D-二聚體的檢測及臨床意義

近年由于血栓性疾病的增多，檢驗醫(yī)學即時檢

驗(POCT)在免疫測定技術(shù)方面，特別是在出凝血和

血栓性疾病的研究上取得了重大的進展。D-二聚體

的檢測方法，從傳統(tǒng)的定性試驗，變?yōu)楹唵慰焖贉?/p>

確定量的即時檢驗。金標全定量快速檢測對于血栓

性疾病的及時準確診斷、以及對溶栓治療的療效監(jiān)

測，是必不可少的重要指標。

一、D-二聚體的形成

正常人纖溶酶和抑制酶之間保持了動態(tài)平衡，

使血液循環(huán)能正常進行。人體內(nèi)的纖溶系統(tǒng)，對保

持血管壁的正常通透性；維持血液的流動狀態(tài)和組

織修復，起著重要作用。為維護正常生理狀態(tài)，在

外傷或血管受損的情況下，血栓的形成可防止血液

從損傷的血管中流失。

病理狀態(tài)下，機體發(fā)生凝血時，凝血酶作用于

纖維蛋白，轉(zhuǎn)變?yōu)榻宦?lián)纖維蛋白，同時纖溶系統(tǒng)被

激活，降解纖維蛋白形成各種碎片。丫鏈能把二個

含D片斷的碎片連接起來，形成D-二聚體。D-

二聚體水平的上升，代表血塊在血管循環(huán)系統(tǒng)中形

成，急性血栓形成的一個敏感的標記物。但不具特

異性;下列因素如外科手術(shù)、創(chuàng)傷、感染、發(fā)炎、懷

孕、產(chǎn)后等，也會導致凝血酶的產(chǎn)生使D-D水平的

上升。

D-二聚體的升高反映了體內(nèi)存在著凝血及纖溶

活性增強的重要分子標志物。因此它既可反映體內(nèi)

存在著血栓或繼續(xù)形成的狀況，又可反映體內(nèi)纖溶

活性增強的指標，因為纖維蛋白降解產(chǎn)物中，唯有

D-二聚體可反映血栓形成后的溶栓活性，對于臨床

血栓性疾病的診斷和溶栓治療有著極其重要的價

值。

二、D-二聚體檢測的方法學的進展

1、三P試驗：FDP碎片X和可溶性纖維蛋白單體FM

復合物的定性試驗。

缺點:敏感性差，DIC陽性率30-6性，試驗時

間長，干擾因素多，采血不順，溶血均可影響結(jié)

