第1頁(yè)（共1頁(yè)）2026年高考生物模擬試卷重點(diǎn)知識(shí)題型問(wèn)題與答案匯編——基因一．選擇題（共10小題）1．如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖．以下相關(guān)敘述，不正確的是（）A．①→②利用兩種不同限制酶處理，能避免含控蟲(chóng)基因的DNA片段自身環(huán)化 B．②→③可用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中 C．③→④用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，重組Ti質(zhì)粒整合到植物細(xì)胞的染色體上 D．④→⑤用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，具有抗蟲(chóng)性狀的植株產(chǎn)生了可遺傳變異2．綠葉海天牛（簡(jiǎn)稱(chēng)甲）吸食濱海無(wú)隔藻（簡(jiǎn)稱(chēng)乙）后，身體就逐漸變綠，這些“奪來(lái)”的葉綠體能夠在甲體內(nèi)長(zhǎng)期穩(wěn)定存在，有科學(xué)家推測(cè)其原因是在甲的染色體DNA上可能存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因。為證實(shí)上述推測(cè)，以這種變綠的甲為材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，方法和結(jié)果最能支持上述推測(cè)的是（）A．通過(guò)PCR技術(shù)從甲體內(nèi)的DNA中克隆出屬于乙的編碼葉綠體蛋白的核基因 B．通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNA C．給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性 D．用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶3．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是（）A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水 C．向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢瑁梢?jiàn)玻璃棒上有白色絮狀物 D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)4．采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?，培育出了轉(zhuǎn)基因羊。但是，人凝血因子只存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中。以下有關(guān)敘述，正確的是（）A．人體細(xì)胞中凝血因子基因編碼區(qū)的堿基對(duì)數(shù)目，等于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍 B．可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵 C．在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他體細(xì)胞中 D．人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后，DNA連接酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA5．抗蟲(chóng)和耐除草劑玉米雙抗12﹣5是我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù)，采用PCR方法進(jìn)行目的基因監(jiān)測(cè)，反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述正確的是（）A．預(yù)變性過(guò)程可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制 B．后延伸過(guò)程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分 C．延伸過(guò)程無(wú)需引物參與即可完成半保留復(fù)制 D．轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測(cè)含有目的基因后即可上市6．粗提取DNA時(shí)，向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過(guò)濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過(guò)濾，在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物的處理方式是（）A．加入適量的木瓜蛋白酶 B．37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘 C．加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精 D．加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0.14mol/L7．抗蟲(chóng)作物對(duì)害蟲(chóng)的生存產(chǎn)生壓力，會(huì)使害蟲(chóng)種群抗性基因頻率迅速提高，導(dǎo)致作物的抗蟲(chóng)效果逐漸減弱。為使轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉保持抗蟲(chóng)效果，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上會(huì)采取一系列措施。以下措施不能實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)的是（）A．在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子 B．大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉，并施用殺蟲(chóng)劑 C．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植 D．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉大田周?chē)O(shè)置常規(guī)棉隔離帶8．蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因之所以能在棉花的葉肉細(xì)胞中準(zhǔn)確地表達(dá)出來(lái)，主要是因?yàn)椋ǎ〢．目的基因能在植物細(xì)胞核中進(jìn)行復(fù)制 B．目的基因與棉花DNA的基本結(jié)構(gòu)相同 C．不同生物共用一套遺傳密碼 D．不同生物具有相同的一套遺傳信息9．生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常呈現(xiàn)“五顏六色”的變化。下列實(shí)驗(yàn)中溶液顏色變化的敘述正確的是（）A．在新鮮的梨汁中加入斐林試劑，混勻后在加熱條件下由無(wú)色變成磚紅色 B．在厭氧發(fā)酵的果汁中加入酸性重鉻酸鉀溶液，混勻后由藍(lán)色變成灰綠色 C．在DNA溶液中加入二苯胺試劑，混勻后在沸水浴條件下逐漸變成藍(lán)色 D．在氨基酸溶液中加入雙縮脲試劑，混勻后逐漸變成紫色10．MyoD是成肌細(xì)胞分化為骨骼肌細(xì)胞過(guò)程中的一種關(guān)鍵蛋白．將MyoD基因轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞中表達(dá)，成纖維細(xì)胞就能表現(xiàn)出骨骼肌細(xì)胞的特征．下列說(shuō)法正確的是（）A．可用Ca2+處理成纖維細(xì)胞使其成為感受態(tài) B．MyoD基因只存在于骨骼肌細(xì)胞中 C．骨骼肌細(xì)胞只表達(dá)MyoD的基因 D．MyoD基因在正常成纖維細(xì)胞中不表達(dá)二．多選題（共5小題）（多選）11．如下表為幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，由此推斷，下列說(shuō)法正確的是（）限制酶名稱(chēng)識(shí)別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱(chēng)識(shí)別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠ5'﹣G↓GATCC﹣3'KpnⅠ5'﹣CGTAC↓C﹣3'EcoRⅠ5'﹣C↓AATTC﹣3'Sau3AⅠ5'﹣↓GATC﹣3'HindⅡ5'﹣GTY↓RAC﹣3'SmaⅠ5'﹣CCC↓GGG﹣3'注：Y為C或T，R為A或G。A．HindⅡ能識(shí)別GTCAAC序列，也能識(shí)別GTTAAC序列 B．Sau3AⅠ和EcoRI破壞的都是識(shí)別序列中心軸線(xiàn)處的磷酸二酯鍵 C．BamHⅠ和KpnⅠ兩種限制酶可識(shí)別相同的序列但切割后形成不同的黏性末端 D．HindⅡ、SmaⅠ兩種限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列中心軸線(xiàn)上，因而形成平末端（多選）12．如圖1表示DNA的基本結(jié)構(gòu)，圖2表示染色體DNA的片段，箭頭是某種限制酶的識(shí)別序列和作用位點(diǎn)，下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．圖1中a所示部位即圖2中箭頭所示部位 B．圖2所示的DNA片段被限制酶切割后獲得的末端形式與圖1下端不同 C．DNA水解酶也作用在a處 D．基因工程的載體必須具有圖2所示的堿基序列（多選）13．PCR技術(shù)可用于遺傳多樣性的研究。如圖是對(duì)跳蟲(chóng)A和跳蟲(chóng)B的DNA分析實(shí)驗(yàn)過(guò)程，有關(guān)敘述正確的是（）A．蛋白酶可以分解組織中的蛋白質(zhì)，在提取DNA時(shí)，加入蛋白酶有助于釋放出DNA B．TaqDNA聚合酶能夠耐高溫，常在PCR中用于DNA鏈的解旋 C．將已知長(zhǎng)度的DNA片段裝到凝膠上作參照，可用于估測(cè)樣本DNA片段的大小 D．陰性對(duì)照是未加DNA模板但加入了PCR擴(kuò)增過(guò)程所需的其他混合物，以檢測(cè)是否有“污染”（多選）14．基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入到染色體DNA特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部特定片段，是一種對(duì)生物體基因組特定目標(biāo)基因進(jìn)行修飾的技術(shù)。如圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行基因編輯的過(guò)程，該過(guò)程中用SgRNA指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．SgRNA的全部堿基序列與靶基因序列完全互補(bǔ) B．核酸內(nèi)切酶Cas9可斷裂核苷酸之間的磷酸二酯鍵 C．根據(jù)上述處理前后生物體的功能變化，可推測(cè)B基因的功能 D．使用該項(xiàng)基因編輯技術(shù)來(lái)預(yù)防人的某些疾病時(shí)可以無(wú)需審批（多選）15．已知B基因存在于水稻基因組中。其僅在體細(xì)胞和精子中正常表達(dá)。在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。研究人員將B基因編碼蛋白的序列與Luc基因（表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）連接成融合基因（表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能），然后構(gòu)建重組表達(dá)載體導(dǎo)入到水稻愈傷組織中，示意圖如圖所示。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．B﹣Luc融合基因的形成需要DNA連接酶的催化 B．構(gòu)建B基因編碼蛋白的cDNA文庫(kù)，只能從水稻體細(xì)胞中提取全部RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄操作 C．