再生醫(yī)學間充質(zhì)干細胞凍存工程師崗位考試試卷及答案單項選擇題（每題2分，共10題）1.間充質(zhì)干細胞凍存常用的保護劑是（）A.乙醇B.DMSOC.甘油D.甲醛答案：B2.凍存細胞時，一般將細胞懸液置于（）中。A.普通冰箱B.液氮罐C.恒溫培養(yǎng)箱D.超凈臺答案：B3.間充質(zhì)干細胞凍存復蘇后，活力應(yīng)不低于（）A.50%B.60%C.70%D.80%答案：C4.凍存管標記內(nèi)容不包括（）A.細胞名稱B.凍存日期C.凍存人D.細胞來源公司答案：D5.間充質(zhì)干細胞凍存密度一般為（）A.1×10?/mlB.1×10?/mlC.1×10?/mlD.1×10?/ml答案：B6.以下哪種不是細胞凍存的關(guān)鍵因素（）A.凍存溫度B.凍存時間C.凍存容器D.凍存地點答案：D7.細胞凍存液中血清比例一般為（）A.10%B.20%C.50%D.70%答案：C8.凍存細胞復蘇時，快速解凍的溫度是（）A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃答案：B9.凍存細胞時，降溫速率一般為（）A.1℃/minB.5℃/minC.10℃/minD.20℃/min答案：A10.間充質(zhì)干細胞凍存常用的培養(yǎng)基是（）A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.McCoy's5A答案：B多項選擇題（每題2分，共10題）1.間充質(zhì)干細胞凍存的目的包括（）A.長期保存細胞B.減少細胞污染風險C.維持細胞特性D.降低細胞培養(yǎng)成本答案：ABC2.凍存細胞時需要注意的事項有（）A.細胞狀態(tài)良好B.凍存液現(xiàn)配現(xiàn)用C.標記清晰D.嚴格無菌操作答案：ABCD3.以下屬于細胞凍存保護劑的有（）A.DMSOB.甘油C.海藻糖D.蔗糖答案：ABCD4.影響間充質(zhì)干細胞凍存效果的因素有（）A.細胞代數(shù)B.凍存方法C.復蘇方法D.凍存設(shè)備答案：ABCD5.細胞凍存管的選擇要求有（）A.耐低溫B.密封性好C.透明度高D.可重復使用答案：ABC6.凍存細胞復蘇后，評估細胞活力的方法有（）A.臺盼藍染色B.MTT法C.流式細胞術(shù)D.觀察細胞形態(tài)答案：ABC7.間充質(zhì)干細胞凍存液的組成成分通常包含（）A.培養(yǎng)基B.血清C.保護劑D.抗生素答案：ABC8.細胞凍存的步驟包括（）A.制備細胞懸液B.加入凍存液C.梯度降溫D.放入液氮答案：ABCD9.凍存細胞的存儲設(shè)備有（）A.液氮罐B.深低溫冰箱C.普通冰箱D.超低溫冰箱答案：ABD10.復蘇凍存細胞時的注意事項有（）A.快速解凍B.無菌操作C.及時更換培養(yǎng)基D.避免劇烈震蕩答案：ABCD判斷題（每題2分，共10題）1.間充質(zhì)干細胞凍存可以在普通冰箱長期保存。（）答案：錯誤2.凍存細胞復蘇后可直接用于實驗。（）答案：錯誤3.DMSO對細胞沒有毒性。（）答案：錯誤4.凍存細胞時，降溫速率越快越好。（）答案：錯誤5.細胞凍存液可以提前配好長期保存。（）答案：錯誤6.間充質(zhì)干細胞凍存密度越高越好。（）答案：錯誤7.復蘇凍存細胞時，可在室溫下慢慢解凍。（）答案：錯誤8.凍存管標記可以使用普通記號筆。（）答案：錯誤9.凍存細胞過程中，液氮罐需要定期檢查補充液氮。（）答案：正確10.不同來源的間充質(zhì)干細胞凍存方法相同。（）答案：錯誤簡答題（每題5分，共4題）1.簡述間充質(zhì)干細胞凍存的基本流程。答案：首先制備狀態(tài)良好的細胞懸液，檢測細胞活力與密度。按比例配制凍存液，將凍存液加入細胞懸液。放入程序降溫盒，以1℃/min的速率降至-80℃，之后轉(zhuǎn)移至液氮罐長期保存。2.為什么凍存細胞時要使用保護劑？答案：在凍存過程中，細胞外溶液易形成冰晶，損傷細胞。保護劑如DMSO、甘油等能降低溶液冰點，減少冰晶形成，同時維持細胞內(nèi)外滲透壓平衡，降低低溫對細胞的損傷，保護細胞的結(jié)構(gòu)和功能。3.如何判斷凍存復蘇后的間充質(zhì)干細胞活力是否合格？答案：常用臺盼藍染色，活細胞不被染色，死細胞被染成藍色，通過計數(shù)計算活細胞比例，活力應(yīng)不低于70%。也可用MTT法、流式細胞術(shù)等檢測細胞代謝活性或細胞膜完整性來評估。4.凍存細胞時對凍存管有哪些要求？答案：需耐低溫，能承受液氮溫度不破裂；密封性要好，防止液氮進入凍存管破壞細胞；透明度高便于觀察細胞狀態(tài)；材質(zhì)穩(wěn)定，不與凍存液等發(fā)生化學反應(yīng)，一般為一次性使用以保證無菌和質(zhì)量。討論題（每題5分，共4題）1.討論不同凍存保護劑對間充質(zhì)干細胞凍存效果的影響。答案：DMSO是常用保護劑，能有效降低冰點減少冰晶，但有一定毒性，可能影響細胞后期功能。甘油也能降低冰點，對細胞毒性相對小，但保護效果可能稍弱。海藻糖等糖類保護劑，能在細胞表面形成保護膜，對細胞生物大分子有保護作用，且毒性低，不過其凍存效果可能受濃度等因素影響。綜合來看，不同保護劑各有優(yōu)劣，選擇時需綜合考慮細胞特性、凍存時間等因素。2.若凍存復蘇后的間充質(zhì)干細胞活力不達標，可能有哪些原因？答案：凍存前細胞狀態(tài)不佳，如細胞代數(shù)過高、培養(yǎng)條件不良導致細胞老化或受損。凍存液配方不合理，保護劑濃度不當。降溫速率不符合要求，過快或過慢都可能損傷細胞。復蘇過程不規(guī)范，未快速解凍，導致冰晶再次形成損傷細胞。凍存設(shè)備故障，如液氮罐液氮不足致溫度波動等，都會影響復蘇后細胞活力。3.如何優(yōu)化間充質(zhì)干細胞凍存方案以提高復蘇后的細胞質(zhì)量？答案：優(yōu)化凍存液配方，篩選合適保護劑組合及濃度。精確控制降溫速率，可采用程序降溫儀確保按1℃/min降溫。凍存前保證細胞處于對數(shù)生長期，狀態(tài)良好。復蘇時嚴格快速解凍操作。定期檢查凍存設(shè)備，確保穩(wěn)定低溫環(huán)境。還可探索新的凍存技術(shù)和添加劑，進一步提高凍存效果和復蘇后細胞質(zhì)量。4.談?wù)勯g充質(zhì)干細胞凍存技術(shù)在再生醫(yī)學領(lǐng)域的重要性。答案：間充質(zhì)干細