微生物檢驗(yàn)指導(dǎo)手冊(cè)一、總則

微生物檢驗(yàn)是評(píng)估樣品中微生物污染程度、種類及活動(dòng)性的重要手段，廣泛應(yīng)用于食品、藥品、環(huán)境、生物制品等領(lǐng)域。本手冊(cè)旨在提供一套標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化的微生物檢驗(yàn)流程與操作指南，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

二、檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境與設(shè)備

1.檢驗(yàn)環(huán)境：應(yīng)在潔凈、恒溫（20-25℃）、恒濕（45%-55%）的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，避免交叉污染。

2.設(shè)備要求：

(1)超凈工作臺(tái)：凈化效率≥99.9%。

(2)恒溫培養(yǎng)箱：溫度控制精度±0.5℃。

(3)顯微鏡：分辨率≥1000倍。

(4)天平：精度達(dá)0.1mg。

（二）試劑與耗材

1.培養(yǎng)基：常用包括麥肯錫瓊脂（MAC）、血瓊脂平板（BAP）、TSB液體培養(yǎng)基等。

2.試劑：

(1)無(wú)菌生理鹽水：用于樣品稀釋。

(2)洗脫劑：如0.1%吐溫80生理鹽水，用于食品樣品處理。

3.耗材：無(wú)菌試管、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、移液器等，均需高壓滅菌（121℃，15min）。

三、樣品采集與處理

（一）采樣原則

1.隨機(jī)、均勻、無(wú)菌取樣。

2.樣品量：固體樣品≥25g，液體樣品≥100mL。

3.采樣工具：使用一次性無(wú)菌采樣勺/吸管。

（二）樣品處理方法

1.固體樣品：

(1)剪碎混勻，取足量樣品。

(2)加入9倍無(wú)菌生理鹽水，均質(zhì)振蕩（200rpm，1min）。

(3)稀釋系列：10?1至10??梯度稀釋。

2.液體樣品：

(1)直接接種或加入1%氯化鈉溶液稀釋。

(2)混勻后取1mL加入9mL生理鹽水。

四、微生物計(jì)數(shù)方法

（一）平板計(jì)數(shù)法（MPN法）

1.步驟：

(1)將10?1、10?2、10?3稀釋液各1mL加入含9mL生理鹽水的試管中。

(2)每管接種3個(gè)平板，傾注30mL培養(yǎng)基。

(3)37℃培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.計(jì)算公式：

MPN（每100g/mL）=（C?×a+C?×b+C?×c）/Σd×稀釋倍數(shù)

其中，C為稀釋倍數(shù)，a/b/c為各管菌落數(shù)，d為總接種量。

（二）直接計(jì)數(shù)法（顯微鏡法）

1.步驟：

(1)樣品與染液（如美藍(lán)）混合。

(2)滴加到載玻片上，覆蓋蓋玻片。

(3)油鏡計(jì)數(shù)（≥200個(gè)視野），計(jì)算CFU/mL。

五、菌種鑒定

（一）形態(tài)學(xué)觀察

1.顯微鏡檢查：革蘭染色區(qū)分細(xì)菌類型（如球菌、桿菌）。

2.培養(yǎng)特征：記錄菌落顏色、形狀、大小等。

（二）生化鑒定

1.常用試驗(yàn)：

(1)硝酸鹽還原試驗(yàn)。

(2)酚紅蛋白胨試驗(yàn)（pH指示）。

(3)動(dòng)力試驗(yàn)（半固體培養(yǎng)基）。

2.儀器鑒定：API鑒定系統(tǒng)或MALDI-TOF質(zhì)譜分析。

六、質(zhì)量控制

（一）陽(yáng)性對(duì)照

1.每批檢驗(yàn)必須設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（已知菌落數(shù)的培養(yǎng)基）。

2.控制范圍：±20%誤差。

（二）重復(fù)性檢驗(yàn)