果，只能定性不能定量。

2、膠乳凝集法：簡單快速

缺點：敏感性低，定性或定量倍比稀釋，費試

劑，重復性差。

3、ELISA法:敏感性高，能定量

缺點：操作煩，時間長，無法滿足急診需求。

4、免疫滲濾膠體金顯色反應法：

采用同種單克隆抗體夾心，即以包被的抗體捕

獲血漿中抗原(D-二聚體)加入偶聯(lián)有膠體金的同種

抗體顯色。抗體特異性高，可與含D-二聚體的多種

片斷結(jié)合可提高試驗的敏感度。

特點：定量報告，快速簡便，敏感性高。

測試范圍：-5mg/L

正常參考值：〈L,接近或＞L應考慮疾病狀態(tài)。

使用說明：

(1)血漿未經(jīng)徹底離心，血漿中含有白細胞、血小

板、高血脂或高粘度血漿，這些物質(zhì)停留在檢測板

的膜表面，導致滲濾減慢時間過長，可能出現(xiàn)假性

高值，應徹底離心(4000轉(zhuǎn)20分鐘為宜)，并小心吸

取血漿。

(2)各個不同廠家的D-二聚體試劑盒的正常參考范

圍值也不一樣，有的以<L為正常，而有的試劑盒以

<L為正常。此外有的以PEU單位模式報告，有的以

mg/L的模式報告，其值正好相差一半。所以在評價

D-二聚體結(jié)果時應注意上述問題。

三、D-二聚體檢測的臨床應用

D-二聚體增高提示了與體內(nèi)各種原因引起的血

栓性疾病相關(guān)。同時也說明了纖溶活性的增強；臨

床上常見于彌慢性血管內(nèi)凝血（DIC）、深靜脈血栓

（DVT）、肺栓塞（PE）、急性心肌梗塞、腦梗塞、

惡性腫瘤、卵巢癌、肺癌、敗血癥、肝病、妊高征

孕婦、先兆子癇、燒傷、外科手術(shù)、創(chuàng)傷和膿毒血

癥等均可使D-二聚體升高，但是D-二聚體檢測的升

高并不能說明血栓形成的原因及位置，必須結(jié)合臨

床和其他檢測分析結(jié)果。

1、DIC（休克、系統(tǒng)感染、外傷、先兆子癇、惡

性疾病和燒傷等）的并發(fā)癥：血液在全身微小血管內(nèi)

廣泛性凝固，形成以血小板和纖維蛋白為主要成分

的微血栓。此過程消耗了大量的血小板和凝血因

子，并通過激活途徑激活了纖溶系統(tǒng)。微血栓中交

聯(lián)纖維蛋白被纖溶酶降解而產(chǎn)生大量高于正常百倍

的D-二聚體。與其他診斷DIC的指標相比較，D-二

聚體是唯一直接反映凝血酶和纖溶酶生成的理想指

標；診斷DIC的特異性也早于其他指標。

2、深靜脈血栓（DVT）的篩查：血漿D-二聚體

陰性可排除DVT的可能性。造影證實DVT者D-二聚

體100%陽性，可做溶栓治療和肝素抗凝的用藥指導

及療效觀察。靜脈栓塞是臨床上最常見的靜脈疾

病，臨床醫(yī)生無法僅僅根據(jù)其臨床癥狀作出診斷。

靜脈造影是診斷靜脈栓塞的黃金標準，它是創(chuàng)

傷性檢查，費用高，而靜脈造影本身具有引發(fā)深靜

脈栓塞或其它并發(fā)癥的危險性。

靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險因素

較低的危險因素中度危險因素高危險因素

臥床＞3日膝關(guān)節(jié)手術(shù)骨折（髓或

腿）

長時間的處于靜中央靜脈狹窄酸或膝復位

止狀態(tài)

（如乘車或乘長

途飛機）

年齡增大惡性腫瘤、化療大手術(shù)

腹腔鏡外科充血性心衰、呼大創(chuàng)傷

衰

減肥荷爾蒙代替物口脊髓損傷

服避孕藥

懷孕/產(chǎn)后偏癱性中風

靜脈曲張懷孕/產(chǎn)后

曾患VTE

血栓形成傾向

D-二聚體測試，配合臨床評估，可以快速、安

全的排除30-50%懷疑DVT/PE的病例，可節(jié)省醫(yī)院

的成本，減少不必要的影象診斷及抗凝血治療，減

少病人留院的時間，改善病人的情況，減少入侵性

診斷的危險，減少因不必要抗凝血治療而引起的出

血。

D-二聚體可反映血栓大小的變化。含量再升

高，預示血栓再發(fā)生。治療期間持續(xù)較高，提示血

栓大小無變化，說明治療無效。陳舊性血栓D-D不

增高。

3、肺栓塞病人(PE)：PE是一種較常見的潛在

致命的疾病，尤其多見于血液病、心臟病和外科手

術(shù)病人。PE臨床表現(xiàn)差異極大且缺乏特異性(從無

任何表現(xiàn)到猝死)、常規(guī)檢查無法獲得直接證據(jù)，加

上對該病的認識不足，常造成漏診或誤診。及時治

療依賴早期診斷。對于呼吸困難、胸悶、咳嗽、咯

血，昏厥的患者，尤其是近期有外傷，手術(shù)及長途

旅行史；既往患有深靜脈血栓，應考慮是否存在

PEoD二聚體測定是PE必備的篩查方法；〈L可除外

PEoD-二聚體測定在急性肺栓塞的篩選中具有重要

作用，且操作方法簡便、設備要求不高，縣市級醫(yī)

