小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在犬頸總動(dòng)脈置換中的實(shí)驗(yàn)探究與機(jī)制解析一、引言1.1研究背景與意義心血管疾病嚴(yán)重威脅人類健康，據(jù)《中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告2020》顯示，心血管病死亡占城鄉(xiāng)居民總死亡原因的首位，同樣，《2021年中國(guó)心血管病醫(yī)療質(zhì)量報(bào)告》也明確指出，心血管疾病是當(dāng)前我國(guó)居民的首要死因。在心血管疾病的治療中，血管移植是治療嚴(yán)重心血管疾病的重要手段，通過(guò)將病變血管替換為人工血管，可確保人體血液循環(huán)需求。人工血管根據(jù)直徑大小，一般將直徑小于6毫米的分類為小口徑人工血管，直徑大于6毫米的則為大口徑人工血管。目前大口徑（內(nèi)徑≥6mm）人工血管已成功實(shí)現(xiàn)商業(yè)化并廣泛應(yīng)用于臨床，但小口徑（內(nèi)徑<6mm）人工血管的研發(fā)與應(yīng)用仍面臨諸多挑戰(zhàn)，至今尚無(wú)成熟產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于臨床。小口徑人工血管在臨床應(yīng)用中面臨的主要問(wèn)題包括血栓形成、內(nèi)膜增生以及與天然血管的順應(yīng)性不匹配等。由于小血管內(nèi)血液流速緩慢，血液停留時(shí)間長(zhǎng)，血小板易聚集在人工血管表面，引發(fā)凝血反應(yīng)，導(dǎo)致移植初期急性血栓的發(fā)生；同時(shí)，內(nèi)膜不完整、炎癥發(fā)生等因素會(huì)促使平滑肌細(xì)胞過(guò)度增殖，造成內(nèi)膜增生，導(dǎo)致小血管長(zhǎng)期植入后出現(xiàn)狹窄；另外，制備材料與吻合技術(shù)等方面的限制，使得人工血管與天然血管之間存在順應(yīng)性不匹配問(wèn)題，進(jìn)而引發(fā)內(nèi)膜增生和管腔內(nèi)再狹窄等問(wèn)題。這些問(wèn)題嚴(yán)重影響了小口徑人工血管的長(zhǎng)期通暢率和臨床應(yīng)用效果。脫細(xì)胞血管基質(zhì)作為一種潛在的小口徑人工血管材料，具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。通過(guò)物理、化學(xué)或酶學(xué)方法去除血管組織中的細(xì)胞成分，保留了細(xì)胞外基質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)和生物活性成分，如膠原蛋白、彈性纖維等，使其具有良好的生物相容性和低免疫原性，能夠?yàn)榧?xì)胞的黏附、增殖和分化提供天然的微環(huán)境，有利于血管組織的再生和修復(fù)。豬動(dòng)脈因其在解剖結(jié)構(gòu)和生理功能上與人類動(dòng)脈有一定的相似性，且來(lái)源豐富，成為制備脫細(xì)胞血管基質(zhì)的理想原材料之一。犬頸總動(dòng)脈在解剖結(jié)構(gòu)和血流動(dòng)力學(xué)方面與人類的一些重要?jiǎng)用}具有相似性，是常用的血管移植研究模型。將小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈用于置換犬頸總動(dòng)脈的研究，能夠在接近生理?xiàng)l件的動(dòng)物模型中，評(píng)估脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為小口徑人工血管的可行性和有效性，包括移植物的通暢率、組織相容性、內(nèi)皮化程度、新生血管的形成以及長(zhǎng)期的血管功能等。這不僅有助于深入了解脫細(xì)胞血管基質(zhì)在體內(nèi)的生物學(xué)行為和作用機(jī)制，還能為解決小口徑人工血管目前面臨的問(wèn)題提供新的思路和方法，推動(dòng)小口徑人工血管從實(shí)驗(yàn)室研究向臨床應(yīng)用的轉(zhuǎn)化，為心血管疾病患者帶來(lái)更有效的治療方案，具有重要的科學(xué)研究?jī)r(jià)值和臨床應(yīng)用前景。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀小口徑血管移植領(lǐng)域一直是生物醫(yī)學(xué)工程的研究熱點(diǎn)，國(guó)內(nèi)外眾多科研團(tuán)隊(duì)圍繞解決小口徑人工血管面臨的血栓形成、內(nèi)膜增生和順應(yīng)性不匹配等問(wèn)題展開(kāi)了廣泛而深入的研究。