B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，據(jù)圖推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中該基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄 D．將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交實(shí)驗(yàn)可對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行鑒定篩選三．解答題（共5小題）16．科學(xué)家嘗試使用Cre/loxP位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)，在檢測(cè)目的基因?qū)氤晒?，刪除轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞內(nèi)的抗除草劑基因．其技術(shù)過(guò)程如下（圖中的■代表基因前的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是基因（gene）的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度．啟動(dòng)子就像“開(kāi)關(guān)”，決定基因的活動(dòng)．），據(jù)圖1回答：（1）loxP是一種只有34個(gè)堿基對(duì)構(gòu)成的小型DNA片段，是有兩個(gè)13個(gè)堿基對(duì)反向重復(fù)序列和中間間隔的8個(gè)堿基對(duì)序列共同組成，自身不會(huì)表達(dá)，插入質(zhì)粒后也不影響原有基因的表達(dá)，其堿基序列如下：Cre酶能特異性地識(shí)別此序列并在箭頭處切開(kāi)loxP，其功能類(lèi)似于基因工程中的酶．從遺傳學(xué)角度分析，Cre酶改變質(zhì)粒產(chǎn)生的結(jié)果相當(dāng)于可遺傳變異中的．（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到植物細(xì)胞后，通過(guò)和兩個(gè)過(guò)程可以形成完整的植株．作為標(biāo)記基因，抗除草劑基因用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入成功的原理是．（3）經(jīng)檢測(cè)成功后，抗除草劑基因已沒(méi)有用途，繼續(xù)留在植物體內(nèi)可能會(huì)造成的安全問(wèn)題是．經(jīng)Cre酶處理后，質(zhì)粒中的兩個(gè)loxP序列分別被切開(kāi)后，可得到如上圖右側(cè)的這兩個(gè)DNA分子．由于_的原因，抗除草劑基因不再表達(dá)，之后會(huì)在培養(yǎng)過(guò)程中消失．（4）loxP序列是有方向性的．如果經(jīng)Cre酶處理后，發(fā)現(xiàn)抗除草劑基因反向連接在質(zhì)粒一上，則原來(lái)質(zhì)粒一中這兩個(gè)loxP序列的方向是．A．兩個(gè)都是正向B．兩個(gè)都是反向C．一個(gè)正向一個(gè)反向D．與方向無(wú)關(guān)．17．天然β淀粉酶大多耐熱性差，不利于工業(yè)化應(yīng)用。我國(guó)學(xué)者借助PCR改造β﹣淀粉酶基因，并將改造的基因與pLN23質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌，最終獲得耐高溫的β﹣淀粉酶?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）上述過(guò)程屬于工程。（2）PCR中使用的聚合酶屬于（填寫(xiě)編號(hào)）。①以DNA為模板的RNA聚合酶②以RNA為模板的RNA聚合酶③以DNA為模板的DNA聚合酶④以RNA為模板的DNA聚合酶（3）某天然β﹣淀粉酶由484個(gè)氨基酸構(gòu)成，研究發(fā)現(xiàn)，將該酶第476位天冬氨酸替換為天冬酰胺，耐熱性明顯提升。在圖1所示的β﹣淀粉酶基因改造方案中，含已替換堿基的引物是（填寫(xiě)編號(hào)）。（4）為了使上述改造后的基因能在大腸桿菌中高效表達(dá)，由圖2所示的pLN23質(zhì)粒構(gòu)建得到基因表達(dá)載體。除圖示信息外，基因表達(dá)載體中還應(yīng)該有目的基因（即改造后的基因）和。（5）目的基因（不含EcoRⅠ酶切位點(diǎn)）全長(zhǎng)為1.5kb，將其插入BamHⅠ位點(diǎn)。用EcoRⅠ酶切來(lái)自于不同大腸桿菌菌落的質(zhì)粒DNA，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳確定DNA片段長(zhǎng)度，這一操作的目的是。正確連接的基因表達(dá)載體被EcoRⅠ酶切后長(zhǎng)度為kb。（6）采用PCR還能在分子水平上確定目的基因是否轉(zhuǎn)錄，根據(jù)中心法則，可通過(guò)反應(yīng)獲得PCR的模板。18．將天然Ti質(zhì)粒改造成含有Vir基因的輔助質(zhì)粒（輔助T﹣DNA轉(zhuǎn)移）和不含有Vir基因、含有T﹣DNA的穿梭質(zhì)粒，共同轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，可提高轉(zhuǎn)化效率。細(xì)菌和棉花對(duì)密碼子偏好不同，為提高翻譯效率，增強(qiáng)棉花抗病蟲(chóng)害能力，進(jìn)行如下操作?；卮鹣铝袉?wèn)題。注：F1﹣F3，R1﹣R3表示引物；T﹣DNA﹣LB表示左邊界；T﹣DNA﹣RB表示右邊界；Ori表示復(fù)制原點(diǎn)；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。（1）從蘇云金桿菌提取DNA時(shí)，需加入蛋白酶，其作用是。提取過(guò)程中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精，其目的是。（2）本操作中獲取目的基因的方法是和。（3）穿梭質(zhì)粒中p35s為啟動(dòng)子，其作用是，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄；插入兩個(gè)p35s啟動(dòng)子，其目的可能是。（4）根據(jù)圖中穿梭質(zhì)粒上的KanR和HygBR兩個(gè)標(biāo)記基因的位置，用基因?qū)?yīng)的抗生素初步篩選轉(zhuǎn)化的棉花愈傷組織。（5）為檢測(cè)棉花植株是否導(dǎo)入目的基因，提取棉花植株染色體DNA作模板，進(jìn)行PCR，應(yīng)選用的引物是和。（6）本研究采用的部分生物技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，理由是（單選）。A.通過(guò)含有雙質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞B.將蘇云金桿菌Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中表達(dá)C.將1﹣1362基因序列改變?yōu)槊藁?xì)胞偏好密碼子的基因序列D.用1﹣1362合成基因序列和1363﹣1848天然基因序列獲得改造的抗蟲(chóng)蛋白19．回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞和表達(dá)的問(wèn)題．如圖表示利用致病病毒M的表面蛋白基因和無(wú)害病毒N，通過(guò)基因工程制作重組M病毒疫苗的部分過(guò)程．其中①～⑤表示操作流程，a～h表示分子或結(jié)構(gòu)．據(jù)圖回答問(wèn)題．（1）基因工程除了微生物基因工程外，還有．在圖所示過(guò)程中，獲取目的基因的步驟是流程（用圖中編號(hào)回答）；在流程③中必須實(shí)施的步驟有．（2）在圖所示的整個(gè)過(guò)程中，用作運(yùn)載體的DNA來(lái)自分子（用圖中字母回答）．（3）下列關(guān)于質(zhì)粒運(yùn)載體的說(shuō)法正確的是（多選）．A．使用質(zhì)粒運(yùn)載體是為了避免目的基因被分解B．質(zhì)粒運(yùn)載體只能在與目的基因重組后進(jìn)入細(xì)胞C．質(zhì)粒運(yùn)載體可能是從細(xì)菌或者病毒的DNA改造的D．質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)也遵循中心法則E．質(zhì)粒運(yùn)載體只有把目的基因整合到受體細(xì)胞的DNA中才能表達(dá)F．沒(méi)有限制酶就無(wú)法使用質(zhì)粒運(yùn)載體（4）據(jù)圖比較結(jié)構(gòu)g和結(jié)構(gòu)h的異同，并解釋產(chǎn)生差異的原因．20．科學(xué)家將人的生長(zhǎng)素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。過(guò)程如圖1據(jù)圖回答：（1）過(guò)程①表示的是采取的方法來(lái)獲取目的基因。其過(guò)程可表示為：目的基因→轉(zhuǎn)錄mRNA→逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA→（2）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是。（3）圖中（3）過(guò)程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。一般將受體大腸桿菌用處理，使細(xì)胞處于能吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞，再將表達(dá)載體溶于緩沖液中與這種細(xì)胞混合，在一定的溫度下完成轉(zhuǎn)化。（4）檢測(cè)大腸桿菌B是否導(dǎo)入了質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒，可采用的方法是。（5）蛋白質(zhì)工程中，直接需要進(jìn)行操作的對(duì)象是。A．氨基酸結(jié)構(gòu)B．蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)C．肽鏈結(jié)構(gòu)D．基因結(jié)構(gòu)為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開(kāi)發(fā)利用備受關(guān)注。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。（6）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性?xún)?nèi)切酶作用于圖2中的處（填“a”或“b”）。（7）將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和法。（8）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。（9）下列屬于PCR技術(shù)的條件的是。①單鏈的脫氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脫氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA連接酶⑥D(zhuǎn)NA聚合酶⑦DNA限制性?xún)?nèi)切酶A．①②③⑤B．①②③⑤⑦C．①②③⑥D(zhuǎn)．①②④⑤⑦