院均可開展此項檢測。我國目前應用D-二聚體篩選

急性肺栓塞尚處于起步階段，對其在急性肺栓塞的

診斷價值中積累的經(jīng)驗仍然較少，特別是急診D-二

聚體的檢測更是剛剛起步，有待于進一步積累臨床

資料，更好地發(fā)揮其在急性肺栓塞中的診斷作用。

4、婦科病人及先兆子癇：Trafatter報告204

例先兆子癇婦女中79例D-二聚體增高，而88例正

常孕婦全正常。該指標對妊高征患者高凝狀態(tài)的診

斷、療效觀察及預后判斷有重要意義。D-D檢測排除

妊娠VTE:隨著妊娠期的發(fā)展，孕婦的D-D值隨之逐

漸升高，可高至基礎(chǔ)值的3-4倍。若妊娠期發(fā)生

VTE,干擾DD排除VTE的有效性。若DD結(jié)果陰

性，仍有排除VTE的價值。

5、肝臟疾?。篋-二聚體含量明顯增高并與肝病

的嚴重程度呈正相關(guān)。惡性腫瘤伴有D-二聚體增

高，提示血栓形成及栓塞，對于病情判斷及治療有

重要意義。

6、血管疾?。翰环€(wěn)定型心絞痛病人比急性心絞

痛高、急性心肌梗死（AMI）、腦梗塞溶栓治療時，

D-二聚體增高對指導溶栓治療很有意義。

7、溶血栓治療的監(jiān)測：D-二聚體是溶栓藥物治

療監(jiān)控和療效觀察的指標。應用溶栓藥物后D-二聚

體明顯升高。若達到療效，該指標在升高后很快下

降；如果二聚體升高后持續(xù)維持在一定程度高水平

則提示溶栓藥物劑量不足。纖維蛋白降解產(chǎn)物中，

唯有D二聚體可反映血栓形成后的溶栓活性。因此

定量檢測D-二聚體可以反映藥物溶栓的效果。

應用溶血栓藥物（SK、UK、rt-PA等）溶解新鮮

血栓，其出血的發(fā)生率高達5%?30%,建議Fg維

持在?L5g/L、TT維持在正常對照的?倍，F(xiàn)DPs維

持在300?400ug/L。

8、交聯(lián)衍生物D-二聚體水平的影響

?血栓的原始大?。ㄐ柙黾硬糠纸忉?，就影響

狀況進行闡述）

?纖溶速率（需增加部分解釋，就影響狀況進

行闡述）

?血栓形成時間，腎功正常時，循環(huán)中的D-二

聚體半衰期約6h；有活躍的纖維蛋白降解和纖溶酶

活化；血栓的位置是否被包裹。（需增加部分解釋，

就影響狀況進行闡述）

四，D-二聚體臨床應用時應注意的問題

1、D-二聚體是一項陰性排除試驗。作為一種無

創(chuàng)性檢查手段，在急性肺栓塞(PE)、深靜脈栓塞

(DVT)、血管內(nèi)彌漫性凝血(DIC)排除診斷中有十分

重要的價值，它是一項陰性排除試驗。在任何情況

下D-二聚體測定值大于試劑盒推薦的CutOff值，

都不能簡單的作為急性肺栓塞、深靜脈栓塞、血管

內(nèi)彌漫性凝血的唯一確診依據(jù)，必須結(jié)合臨床情況

綜合分析。在腦梗死、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝

血、急性靜脈血栓形成時升高，從D-二聚體的檢測

目標而言，這些歸屬陽性升高。但是只要機體血管

內(nèi)有活化的血栓形成及纖維溶解活動，D-二聚體就

會升高，比如手術(shù)、腫瘤、感染及組織壞死等均可

導致D-二聚體升高。特別對80歲以上人群及住院

患者，因患感染性等疾病易引起凝血異常而導致D-

二聚體升高的病人應注意結(jié)合臨床情況綜合分析，

國際上D-二聚體檢測的特異性一般為50%左右。

2、國內(nèi)外無D-二聚體統(tǒng)一標準品。D-二聚體

是血液中纖維蛋白降解產(chǎn)物，其大小和抗原決定簇

不可能完全相同，因此D-二聚體既沒有國際標準、

國內(nèi)外均無統(tǒng)一標準品，也無行業(yè)標準品。不同公