在國(guó)外，一些研究聚焦于新型材料的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用。美國(guó)的科研人員嘗試?yán)眉{米纖維材料制備小口徑人工血管，通過(guò)精確控制納米纖維的直徑和排列方式，來(lái)改善血管的力學(xué)性能和生物相容性，以期減少血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。例如，采用靜電紡絲技術(shù)制備的聚乳酸-己內(nèi)酯（PLCL）納米纖維血管支架，其纖維結(jié)構(gòu)與天然血管的細(xì)胞外基質(zhì)相似，為細(xì)胞的黏附和生長(zhǎng)提供了良好的微環(huán)境。但這類納米纖維材料在體內(nèi)的長(zhǎng)期穩(wěn)定性和降解產(chǎn)物的安全性仍有待進(jìn)一步研究。歐洲的研究團(tuán)隊(duì)則在生物活性涂層方面取得了一定進(jìn)展，通過(guò)在人工血管表面涂覆具有抗凝血和促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞黏附功能的生物分子，如肝素、一氧化氮釋放劑等，有效提高了人工血管的抗血栓性能和內(nèi)皮化程度。然而，涂層的穩(wěn)定性和耐久性仍是制約其臨床應(yīng)用的關(guān)鍵因素，涂層在長(zhǎng)期血流沖刷下可能會(huì)出現(xiàn)脫落，從而影響其功能的發(fā)揮。國(guó)內(nèi)在小口徑血管移植領(lǐng)域也取得了豐碩成果。東華大學(xué)的科研團(tuán)隊(duì)通過(guò)對(duì)聚多巴胺（PDA）表面修飾技術(shù)的改進(jìn)，選用賴氨酸（Lys）作為小分子交聯(lián)劑介導(dǎo)PDA聚合，在電紡PLCL取向纖維表面形成PDA-Lys功能性涂層。該涂層不僅顯著增強(qiáng)了支架的抗血栓形成能力，還可通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞-基質(zhì)間和細(xì)胞-細(xì)胞間的相互作用促進(jìn)血管內(nèi)皮層再生和功能重塑。將直徑為2mm的小口徑組織工程血管植入兔頸動(dòng)脈3個(gè)月后，觀察到經(jīng)PDA-Lys功能修飾的PLCL取向纖維可在抑制急性血栓形成過(guò)程中加快血管內(nèi)皮層再生和平滑肌層重塑，呈現(xiàn)出誘導(dǎo)血管組織健康重塑的潛力。中國(guó)科學(xué)院理化技術(shù)研究所和首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院聯(lián)合應(yīng)用抗凝血因子藥物和抗血小板藥物，賦予小口徑血管“雙重抗凝血效應(yīng)”，開(kāi)發(fā)出能夠有效抵抗急性血栓的小口徑人工血管。他們選擇聚己內(nèi)酯（PCL）和聚氨酯（PU）復(fù)合材料作為構(gòu)建材料，通過(guò)精確調(diào)控兩者復(fù)合的比例來(lái)調(diào)控人工血管的力學(xué)性能，并找到了在溫和條件下緩慢反應(yīng)制備肝素-阿司匹林復(fù)合物的方法，實(shí)現(xiàn)一次性在人工血管上引入兩種藥物，發(fā)揮更強(qiáng)效的抗凝血功能。但目前該人工血管仍處于實(shí)驗(yàn)室研發(fā)階段，受限于靜電紡絲的生產(chǎn)效率以及有機(jī)合成反應(yīng)的局限性，距離臨床應(yīng)用還有一定距離。脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為一種潛在的小口徑血管替代材料，也受到了國(guó)內(nèi)外研究者的關(guān)注。國(guó)外有研究通過(guò)優(yōu)化脫細(xì)胞工藝，采用多種物理、化學(xué)和酶學(xué)方法聯(lián)合處理豬動(dòng)脈，在有效去除細(xì)胞成分的同時(shí)，最大程度保留了細(xì)胞外基質(zhì)的生物活性和結(jié)構(gòu)完整性。對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈進(jìn)行力學(xué)性能測(cè)試，發(fā)現(xiàn)其在一定程度上能夠滿足小口徑血管的力學(xué)需求，但在長(zhǎng)期植入過(guò)程中，由于缺乏血管的自我修復(fù)和重塑能力，仍可能出現(xiàn)結(jié)構(gòu)退化和功能喪失的問(wèn)題。