2026年高考生物模擬試卷重點(diǎn)知識(shí)題型問(wèn)題與答案匯編——一．選擇題（共10小題）題號(hào)12345678910答案CDCBBABCCD二．多選題（共5小題）題號(hào)1112131415答案ADABCACDADAC一．選擇題（共10小題）1．如圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖．以下相關(guān)敘述，不正確的是（）A．①→②利用兩種不同限制酶處理，能避免含控蟲(chóng)基因的DNA片段自身環(huán)化 B．②→③可用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中 C．③→④用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，重組Ti質(zhì)粒整合到植物細(xì)胞的染色體上 D．④→⑤用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，具有抗蟲(chóng)性狀的植株產(chǎn)生了可遺傳變異【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【專(zhuān)題】模式圖；基因工程．【答案】C【分析】分析題圖：圖示是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖，其中①為質(zhì)粒，作為運(yùn)載體；②為重組質(zhì)粒；③為含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌；④為含有目的基因的植物細(xì)胞；⑤為轉(zhuǎn)基因植株．【解答】解：A、①→②利用兩種不同限制酶處理，能避免含控蟲(chóng)基因的DNA片段自身環(huán)化，A正確；B、②→③可用氯化鈣處理農(nóng)桿菌，使之成為易于吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的感受態(tài)，這樣有助于促進(jìn)重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到農(nóng)桿菌細(xì)胞中，B正確；C、③→④用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，重組Ti質(zhì)粒的T﹣DNA片段整合到植物細(xì)胞的染色體上，C錯(cuò)誤；D、④→⑤用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，具有抗蟲(chóng)性狀的植株產(chǎn)生了可遺傳變異，D正確。故選：C。【點(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的工作原理和操作步驟等方面的知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的工具酶；能夠區(qū)分識(shí)記DNA連接酶和DNA聚合酶；識(shí)記目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需要檢測(cè)與鑒定．2．綠葉海天牛（簡(jiǎn)稱(chēng)甲）吸食濱海無(wú)隔藻（簡(jiǎn)稱(chēng)乙）后，身體就逐漸變綠，這些“奪來(lái)”的葉綠體能夠在甲體內(nèi)長(zhǎng)期穩(wěn)定存在，有科學(xué)家推測(cè)其原因是在甲的染色體DNA上可能存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因。為證實(shí)上述推測(cè)，以這種變綠的甲為材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，方法和結(jié)果最能支持上述推測(cè)的是（）A．通過(guò)PCR技術(shù)從甲體內(nèi)的DNA中克隆出屬于乙的編碼葉綠體蛋白的核基因 B．通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNA C．給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性 D．用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用；基因工程的操作過(guò)程綜合．【專(zhuān)題】正推法；基因工程．【答案】D【分析】目的基因的檢測(cè)與鑒定：1、分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)．2、個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．【解答】解：A、通過(guò)PCR技術(shù)從甲體內(nèi)的DNA中克隆出屬于乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，這只能說(shuō)明甲體內(nèi)含有乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，但不能說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，A錯(cuò)誤；B、通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNA，這只能說(shuō)明甲體內(nèi)含有乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，但不能說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，B錯(cuò)誤；C、給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性，這說(shuō)明甲中含有葉綠體，但不能說(shuō)明的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，C錯(cuò)誤；D、用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶，這說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，D正確。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟中，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)較多，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．3．下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述，錯(cuò)誤的是（）A．酵母和菜花均可作為提取DNA的材料 B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水 C．向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?，可?jiàn)玻璃棒上有白色絮狀物 D．DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)【考點(diǎn)】DNA的粗提取與鑒定．【答案】C【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性．2、DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色．【解答】解：A、理論上只要含有DNA的生物組織均可作為該實(shí)驗(yàn)的材料，因此酵母和菜花均可作為提取DNA的材料，故A選項(xiàng)正確；B、DNA既可溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水，故B選項(xiàng)正確；C、向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢瑁墒蛊屏鸭?xì)胞，釋放DNA，但不會(huì)觀察到玻璃棒上有白色絮狀物，故C選項(xiàng)錯(cuò)誤；D、DNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)，故D選項(xiàng)正確。故選：C。【點(diǎn)評(píng)】本題考查DNA的粗提取和鑒定，對(duì)于此類(lèi)試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)選擇的材料、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累．4．采用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫?，培育出了轉(zhuǎn)基因羊。但是，人凝血因子只存在于該轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中。以下有關(guān)敘述，正確的是（）A．人體細(xì)胞中凝血因子基因編碼區(qū)的堿基對(duì)數(shù)目，等于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍 B．可用顯微注射技術(shù)將含有人凝血因子基因的重組DNA分子導(dǎo)入羊的受精卵 C．在該轉(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺細(xì)胞，而不存在于其他體細(xì)胞中 D．人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后，DNA連接酶以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA【考點(diǎn)】將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞．【答案】B【分析】此題考查的是基因工程的應(yīng)用實(shí)例，我們從基因的特點(diǎn)，基因的表達(dá)以及基因工程的方法開(kāi)始考慮這道題?！窘獯稹拷猓篈、人體細(xì)胞中凝血因子基因?qū)儆谡婧松锏幕?，其編碼區(qū)是不連續(xù)的，包括了外顯子和內(nèi)含子，故其編碼區(qū)的堿基對(duì)數(shù)目大于凝血因子氨基酸數(shù)目的3倍，A錯(cuò)；B、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常采用顯微注射的方法，B正確；C、用基因工程技術(shù)將人凝血因子基因?qū)肷窖蚴芫阉栽谵D(zhuǎn)基因羊中，人凝血因子基因存在與所有的體細(xì)胞中，C錯(cuò)；D、人凝血因子基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄后，是RNA聚合酶，不是DNA連接酶，以DNA分子的一條鏈為模板合成mRNA，D錯(cuò)。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】我們要儲(chǔ)備好這道題目的信息，基因工程是高考的熱點(diǎn)，涉及的知識(shí)廣，本題考查的重點(diǎn)是基因的結(jié)構(gòu)和功能和基因工程的方法步驟。5．抗蟲(chóng)和耐除草劑玉米雙抗12﹣5是我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù)，采用PCR方法進(jìn)行目的基因監(jiān)測(cè)，反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述正確的是（）A．預(yù)變性過(guò)程可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制 B．后延伸過(guò)程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分 C．延伸過(guò)程無(wú)需引物參與即可完成半保留復(fù)制 D．轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測(cè)含有目的基因后即可上市【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；轉(zhuǎn)基因食品的安全性．【專(zhuān)題】坐標(biāo)曲線(xiàn)圖；基因工程；生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題．【答案】B【分析】PCR技術(shù)：1、概念：PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。2、原理：DNA復(fù)制。3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。5、過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！窘獯稹拷猓篈、預(yù)變性過(guò)程可促進(jìn)模板DNA解旋，沒(méi)有促進(jìn)復(fù)制，A錯(cuò)誤；B、后延伸過(guò)程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分，B正確；C、延伸過(guò)程仍需引物參與才能完成半保留復(fù)制，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測(cè)含有目的基因并能穩(wěn)定表達(dá)，且有生物活性后才能上市，D錯(cuò)誤。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記PCR技術(shù)的概念、原理、條件、過(guò)程等基礎(chǔ)知識(shí)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。6．粗提取DNA時(shí)，向雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水并攪拌，過(guò)濾后所得濾液進(jìn)行下列處理后再進(jìn)行過(guò)濾，在得到的濾液中加入特定試劑后容易提取出DNA相對(duì)含量較高的白色絲狀物的處理方式是（）A．