2025年實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)考試試題（附答案）一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共30分）1.根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2022），BSL-3實(shí)驗(yàn)室的核心工作間應(yīng)保持（）。A.正壓（相對(duì)于相鄰區(qū)域）B.常壓C.負(fù)壓（相對(duì)于相鄰區(qū)域）D.微正壓2.以下哪種操作不屬于可能產(chǎn)生生物氣溶膠的高風(fēng)險(xiǎn)操作？（）A.離心未密封的樣本管B.用吸管吹打液體樣本C.戴手套直接轉(zhuǎn)移固體培養(yǎng)物D.開(kāi)啟凍干菌種安瓿3.實(shí)驗(yàn)室感染性廢棄物的處理原則是（）。A.先收集后消毒B.分類(lèi)收集→消毒/滅菌→專(zhuān)用包裝→集中處理C.直接投入普通垃圾桶D.焚燒前無(wú)需消毒4.二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）必須配備的基本防護(hù)設(shè)備是（）。A.Ⅱ級(jí)生物安全柜B.Ⅲ級(jí)生物安全柜C.正壓防護(hù)服D.通風(fēng)櫥5.進(jìn)行病原體分離培養(yǎng)時(shí)，若操作中意外打翻培養(yǎng)平板，正確的應(yīng)急處理流程是（）。A.立即用紙巾擦拭，再?lài)姙?5%酒精B.先覆蓋含有效氯1000mg/L的消毒巾，靜置30分鐘后清理C.直接用清水沖洗臺(tái)面D.報(bào)告主管后等待專(zhuān)業(yè)人員處理6.實(shí)驗(yàn)室菌（毒）種管理中，高致病性病原微生物的運(yùn)輸必須符合（）。A.《危險(xiǎn)化學(xué)品管理?xiàng)l例》B.《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》C.《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》D.《實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)定評(píng)審準(zhǔn)則》7.關(guān)于個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）的使用，錯(cuò)誤的是（）。A.接觸感染性物質(zhì)后，應(yīng)先脫手套再摘口罩B.實(shí)驗(yàn)服應(yīng)長(zhǎng)袖、束口，避免與便服接觸C.一次性手套破損后，需立即更換并消毒手部D.防護(hù)眼鏡可替代生物安全柜的防護(hù)作用8.實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的首要依據(jù)是（）。A.實(shí)驗(yàn)人員的操作熟練程度B.病原體的危害等級(jí)（如WHO分類(lèi)）C.實(shí)驗(yàn)室的空間大小D.實(shí)驗(yàn)設(shè)備的先進(jìn)程度9.高壓蒸汽滅菌效果的生物監(jiān)測(cè)應(yīng)使用（）。A.嗜熱脂肪芽孢桿菌B.金黃色葡萄球菌C.大腸桿菌D.白色念珠菌10.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生疑似氣溶膠暴露（如生物安全柜故障）后，人員應(yīng)（）。A.立即離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室并關(guān)閉門(mén)，30分鐘后再進(jìn)入B.繼續(xù)操作至實(shí)驗(yàn)結(jié)束C.佩戴更高防護(hù)等級(jí)的口罩后繼續(xù)工作D.用紫外線(xiàn)照射10分鐘后繼續(xù)操作11.以下哪類(lèi)微生物屬于第一類(lèi)病原微生物？（）A.埃博拉病毒（非洲型）B.結(jié)核分枝桿菌C.乙肝病毒D.流感病毒（季節(jié)性）12.實(shí)驗(yàn)室廢棄物標(biāo)簽應(yīng)標(biāo)注的關(guān)鍵信息不包括（）。A.廢棄物類(lèi)型（感染性/化學(xué)性）B.產(chǎn)生日期C.實(shí)驗(yàn)人員姓名D.消毒處理狀態(tài)（已/未滅菌）13.進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，感染性動(dòng)物尸體的處理應(yīng)（）。A.直接冷凍保存B.高壓蒸汽滅菌后按醫(yī)療廢物處理C.深埋于實(shí)驗(yàn)室附近D.焚燒前無(wú)需消毒14.實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)中，“雙門(mén)互鎖”主要用于（）。A.BSL-1實(shí)驗(yàn)室的普通走廊B.BSL-3實(shí)驗(yàn)室的核心工作區(qū)與緩沖間C.試劑儲(chǔ)存室D.辦公室與實(shí)驗(yàn)室的通道15.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入制度，錯(cuò)誤的是（）。A.新員工需通過(guò)生物安全培訓(xùn)并考核合格后方可進(jìn)入B.外部參觀人員需經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)并全程陪同C.