司的企業(yè)D-二聚體標準品也不能相互通用。因此該

試驗不同廠家試劑所測的DD具體數(shù)據(jù)，不可能互相

獲得一致的結(jié)果也就可以理解了。但是基本的要求

是陰性的排除值和陽性的確定值應總體符合。有關(guān)

的權(quán)威論述如下：

FACT（FibrinAssayComparisonTrial有關(guān)纖

維蛋白化驗的國際專職評估和研究機構(gòu)）以下由權(quán)威

的(FACT)研究組發(fā)表的原文摘錄：“Although

D-dimerhasgainedwidespreadclinicaluseasa

parameterfordetectionofinK/P。fibrin

formation,thestandardizationissuehasnot

beenresolvedandreferencepreparationsand/or

guidelineshavenotbeendistributed.”

中文翻譯：雖然D-二聚體作為纖維蛋白形成的

一項指標,在臨床巳廣泛使用,但其標準化問題至

今未解決,也無標準品,甚至有關(guān)參照品制備的指

導性文件也沒有公布過。

----摘自ThrombHaemost2001;85:671-8

3、目前D-二聚體試劑溯源標準是如何建立的

D-DDOT試劑標準的建立，D-二聚體試劑盒只能向同

類公認可靠的D-二聚體測定方法或試劑盒靠攏。D-D

DOT研發(fā)時用挪威NycoCard二聚體試劑盒測定患者

樣品，從中選取高值D-Dimer陽性樣品混合，用此

NycoCard二聚體試劑盒將這高值Dimer混合血漿系

列稀釋后定標，作溯源標準，建立D-DDOT試劑盒

的二聚體標準曲線、企業(yè)D-二聚體標準品、質(zhì)控

品。本項目方法轉(zhuǎn)移靠混合高值血漿的做法符合國

際的通常規(guī)定。

有關(guān)的權(quán)威論述如下：

FACT文獻摘錄：

原文：“Thebestconformityisachievedby

theuseofpooledplasmasamplesfrompatients

withhighlevelsofD-dimerantigeninplasma.”

“4sanalternativetopooledplasma

samples,D-dimerantigenassaysmaybe

ca]ibratedwithinvitropreparations

containingpredominantly-fibrin

oligomers.”

中文翻譯：使用病人高值。一dimer混合血漿可

取得最好的一致性,作為混合血漿樣品的代用品,

D-二聚體檢測可以使用體外制備的標準品校正,體

外制備的標準品主要含高分子量纖維蛋白的低聚

物。

摘自：ThrombHaemost2001;85671一8

4、常見品牌D-二聚體試劑盒的檢測量程：一

些品牌D-二聚體試劑盒，為了保證陰性排除判斷的敏

感性和陽性確定結(jié)果的準確性，往往把檢測量程定

在一5mg/L,這一設計除了滿足和保證區(qū)分陰陽性區(qū)

域的敏感性外，更重要的是這種檢測量程設計已能滿

足大部分血栓病人的輔助診斷和溶栓指導的參考。

羅氏金標層析數(shù)碼定量系統(tǒng)，CARDIAC

D-Dimer,測量范圍：ug/mL法國Stago

—4LIg/ml(FEU),—L

生物梅里埃D-二聚體測量范圍：

45-10,000ng/ml(FEU)

(注：FEU—mg/L=mg/L+2,=。)

5、幾個常見品牌D-二聚體試劑主要檢測數(shù)據(jù)