加入適量的木瓜蛋白酶 B．37～40℃的水浴箱中保溫10～15分鐘 C．加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精 D．加入NaCl調(diào)節(jié)濃度至2mol/L→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0.14mol/L【考點(diǎn)】DNA的粗提取與鑒定．【專(zhuān)題】實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)步驟；從生物材料提取特定成分．【答案】A【分析】DNA粗提取和鑒定的過(guò)程：（1）實(shí)驗(yàn)材料的選?。悍彩呛蠨NA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對(duì)較高的生物組織，成功的可能性更大。（2）破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液：動(dòng)物細(xì)胞的破碎比較容易，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過(guò)濾后收集濾液即可。如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞，需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時(shí)，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分的攪拌和研磨，過(guò)濾后收集研磨液。（3）去除濾液中的雜質(zhì)：方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質(zhì)，不分解DNA；方案三的原理是蛋白質(zhì)和DNA的變性溫度不同。（4）DNA的析出與鑒定①將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會(huì)出現(xiàn)白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。②取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑。混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)?！窘獯稹拷猓篈、利用木瓜蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，提取雜質(zhì)較少的DNA，A正確；B、DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同，將濾液放在60～75℃的恒溫水浴箱中保溫10～15min能去除濾液中的雜質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、加入與濾液體積相等的、體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精是析出DNA，C錯(cuò)誤；D、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，通過(guò)控制NaCl的濃度去除雜質(zhì)，加入2mol/LNaCl溶液→過(guò)濾→調(diào)節(jié)濾液中NaCl濃度至0.14mol/L→過(guò)濾→絲狀物再溶解在2mol/LNaCl溶液，D錯(cuò)誤。故選：A。【點(diǎn)評(píng)】本題考查DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)，對(duì)于此類(lèi)試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意積累。7．抗蟲(chóng)作物對(duì)害蟲(chóng)的生存產(chǎn)生壓力，會(huì)使害蟲(chóng)種群抗性基因頻率迅速提高，導(dǎo)致作物的抗蟲(chóng)效果逐漸減弱。為使轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉保持抗蟲(chóng)效果，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上會(huì)采取一系列措施。以下措施不能實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)的是（）A．在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子 B．大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉，并施用殺蟲(chóng)劑 C．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植 D．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉大田周?chē)O(shè)置常規(guī)棉隔離帶【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．【答案】B【分析】轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的利弊，正確的做法應(yīng)該是趨利避害，不能因噎廢食。【解答】解：A、在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉種子中混入少量常規(guī)種子，則常規(guī)種子長(zhǎng)成的普通植株能為敏感性（不抗蟲(chóng)）個(gè)體提供生存空間，增加與抗蟲(chóng)個(gè)體的競(jìng)爭(zhēng)，避免抗性基因頻率升高過(guò)快，提高了抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，A正確；B、大面積種植轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉、施用殺蟲(chóng)劑，都會(huì)進(jìn)一步選擇并保存抗性強(qiáng)的個(gè)體，導(dǎo)致敏感性個(gè)體死亡，從而加快害蟲(chóng)種群抗性基因頻率提高，不利于抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，B錯(cuò)誤；CD、將轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉與小面積的常規(guī)棉間隔種植以及轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉大田周?chē)O(shè)置常規(guī)棉隔離帶，作用機(jī)理相似：可以使敏感型個(gè)體存活，敏感性個(gè)體能與抗性強(qiáng)的棉鈴蟲(chóng)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，不會(huì)導(dǎo)致抗性基因頻率升高過(guò)快，提高了抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)持久性，CD正確。故選：B?！军c(diǎn)評(píng)】本題主要以抗蟲(chóng)棉抗蟲(chóng)效果的保持為情境，考查轉(zhuǎn)基因作物的安全性問(wèn)題，要求考生明確相關(guān)內(nèi)容，能結(jié)合題意分析作答。8．蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因之所以能在棉花的葉肉細(xì)胞中準(zhǔn)確地表達(dá)出來(lái)，主要是因?yàn)椋ǎ〢．目的基因能在植物細(xì)胞核中進(jìn)行復(fù)制 B．目的基因與棉花DNA的基本結(jié)構(gòu)相同 C．不同生物共用一套遺傳密碼 D．不同生物具有相同的一套遺傳信息【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【答案】C【分析】基因工程是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。一種生物的基因能與另一種生物的DNA形成重組DNA分子，是因?yàn)椴煌锏腄NA結(jié)構(gòu)相同。一種生物的基因能在另一種生物細(xì)胞中表達(dá)，是因?yàn)樗猩锕灿靡惶走z傳密碼?！窘獯稹拷猓篈、目的基因能在植物細(xì)胞核中進(jìn)行復(fù)制，這不是抗蟲(chóng)基因在葉肉細(xì)胞中表達(dá)的原因，A錯(cuò)誤；B、目的基因與棉花DNA的基本結(jié)構(gòu)相同，所以目的基因能與受體細(xì)胞的DNA形成重組DNA，但這不是抗蟲(chóng)基因在葉肉細(xì)胞中表達(dá)的原因，B錯(cuò)誤；C、因?yàn)樗猩锕灿靡惶走z傳密碼，所以抗蟲(chóng)基因能在棉花的葉肉細(xì)胞中準(zhǔn)確地表達(dá)出來(lái)，C正確；D、不同生物的遺傳信息不同，D錯(cuò)誤。故選：C。【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的相關(guān)知識(shí)，明確不同生物的遺傳信息不同，但基因結(jié)構(gòu)相同，且共用一套遺傳密碼子，所以一種生物的基因能與另一種生物的基因重組，且能在另一種生物體內(nèi)表達(dá)。9．生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常呈現(xiàn)“五顏六色”的變化。下列實(shí)驗(yàn)中溶液顏色變化的敘述正確的是（）A．在新鮮的梨汁中加入斐林試劑，混勻后在加熱條件下由無(wú)色變成磚紅色 B．在厭氧發(fā)酵的果汁中加入酸性重鉻酸鉀溶液，混勻后由藍(lán)色變成灰綠色 C．在DNA溶液中加入二苯胺試劑，混勻后在沸水浴條件下逐漸變成藍(lán)色 D．在氨基酸溶液中加入雙縮脲試劑，混勻后逐漸變成紫色【考點(diǎn)】DNA的粗提取與鑒定；糖類(lèi)的檢測(cè)；蛋白質(zhì)的檢測(cè)；探究酵母菌的呼吸方式．【專(zhuān)題】實(shí)驗(yàn)原理；蛋白質(zhì)核酸的結(jié)構(gòu)與功能；糖類(lèi)脂質(zhì)的種類(lèi)和作用．【答案】C【分析】1、還原糖與斐林試劑在水浴加熱的條件下產(chǎn)生磚紅色沉淀。2、酸性重鉻酸鉀溶液呈橙色，遇酒精變成灰綠色。3、蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。【解答】解：A、在新鮮的梨汁中加入斐林試劑，混勻后在加熱條件下由藍(lán)色變成磚紅色，A錯(cuò)誤；B、厭氧發(fā)酵的果汁中加入酸性重鉻酸鉀溶液，混勻后由橙色變成灰綠色，B錯(cuò)誤；C、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，C正確；D、蛋白質(zhì)溶液中加入雙縮脲試劑，混勻后逐漸變成紫色，D錯(cuò)誤。故選：C。【點(diǎn)評(píng)】本題考查了還原性糖和蛋白質(zhì)的鑒定、DNA的提取與分離的相關(guān)實(shí)驗(yàn)的知識(shí)，意在考查考生了解有機(jī)物的顏色反應(yīng)，難度不大。10．MyoD是成肌細(xì)胞分化為骨骼肌細(xì)胞過(guò)程中的一種關(guān)鍵蛋白．將MyoD基因轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的成纖維細(xì)胞中表達(dá)，成纖維細(xì)胞就能表現(xiàn)出骨骼肌細(xì)胞的特征．下列說(shuō)法正確的是（）A．可用Ca2+處理成纖維細(xì)胞使其成為感受態(tài) B．MyoD基因只存在于骨骼肌細(xì)胞中 C．骨骼肌細(xì)胞只表達(dá)MyoD的基因 D．MyoD基因在正常成纖維細(xì)胞中不表達(dá)【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【答案】D【分析】將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)．此方法的受體細(xì)胞多是受精卵．將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程．人體細(xì)胞都是由同一個(gè)受精卵有絲分裂而來(lái)，因此正常情況下，體細(xì)胞中的基因相同；而不同的細(xì)胞中基因進(jìn)行選擇性表達(dá)，從而導(dǎo)致細(xì)胞分化．