國(guó)內(nèi)學(xué)者則著重研究脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在體內(nèi)的生物學(xué)行為和免疫反應(yīng)。有研究將脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植到動(dòng)物體內(nèi)后，通過(guò)組織學(xué)和免疫學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，雖然脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的免疫原性較低，但仍會(huì)引發(fā)一定程度的免疫反應(yīng)，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維組織增生，這可能會(huì)影響移植物的長(zhǎng)期通暢率和穩(wěn)定性。此外，如何促進(jìn)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的內(nèi)皮化，使其盡快形成具有完整功能的內(nèi)皮細(xì)胞層，也是國(guó)內(nèi)研究的重點(diǎn)之一。目前，雖已嘗試采用內(nèi)皮細(xì)胞種植、生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)等方法來(lái)促進(jìn)內(nèi)皮化，但效果仍不盡人意，內(nèi)皮化速度較慢，難以滿足臨床需求。綜合國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈用于血管置換雖展現(xiàn)出一定潛力，但仍存在諸多問(wèn)題亟待解決。在前期研究基礎(chǔ)上，本研究擬通過(guò)進(jìn)一步優(yōu)化脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的制備工藝，深入探究其在犬頸總動(dòng)脈置換模型中的生物學(xué)性能和血管再生機(jī)制，為小口徑人工血管的研發(fā)提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論支持。1.3研究目的與創(chuàng)新點(diǎn)本研究旨在通過(guò)將小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈置換犬頸總動(dòng)脈，深入探究脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為小口徑人工血管替代物的可行性、有效性及其作用機(jī)制。具體研究目的包括：其一，評(píng)估小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在犬頸總動(dòng)脈置換模型中的短期和長(zhǎng)期通暢率，明確其在體內(nèi)環(huán)境下維持血管通暢的能力，為臨床應(yīng)用提供關(guān)鍵的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。其二，研究脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后與宿主組織的相容性，包括炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)以及組織整合情況等，全面了解其在體內(nèi)的生物學(xué)行為，為優(yōu)化材料設(shè)計(jì)和降低免疫排斥反應(yīng)提供理論依據(jù)。其三，分析脫細(xì)胞豬動(dòng)脈置換后血管的內(nèi)皮化程度、新生血管形成以及血管壁結(jié)構(gòu)和功能的變化，深入探討其促進(jìn)血管再生和修復(fù)的機(jī)制，為進(jìn)一步提高小口徑人工血管的性能提供新的思路和方法。本研究在方法和觀察指標(biāo)方面具有一定的創(chuàng)新之處。在方法上，采用了一種優(yōu)化的脫細(xì)胞工藝，綜合運(yùn)用物理、化學(xué)和酶學(xué)方法，在有效去除豬動(dòng)脈細(xì)胞成分的同時(shí)，最大程度保留細(xì)胞外基質(zhì)的生物活性和三維結(jié)構(gòu)，相較于傳統(tǒng)的脫細(xì)胞方法，能更好地維持血管的力學(xué)性能和生物學(xué)功能。