見下表

幾個品牌D-D二聚體試劑比較

方法學報告單位正常值檢測范圍

金標免疫法mg/L<LL

z口液體試劑<ml-9ug/ml(FEU)

FEU1

717生化儀?L)L

<ml

L

;國專用測定儀FEU-4ug/mlL(FEU)/

D

<ml

液體試劑FEU-4ug/mlL(FEU)1

(⑴

eux<500ng/ml

V

酶免法FEU45-10000ng/ml(FEU)LU

!埃L)

6、FEU單位和mg/L單位的報告模式及換算方

法:纖維蛋白等值單位(FibrinogenEquivalent

UnitsFEU)這是目前一些測定D-二聚體儀器和試劑

盒所用的報告模式。FEU和mg/L之間的換算，

FEUlng/mlD-dimer=2ng/FEU/ml,即FEU;Ing/ml

D-dimer=2ng/ml的非FEU單位。例如如果以D-二聚

體正常值＜L,換算成FEU結(jié)果需乘2即為LFEU。

7、奧普D-二聚體試劑的特點：

△保存期長，穩(wěn)定性好。12個月的失效期，較

常見同類試劑的6個月失效期長了一半。更方便客

戶應用。

△陰性結(jié)果排除試驗的準確性和鑒別排除假陽

性結(jié)果的臨床符合性滿意。本試劑盒在臨床評估時

發(fā)現(xiàn)6例DD結(jié)果全正常范圍（5例，1例L）,而用進

口試劑測數(shù)在值在之間、、、、、L）,臨床追蹤證

實該6例陽性結(jié)果的病人為非血栓病人。

△U2愛國者POCT即時檢驗儀器，可快速測定

CRP、HCG、ALB、D-dimer四個項目,一機多用，有很

好的配套效應。D-DDOT國產(chǎn)試劑的價格優(yōu)勢，與進

口試劑等效的產(chǎn)品質(zhì)量。

8、對D-D檢測中可能出現(xiàn)的假陰性和假陽性的

評價：D-D檢測的陰性患者中（假陰性），仍有極少

數(shù)患者（〈2%）伴靜脈血栓，其原因：

（1）血栓體積很小/遠端小血栓；

（2）放射線/超聲檢查出現(xiàn)假陽性；

（3）臨床表現(xiàn)與標本采集時間相隔太長；

（4）纖溶活性降低

因為DHD增高所謂的假陽性，常見于老年人、

孕婦、癌癥、DIC、肝病、炎癥、創(chuàng)傷、手術(shù)、冠心

病等均會導致假陽性。

9、不同型號D-二聚體試劑比對檢測評估應掌

握的基本原則：D-二聚體試劑不同于其它試劑，既

沒有國際標準、國內(nèi)外均無統(tǒng)一標準品，也無行業(yè)

標準、不同公司的企業(yè)D-二聚體標準品也不能相互

通用。生物梅里埃在宣傳資料中是這樣表達的：

"D-dimer由于沒有統(tǒng)一的標準，不同試劑的測試可

有不同的結(jié)果。不同商品D-二聚體試劑盒定量值各

不相同,這是因為試劑單克隆抗體的來源/免疫反應

性，基質(zhì)效應，干憂因素、定標物的種類不同等多

因素，測試X試劑的結(jié)果不一定能與Y測試的試劑比

較"，每種DD試劑通過充份的臨床驗證，通過觀察

陰性結(jié)果排除試驗的準確性和真陽性，以及鑒別排除

假陽性結(jié)果的臨床符合性來評估試劑優(yōu)劣。這對于

傳統(tǒng)用二種數(shù)據(jù)的比對試驗來評價試劑的方法不同，

我們必須接受國際上通行的做法，來更新我們的觀

念。

D-二聚體檢測倍受關(guān)注的原因分析

中華醫(yī)學會檢驗學會主任、解放軍301醫(yī)院主

任、叢玉隆教授認為:隨著生化、細胞生物學、免

疫學飛速發(fā)展;止血、凝血和血栓疾病的研究取得

了巨大進步,積極開展血栓與止血試驗檢測,推廣

臨床應用,無疑具有重要意義。血栓性疾病的增

多,診斷、治療、監(jiān)測的臨床需要。檢測方法學的

進步、從定性到定量,正確快速。

D-二聚體檢測試劑盒臨床研究總結(jié)報告（摘要）

臨床研究評估單位：上海中醫(yī)藥大學岳陽醫(yī)

