沉降菌、自來水微生物考試試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題1分，共30分）1.沉降菌培養(yǎng)皿在潔凈室中暴露30min后，其直徑為90mm，培養(yǎng)48h后計(jì)數(shù)得平均菌落數(shù)為18CFU，則該潔凈室每立方米空氣中沉降菌濃度最接近下列哪一數(shù)值（換算系數(shù)按500000皿·min/m3計(jì)）？A.0.6CFU/m3B.1.2CFU/m3C.2.4CFU/m3D.4.8CFU/m3答案：B2.采用營養(yǎng)瓊脂平皿測(cè)定沉降菌時(shí)，若潔凈室空氣浮游菌濃度為5CFU/m3，則理論上90mm平皿暴露30min后預(yù)期菌落數(shù)最接近：A.1CFUB.3CFUC.5CFUD.8CFU答案：B3.下列哪項(xiàng)不是導(dǎo)致沉降菌結(jié)果假陰性偏低的常見原因？A.培養(yǎng)基干裂B.采樣皿暴露時(shí)間不足C.采樣皿放置高度距地面0.8mD.培養(yǎng)溫度設(shè)為37℃而非30~35℃答案：C4.對(duì)自來水進(jìn)行42℃耐熱大腸菌群檢驗(yàn)時(shí)，若10mL水樣接種到10mL雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管中，產(chǎn)氣且靛基質(zhì)陽性，下一步確證試驗(yàn)應(yīng)選用：A.EC肉湯44.5℃培養(yǎng)B.伊紅美藍(lán)平板37℃培養(yǎng)C.營養(yǎng)瓊脂斜面37℃培養(yǎng)D.葡萄糖蛋白胨水37℃培養(yǎng)答案：A5.按GB/T5750.122022，測(cè)定自來水菌落總數(shù)時(shí)，若1mL原水樣在營養(yǎng)瓊脂上生長出280CFU，而10?1稀釋度平皿生長出28CFU，則報(bào)告值為：A.280CFU/mLB.2.8×102CFU/mLC.3.0×102CFU/mLD.2.8×101CFU/mL答案：B6.沉降菌檢測(cè)中，若同一測(cè)點(diǎn)兩皿計(jì)數(shù)分別為12CFU與38CFU，其差異超過可接受范圍，應(yīng)優(yōu)先排查：A.培養(yǎng)基滅菌不徹底B.皿蓋未完全打開C.人員操作造成局部氣流擾動(dòng)D.培養(yǎng)箱溫度波動(dòng)答案：C7.對(duì)自來水進(jìn)行酶底物法測(cè)定總大腸菌群時(shí)，若100mL水樣加入MMOMUG試劑后，在36℃下24h內(nèi)無熒光，可初步結(jié)論為：A.未檢出總大腸菌群B.未檢出大腸埃希氏菌C.需延長培養(yǎng)至48hD.需驗(yàn)證試劑有效性答案：A8.沉降菌培養(yǎng)基若添加0.05%（w/v）Tween80，其主要作用是：A.中和殘留消毒劑B.促進(jìn)真菌生長C.降低表面張力，提高微粒捕獲率D.抑制革蘭陽性菌過度生長答案：C9.下列哪項(xiàng)不是自來水微生物指標(biāo)中的“指示菌”？A.菌落總數(shù)B.總大腸菌群C.大腸埃希氏菌D.銅綠假單胞菌答案：D10.潔凈室沉降菌測(cè)點(diǎn)布置時(shí)，對(duì)于面積30m2、單向流的工作臺(tái)，最少采樣點(diǎn)數(shù)為：A.2B.3C.4D.5答案：B11.若自來水樣經(jīng)濾膜法后，將濾膜貼于mFC瓊脂上，44.5℃培養(yǎng)24h后出現(xiàn)藍(lán)色菌落，其應(yīng)計(jì)數(shù)為：A.總大腸菌群B.耐熱大腸菌群C.大腸埃希氏菌D.糞鏈球菌答案：B12.沉降菌結(jié)果報(bào)告單位為CFU/（皿·30min），若需換算成CFU/m3，已知90mm皿采集效率為0.78，則換算公式為：A.CFU/m3=CFU/(0.78×0.063×0.5)B.CFU/m3=CFU×0.78×0.063×0.5C.CFU/m3=CFU/(0.78×0.063×30)D.CFU/m3=CFU×0.063×30/0.78答案：A13.某水廠出廠水菌落總數(shù)為80CFU/mL，經(jīng)城市管網(wǎng)輸送至用戶末端增至320CFU/mL，其增幅百分比為：A.75%B.200%C.300%D.400%答案：C14.采用酶底物法同時(shí)檢測(cè)總大腸菌群與大腸埃希氏菌時(shí)，若樣品產(chǎn)生黃色但無熒光，應(yīng)判斷為：A.總大腸菌群陽性、大腸埃希氏菌陰性B.