實(shí)習(xí)學(xué)生可獨(dú)立操作高風(fēng)險(xiǎn)實(shí)驗(yàn)D.懷孕或免疫功能低下人員需評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)后決定是否準(zhǔn)入二、多項(xiàng)選擇題（每題3分，共15分，多選、錯(cuò)選不得分，少選得1分）1.BSL-3實(shí)驗(yàn)室的核心要求包括（）。A.獨(dú)立的空氣凈化系統(tǒng)，氣流從清潔區(qū)流向污染區(qū)B.實(shí)驗(yàn)人員需穿戴正壓防護(hù)服C.配備雙扉高壓滅菌器（傳遞窗）D.每日監(jiān)測(cè)并記錄壓差、溫度、濕度2.生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的主要內(nèi)容包括（）。A.病原體的傳播途徑、致病性、耐藥性B.實(shí)驗(yàn)操作的復(fù)雜性（如離心、勻漿）C.實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有防護(hù)措施的有效性D.實(shí)驗(yàn)人員的健康狀況（如免疫接種史）3.發(fā)生銳器傷（如被接種環(huán)刺傷）后，正確的處理步驟是（）。A.立即在流動(dòng)水下擠壓傷口，由近心端向遠(yuǎn)心端擠出血液B.用0.5%碘伏或75%酒精消毒傷口C.立即包扎傷口并繼續(xù)實(shí)驗(yàn)D.24小時(shí)內(nèi)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人并填寫(xiě)暴露記錄4.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案應(yīng)包含（）。A.生物安全柜故障導(dǎo)致氣溶膠暴露的處理流程B.火災(zāi)或斷電時(shí)的人員疏散與樣本保護(hù)措施C.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物逃逸的捕捉與消毒方法D.外來(lái)人員突發(fā)疾病的急救措施5.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室消毒滅菌，正確的做法是（）。A.臺(tái)面消毒使用有效氯500mg/L的含氯消毒液B.塑料離心管可采用環(huán)氧乙烷氣體滅菌C.玻璃器皿可使用干熱滅菌（160℃，2小時(shí)）D.細(xì)胞培養(yǎng)液需先高壓滅菌再?gòu)U棄三、判斷題（每題1分，共10分，正確打“√”，錯(cuò)誤打“×”）1.BSL-2實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)置獨(dú)立的緩沖間。（）2.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，生物安全柜的紫外線(xiàn)燈需照射30分鐘以上方可關(guān)閉。（）3.感染性廢棄物的專(zhuān)用包裝袋應(yīng)采用黃色、帶生物危害標(biāo)識(shí)的防滲漏材料。（）4.進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，由于樣本已滅活，可在普通實(shí)驗(yàn)室操作。（）5.實(shí)驗(yàn)室冰箱內(nèi)可同時(shí)存放樣本、試劑和個(gè)人食品。（）6.高壓蒸汽滅菌時(shí)，物品應(yīng)松散放置，確保蒸汽穿透。（）7.接觸過(guò)感染性物質(zhì)的手套，應(yīng)直接丟入普通垃圾桶。（）8.實(shí)驗(yàn)室生物安全委員會(huì)應(yīng)至少每年對(duì)實(shí)驗(yàn)室安全狀況進(jìn)行一次全面評(píng)估。（）9.運(yùn)輸高致病性病原微生物時(shí)，只需填寫(xiě)運(yùn)輸申請(qǐng)表，無(wú)需其他證明文件。（）10.實(shí)驗(yàn)人員出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽等癥狀時(shí)，應(yīng)立即停止實(shí)驗(yàn)并報(bào)告。（）四、簡(jiǎn)答題（每題6分，共30分）1.簡(jiǎn)述生物安全實(shí)驗(yàn)室分級(jí)的主要依據(jù)（BSL-1至BSL-4）。2.列舉BSL-2實(shí)驗(yàn)室的5項(xiàng)基本要求（設(shè)施、操作或管理層面）。3.銳器傷的正確處理流程包括哪些關(guān)鍵步驟？4.實(shí)驗(yàn)室生物安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)重點(diǎn)分析哪些內(nèi)容？5.高壓蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)方法有哪些？各自的特點(diǎn)是什么？五、案例分析題（15分）某高校分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，實(shí)驗(yàn)員張某在使用移液器轉(zhuǎn)移大腸桿菌（具有氨芐青霉素抗性）菌液時(shí)，移液器頭意外刺破手套并劃傷手指?，F(xiàn)場(chǎng)未立即處理，3小時(shí)后張某感覺(jué)傷口輕微疼痛，遂報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。