2025年大學(xué)大三（分子生物學(xué)）基因工程基礎(chǔ)試題及解析

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題共30分）（總共10題，每題3分，每題只有一個(gè)正確答案，請(qǐng)將正確答案填在題后的括號(hào)內(nèi)）w1.基因工程中常用的工具酶不包括以下哪種？（）A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA連接酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.淀粉酶w2.以下關(guān)于質(zhì)粒的描述，錯(cuò)誤的是（）A.是雙鏈環(huán)狀DNA分子B.能自主復(fù)制C.只能存在于細(xì)菌中D.可作為基因載體w3.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生的末端類型不包括（）A.平末端B.黏性末端C.5'突出末端D.3'凹陷末端w4.基因工程中構(gòu)建重組DNA分子常用的載體是（）A.噬菌體B.動(dòng)植物病毒C.質(zhì)粒D.以上都是w5.以下哪種技術(shù)可用于檢測(cè)基因的表達(dá)水平？（）A.PCRB.SouthernblottingC.NorthernblottingD.Westernblottingw6.基因工程中導(dǎo)入目的基因的方法不包括（）A.顯微注射法B.氯化鈣處理法C.電穿孔法D.研磨法w7.以下關(guān)于PCR技術(shù)的說法，錯(cuò)誤的是（）A.以DNA為模板B.需要引物C.不需要DNA聚合酶D.可擴(kuò)增特定DNA片段w8.基因文庫是指（）A.包含某種生物全部基因的克隆群體B.包含某種生物部分基因的克隆群體C.包含多種生物全部基因的克隆群體D.包含多種生物部分基因的克隆群體w9.以下哪種方法可用于鑒定重組DNA分子？（）A.酶切分析B.PCR擴(kuò)增C.核酸測(cè)序D.以上都是w10.基因工程在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用不包括（）A.生產(chǎn)疫苗B.生產(chǎn)抗生素C.基因治療D.培育新品種第II卷（非選擇題共70分）w11.（10分）簡(jiǎn)述基因工程的基本操作流程。w12.（15分）請(qǐng)說明限制性核酸內(nèi)切酶的作用原理及特點(diǎn)。w13.（15分）分析PCR技術(shù)的原理、反應(yīng)體系及反應(yīng)過程。有這樣一個(gè)材料：在基因工程實(shí)驗(yàn)中，科研人員想要將一個(gè)特定的目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，他們采用了氯化鈣處理法。首先，將大腸桿菌細(xì)胞懸浮在氯化鈣溶液中，然后加入重組質(zhì)粒DNA分子，經(jīng)過一定時(shí)間的處理后，再進(jìn)行熱休克處理，使細(xì)胞吸收重組質(zhì)粒。之后，將處理后的細(xì)胞接種在含有抗生素的培養(yǎng)基上，觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)情況。w14.（20分）根據(jù)上述材料，回答以下問題：（1）氯化鈣處理法的作用是什么？（2）熱休克處理的目的是什么？（3）為什么要將細(xì)胞接種在含有抗生素的培養(yǎng)基上？w15.（10分）闡述基因工程在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用及可能帶來的問題。答案：w1.Dw2.Cw3.Dw4.Dw5.Cw6.Dw7.Cw8.Aw9.Dw10.Dw11.基因工程基本操作流程：獲取目的基因，可從生物基因組中分離、人工合成或PCR擴(kuò)增等；構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因與載體連接；導(dǎo)入目的基因到受體細(xì)胞，如細(xì)菌、動(dòng)植物細(xì)胞等；篩選和鑒定含有目的基因的受體細(xì)胞，可通過抗生素篩選、PCR檢測(cè)、核酸測(cè)序等方法；目的基因的表達(dá)與檢測(cè)，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄和翻譯。w12.限制性核酸內(nèi)切酶作用原理：能識(shí)別雙鏈DNA分子中特定的核苷酸序列，并在特定位置切割DNA。特點(diǎn)：具有特異性識(shí)別序列；切割產(chǎn)生特定末端類型，如平末端、黏性末端；可用于基因工程中切割目的基因和載體。w13.PCR技術(shù)原理：以DNA為模板，利用DNA聚合酶在引物引導(dǎo)下合成新的DNA鏈。反應(yīng)體系包括模板DNA、引物、dNTP、DNA聚合酶、緩沖液等。反應(yīng)過程：高溫變性使模板DNA雙鏈解開；低溫退火使引物與模板結(jié)合；適溫延伸合成新DNA鏈，如此循環(huán)多次擴(kuò)增特定DNA片段。w14.（1）氯化鈣處理法可使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài)，易于吸收重組質(zhì)粒DNA分子。（2）熱休克處理能進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞吸收重組質(zhì)粒。（3）將細(xì)胞接種在含有抗生素的培養(yǎng)基上，是因?yàn)橹亟M質(zhì)粒中含有抗生素抗性基因，能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)胞說明已成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒。w15.基因工程在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域