1.關(guān)鍵項(xiàng)目（如菌落總數(shù)）需雙份平行檢測(cè)。

2.結(jié)果差異＞10%需重新檢驗(yàn)。

七、結(jié)果報(bào)告

（一）報(bào)告內(nèi)容

1.樣品信息：名稱、批次、采樣日期。

2.檢驗(yàn)項(xiàng)目：菌落總數(shù)、大腸菌群等。

3.單位：CFU/g或CFU/mL。

（二）異常處理

1.超標(biāo)樣品需標(biāo)注“拒收”并復(fù)檢。

2.無(wú)法鑒定的菌株送專業(yè)機(jī)構(gòu)確認(rèn)。

八、注意事項(xiàng)

1.每次操作后需徹底消毒工作臺(tái)面。

2.培養(yǎng)基過(guò)期或開封超過(guò)2個(gè)月不得使用。

3.嚴(yán)禁手直接接觸樣品或培養(yǎng)基表面。

一、總則

微生物檢驗(yàn)是評(píng)估樣品中微生物污染程度、種類及活動(dòng)性的重要手段，廣泛應(yīng)用于食品、藥品、環(huán)境、生物制品等領(lǐng)域。本手冊(cè)旨在提供一套標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化的微生物檢驗(yàn)流程與操作指南，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

微生物檢驗(yàn)的核心在于模擬微生物在適宜環(huán)境中的生長(zhǎng)規(guī)律，通過(guò)特定的培養(yǎng)、計(jì)數(shù)、鑒定方法，判斷樣品的微生物狀態(tài)。檢驗(yàn)過(guò)程需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，避免環(huán)境污染導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。同時(shí)，檢驗(yàn)人員應(yīng)熟悉各類培養(yǎng)基的特性和適用范圍，選擇最合適的檢測(cè)方法。本手冊(cè)將詳細(xì)闡述從樣品準(zhǔn)備到結(jié)果報(bào)告的完整流程，并強(qiáng)調(diào)質(zhì)量控制的重要性。

二、檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境與設(shè)備

1.檢驗(yàn)環(huán)境：

(1)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置獨(dú)立檢驗(yàn)區(qū)域，與清潔區(qū)、污染區(qū)分隔。

(2)空氣潔凈度要求：生物安全柜或超凈工作臺(tái)內(nèi)≥3.5×10?CFU/m3（30min沉降菌）。

(3)溫濕度控制：培養(yǎng)期間溫度波動(dòng)≤±2℃，相對(duì)濕度維持在45%-55%。

2.設(shè)備要求：

(1)超凈工作臺(tái)：定期使用紫外燈照射（30min）消毒，開啟前用70%-75%酒精噴灑表面。

(2)恒溫培養(yǎng)箱：校準(zhǔn)溫度計(jì)（每年1次），確保培養(yǎng)箱內(nèi)溫度均勻性（使用熱分布測(cè)試儀）。

(3)顯微鏡：油鏡需用專用鏡油，使用后用擦鏡紙蘸酒精清潔。

(4)天平：稱量時(shí)需調(diào)平，避免氣流干擾。

（二）試劑與耗材

1.培養(yǎng)基：

(1)麥肯錫瓊脂（MAC）：用于分離腸道桿菌。成分包括胰蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、伊紅美藍(lán)。

(2)血瓊脂平板（BAP）：用于培養(yǎng)需氧菌及鑒定β溶血性。需使用新鮮血（采后4h內(nèi)使用）。

(3)TSB液體培養(yǎng)基：用于增菌培養(yǎng)，含胰蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母提取物。

