1密閉式豬舍空氣過(guò)濾器對(duì)病原攔截效果評(píng)估檢測(cè)方法本文件規(guī)定了亞高效過(guò)濾豬舍過(guò)濾器上游和下游病原采集步驟及檢本標(biāo)準(zhǔn)適用于密閉式豬舍空氣過(guò)濾器病原攔截效果的檢GB/T18801空氣凈化器GB/T18641偽狂犬病診斷方法GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T27401實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范動(dòng)物檢疫GB/T35911偽狂犬病病毒熒光PCR檢測(cè)方法GB/T38517顆粒生物氣溶膠采樣和分析通則舍內(nèi)環(huán)境由人工調(diào)控。這種豬舍通常由高度自動(dòng)化設(shè)備控制人工小氣候條件，以提供適宜的環(huán)境亞高效過(guò)濾器Sub-HighEfficiencyParticulateAir(Sub-HEP2用于豬舍通風(fēng)系統(tǒng)，對(duì)粒徑≥0.5μm額定風(fēng)量下效率不低于90%的空氣過(guò)濾器。PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PolymerasePBS：磷酸鹽緩沖液（PhosphatebuffereABSL：動(dòng)物生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（AnimalbiosafetyPK-15：豬腎細(xì)胞系（PorcineKidney-3按照GB/T18641.3的相關(guān)要求和操作步驟進(jìn)行病毒的效撞擊式空氣微生物采樣器（常州康華KHW-6型六級(jí)篩孔）、熒光定量PCR200PCR管、200uL八連管、移液器吸頭、EP管7.2樣品的采集b）采樣流量：28.3L/minc）可調(diào)節(jié)精度：小于等于5%4使用兩套相同的采樣裝置或采樣方式，按照GB/T385樣本采集后對(duì)應(yīng)標(biāo)記清楚，并及時(shí)送往實(shí)驗(yàn)室，采集后室溫（25℃)環(huán)境中放置不應(yīng)超過(guò)4h。樣本采集后應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)，能在24h內(nèi)完成檢測(cè)的樣本可置于2℃~8℃環(huán)境保存；24h內(nèi)無(wú)法檢測(cè)的樣本應(yīng)置于-70℃或以下條件保存，依據(jù)GB/T35911對(duì)樣本進(jìn)行偽狂犬病病毒核酸檢測(cè)通過(guò)檢測(cè)病毒特異性基因片段的拷貝數(shù)，來(lái)精確量化空氣中的病攔截效率(%)=[(C_上游-C_下游)/C_上游]×100%,5安裝0.5微米亞高效過(guò)濾器的密閉式豬舍對(duì)病原的攔截效率在90%以上為合格，攔截效率在90%61.1量取去離子水950mL，置于一定的容器中。1.2將10.0gDMEM粉劑加于15℃~30℃的去離子水中，邊加邊攪拌1.3每1000mL培養(yǎng)液加3.7g碳酸氫鈉（NaHCO?)1.4現(xiàn)在加水至1000mL，用1mol/LNaOH或HCl調(diào)pH值至6.9～7.0，在過(guò)濾前應(yīng)蓋緊容器