同時(shí)，在血管移植手術(shù)中，應(yīng)用了先進(jìn)的顯微外科技術(shù)，確保血管吻合的精確性和穩(wěn)定性，減少手術(shù)創(chuàng)傷和并發(fā)癥的發(fā)生，提高實(shí)驗(yàn)成功率和數(shù)據(jù)的可靠性。在觀察指標(biāo)方面，除了常規(guī)的通暢率、組織學(xué)和免疫組化檢測(cè)外，還引入了多種新興的檢測(cè)技術(shù)和指標(biāo)。利用活體成像技術(shù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)移植血管的血流灌注和功能變化，能夠?qū)崟r(shí)、直觀地獲取血管在體內(nèi)的生理狀態(tài)信息，為評(píng)估血管功能提供更全面、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。通過(guò)檢測(cè)與血管再生和修復(fù)相關(guān)的細(xì)胞因子、信號(hào)通路等分子指標(biāo)，深入探究脫細(xì)胞豬動(dòng)脈促進(jìn)血管再生的分子機(jī)制，從分子層面揭示其作用原理，為后續(xù)的研究和應(yīng)用提供更深入的理論支持。二、相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1小口徑血管移植概述小口徑血管移植，是指將內(nèi)徑小于6毫米的血管替代物移植到體內(nèi)，以修復(fù)或替換病變血管，恢復(fù)血液循環(huán)的醫(yī)療手段。作為心血管疾病治療的重要方式，小口徑血管移植在冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)、外周血管旁路移植術(shù)、血管創(chuàng)傷修復(fù)（缺損≥2cm）以及血液透析血管通路建立等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。在冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)中，小口徑人工血管可作為橋血管，繞過(guò)冠狀動(dòng)脈狹窄或阻塞部位，為心肌提供充足的血液供應(yīng)，改善心肌缺血狀況，對(duì)于冠心病患者的治療具有重要意義。在外周血管旁路移植術(shù)中，小口徑血管移植能夠解決下肢動(dòng)脈粥樣硬化、血栓閉塞性脈管炎等導(dǎo)致的下肢缺血問(wèn)題，恢復(fù)下肢血液循環(huán)，避免截肢風(fēng)險(xiǎn)，提高患者生活質(zhì)量。對(duì)于因外傷、手術(shù)等原因造成的血管創(chuàng)傷，當(dāng)血管缺損長(zhǎng)度≥2cm時(shí)，小口徑血管移植可作為修復(fù)手段，重建血管連續(xù)性，保證組織器官的正常血供。在終末期腎病患者的血液透析治療中，小口徑人工血管用于建立動(dòng)靜脈內(nèi)瘺，為血液透析提供穩(wěn)定的血管通路，是維持患者生命和治療效果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。盡管小口徑血管移植在臨床治療中具有不可或缺的作用，但其應(yīng)用仍面臨諸多挑戰(zhàn)，血栓形成和內(nèi)膜增生是其中最為突出的問(wèn)題。小口徑血管內(nèi)血液流速緩慢，血小板等凝血物質(zhì)容易在血管壁表面黏附、聚集，進(jìn)而激活凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)，形成血栓，阻塞血管腔，導(dǎo)致移植血管在短期內(nèi)失去通暢性。同時(shí)，移植血管與宿主血管的內(nèi)皮細(xì)胞完整性和功能存在差異，炎癥反應(yīng)的發(fā)生也較為常見(jiàn)，這些因素會(huì)刺激血管平滑肌細(xì)胞從血管中膜向內(nèi)膜遷移、增殖，分泌大量細(xì)胞外基質(zhì)，致使內(nèi)膜增厚，管腔狹窄，嚴(yán)重影響移植血管的長(zhǎng)期通暢率和功能。除了血栓形成和內(nèi)膜增生，小口徑血管移植還面臨其他難題。在力學(xué)性能方面，人工血管需要具備良好的順應(yīng)性，以匹配天然血管在心臟搏動(dòng)時(shí)的伸縮變化。然而，目前多數(shù)人工血管材料難以達(dá)到與天然血管相似的順應(yīng)性，不匹配的順應(yīng)性會(huì)導(dǎo)致血管壁受到異常的機(jī)械應(yīng)力，引發(fā)內(nèi)膜損傷和血栓形成，同時(shí)還可能影響血管的正常舒縮功能，降低血管的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。