2.試劑：

(1)無(wú)菌生理鹽水：使用純化水配制，分裝于10mL無(wú)菌瓶，高壓滅菌。

(2)洗脫劑：0.1%吐溫80生理鹽水，適用于食品表面取樣。

3.耗材：

(1)無(wú)菌試管：熔封口需平整，滅菌后檢查有無(wú)破損。

(2)接種環(huán)：金屬環(huán)需用酒精燈火焰燒至紅熱，冷卻后使用。

(3)移液器：校準(zhǔn)刻度（每月1次），避免膠頭污染。

三、樣品采集與處理

（一）采樣原則

1.目標(biāo)：采集具有代表性的樣品，減少微生物污染。

2.方式：

(1)固體樣品：使用無(wú)菌采樣鏟或勺，避開表層及異常區(qū)域。

(2)液體樣品：用無(wú)菌吸管或注射器直接吸取，避免接觸容器內(nèi)壁。

3.量要求：

(1)食品：25g（肉類）、100mL（飲料）、10cm2（表面）。

(2)環(huán)境：使用無(wú)菌棉簽擦拭樣表面（旋轉(zhuǎn)5次）。

（二）樣品處理方法

1.固體樣品：

(1)剪碎混勻：將樣品置于無(wú)菌研缽中，加9倍生理鹽水研磨。

(2)稀釋系列：梯度稀釋至10??，每級(jí)取1mL接種平板。

(3)注意：避免玻璃碎片混入，每次轉(zhuǎn)移后用酒精燈火焰滅菌容器邊緣。

2.液體樣品：

(1)直接接種：100mL液體樣品加入含9mL生理鹽水的試管中，混勻后傾注平板。

(2)沉淀法：離心（3000rpm，5min）取上清液，沉淀物用生理鹽水重懸。

3.表面樣品：

(1)棉簽法：旋轉(zhuǎn)擦拭后，將棉簽放入1mL生理鹽水中勻漿。

(2)浸泡法：將表面放入含100mL生理鹽水的容器中，震蕩30min。

四、微生物計(jì)數(shù)方法

（一）平板計(jì)數(shù)法（MPN法）

1.步驟：

(1)稀釋液制備：取樣品10g/mL，依次稀釋至10?1至10??。

(2)接種平板：每個(gè)稀釋度取1mL加入含9mL生理鹽水的試管，各接種3個(gè)平板。

(3)培養(yǎng)：37℃培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)30-300CFU的平板。

2.計(jì)算公式：

MPN（每100g/mL）=（C?×a+C?×b+C?×c）/Σd×稀釋倍數(shù)

其中，C為稀釋倍數(shù)，a/b/c為各管菌落數(shù)，d為總接種量。

（二）直接計(jì)數(shù)法（顯微鏡法）

1.步驟：

(1)樣品制備：取0.1g/mL樣品，加1滴美藍(lán)染液，混勻。

(2)制片：滴加到載玻片上，覆蓋蓋玻片，邊緣用指甲油封邊。

(3)計(jì)數(shù)：油鏡觀察，每視野計(jì)數(shù)≥200個(gè)，計(jì)算CFU/mL。

2.注意事項(xiàng)：

(1)美藍(lán)染色時(shí)間：3-5min，過(guò)長(zhǎng)會(huì)抑制嗜堿性細(xì)菌。

(2)重復(fù)計(jì)數(shù)：每個(gè)樣品需計(jì)數(shù)2張玻片。

五、菌種鑒定

（一）形態(tài)學(xué)觀察

1.顯微鏡檢查：

(1)革蘭染色：按順序加熱復(fù)紅（30s）、碘液（1min）、95%酒精（5s）、復(fù)紅（30s）。

(2)菌落觀察：記錄形狀（圓形/卵圓形）、邊緣（整齊/波狀）、顏色（黃色/粉色）。

2.生化特性：

(1)API鑒定：選擇革蘭陽(yáng)性菌鑒定條（如API20E），按說(shuō)明書接種、培養(yǎng)。

(2)代謝試驗(yàn)：檢測(cè)氧化酶、凝固酶、乳糖發(fā)酵等。

六、質(zhì)量控制

（一）陽(yáng)性對(duì)照

1.設(shè)置要求：

(1)每批次檢驗(yàn)必須添加已知菌落數(shù)的培養(yǎng)基（如10?CFU/mL）。

(2)對(duì)照值偏差：±20%內(nèi)為合格。

2.操作：

(1)將陽(yáng)性對(duì)照與樣品同步培養(yǎng)，結(jié)果需在允許范圍內(nèi)。

(2)若超標(biāo)需重新檢驗(yàn)并查找原因。

（二）重復(fù)性檢驗(yàn)