【解答】解：A、一般將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞時(shí)利用鈣離子轉(zhuǎn)化法，而動(dòng)物細(xì)胞一般使用顯微注射法，A錯(cuò)誤；B、人體細(xì)胞都是由同一個(gè)受精卵有絲分裂而來(lái)，成肌細(xì)胞和骨骼肌細(xì)胞的基因相同，即其他體細(xì)胞均含有MyoD基因，B錯(cuò)誤；C、MyoD的基因在骨骼肌細(xì)胞中選擇性表達(dá)，但是骨骼肌細(xì)胞還表達(dá)很多其他基因，如呼吸酶基因，C錯(cuò)誤；D、由于MyoD的基因在骨骼肌細(xì)胞中選擇性表達(dá)，在正常成纖維細(xì)胞中不表達(dá)，D正確。故選：D?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的操作步驟和細(xì)胞分化的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記并區(qū)分不同細(xì)胞導(dǎo)入目的基因的方法；掌握細(xì)胞分化的原因，難度適中．二．多選題（共5小題）（多選）11．如下表為幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，由此推斷，下列說(shuō)法正確的是（）限制酶名稱(chēng)識(shí)別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱(chēng)識(shí)別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠ5'﹣G↓GATCC﹣3'KpnⅠ5'﹣CGTAC↓C﹣3'EcoRⅠ5'﹣C↓AATTC﹣3'Sau3AⅠ5'﹣↓GATC﹣3'HindⅡ5'﹣GTY↓RAC﹣3'SmaⅠ5'﹣CCC↓GGG﹣3'注：Y為C或T，R為A或G。A．HindⅡ能識(shí)別GTCAAC序列，也能識(shí)別GTTAAC序列 B．Sau3AⅠ和EcoRI破壞的都是識(shí)別序列中心軸線(xiàn)處的磷酸二酯鍵 C．BamHⅠ和KpnⅠ兩種限制酶可識(shí)別相同的序列但切割后形成不同的黏性末端 D．HindⅡ、SmaⅠ兩種限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列中心軸線(xiàn)上，因而形成平末端【考點(diǎn)】限制性?xún)?nèi)切核酸酶．【專(zhuān)題】數(shù)據(jù)表格；基因工程．【答案】AD【分析】限制酶能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端?！窘獯稹拷猓篈、當(dāng)Y為C，R為A時(shí)，HindII的識(shí)別序列為GTCAAC序列，當(dāng)Y為T(mén)，R為A時(shí)，識(shí)別序列為GTTAAC序列，A正確；B、Sau3AI識(shí)別序列為5'﹣↓GATC﹣3'，切割后形成的末端為黏性末端GATC﹣3'，破壞的是識(shí)別序列中心軸線(xiàn)兩側(cè)的磷酸二酯鍵，B錯(cuò)誤；C、BamHⅠ和KpnⅠ兩種限制酶識(shí)別序列不同，但切割后可形成相同的黏性末端GATC﹣3'，C錯(cuò)誤；D、由表格可知，HindⅡ、SmaⅠ兩種限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列中心軸線(xiàn)上，因而形成平末端，D正確。故選：AD?！军c(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合表格，考查限制酶的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記限制酶的作用及特點(diǎn)，能正確分析表格，從中提取有效信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。（多選）12．如圖1表示DNA的基本結(jié)構(gòu)，圖2表示染色體DNA的片段，箭頭是某種限制酶的識(shí)別序列和作用位點(diǎn)，下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．圖1中a所示部位即圖2中箭頭所示部位 B．圖2所示的DNA片段被限制酶切割后獲得的末端形式與圖1下端不同 C．DNA水解酶也作用在a處 D．基因工程的載體必須具有圖2所示的堿基序列【考點(diǎn)】限制性?xún)?nèi)切核酸酶；DNA的結(jié)構(gòu)層次及特點(diǎn)．【專(zhuān)題】模式圖；DNA分子結(jié)構(gòu)和復(fù)制；基因工程．【答案】ABC【分析】DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。E?coliDNA連接酶只能縫合黏性末端；T4DNA連接酶黏性末端與平末端都可以縫合，但連接平末端時(shí)的效率比較低。圖1片段為平末端，圖2被限制酶切割后形成的是黏性末端?！窘獯稹拷猓篈、圖2中箭頭所示部位為脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，圖1中a所示部位也是脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，A正確；B、圖2所示的DNA片段被限制酶切割后獲得的末端為黏性末端，圖1下端為平末端，故圖2所示的DNA片段被限制酶切割后獲得的末端形式與圖1下端不同，B正確；C、DNA水解酶也作用在a處，即脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，C正確；D、基因工程的載體必須具有限制酶的切割位點(diǎn)，但不一定具有圖2所示的堿基序列，D錯(cuò)誤。故選：ABC?！军c(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作工具的特點(diǎn)及作用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。（多選）13．PCR技術(shù)可用于遺傳多樣性的研究。如圖是對(duì)跳蟲(chóng)A和跳蟲(chóng)B的DNA分析實(shí)驗(yàn)過(guò)程，有關(guān)敘述正確的是（）A．蛋白酶可以分解組織中的蛋白質(zhì)，在提取DNA時(shí)，加入蛋白酶有助于釋放出DNA B．TaqDNA聚合酶能夠耐高溫，常在PCR中用于DNA鏈的解旋 C．將已知長(zhǎng)度的DNA片段裝到凝膠上作參照，可用于估測(cè)樣本DNA片段的大小 D．陰性對(duì)照是未加DNA模板但加入了PCR擴(kuò)增過(guò)程所需的其他混合物，以檢測(cè)是否有“污染”【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．【專(zhuān)題】PCR技術(shù)．【答案】ACD【分析】PCR技術(shù)：①概念：PCR全稱(chēng)為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；②原理：DNA復(fù)制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指數(shù)的方式擴(kuò)增，即約2n；⑤過(guò)程：高溫變性、低溫復(fù)性、中溫延伸。【解答】解：A、蛋白酶可以分解組織中的蛋白質(zhì)，在提取DNA時(shí)加入蛋白酶有助于釋放出DNA，A正確；B、PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)；Taq酶能夠耐高溫，常在PCR中用于DNA鏈的合成，B錯(cuò)誤；C、將已知長(zhǎng)度的DNA片段裝到凝膠上作參照，可用于估測(cè)樣本DNA片段的大小，C正確；D、陰性對(duì)照是未加DNA模板但加入PCR擴(kuò)增過(guò)程所需的混合物，以監(jiān)測(cè)試劑是否污染，D正確。故選：ACD。【點(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合圖示，主要考查PCR技術(shù)，意在考查學(xué)生的識(shí)圖能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題的能力。（多選）14．基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入到染色體DNA特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部特定片段，是一種對(duì)生物體基因組特定目標(biāo)基因進(jìn)行修飾的技術(shù)。如圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行基因編輯的過(guò)程，該過(guò)程中用SgRNA指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的靶位點(diǎn)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．SgRNA的全部堿基序列與靶基因序列完全互補(bǔ) B．核酸內(nèi)切酶Cas9可斷裂核苷酸之間的磷酸二酯鍵 C．根據(jù)上述處理前后生物體的功能變化，可推測(cè)B基因的功能 D．使用該項(xiàng)基因編輯技術(shù)來(lái)預(yù)防人的某些疾病時(shí)可以無(wú)需審批【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．【專(zhuān)題】模式圖；基因工程．【答案】AD【分析】分析題圖：用sgRNA可指引核酸內(nèi)切酶Cas9結(jié)合到特定的切割位點(diǎn)并進(jìn)行切割，進(jìn)而將基因Ⅱ切除，連接基因Ⅰ和Ⅲ，形成新的B基因?！窘獯稹拷猓篈、圖中sgRNA1的堿基序列和sgRNA2堿基序列結(jié)合的是不同的DNA區(qū)段，故二者一般情況下既不相同也不互補(bǔ)，A錯(cuò)誤；B、核酸內(nèi)切酶Cas9可斷裂脫氧核糖核苷酸之間的化學(xué)鍵﹣﹣磷酸二酯鍵，B正確；C、可通過(guò)破壞B基因后生物體的功能變化可推測(cè)B基因的功能，C正確；D、使用該項(xiàng)基因編輯技術(shù)來(lái)預(yù)防人的某些疾病時(shí)必須通過(guò)審批，方可大量生產(chǎn)，D錯(cuò)誤。故選：AD?！军c(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，掌握基因工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能正確分析題圖，并從圖中提取有效信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。（多選）15．已知B基因存在于水稻基因組中。其僅在體細(xì)胞和精子中正常表達(dá)。在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。研究人員將B基因編碼蛋白的序列與Luc基因（表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）連接成融合基因（表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能），然后構(gòu)建重組表達(dá)載體導(dǎo)入到水稻愈傷組織中，示意圖如圖所示。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A．B﹣Luc融合基因的形成需要DNA連接酶的催化 B．構(gòu)建B基因編碼蛋白的cDNA文庫(kù)，只能從水稻體細(xì)胞中提取全部RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄操作 C．B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，據(jù)圖推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中該基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄 D．將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交實(shí)驗(yàn)可對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行鑒定篩選【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【專(zhuān)題】模式圖；基因工程．【答案】AC【分析】分析題圖：圖中①表示將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌，②表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株。