問(wèn)題：（1）張某的操作存在哪些錯(cuò)誤？（5分）（2）正確的應(yīng)急處理流程應(yīng)包括哪些步驟？（5分）（3）為避免類(lèi)似事件再次發(fā)生，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取哪些改進(jìn)措施？（5分）參考答案一、單項(xiàng)選擇題1.C2.C3.B4.A5.B6.B7.D8.B9.A10.A11.A12.C13.B14.B15.C二、多項(xiàng)選擇題1.ACD2.ABCD3.ABD4.ABC5.ABC三、判斷題1.×（BSL-2可不設(shè)獨(dú)立緩沖間，但BSL-3及以上必須設(shè)置）2.√3.√4.×（PCR樣本需確認(rèn)滅活效果，即使滅活也需在符合要求的實(shí)驗(yàn)室操作）5.×（禁止存放個(gè)人食品）6.√7.×（需投入感染性廢棄物專(zhuān)用袋）8.√9.×（需提供準(zhǔn)運(yùn)證明等文件）10.√四、簡(jiǎn)答題1.分級(jí)依據(jù)包括：①病原微生物的危害程度（感染后對(duì)個(gè)體或群體的危害）；②實(shí)驗(yàn)操作的風(fēng)險(xiǎn)（如是否產(chǎn)生氣溶膠、操作量大?。虎蹖?shí)驗(yàn)室的防護(hù)措施（設(shè)施、設(shè)備、管理要求）。BSL-1針對(duì)無(wú)或極低危害微生物，BSL-2針對(duì)中等危害，BSL-3針對(duì)高危害（但不通過(guò)空氣傳播），BSL-4針對(duì)極高危害（通過(guò)空氣傳播且無(wú)有效治療）。2.BSL-2實(shí)驗(yàn)室基本要求：①入口處設(shè)生物危害標(biāo)識(shí)和準(zhǔn)入制度；②配備Ⅱ級(jí)生物安全柜；③操作區(qū)與辦公區(qū)分離；④有可靠的消毒設(shè)施（如高壓滅菌器、臺(tái)面消毒液）；⑤實(shí)驗(yàn)人員需接受培訓(xùn)并穿戴合適PPE（實(shí)驗(yàn)服、手套、護(hù)目鏡）。3.銳器傷處理流程：①立即停止操作，在流動(dòng)水下由近心端向遠(yuǎn)心端輕輕擠壓傷口，排出部分血液；②用肥皂水或生理鹽水沖洗傷口10分鐘；③用0.5%碘伏或75%酒精消毒傷口，覆蓋無(wú)菌敷料；④2小時(shí)內(nèi)報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人并填寫(xiě)暴露記錄；⑤評(píng)估暴露風(fēng)險(xiǎn)（如病原體類(lèi)型、傷口深度），必要時(shí)進(jìn)行暴露后預(yù)防（如接種疫苗、服用藥物）；⑥跟蹤觀察至少3個(gè)月（如監(jiān)測(cè)感染指標(biāo)）。4.風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估重點(diǎn)內(nèi)容：①病原體特性（致病性、傳播途徑、耐藥性、是否需要特殊防護(hù)）；②實(shí)驗(yàn)操作（如離心、勻漿、接種等是否易產(chǎn)生氣溶膠或飛濺）；③人員能力（培訓(xùn)記錄、操作熟練度、健康狀況）；④設(shè)施設(shè)備（生物安全柜性能、高壓滅菌器有效性、通風(fēng)系統(tǒng)穩(wěn)定性）；⑤應(yīng)急措施（是否有暴露處理預(yù)案、急救藥品是否齊全）。5.監(jiān)測(cè)方法及特點(diǎn)：①物理監(jiān)測(cè)：通過(guò)滅菌器自帶的溫度、壓力、時(shí)間記錄儀，實(shí)時(shí)監(jiān)控參數(shù)是否達(dá)標(biāo)（快速但無(wú)法驗(yàn)證微生物滅活效果）；②化學(xué)監(jiān)測(cè)：使用化學(xué)指示卡/膠帶（如121℃壓力蒸汽指示卡），通過(guò)顏色變化判斷是否達(dá)到滅菌條件（簡(jiǎn)便但不能完全代表生物滅活）；③生物監(jiān)測(cè)：使用嗜熱脂肪芽孢桿菌（抗力強(qiáng)于多數(shù)病原微生物）作為指示菌，滅菌后培養(yǎng)48-72小時(shí)，若無(wú)菌生長(zhǎng)則滅菌合格（最可靠，但耗時(shí)較長(zhǎng)）。五、案例分析題（1）錯(cuò)誤：①未正確佩戴手套（或手套選擇不當(dāng)，未使用防刺手套）；②操作中未注意移液器頭的安全性（如未使用無(wú)氣溶膠移液器）；③暴露后未立即處理傷口（延遲3小時(shí)）；④未在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行菌液轉(zhuǎn)移（若大腸桿菌為BSL-2級(jí)，需在安全柜內(nèi)操作）。（2）正確流程：①立即停止操作，脫除污染手套，在流動(dòng)水下擠壓傷口（近心端向遠(yuǎn)心端），排出部分血液；②用肥皂水沖洗傷口10分鐘，再用0.5%碘伏消毒，覆蓋無(wú)菌敷料；③2小時(shí)內(nèi)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，填寫(xiě)《實(shí)驗(yàn)室生物安全暴露記錄表》；④評(píng)估暴露風(fēng)險(xiǎn)（大腸桿菌為條件致病菌，氨芐青霉素抗性不增加致病性），但仍需進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察（如監(jiān)測(cè)體溫、傷口感染情況）；⑤對(duì)操作臺(tái)面及移液器進(jìn)行消毒（用100