總大腸菌群陰性、大腸埃希氏菌陽性C.兩者均陽性D.需做氧化酶試驗(yàn)確證答案：A15.沉降菌檢測(cè)中，若培養(yǎng)基pH降至5.0以下，最可能導(dǎo)致：A.細(xì)菌總數(shù)偏高B.真菌抑制C.革蘭陰性菌過度生長D.培養(yǎng)基顏色變深答案：B16.自來水微生物采樣瓶中加入硫代硫酸鈉的目的是：A.中和余氯B.提供還原環(huán)境C.抑制真菌D.促進(jìn)大腸菌群復(fù)蘇答案：A17.若潔凈室沉降菌連續(xù)三天結(jié)果分別為5、6、4CFU/皿，則其警戒限可設(shè)為：A.4CFU/皿B.6CFU/皿C.8CFU/皿D.10CFU/皿答案：C18.對(duì)沉降菌平皿進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)時(shí)，若兩皿菌落數(shù)分別為18與22，且均無蔓延，則平均值為：A.19CFUB.20CFUC.21CFUD.22CFU答案：B19.按《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB57492022），菌落總數(shù)限值為：A.50CFU/mLB.100CFU/mLC.150CFU/mLD.200CFU/mL答案：B20.沉降菌采樣時(shí)，若暴露時(shí)間延長至60min，則結(jié)果計(jì)算應(yīng)：A.直接按60min計(jì)數(shù)報(bào)告B.折算為30min等效值C.乘以2后報(bào)告D.無需折算答案：B21.自來水耐熱大腸菌群確證試驗(yàn)中，EC肉湯產(chǎn)氣且靛基質(zhì)陽性，則報(bào)告單位為：A.CFU/100mLB.MPN/100mLC.個(gè)/LD.CFU/mL答案：B22.沉降菌平皿若出現(xiàn)鏈狀菌落，計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)：A.按單菌落計(jì)B.按鏈段數(shù)計(jì)C.按可見單個(gè)菌落分別計(jì)D.按一條鏈計(jì)為1CFU答案：C23.若自來水樣經(jīng)0.45μm濾膜過濾后，將濾膜置于mHPC瓊脂，35℃培養(yǎng)48h，其目的是測(cè)定：A.菌落總數(shù)B.總大腸菌群C.大腸埃希氏菌D.耐熱大腸菌群答案：A24.沉降菌檢測(cè)中，若采樣點(diǎn)上方有高效送風(fēng)口，則采樣皿應(yīng)置于：A.送風(fēng)口正下方0.3mB.送風(fēng)口下方1.0mC.工作面高度任意位置D.回風(fēng)口附近答案：B25.自來水微生物采樣后，若4℃冷藏，最長允許保存時(shí)間為：A.2hB.6hC.12hD.24h答案：B26.沉降菌培養(yǎng)基若加入放線菌酮，其主要目的是：A.抑制真菌B.促進(jìn)細(xì)菌C.中和消毒劑D.提高pH答案：A27.若潔凈室沉降菌結(jié)果超過糾偏限，首先應(yīng)采取的措施是：A.重新校準(zhǔn)培養(yǎng)箱B.增加采樣點(diǎn)復(fù)測(cè)C.立即停產(chǎn)D.更換培養(yǎng)基品牌答案：B28.自來水樣經(jīng)MPN法測(cè)定總大腸菌群，若10mL、1mL、0.1mL三管陽性數(shù)分別為531，查MPN表得：A.110MPN/100mLB.150MPN/100mLC.170MPN/100mLD.190MPN/100mL答案：C29.沉降菌平皿若出現(xiàn)大量透明水滴狀菌落，氧化酶陰性，革蘭染色陰性短桿菌，最可能為：A.大腸埃希氏菌B.銅綠假單胞菌C.鮑曼不動(dòng)桿菌D.嗜麥芽窄食單胞菌答案：A30.按GMP要求，A級(jí)潔凈區(qū)沉降菌動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)限度為：A.<1CFU/皿B.≤1CFU/皿C.≤3CFU/皿D.≤5CFU/皿答案：B二、配伍選擇題（每題1分，共20分）3135題共用備選答案：A.硫代硫酸鈉B.磷酸鹽緩沖液C.放線菌酮D.Tween80E.檸檬酸鈉31.中和自來水余氯答案：A32.抑制真菌過度生長答案：C33.降低培養(yǎng)基表面張力答案：D34.調(diào)節(jié)水樣pH至中性答案：B35.防止金屬離子沉淀答案：E3640題共用備選答案：A.36±1℃，48hB.44.5±0.2℃，24hC.28±1℃，5dD.55±1℃，1hE.121℃，15min36.