【解答】解：A、B﹣Luc融合基因的形成需要DNA連接酶的催化，A正確；B、構(gòu)建B基因編碼蛋白的cDNA文庫(kù)，可以從水稻體細(xì)胞或精子中提取全部RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄操作，B錯(cuò)誤；C、B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄，據(jù)圖推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中該基因的啟動(dòng)子無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，C正確；D、探針是指用放射性同位素（或熒光分子）標(biāo)記的含有目的基因DNA片段，因此要以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針，而不是將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針，D錯(cuò)誤。故選：AC。【點(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟；明確農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法在植物基因工程中的應(yīng)用；并能夠掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的過(guò)程等知識(shí)。三．解答題（共5小題）16．科學(xué)家嘗試使用Cre/loxP位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)，在檢測(cè)目的基因?qū)氤晒?，刪除轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞內(nèi)的抗除草劑基因．其技術(shù)過(guò)程如下（圖中的■代表基因前的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是基因（gene）的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度．啟動(dòng)子就像“開(kāi)關(guān)”，決定基因的活動(dòng)．），據(jù)圖1回答：（1）loxP是一種只有34個(gè)堿基對(duì)構(gòu)成的小型DNA片段，是有兩個(gè)13個(gè)堿基對(duì)反向重復(fù)序列和中間間隔的8個(gè)堿基對(duì)序列共同組成，自身不會(huì)表達(dá)，插入質(zhì)粒后也不影響原有基因的表達(dá)，其堿基序列如下：Cre酶能特異性地識(shí)別此序列并在箭頭處切開(kāi)loxP，其功能類(lèi)似于基因工程中的限制酶酶．從遺傳學(xué)角度分析，Cre酶改變質(zhì)粒產(chǎn)生的結(jié)果相當(dāng)于可遺傳變異中的基因重組．（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到植物細(xì)胞后，通過(guò)脫分化和再分化兩個(gè)過(guò)程可以形成完整的植株．作為標(biāo)記基因，抗除草劑基因用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入成功的原理是抗除草劑基因和目的基因在同一個(gè)質(zhì)粒上．（3）經(jīng)檢測(cè)成功后，抗除草劑基因已沒(méi)有用途，繼續(xù)留在植物體內(nèi)可能會(huì)造成的安全問(wèn)題是抗除草劑基因可能轉(zhuǎn)移到雜草中．經(jīng)Cre酶處理后，質(zhì)粒中的兩個(gè)loxP序列分別被切開(kāi)后，可得到如上圖右側(cè)的這兩個(gè)DNA分子．由于抗除草劑基因前沒(méi)有了啟動(dòng)子_的原因，抗除草劑基因不再表達(dá)，之后會(huì)在培養(yǎng)過(guò)程中消失．（4）loxP序列是有方向性的．如果經(jīng)Cre酶處理后，發(fā)現(xiàn)抗除草劑基因反向連接在質(zhì)粒一上，則原來(lái)質(zhì)粒一中這兩個(gè)loxP序列的方向是C．A．兩個(gè)都是正向B．兩個(gè)都是反向C．一個(gè)正向一個(gè)反向D．與方向無(wú)關(guān)．【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【專(zhuān)題】圖文信息類(lèi)簡(jiǎn)答題；基因工程．【答案】見(jiàn)試題解答內(nèi)容【分析】基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與鑒定．基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．基因工程的原理是基因重組．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因．目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的最常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．【解答】解：（1）限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．Cre酶能特異性地識(shí)別此序列并在箭頭處切開(kāi)loxP，其功能類(lèi)似于基因工程中的限制酶．從遺傳學(xué)角度分析，Cre酶改變質(zhì)粒產(chǎn)生的結(jié)果相當(dāng)于可遺傳變異中的基因重組．（2）將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到植物細(xì)胞中，再用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，通過(guò)脫分化和再分化兩個(gè)過(guò)程可以形成完整的植株．由于抗除草劑基因和目的基因在同一個(gè)質(zhì)粒上，故抗除草劑基因可以用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入成功．（3）經(jīng)檢測(cè)成功后，抗除草劑基因已沒(méi)有用途，繼續(xù)留在植物體內(nèi)可能會(huì)造成的安全問(wèn)題是抗除草劑基因可能轉(zhuǎn)移到雜草中．經(jīng)Cre酶處理后，質(zhì)粒中的兩個(gè)loxP序列分別被切開(kāi)后，可得到如上圖右側(cè)的這兩個(gè)DNA分子．基因表達(dá)載體的組成包括：目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因．由于抗除草劑基因前沒(méi)有了啟動(dòng)子的原因，因此抗除草劑基因不再表達(dá)，之后會(huì)在培養(yǎng)過(guò)程中消失．（4）loxP序列是有方向性的．據(jù)圖分析，如果經(jīng)Cre酶處理后，發(fā)現(xiàn)抗除草劑基因反向連接在質(zhì)粒一上，則原來(lái)質(zhì)粒一中這兩個(gè)loxP序列的方向是一個(gè)正向一個(gè)反向．故選：C．故答案為：（1）限制酶基因重組（2）脫分化再分化抗除草劑基因和目的基因在同一個(gè)質(zhì)粒上（3）抗除草劑基因可能轉(zhuǎn)移到雜草中抗除草劑基因前沒(méi)有了啟動(dòng)子（4）C【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，題目中考查的要點(diǎn)較多，設(shè)計(jì)到多方面的知識(shí)，要求學(xué)生對(duì)生物學(xué)知識(shí)掌握得比較全面．基因工程是考查的重點(diǎn)知識(shí)，與細(xì)胞工程、胚胎工程等現(xiàn)代生物技術(shù)都有一定聯(lián)系．復(fù)習(xí)時(shí)可以建立知識(shí)框架，幫助記憶和理解．17．天然β淀粉酶大多耐熱性差，不利于工業(yè)化應(yīng)用。我國(guó)學(xué)者借助PCR改造β﹣淀粉酶基因，并將改造的基因與pLN23質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌，最終獲得耐高溫的β﹣淀粉酶。回答下列問(wèn)題：（1）上述過(guò)程屬于蛋白質(zhì)工程。（2）PCR中使用的聚合酶屬于③（填寫(xiě)編號(hào)）。①以DNA為模板的RNA聚合酶②以RNA為模板的RNA聚合酶③以DNA為模板的DNA聚合酶④以RNA為模板的DNA聚合酶（3）某天然β﹣淀粉酶由484個(gè)氨基酸構(gòu)成，研究發(fā)現(xiàn)，將該酶第476位天冬氨酸替換為天冬酰胺，耐熱性明顯提升。在圖1所示的β﹣淀粉酶基因改造方案中，含已替換堿基的引物是②（填寫(xiě)編號(hào)）。（4）為了使上述改造后的基因能在大腸桿菌中高效表達(dá)，由圖2所示的pLN23質(zhì)粒構(gòu)建得到基因表達(dá)載體。除圖示信息外，基因表達(dá)載體中還應(yīng)該有目的基因（即改造后的基因）和標(biāo)記基因。（5）目的基因（不含EcoRⅠ酶切位點(diǎn)）全長(zhǎng)為1.5kb，將其插入BamHⅠ位點(diǎn)。用EcoRⅠ酶切來(lái)自于不同大腸桿菌菌落的質(zhì)粒DNA，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳確定DNA片段長(zhǎng)度，這一操作的目的是篩選導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌。正確連接的基因表達(dá)載體被EcoRⅠ酶切后長(zhǎng)度為5.7kb。（6）采用PCR還能在分子水平上確定目的基因是否轉(zhuǎn)錄，根據(jù)中心法則，可通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)獲得PCR的模板。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合；蛋白質(zhì)工程基本原理．【專(zhuān)題】圖文信息類(lèi)簡(jiǎn)答題；基因工程．【答案】（1）蛋白質(zhì)（2）③（3）②（4）標(biāo)記基因（5）篩選導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌5.7（6）逆轉(zhuǎn)錄【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！窘獯稹拷猓海?）根據(jù)蛋白質(zhì)的功能改變基因的結(jié)構(gòu)，最終獲得耐高溫的β﹣淀粉酶，這屬于蛋白質(zhì)工程。（2）PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，利用的酶是耐熱的DNA聚合酶，合成子鏈時(shí)是以DNA為模板。（3）根據(jù)β﹣淀粉酶的編碼序列，替換的堿基在編碼序列中，則利用的引物應(yīng)該把編碼序列全部擴(kuò)增在內(nèi)，則所用的引物是②③。再結(jié)合題意可知，β﹣淀粉酶由484個(gè)氨基酸構(gòu)成，而替換位點(diǎn)位于476位，則含已替換堿基的引物是②。（4）作為基因工程載體的質(zhì)粒應(yīng)該包含：復(fù)制原點(diǎn)、限制酶的切割位點(diǎn)、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子，根據(jù)圖示的表達(dá)載體可知應(yīng)還要包括目的基因和標(biāo)記基因。（5）目的基因通過(guò)表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌中，大腸桿菌菌落的質(zhì)粒DNA，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳確定DNA片段長(zhǎng)度，這一操作的目的是篩選出導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌。正確連接的基因表達(dá)載體只有一個(gè)EcoRⅠ酶切位點(diǎn)，則切割后的長(zhǎng)度為4.2+1.5＝5.7kb。（6）轉(zhuǎn)錄是以DNA為模板合成RNA的過(guò)程，通過(guò)PCR在分子水平上確定目的基因是否轉(zhuǎn)錄，則需要以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄出DNA作為PCR反應(yīng)的模板。故答案為：（1）蛋白質(zhì)（2）③（3）②（4）標(biāo)記基因（5）篩選導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌5.7（6）逆轉(zhuǎn)錄【點(diǎn)評(píng)】本題以β淀粉酶的相關(guān)研究為知識(shí)背景，考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的相關(guān)操作，熟記和理解相關(guān)知識(shí)并能用于解決實(shí)際問(wèn)題是解答本題的關(guān)鍵。