1.檢測(cè)項(xiàng)目：菌落總數(shù)、大腸菌群等。

2.要求：

(1)平行樣品差值＞10%需復(fù)檢。

(2)記錄每次檢測(cè)的變異系數(shù)（CV）。

七、結(jié)果報(bào)告

（一）報(bào)告內(nèi)容

1.樣品信息：名稱、批號(hào)、采樣日期、檢測(cè)人。

2.檢驗(yàn)項(xiàng)目：菌落總數(shù)、大腸菌群、致病菌等。

3.單位：CFU/g或CFU/mL。

（二）異常處理

1.超標(biāo)樣品：標(biāo)注“不合格”并記錄復(fù)查結(jié)果。

2.無(wú)法鑒定的菌株：送第三方實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步檢測(cè)。

八、注意事項(xiàng)

1.操作流程：

(1)每次接種后用酒精燈火焰滅菌接種環(huán)。

(2)培養(yǎng)基開封后需標(biāo)注日期，超過(guò)2個(gè)月禁止使用。

2.安全防護(hù)：

(1)穿戴無(wú)菌手套，避免接觸非無(wú)菌區(qū)域。

(2)污染培養(yǎng)基用10%漂白水浸泡30min后丟棄。

3.記錄規(guī)范：

(1)每步操作需在檢驗(yàn)記錄表上簽字確認(rèn)。

(2)電子版報(bào)告需雙人審核。

一、總則

微生物檢驗(yàn)是評(píng)估樣品中微生物污染程度、種類及活動(dòng)性的重要手段，廣泛應(yīng)用于食品、藥品、環(huán)境、生物制品等領(lǐng)域。本手冊(cè)旨在提供一套標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化的微生物檢驗(yàn)流程與操作指南，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

二、檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境與設(shè)備

1.檢驗(yàn)環(huán)境：應(yīng)在潔凈、恒溫（20-25℃）、恒濕（45%-55%）的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，避免交叉污染。

2.設(shè)備要求：

(1)超凈工作臺(tái)：凈化效率≥99.9%。

(2)恒溫培養(yǎng)箱：溫度控制精度±0.5℃。

(3)顯微鏡：分辨率≥1000倍。

(4)天平：精度達(dá)0.1mg。

（二）試劑與耗材

1.培養(yǎng)基：常用包括麥肯錫瓊脂（MAC）、血瓊脂平板（BAP）、TSB液體培養(yǎng)基等。

2.試劑：

(1)無(wú)菌生理鹽水：用于樣品稀釋。

(2)洗脫劑：如0.1%吐溫80生理鹽水，用于食品樣品處理。

3.耗材：無(wú)菌試管、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、移液器等，均需高壓滅菌（121℃，15min）。

三、樣品采集與處理

（一）采樣原則

1.隨機(jī)、均勻、無(wú)菌取樣。

2.樣品量：固體樣品≥25g，液體樣品≥100mL。

3.采樣工具：使用一次性無(wú)菌采樣勺/吸管。

（二）樣品處理方法

1.固體樣品：

(1)剪碎混勻，取足量樣品。

(2)加入9倍無(wú)菌生理鹽水，均質(zhì)振蕩（200rpm，1min）。

(3)稀釋系列：10?1至10??梯度稀釋。

2.液體樣品：

(1)直接接種或加入1%氯化鈉溶液稀釋。

(2)混勻后取1mL加入9mL生理鹽水。

四、微生物計(jì)數(shù)方法

（一）平板計(jì)數(shù)法（MPN法）

1.步驟：

(1)將10?1、10?2、10?3稀釋液各1mL加入含9mL生理鹽水的試管中。

(2)每管接種3個(gè)平板，傾注30mL培養(yǎng)基。

(3)37℃培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。

2.計(jì)算公式：

MPN（每100g/mL）=（C?×a+C?×b+C?×c）/Σd×稀釋倍數(shù)