營養(yǎng)瓊脂測(cè)定菌落總數(shù)答案：A37.EC肉湯耐熱大腸菌群答案：B38.沉降菌培養(yǎng)基滅菌答案：E39.沙氏瓊脂測(cè)真菌答案：C40.培養(yǎng)基質(zhì)量穩(wěn)定性驗(yàn)證熱處理答案：D4145題共用備選答案：A.0.45μmB.0.22μmC.0.8μmD.1.2μmE.5.0μm41.大腸埃希氏菌濾膜法答案：A42.去除自來水顆粒雜質(zhì)預(yù)過濾答案：C43.無菌過濾除菌答案：B44.測(cè)定水中綠膿桿菌答案：A45.測(cè)定水中隱孢子蟲卵囊答案：D4650題共用備選答案：A.黃色但無熒光B.黃色且有熒光C.無黃色有熒光D.無黃色無熒光E.棕色渾濁46.總大腸菌群陽性、大腸埃希氏菌陰性答案：A47.兩者均陽性答案：B48.兩者均陰性答案：D49.試劑失效答案：E50.僅大腸埃希氏菌陽性答案：C三、填空題（每空1分，共20分）51.沉降菌采樣皿暴露后應(yīng)________蓋蓋，________倒置培養(yǎng)，以防止________。答案：立即、倒置、冷凝水滴落52.自來水菌落總數(shù)測(cè)定中，若所有稀釋度均無菌落，則報(bào)告為________CFU/mL。答案：<153.按GB57492022，生活飲用水中總大腸菌群不得檢出，即MPN/100mL應(yīng)________。答案：054.沉降菌結(jié)果換算為CFU/m3時(shí)，90mm皿采集面積約為________m2。答案：0.0063655.潔凈室沉降菌動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)應(yīng)在________狀態(tài)下進(jìn)行，即設(shè)備運(yùn)行、人員________。答案：動(dòng)態(tài)、正常操作56.自來水采樣瓶滅菌后，硫代硫酸鈉終濃度應(yīng)為________mg/L。答案：10057.酶底物法測(cè)定大腸埃希氏菌時(shí)，熒光底物為________。答案：MUG58.沉降菌培養(yǎng)基若需中和醛類消毒劑，可添加________。答案：甘氨酸59.耐熱大腸菌群在EC肉湯中產(chǎn)氣，且靛基質(zhì)試驗(yàn)陽性，可推斷為________。答案：大腸埃希氏菌60.自來水微生物采樣點(diǎn)應(yīng)選在________、________、________三個(gè)代表性位置。答案：出廠水、管網(wǎng)末梢、二次供水61.沉降菌平皿若出現(xiàn)________菌落，應(yīng)進(jìn)行革蘭染色與________試驗(yàn)以排除真菌。答案：大型、氧化酶62.濾膜法測(cè)菌落總數(shù)時(shí)，濾膜應(yīng)________面朝上貼于培養(yǎng)基。答案：菌63.沉降菌采樣時(shí)，距墻面最小距離為________m。答案：0.564.自來水菌落總數(shù)若超出標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)在________h內(nèi)復(fù)檢。答案：2465.沉降菌培養(yǎng)基若加入________，可抑制革蘭陽性菌，提高革蘭陰性菌回收率。答案：膽鹽66.按GMP，B級(jí)區(qū)沉降菌靜態(tài)限度為________CFU/皿。答案：567.自來水大腸菌群初發(fā)酵產(chǎn)氣量≥________mL視為陽性。答案：0.3368.沉降菌采樣皿運(yùn)輸時(shí)應(yīng)保持________℃，防止________。答案：28、細(xì)菌增殖69.酶底物法結(jié)果判讀應(yīng)在________nm紫外燈下觀察熒光。答案：36670.沉降菌結(jié)果若剛好為糾偏限，應(yīng)啟動(dòng)________調(diào)查。答案：偏差四、判斷題（每題1分，共10分）71.沉降菌采樣皿可在高效送風(fēng)口正下方0.2m處放置。答案：錯(cuò)誤72.自來水菌落總數(shù)測(cè)定中，若兩皿菌落數(shù)相差超過兩倍，應(yīng)重新檢測(cè)。答案：正確73.耐熱大腸菌群即糞大腸菌群。答案：正確74.沉降菌培養(yǎng)基pH高于7.5會(huì)抑制大多數(shù)細(xì)菌。答案：錯(cuò)誤75.自來水采樣瓶可經(jīng)121℃、30min高壓滅菌。答案：正確76.酶底物法可同時(shí)檢測(cè)總大腸菌群與大腸埃希氏菌，無需確證。答案：正確77.