18．將天然Ti質(zhì)粒改造成含有Vir基因的輔助質(zhì)粒（輔助T﹣DNA轉(zhuǎn)移）和不含有Vir基因、含有T﹣DNA的穿梭質(zhì)粒，共同轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，可提高轉(zhuǎn)化效率。細(xì)菌和棉花對(duì)密碼子偏好不同，為提高翻譯效率，增強(qiáng)棉花抗病蟲(chóng)害能力，進(jìn)行如下操作。回答下列問(wèn)題。注：F1﹣F3，R1﹣R3表示引物；T﹣DNA﹣LB表示左邊界；T﹣DNA﹣RB表示右邊界；Ori表示復(fù)制原點(diǎn)；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。（1）從蘇云金桿菌提取DNA時(shí)，需加入蛋白酶，其作用是水解蘇云金桿菌細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，使菌體釋放DNA。提取過(guò)程中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精，其目的是初步分離DNA和蛋白質(zhì)。（2）本操作中獲取目的基因的方法是PCR技術(shù)和人工合成法。（3）穿梭質(zhì)粒中p35s為啟動(dòng)子，其作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄；插入兩個(gè)p35s啟動(dòng)子，其目的可能是促進(jìn)目的基因更多的轉(zhuǎn)錄。（4）根據(jù)圖中穿梭質(zhì)粒上的KanR和HygBR兩個(gè)標(biāo)記基因的位置，用HygBR基因?qū)?yīng)的抗生素初步篩選轉(zhuǎn)化的棉花愈傷組織。（5）為檢測(cè)棉花植株是否導(dǎo)入目的基因，提取棉花植株染色體DNA作模板，進(jìn)行PCR，應(yīng)選用的引物是F3和R2。（6）本研究采用的部分生物技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，理由是D（單選）。A.通過(guò)含有雙質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞B.將蘇云金桿菌Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中表達(dá)C.將1﹣1362基因序列改變?yōu)槊藁?xì)胞偏好密碼子的基因序列D.用1﹣1362合成基因序列和1363﹣1848天然基因序列獲得改造的抗蟲(chóng)蛋白【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【專(zhuān)題】圖文信息類(lèi)簡(jiǎn)答題；基因工程．【答案】（1）水解蘇云金桿菌細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，使菌體釋放DNA初步分離DNA和蛋白質(zhì)（2）PCR技術(shù)人工合成法（3）RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)促進(jìn)目的基因更多的轉(zhuǎn)錄（4）HygBR（5）F3R2（6）D【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！窘獯稹拷猓海?）從蘇云金桿菌提取DNA時(shí)，加入蛋白酶的作用是水解蘇云金桿菌細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，使菌體釋放DNA。由于DNA不溶于酒精，有些蛋白質(zhì)溶于酒精，提取過(guò)程中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精可初步分離DNA和蛋白質(zhì)。（2）由圖示可知，本操作中獲取目的基因的方法是PCR技術(shù)和人工合成法。（3）啟動(dòng)子作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄；插入兩個(gè)p35s啟動(dòng)子，其目的可能是促進(jìn)目的基因更多的轉(zhuǎn)錄。（4）由題干信息可知，T﹣DNA﹣LB表示左邊界；T﹣DNA﹣RB表示右邊界，根據(jù)圖中穿梭質(zhì)粒上的KanR和HygBR兩個(gè)標(biāo)記基因的位置可知，HygBR基因在T﹣DNA（重組DNA）上，用HygBR基因?qū)?yīng)的抗生素初步篩選轉(zhuǎn)化的棉花愈傷組織。（5）PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，引物應(yīng)在目的基因的兩端，所以為檢測(cè)棉花植株是否導(dǎo)入目的基因，應(yīng)選用的引物是F3和R2。（6）蛋白質(zhì)工程合成的蛋白質(zhì)為自然界中沒(méi)有的新蛋白質(zhì)，本研究中用1﹣1362合成基因序列和1363﹣1848天然基因序列獲得改造的抗蟲(chóng)蛋白，所以屬于蛋白質(zhì)工程，D正確。故選：D。.故答案為：（1）水解蘇云金桿菌細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)，使菌體釋放DNA初步分離DNA和蛋白質(zhì)（2）PCR技術(shù)人工合成法（3）RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)促進(jìn)目的基因更多的轉(zhuǎn)錄（4）HygBR（5）F3R2（6）D【點(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確的判斷，難度適中。19．回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞和表達(dá)的問(wèn)題．如圖表示利用致病病毒M的表面蛋白基因和無(wú)害病毒N，通過(guò)基因工程制作重組M病毒疫苗的部分過(guò)程．其中①～⑤表示操作流程，a～h表示分子或結(jié)構(gòu)．據(jù)圖回答問(wèn)題．（1）基因工程除了微生物基因工程外，還有植物基因工程、動(dòng)物基因工程．在圖所示過(guò)程中，獲取目的基因的步驟是流程①、②（用圖中編號(hào)回答）；在流程③中必須實(shí)施的步驟有切割質(zhì)粒、將質(zhì)粒與目的基因重組．（2）在圖所示的整個(gè)過(guò)程中，用作運(yùn)載體的DNA來(lái)自分子c、d（用圖中字母回答）．（3）下列關(guān)于質(zhì)粒運(yùn)載體的說(shuō)法正確的是A、D、F（多選）．A．使用質(zhì)粒運(yùn)載體是為了避免目的基因被分解B．質(zhì)粒運(yùn)載體只能在與目的基因重組后進(jìn)入細(xì)胞C．質(zhì)粒運(yùn)載體可能是從細(xì)菌或者病毒的DNA改造的D．質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)也遵循中心法則E．質(zhì)粒運(yùn)載體只有把目的基因整合到受體細(xì)胞的DNA中才能表達(dá)F．沒(méi)有限制酶就無(wú)法使用質(zhì)粒運(yùn)載體（4）據(jù)圖比較結(jié)構(gòu)g和結(jié)構(gòu)h的異同，并解釋產(chǎn)生差異的原因相同點(diǎn)：遺傳物質(zhì)相同；不同點(diǎn)：表面蛋白質(zhì)不同．差異的原因：因?yàn)間導(dǎo)入受體細(xì)胞后，目的基因得以表達(dá)，合成了致病病毒M的表面蛋白．【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【答案】見(jiàn)試題解答內(nèi)容【分析】結(jié)合題意分析圖解：圖中流程①表示從致病病毒M中獲得病毒遺傳物質(zhì)DNA，流程②表示獲取致病病毒M的表面蛋白基因，流程③表示將目的基因和質(zhì)粒c構(gòu)成重組質(zhì)粒，流程④表示將重組后的無(wú)害病毒去感染細(xì)胞，流程⑤表示形成疫苗．【解答】解：（1）根據(jù)受體細(xì)胞的不同，基因工程可分為動(dòng)物基因工程、植物基因工程和微生物基因工程．圖中①、②表示提取致病病毒M的DNA并切割下目的基因，圖中③是目的基因與運(yùn)載體拼接過(guò)程，需要用同種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因．（2）圖中c、d起到了運(yùn)載體的作用．（3）若直接將目的基因片段導(dǎo)入受體細(xì)胞，則很容易被分解失效，只有整合后隨運(yùn)載體一起友好的寄居在受體細(xì)胞，A正確．質(zhì)粒運(yùn)載體與目的基因沒(méi)有成功重組也會(huì)被導(dǎo)入受體細(xì)胞，B錯(cuò)誤．質(zhì)粒運(yùn)載體通常是來(lái)自細(xì)菌，病毒沒(méi)有質(zhì)粒，C錯(cuò)誤．質(zhì)粒的本質(zhì)是小型環(huán)狀DNA，其復(fù)制和表達(dá)遵循中心法則，可獨(dú)立的在受體細(xì)胞表達(dá)，所以D正確，E錯(cuò)誤．質(zhì)粒作為運(yùn)載體，必須先用同種限制酶切割，才能與目的基因整合重組，F(xiàn)正確．（4）仔細(xì)比較結(jié)構(gòu)g和結(jié)構(gòu)h，主要區(qū)別在病毒表面的蛋白質(zhì)不同，h能合成病毒M的表面蛋白，說(shuō)明目的基因?qū)牒蟪晒Ρ磉_(dá)．故答案為：（1）植物基因工程、動(dòng)物基因工程①、②切割質(zhì)粒、將質(zhì)粒與目的基因重組（2）c、d（3）A、D、F（4）相同點(diǎn)：遺傳物質(zhì)相同；不同點(diǎn)：表面蛋白質(zhì)不同．差異的原因：因?yàn)間導(dǎo)入受體細(xì)胞后，目的基因得以表達(dá)，合成了致病病毒M的表面蛋白【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查基因工程的基本工具和操作程序，意在考查考生的識(shí)記能力、圖文轉(zhuǎn)換能力以及理解能力，難度適中．20．科學(xué)家將人的生長(zhǎng)素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。過(guò)程如圖1據(jù)圖回答：（1）過(guò)程①表示的是采取反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）（從CDNA文庫(kù)中獲?。┑姆椒▉?lái)獲取目的基因。其過(guò)程可表示為：目的基因→轉(zhuǎn)錄mRNA→逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA→（2）人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，原因是人的基因與大腸桿菌DNA的組成成分相同，結(jié)構(gòu)相同，并且具有相同的黏性末端。（3）圖中（3）過(guò)程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。一般將受體大腸桿菌用Ca2+處理，使細(xì)胞處于能吸收周?chē)h(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱(chēng)為感受態(tài)細(xì)胞，再將表達(dá)載體溶于緩沖液中與這種細(xì)胞混合，在一定的溫度下完成轉(zhuǎn)化。（4）檢測(cè)大腸桿菌B是否導(dǎo)入了質(zhì)粒或重組質(zhì)粒，可采用的方法是將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說(shuō)明已導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒(méi)有導(dǎo)入。（5）蛋白質(zhì)工程中，直接需要進(jìn)行操作的對(duì)象是D。A．氨基酸結(jié)構(gòu)B．蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)C．肽鏈結(jié)構(gòu)D．基因結(jié)構(gòu)為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開(kāi)發(fā)利用備受關(guān)注。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。（6）獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性?xún)?nèi)切酶作用于圖2中的a處（填“a”或“b”）。