院

上海閔行區(qū)中心醫(yī)院

一、材料和方法

儀器和試劑：比對評估系統(tǒng)所用的儀器試劑，

均為挪威原裝進口的NycoCardD-二聚體測定儀和試

劑，與上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)的U2金標斑

點法定量讀數(shù)儀及試劑按各自操作說明作比對測

定。

標本采集：疑似病例組均為臨床送檢D-二聚體

血漿，共135份（閔行醫(yī)院85例，岳陽醫(yī)院50例）。

對照組均為健康體檢人群共100例（閔行醫(yī)院

40例，岳陽醫(yī)院60例）o該組為隨機體檢人群，未

進行挑選，年齡分布在16-85歲，平均年齡為歲。

二、結(jié)果

1、疑似病例組以比對法結(jié)果為標準，共有88例陽

性，46例陰性，1例乳糜血有干擾不作統(tǒng)計。在陽

性組（88例）中，D-DDOT檢測出82例陽性,6例

陰性，陽性符合率為％（82/88）,病例追蹤不符合

的6例，結(jié)果支持DDDOT的陰性結(jié)果。疑似病例組

比對法陰性的46例中,D-DDOT檢測均陰性，陰性

符合率100%。陰陽不符的6例均為比對試劑（+）,

而D-DDOT（-）,見表1。對該陰陽不符的6例進行臨

床病例追蹤，結(jié)果顯示該6例病例均無深靜脈血

栓、肺栓塞和血管內(nèi)彌漫性凝血的相關(guān)癥狀和診

斷，病例追蹤結(jié)果支持D-DDOT的可靠性，在兩家醫(yī)

院臨床研究中D-DDOT特異性應優(yōu)于進口同類比對試

劑。

對照組以比對法結(jié)果為標準，共有1例陽性（閔

行119號,mg/L）,99例陰性。該陽性樣本D-DDOT

檢測亦為mg/L,其它99例D-DDOT檢測均為陰性,

符合率100%。

在列入統(tǒng)計的全部234例樣本中，以比對法

（NycoCard）為標準結(jié)果：

陽性符合率二%

陰性符合率=100%

總符合率二%

配對卡方檢測結(jié)果顯示兩者結(jié)果在統(tǒng)計學上無

顯著差別；Kappa值（＞）,具有非常好的一致性。

以比對法陽性為標準，D-DDOT的陽性符合率雖

為％，但2個醫(yī)院對陽性不符病例(共6例)追蹤結(jié)

果均支持D-DDOT的可靠性。

D-DDOT與比對法(NycoCard)6例陽性不符結(jié)果

序D-DDOT比對法

追蹤診斷

號(mg/L)(mg/L)