其中，C為稀釋倍數(shù)，a/b/c為各管菌落數(shù)，d為總接種量。

（二）直接計(jì)數(shù)法（顯微鏡法）

1.步驟：

(1)樣品與染液（如美藍(lán)）混合。

(2)滴加到載玻片上，覆蓋蓋玻片。

(3)油鏡計(jì)數(shù)（≥200個(gè)視野），計(jì)算CFU/mL。

五、菌種鑒定

（一）形態(tài)學(xué)觀察

1.顯微鏡檢查：革蘭染色區(qū)分細(xì)菌類型（如球菌、桿菌）。

2.培養(yǎng)特征：記錄菌落顏色、形狀、大小等。

（二）生化鑒定

1.常用試驗(yàn)：

(1)硝酸鹽還原試驗(yàn)。

(2)酚紅蛋白胨試驗(yàn)（pH指示）。

(3)動(dòng)力試驗(yàn)（半固體培養(yǎng)基）。

2.儀器鑒定：API鑒定系統(tǒng)或MALDI-TOF質(zhì)譜分析。

六、質(zhì)量控制

（一）陽(yáng)性對(duì)照

1.每批檢驗(yàn)必須設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（已知菌落數(shù)的培養(yǎng)基）。

2.控制范圍：±20%誤差。

（二）重復(fù)性檢驗(yàn)

1.關(guān)鍵項(xiàng)目（如菌落總數(shù)）需雙份平行檢測(cè)。

2.結(jié)果差異＞10%需重新檢驗(yàn)。

七、結(jié)果報(bào)告

（一）報(bào)告內(nèi)容

1.樣品信息：名稱、批次、采樣日期。

2.檢驗(yàn)項(xiàng)目：菌落總數(shù)、大腸菌群等。

3.單位：CFU/g或CFU/mL。

（二）異常處理

1.超標(biāo)樣品需標(biāo)注“拒收”并復(fù)檢。

2.無(wú)法鑒定的菌株送專業(yè)機(jī)構(gòu)確認(rèn)。

八、注意事項(xiàng)

1.每次操作后需徹底消毒工作臺(tái)面。

2.培養(yǎng)基過(guò)期或開封超過(guò)2個(gè)月不得使用。

3.嚴(yán)禁手直接接觸樣品或培養(yǎng)基表面。

一、總則

微生物檢驗(yàn)是評(píng)估樣品中微生物污染程度、種類及活動(dòng)性的重要手段，廣泛應(yīng)用于食品、藥品、環(huán)境、生物制品等領(lǐng)域。本手冊(cè)旨在提供一套標(biāo)準(zhǔn)化、系統(tǒng)化的微生物檢驗(yàn)流程與操作指南，確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。

微生物檢驗(yàn)的核心在于模擬微生物在適宜環(huán)境中的生長(zhǎng)規(guī)律，通過(guò)特定的培養(yǎng)、計(jì)數(shù)、鑒定方法，判斷樣品的微生物狀態(tài)。檢驗(yàn)過(guò)程需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，避免環(huán)境污染導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。同時(shí)，檢驗(yàn)人員應(yīng)熟悉各類培養(yǎng)基的特性和適用范圍，選擇最合適的檢測(cè)方法。本手冊(cè)將詳細(xì)闡述從樣品準(zhǔn)備到結(jié)果報(bào)告的完整流程，并強(qiáng)調(diào)質(zhì)量控制的重要性。

二、檢驗(yàn)前的準(zhǔn)備

（一）環(huán)境與設(shè)備

1.檢驗(yàn)環(huán)境：

(1)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置獨(dú)立檢驗(yàn)區(qū)域，與清潔區(qū)、污染區(qū)分隔。