（7）將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法（花粉管通道法）法。（8）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的耐鹽基因（目的基因）作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。（9）下列屬于PCR技術(shù)的條件的是C。①單鏈的脫氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脫氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA連接酶⑥D(zhuǎn)NA聚合酶⑦DNA限制性?xún)?nèi)切酶A．①②③⑤B．①②③⑤⑦C．①②③⑥D(zhuǎn)．①②④⑤⑦【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．【專(zhuān)題】圖文信息類(lèi)簡(jiǎn)答題；基因工程．【答案】（1）反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）（從CDNA文庫(kù)中獲取）（2）人的基因與大腸桿菌DNA的組成成分相同，結(jié)構(gòu)相同，并且具有相同的黏性末端（3）Ca2+感受態(tài)（4）將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說(shuō)明已導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒(méi)有導(dǎo)入（5）D（6）a（7）基因槍法（花粉管通道法）（8）耐鹽基因（目的基因）一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）（9）C【分析】分析題圖：圖中（1）表示以人的生長(zhǎng)素RNA為模板反轉(zhuǎn)錄形成目的基因；（2）表示目的基因與質(zhì)粒A結(jié)合形成重組質(zhì)粒，目的基因插入位點(diǎn)是四環(huán)素抗性基因，而抗氨芐青霉素基因結(jié)構(gòu)完整；（3）表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，最后檢測(cè)、篩選得到工程菌?！窘獯稹拷猓海?）目的基因的獲取途徑有：從基因文庫(kù)中獲?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增；人工合成（反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法），從圖中可以明顯地看出，過(guò)程①是通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因的。（2）由于人的基因與大腸桿菌DNA的組成成分相同，結(jié)構(gòu)相同，并且具有相同的黏性末端，故人的基因能與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組。（3）過(guò)程③表示借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。受體細(xì)胞是微生物時(shí)，一般用Cacl2（Ca2+）處理，以增大細(xì)胞壁的通透性，使細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞，易于含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。（4）由圖可知，質(zhì)粒上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素的抗性基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，破壞了質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但沒(méi)有破壞氨芐青霉素的抗性基因，所以導(dǎo)入普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒的大腸桿菌都能抗氨芐青霉素，都能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故可將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說(shuō)明已導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒(méi)有導(dǎo)入。（5）蛋白質(zhì)工程是對(duì)控制蛋白質(zhì)合成的基因進(jìn)行改造，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)相應(yīng)蛋白質(zhì)的改變，故選D。（6）圖中a表示磷酸二酯鍵，是限制酶的切割位點(diǎn)，也是DNA連接酶的連接位點(diǎn)；b表示氫鍵，是解旋酶的作用位點(diǎn)，故構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性?xún)?nèi)切酶作用于圖中的a。（7）將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和基因槍法（花粉管通道法）法。（8）為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的耐鹽基因（目的基因）作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè)，又要用一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。（9）PCR需要模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），故選：C。故答案為：（1）反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）（從CDNA文庫(kù)中獲取）（2）人的基因與大腸桿菌DNA的組成成分相同，結(jié)構(gòu)相同，并且具有相同的黏性末端（3）Ca2+感受態(tài)（4）將得到的大腸桿菌B涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長(zhǎng)的，說(shuō)明已導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒(méi)有導(dǎo)入（5）D（6）a（7）基因槍法（花粉管通道法）（8）耐鹽基因（目的基因）一定濃度鹽水澆灌（移栽到鹽堿地中）（9）C【點(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的相關(guān)細(xì)節(jié)，能正確分析題圖，再結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。

考點(diǎn)卡片1．糖類(lèi)的檢測(cè)【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】常用材料：蘋(píng)果和梨試劑：斐林試劑（甲液：0.1g/mL的NaOH乙液：0.05g/mL的CuSO4）甲液和乙液等量混合后加入樣液，50﹣65℃水浴加熱，2min后有磚紅色沉淀出現(xiàn)，則證明樣液中有還原糖?！久}方向】關(guān)于檢測(cè)生物組織中糖類(lèi)的一些說(shuō)法正確的是（）A．生物組織中糖類(lèi)的檢測(cè)只能使用斐林試劑B．生物組織中糖類(lèi)的檢測(cè)必需水浴加熱才能看到現(xiàn)象C．不直接用西瓜為檢測(cè)材料，是因?yàn)槲鞴现胁缓€原糖D．一般不選擇甘蔗檢測(cè)還原糖，是因?yàn)檎崽菦](méi)有還原性分析：斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）。斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉、蔗糖）。解答：A、斐林試劑只能用于檢測(cè)還原糖，A錯(cuò)誤；B、用斐林試劑檢測(cè)生物組織中還原糖時(shí)，需要水浴加熱才能觀察到顏色變化，B錯(cuò)誤；C、不直接選用西瓜作為還原糖的檢測(cè)材料，是因?yàn)槲鞴媳旧淼念伾珪?huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象造成干擾，C錯(cuò)誤；D、一般不選擇甘蔗檢測(cè)還原糖，是因?yàn)楦收嶂懈缓崽牵崽菦](méi)有還原性，D正確。故選：D。點(diǎn)評(píng)：本題考查生物組織中可溶性還原糖的鑒定的實(shí)驗(yàn)，意在考查學(xué)生能獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn)，理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運(yùn)用；并對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析、處理?！窘忸}思路點(diǎn)撥】注意事項(xiàng)：①西瓜汁不能用②甲乙液必須等量混合均勻后再加入樣液中，現(xiàn)配現(xiàn)用，混合使用③必須用50～65攝氏度水浴加熱顏色變化：淺藍(lán)色→棕色→磚紅色2．蛋白質(zhì)的檢測(cè)【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】蛋白質(zhì)鑒定用雙縮脲試劑（A液0.1g/mlNaOH和B液0.01g/mlCuSO4），先向樣液中滴加1mlA液，搖勻后加入4滴B液，搖勻后觀察組織樣液變成紫色，則證明該樣液中有蛋白質(zhì)?！久}方向】下列有關(guān)生物組織中的糖類(lèi)、脂肪、蛋白質(zhì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)的敘述中，正確的是（）A．斐林試劑甲液和稀釋5倍的斐林試劑乙液，可用于蛋白質(zhì)檢測(cè)B．梨勻漿與斐林試劑作用能生成磚紅色沉淀，說(shuō)明其含有葡萄糖C．斐林試劑與雙縮脲試劑的組成相同，使用方法也相同，且都需要加熱D．脂肪鑒定時(shí)，實(shí)驗(yàn)材料選用花生油，染色劑選用蘇丹Ⅲ染液分析：生物組織中化合物的鑒定：（1）斐林試劑可用于鑒定還原糖，在水浴加熱的條件下，溶液的顏色變化為磚紅色（沉淀）。斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖（如葡萄糖、麥芽糖、果糖）存在與否，而不能鑒定非還原性糖（如淀粉）。（2）蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。（3）脂肪可用蘇丹Ⅲ染液鑒定，呈橘黃色。解答：A、斐林試劑甲夜和雙縮脲試劑A液都是0.1g/mlNaOH溶液，斐林試劑乙液是0.05g/mlCuSO4，稀釋5倍濃度為0.01g/ml，與雙縮脲試劑B液相同，所以斐林試劑甲液和稀釋5倍的斐林試劑乙液，可用于蛋白質(zhì)檢測(cè)，A正確；B、梨勻漿與斐林試劑作用能生成磚紅色沉淀，說(shuō)明其含有還原糖，B錯(cuò)誤；C、斐林試劑與雙縮脲試劑的組成不同，使用方法不同，斐林試劑是將甲液和乙液混合，而雙縮脲試劑是先加入A液，再加入B液，雙縮脲試劑不需要加熱，C錯(cuò)誤；D、花生油成黃色，蘇丹Ⅲ染液將脂肪染成黃色，所以脂肪鑒定時(shí)，實(shí)驗(yàn)材料如果選用花生油，染色劑不能選用蘇丹Ⅲ染液，D錯(cuò)誤。故選：A。點(diǎn)評(píng)：本題考查有機(jī)物檢測(cè)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問(wèn)題的能力是解答本題的關(guān)鍵?！窘忸}思路點(diǎn)撥】注意事項(xiàng)：①雙縮脲試劑與斐林試劑濃度的相同點(diǎn)和不同點(diǎn)②先加A液1ml，再加B液4滴③鑒定前，留出一部分組織樣液，以便對(duì)比3．探究酵母菌的呼吸方式【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、了解酵母菌的無(wú)氧呼吸和有氧呼吸情況2、學(xué)會(huì)運(yùn)用對(duì)比實(shí)驗(yàn)的方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)原理：1、酵母菌是一種單細(xì)胞真菌，在有氧和無(wú)氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來(lái)研究細(xì)胞呼吸的不同方式．2、CO2可使澄清石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)