沉降菌結(jié)果超過糾偏限即視為產(chǎn)品不合格。答案：錯(cuò)誤78.濾膜法測(cè)菌落總數(shù)時(shí)，濾膜孔徑越小越好。答案：錯(cuò)誤79.沉降菌采樣時(shí)間延長至90min無需折算。答案：錯(cuò)誤80.自來水微生物指標(biāo)中，大腸埃希氏菌比總大腸菌群更具糞便污染指示意義。答案：正確五、簡答題（每題6分，共30分）81.簡述沉降菌采樣皿布置原則。答案：1.采樣點(diǎn)應(yīng)覆蓋關(guān)鍵操作區(qū)、人員活動(dòng)區(qū)、物料暴露區(qū)；2.距墻面≥0.5m，距高效送風(fēng)口≥1m；3.高度距工作面0.8~1.0m；4.避免氣流直接沖擊；5.每點(diǎn)雙皿平行；6.采樣點(diǎn)編號(hào)與平面圖對(duì)應(yīng)，便于追溯。82.自來水菌落總數(shù)測(cè)定中，如何消除余氯干擾？答案：1.采樣瓶預(yù)加硫代硫酸鈉，終濃度100mg/L；2.采樣后立即混勻，使余氯快速中和；3.若現(xiàn)場(chǎng)余氯>1mg/L，可加大硫代硫酸鈉量；4.采樣后4℃冷藏，6h內(nèi)檢測(cè)；5.對(duì)照試驗(yàn)驗(yàn)證中和效果。83.沉降菌結(jié)果出現(xiàn)“倒掛”現(xiàn)象（動(dòng)態(tài)低于靜態(tài)）的可能原因。答案：1.動(dòng)態(tài)采樣時(shí)人員活動(dòng)擾動(dòng)氣流，微粒被帶走；2.靜態(tài)采樣后未及時(shí)清理，培養(yǎng)基干裂；3.動(dòng)態(tài)采樣點(diǎn)布置偏離污染源；4.培養(yǎng)基批次差異；5.靜態(tài)采樣時(shí)空調(diào)系統(tǒng)剛停機(jī)，顆粒沉降增加；6.人員操作誤差，如皿蓋開啟角度不同。84.簡述酶底物法測(cè)定大腸埃希氏菌的質(zhì)量控制措施。答案：1.每批次試劑做空白與陽性對(duì)照；2.使用標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC25922驗(yàn)證黃色與熒光；3.紫外燈強(qiáng)度每年校準(zhǔn)；4.培養(yǎng)箱溫度36±1℃每日記錄；5.采樣瓶滅菌后做無菌驗(yàn)證；6.結(jié)果可疑時(shí)做濾膜法平行比對(duì)。85.自來水耐熱大腸菌群檢測(cè)中，如何避免“假陽性”產(chǎn)氣？答案：1.EC肉湯導(dǎo)管內(nèi)不得有氣泡；2.培養(yǎng)前倒置檢查，確保無漏氣；3.44.5±0.2℃水浴培養(yǎng)，溫度波動(dòng)<0.1℃；4.使用新鮮膽鹽，抑制非目標(biāo)菌；5.產(chǎn)氣量<0.33mL判陰性；6.陽性管轉(zhuǎn)種mFC確認(rèn)藍(lán)色菌落。六、綜合應(yīng)用題（每題10分，共30分）86.某制藥企業(yè)A級(jí)潔凈室面積20m2，單向流，日常沉降菌監(jiān)測(cè)用90mm營養(yǎng)瓊脂皿，暴露30min。連續(xù)5日結(jié)果（CFU/皿）為：0、1、0、2、1。(1)計(jì)算平均值與標(biāo)準(zhǔn)差；(2)若警戒限設(shè)為平均值+2SD，糾偏限設(shè)為平均值+3SD，求二者；(3)評(píng)估現(xiàn)行限度是否滿足GMP要求并提出改進(jìn)建議。答案：(1)平均值=0.8，SD=0.84；(2)警戒限=0.8+2×0.84=2.48≈2CFU/皿，糾偏限=0.8+3×0.84=3.32≈3CFU/皿；(3)GMP要求A級(jí)動(dòng)態(tài)≤1CFU/皿，現(xiàn)行數(shù)據(jù)最大值2CFU/皿已超標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)：a.增加采樣點(diǎn)密度至每2m2一點(diǎn)；b.調(diào)查人員操作與氣流模式；c.加強(qiáng)手套與表面消毒；d.考慮縮短暴露時(shí)間至15min，提高靈敏度。87.某市疾控中心對(duì)管網(wǎng)末梢水進(jìn)行微生物評(píng)價(jià)，采樣量100mL，采用濾膜法測(cè)菌落總數(shù)，0.45μm濾膜過濾后貼于mHPC瓊脂，35℃培養(yǎng)48h，兩皿菌落數(shù)分別為180、190CFU；同時(shí)用MPN法測(cè)總大腸菌群，10mL×5、1mL×5、0.1mL×5，陽性