閔肺炎，高血壓，非血栓病

行

閔糖尿病，肺炎，非血栓病

行

閔胰頭癌，非血栓病

行

閔上消化道出血，肝硬化，非血

行栓病

岳<氣管炎急性發(fā)作，非血栓病

陽

岳高血壓，心臟病，非血栓病

陽

2、對照組均為健康體檢人群共100例（閔行醫(yī)院40

例，岳陽醫(yī)院60例）。該組為隨機體檢人群，未進

行挑選，年齡分布在16-85歲，平均年齡為歲。以

比對法結(jié)果為標準，共有1例陽性（閔行119號，

mg/L）,99例陰性。該陽性樣本D-DDOT檢測亦為

mg/L,其它99例D-DDOT檢測均為陰性，符合率

100%。100例健康人D-二聚體讀數(shù)分布如下：

在兩家醫(yī)院進行的共100例健康體檢人群的臨

床研究中，二法99%的健康人D-二聚體讀數(shù)均〈

mg/ml,表明D-DDOT與比對法一樣，所選的正常參

考范圍Vmg/L設置恰當，滿足臨床需要。

D-DDOT陽性符合率=a/(a+c)=%

D-DDOT陰性符合率:d/(b+d)=100%

D-DDOT總符合率=(a+d)/'(a+b+c+d)=%

閔行醫(yī)院和岳陽醫(yī)院的統(tǒng)計四格表分別進行配

對卡方檢驗，兩者P均大于。

三、結(jié)論

上海市閔行區(qū)中心醫(yī)院和上海中醫(yī)藥大學附屬

岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床研究結(jié)果表明上海奧普

生物醫(yī)藥有限公司申請臨床研究的D-二聚體檢測試

劑盒(膠體金法)和比對法NycoCardD-二聚體單一試

劑盒在D-二聚體測定上有良好等效性，引用的正常

人參考范圍(Vmg/L)恰當，D-DDOT可以與比對

法一樣，在臨床用于排除深靜脈血栓、肺栓塞和血

管內(nèi)彌漫性凝血，滿足臨床應用需要。

以比對法陽性為標準，D-DDOT的陽性符合率雖

為%，但2個醫(yī)院對陽性不符病例（共6例）追蹤結(jié)

果均支持D-DDOT的可靠性，提示在本研究D-DDOT

特異性應優(yōu)于同類比對試劑。

檢測血漿D-二聚體新金標斑點滲濾法

試劑盒的臨床適用性（摘要）

上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院崇明分院檢驗科

張莉

本研究對國產(chǎn)新研制的膠體金法D-二聚體試劑

盒作了性能評價，并將其與挪威進口試劑盒的臨床

測試結(jié)果進行了比較。

一、材料與方法

儀器與試劑

D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）及配套

UppergoldU2金標斑點法定量讀數(shù)儀和D-DDOT試

劑，質(zhì)控品均由上海奧普生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)。

比對用挪威NycoCard公司生產(chǎn)D-二聚體試劑盒及配

套測讀儀NycoCardReaderIIo

234份臨床收集的新鮮血漿標本，作了線性、

精密度（CV）、回收率并用統(tǒng)計軟件作了分析。

結(jié)果

一、試劑盒性能評價

線性評價：回歸方程為：Y=+,Y=o此結(jié)果

顯示，該試劑D-D在范圍內(nèi)線性良好。

精密度總批內(nèi)及批間精密度分別為%和％?？偦厥章?/p>

為％。

二、臨床標本比對結(jié)果:

234例樣本中，二者陽性符合率為％,陰性符合

率為100%,總符合率為%。D-DDOT和Nycocard試

劑盒結(jié)果具有非常好的一致性。

討論

目前,D-二聚體的臨床檢測主要應用街排除靜脈血栓

栓塞(VTE),其中包括了DVT和PE。目前快速D-二聚

體測定已作為DVT診斷的首選項目。D-二聚體還是

早期診斷彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)較敏感的指標。

這對血栓性疾病的診斷，尤其是對于低臨床概率的

排除性診斷具有重要的意義。

目前D-二聚體的檢測沒有國際標準品和行業(yè)標

準品，各公司的標準品不統(tǒng)一、不通用，通常只適

合于與其配套的檢測系統(tǒng)的自身校正。另外，由于

各個檢測系統(tǒng)所使用的免疫抗體差異較大，抗原決

定簇各有不同，從而造成不同的檢測方法之間數(shù)據(jù)