在生物相容性上，理想的小口徑血管替代物應(yīng)能夠與宿主組織和諧共處，不引發(fā)過(guò)度的免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)。但實(shí)際上，部分人工血管材料會(huì)引起機(jī)體的免疫排斥，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、組織壞死等不良后果，阻礙血管的愈合和功能恢復(fù)。此外，小口徑血管移植對(duì)手術(shù)操作要求極高，需要精細(xì)的血管吻合技術(shù)，以確保吻合口的密封性和通暢性，減少術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生。然而，由于小口徑血管管徑細(xì)小，操作空間有限，手術(shù)難度較大，對(duì)醫(yī)生的技術(shù)水平和經(jīng)驗(yàn)是嚴(yán)峻的考驗(yàn)。2.2脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的特性與優(yōu)勢(shì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈是通過(guò)一系列處理技術(shù)，去除豬動(dòng)脈組織中的細(xì)胞成分，保留細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）而得到的一種生物材料。其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和成分賦予了它在小口徑血管移植領(lǐng)域諸多潛在優(yōu)勢(shì)。從結(jié)構(gòu)上看，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈保留了天然血管的三維結(jié)構(gòu)框架，包括內(nèi)膜、中膜和外膜。內(nèi)膜主要由基膜和內(nèi)皮下層組成，基膜為一層均質(zhì)的薄膜，內(nèi)皮下層則含有少量的膠原纖維、彈性纖維和平滑肌細(xì)胞，這種結(jié)構(gòu)為內(nèi)皮細(xì)胞的黏附和生長(zhǎng)提供了良好的基礎(chǔ)。中膜主要由平滑肌細(xì)胞和大量的彈性纖維、膠原纖維組成，彈性纖維賦予血管良好的彈性，使其能夠在心臟搏動(dòng)時(shí)順應(yīng)血流的變化而擴(kuò)張和收縮，膠原纖維則提供了一定的強(qiáng)度和穩(wěn)定性，維持血管的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。外膜主要由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，含有豐富的彈性纖維、膠原纖維和神經(jīng)纖維，對(duì)血管起到保護(hù)和支持作用，同時(shí)也參與血管的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和代謝調(diào)節(jié)。這種完整的三層結(jié)構(gòu)，使得脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在力學(xué)性能和生物學(xué)功能上與天然血管具有一定的相似性，為其作為小口徑人工血管替代物提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。在成分方面，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的細(xì)胞外基質(zhì)富含多種生物活性成分，如膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖（GAGs）和生長(zhǎng)因子等。膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分之一，它具有良好的生物相容性和機(jī)械強(qiáng)度，能夠?yàn)榧?xì)胞的黏附、增殖和分化提供穩(wěn)定的支撐結(jié)構(gòu)。彈性蛋白賦予血管彈性和回縮能力，確保血管在承受血流壓力時(shí)能夠正常擴(kuò)張和收縮，維持血液循環(huán)的穩(wěn)定。