(2)空氣潔凈度要求：生物安全柜或超凈工作臺(tái)內(nèi)≥3.5×10?CFU/m3（30min沉降菌）。

(3)溫濕度控制：培養(yǎng)期間溫度波動(dòng)≤±2℃，相對(duì)濕度維持在45%-55%。

2.設(shè)備要求：

(1)超凈工作臺(tái)：定期使用紫外燈照射（30min）消毒，開啟前用70%-75%酒精噴灑表面。

(2)恒溫培養(yǎng)箱：校準(zhǔn)溫度計(jì)（每年1次），確保培養(yǎng)箱內(nèi)溫度均勻性（使用熱分布測(cè)試儀）。

(3)顯微鏡：油鏡需用專用鏡油，使用后用擦鏡紙蘸酒精清潔。

(4)天平：稱量時(shí)需調(diào)平，避免氣流干擾。

（二）試劑與耗材

1.培養(yǎng)基：

(1)麥肯錫瓊脂（MAC）：用于分離腸道桿菌。成分包括胰蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、伊紅美藍(lán)。

(2)血瓊脂平板（BAP）：用于培養(yǎng)需氧菌及鑒定β溶血性。需使用新鮮血（采后4h內(nèi)使用）。

(3)TSB液體培養(yǎng)基：用于增菌培養(yǎng)，含胰蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母提取物。

2.試劑：

(1)無(wú)菌生理鹽水：使用純化水配制，分裝于10mL無(wú)菌瓶，高壓滅菌。

(2)洗脫劑：0.1%吐溫80生理鹽水，適用于食品表面取樣。

3.耗材：

(1)無(wú)菌試管：熔封口需平整，滅菌后檢查有無(wú)破損。

(2)接種環(huán)：金屬環(huán)需用酒精燈火焰燒至紅熱，冷卻后使用。

(3)移液器：校準(zhǔn)刻度（每月1次），避免膠頭污染。

三、樣品采集與處理

（一）采樣原則

1.目標(biāo)：采集具有代表性的樣品，減少微生物污染。

2.方式：

(1)固體樣品：使用無(wú)菌采樣鏟或勺，避開表層及異常區(qū)域。

(2)液體樣品：用無(wú)菌吸管或注射器直接吸取，避免接觸容器內(nèi)壁。

3.量要求：

(1)食品：25g（肉類）、100mL（飲料）、10cm2（表面）。

(2)環(huán)境：使用無(wú)菌棉簽擦拭樣表面（旋轉(zhuǎn)5次）。

（二）樣品處理方法

1.固體樣品：

(1)剪碎混勻：將樣品置于無(wú)菌研缽中，加9倍生理鹽水研磨。

(2)稀釋系列：梯度稀釋至10??，每級(jí)取1mL接種平板。

(3)注意：避免玻璃碎片混入，每次轉(zhuǎn)移后用酒精燈火焰滅菌容器邊緣。

2.液體樣品：

(1)直接接種：100mL液體樣品加入含9mL生理鹽水的試管中，混勻后傾注平板。

(2)沉淀法：離心（3000rpm，5min）取上清液，沉淀物用生理鹽水重懸。

3.表面樣品：

(1)棉簽法：旋轉(zhuǎn)擦拭后，將棉簽放入1mL生理鹽水中勻漿。

(2)浸泡法：將表面放入含100mL生理鹽水的容器中，震蕩30min。

四、微生物計(jì)數(shù)方法

（一）平板計(jì)數(shù)法（MPN法）

1.步驟：

(1)稀釋液制備：取樣品10g/mL，依次稀釋至10?1至10??。

(2)接種平板：每個(gè)稀釋度取1mL加入含9mL生理鹽水的試管，各接種3個(gè)平板。

(3)培養(yǎng)：37℃培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)30-300CFU的平板。

2.計(jì)算公式：

MPN（每100g/mL）=（C?×a+C?×b+C?×c）/Σd×稀釋倍數(shù)

其中，C為稀釋倍數(shù)，a/b/c為各管菌落數(shù)，d為總接種量。

（二）直接計(jì)數(shù)法（顯微鏡法）

1.步驟：

(1)樣品制備：取0.1g/mL樣品，加1滴美藍(lán)染液，混勻。

(2)制片：滴加到載玻片上，覆蓋蓋玻片，邊緣用指甲油封邊。

(3)計(jì)數(shù)：油鏡觀察，每視野計(jì)數(shù)≥200個(gè)，計(jì)算CFU/mL。

2.注