Ref.{FCE939ED-2B3A-4538-8DCC-B3CB10664A5A}[70]。王殿東對(duì)松材線蟲MAPK基因進(jìn)行RNA干擾發(fā)現(xiàn)該基因可能抑制松材線蟲的繁殖能力ADDINNE.Ref.{8488868F-5004-41D6-8AF7-C07D20235E76}[71]。galectin-1是凝集素的一種，在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。任萬(wàn)蘭研究克并分析松材線蟲的galectin-1基因了各個(gè)齡期的表達(dá)量ADDINNE.Ref.{CCBF2819-23B9-41FE-AEE3-8C586E3D5C45}[72]。但關(guān)于該基因以及許多其他潛在的松材線蟲相關(guān)基因的功能還有待進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)[1] 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