差異很大，其陽性率、敏感性、特異性均不同，甚

至對于同一個樣本（枸椽酸抗凝血漿）的讀數(shù)亦存在

較大差異。

D-二聚體項目目前公認的敏感度在90%以上，

而特異性為40%?60%左右[7],因此診斷疾病時，

其意義主要在于陰性結(jié)果，即它是用于排除性的診

斷而非確診性的診斷。其陰性符合率達到100%,,陰

陽不符的四例病例均為Nycocard試劑盒陽性而D-D

DOT陰性，對于注重陰性排除試驗的D-二聚體檢測

項目，這樣的結(jié)果顯示出D-DDOT更具臨床適用性。

已上市的23種D-二聚體檢測試劑盒之間的比對

評估，它們的Spearman等級相關(guān)系數(shù)在之間。而

D-DDOT與NycoCard的Spearman系數(shù)為，說明其與

國際知名試劑盒等效。

以上三項臨床比對數(shù)據(jù)的統(tǒng)計指標和對試劑盒

基本性能的評價結(jié)果均顯示D-DDOT完全能夠滿足臨

床的需要。

本文摘自：核心醫(yī)學期刊“檢驗醫(yī)學”2010年1月

第1期

D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）操作規(guī)程（SOP）

一、項目名稱檢驗方法名稱

D-二聚體檢測試劑盒（膠體金法）D-DDOT

英文名：D-DimerassaybyDIGFAmethod

二、方法學原理

反應原理為固相雙抗體夾心法免疫試驗。待測

樣品中所含的D-二聚體，能為固相在膜上的D-二聚

體抗體特異性地捕獲，然后由另一個D-二聚體單抗-

膠體金綴合物標記，呈紅色斑點，斑點紅色強度與

樣品中D-二聚體濃度呈正比，可用U2金標斑點法定

量讀數(shù)儀測定。

三、試劑品牌、規(guī)格、內(nèi)含物：

包裝規(guī)格：20人份/盒

D-二聚體定量檢測試劑盒（膠體金法）

組份名稱主要活性成分及濃度數(shù)量

1.反應板D-二聚體抗體、致敏濃度塊

2.封閉液1%牛血清白蛋白（BSA）,PBS緩IX

沖液

3.洗滌液PBS緩沖液IX

4.金標液D-二聚體單抗膠體金綴合物、1%2X

凍干品BSA

5.金標液雙蒸水，％NaClIX

凍干品

復溶液

表中溶液分別以疊氮鈉防腐。

四、儀器品牌、型號

金標斑點法定量讀數(shù)儀UppergoldU2

五、操作步驟

1.從冷藏處取出試劑盒，室溫至少平衡半小

時，在D-二聚體金標液凍干品中，準確加入D-二聚

體金標凍干品復溶液搖勻。

2.將D-二聚體反應板平放于實驗臺，在反應孔

內(nèi)滴加2滴D-二聚體封閉液，待完全滲入。

3.使用潔凈吸頭準確吸取100u1枸檬酸抗凝血

漿，加到反應板中，待完全滲入后，加2滴D-二聚

體洗滌液。

4.待洗滌液完全滲入，使用潔凈吸頭準確加入

D-二聚體膠體金溶液100口1。

5.待完全滲入后，加4滴D-二聚體洗滌液。

6.立刻在U2金標定量儀D-二聚體項目下測讀，

測讀時間不宜超過5分鐘。

六、正常參考值

本試劑盒推薦正常人的預期讀數(shù)應＜mg/Lo

七、臨床意義

本產(chǎn)品在UppergoldU2金標斑點法定量讀數(shù)儀

上可快速測定血漿中的纖維蛋白降解產(chǎn)物D-二聚

體，是深靜脈血栓、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝血的

陰性排除試驗，屬即時檢驗(P0CT)類體外診斷試

劑。檢測結(jié)果可在3分鐘內(nèi)獲得，讀數(shù)范圍為，適

用于醫(yī)院門急診、重癥監(jiān)護病房等需快速測定D-二

聚體的場所。DDimer結(jié)果以D二聚體濃度mg/L表

達，如要用纖維蛋白原相當單位(FEU)表示，則應乘

以2。D-二聚體濃度正常，可基本排除深靜脈血栓、

肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)