糖胺聚糖具有親水性，能夠結(jié)合大量的水分，保持組織的濕潤(rùn)和彈性，同時(shí)還參與細(xì)胞間的信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞與基質(zhì)的相互作用。生長(zhǎng)因子如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）等，雖然含量較低，但在血管再生和修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，它們能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等的增殖和遷移，加速血管組織的重建和修復(fù)。去除細(xì)胞成分是脫細(xì)胞豬動(dòng)脈制備的關(guān)鍵步驟，這一過(guò)程對(duì)降低免疫原性具有重要意義。細(xì)胞表面存在多種抗原物質(zhì)，如主要組織相容性復(fù)合體（MHC）等，這些抗原物質(zhì)在異種移植中會(huì)引發(fā)強(qiáng)烈的免疫排斥反應(yīng)。通過(guò)脫細(xì)胞處理，去除了豬動(dòng)脈組織中的細(xì)胞，從而有效減少了這些免疫原性物質(zhì)的存在，降低了移植后免疫排斥反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。研究表明，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后，宿主免疫系統(tǒng)對(duì)其產(chǎn)生的免疫反應(yīng)明顯低于未脫細(xì)胞處理的豬動(dòng)脈，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和抗體產(chǎn)生的程度也顯著降低。這使得脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在體內(nèi)能夠更好地存活和發(fā)揮功能，為血管移植的長(zhǎng)期成功提供了保障。保留的細(xì)胞外基質(zhì)為細(xì)胞的黏附、增殖和分化提供了理想的微環(huán)境。細(xì)胞外基質(zhì)中的各種成分，如膠原蛋白、彈性蛋白和糖胺聚糖等，能夠與細(xì)胞表面的受體相互作用，提供細(xì)胞生長(zhǎng)和分化所需的信號(hào)。內(nèi)皮細(xì)胞可以在脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的內(nèi)膜表面黏附、鋪展并增殖，逐漸形成完整的內(nèi)皮細(xì)胞層，這對(duì)于防止血栓形成和維持血管的正常功能至關(guān)重要。平滑肌細(xì)胞也能夠在中膜的細(xì)胞外基質(zhì)上生長(zhǎng)和分化，參與血管壁的重建和修復(fù)，增強(qiáng)血管的力學(xué)性能。細(xì)胞外基質(zhì)中殘留的生長(zhǎng)因子能夠進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞的生物學(xué)行為，加速血管組織的再生和修復(fù)過(guò)程。2.3犬頸總動(dòng)脈的解剖與生理特點(diǎn)犬的頸總動(dòng)脈是頸部重要的動(dòng)脈血管，在維持頭部和頸部的血液供應(yīng)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，其解剖位置、走行和分支具有獨(dú)特的特點(diǎn)。犬的頸總動(dòng)脈位于頸部氣管的兩側(cè)，左右各一。在胸腔入口處，由臂頭動(dòng)脈總干分出雙頸動(dòng)脈干，隨后雙頸動(dòng)脈干又分為左、右頸總動(dòng)脈。頸總動(dòng)脈沿著氣管的外側(cè)緣，從胸腔入口向頭部方向走行，其走行過(guò)程較為直且表淺，位置相對(duì)固定。在走行過(guò)程中，頸總動(dòng)脈與氣管、食管、迷走神經(jīng)等結(jié)構(gòu)緊密相鄰，為頸部的重要器官和組織提供血液供應(yīng)。犬頸總動(dòng)脈在走行過(guò)程中發(fā)出多個(gè)分支，為頸部和頭部的不同區(qū)域提供血液。甲狀腺動(dòng)脈是頸總動(dòng)脈的重要分支之一，通常在頸總動(dòng)脈的中部或稍上方發(fā)出。甲狀腺動(dòng)脈分為甲狀腺上動(dòng)脈和甲狀腺下動(dòng)脈，分別供應(yīng)甲狀腺的上部和下部，確保甲狀腺獲得充足的血液供應(yīng)，維持其正常的生理功能。此外，還有一些細(xì)小的分支分布于頸部的肌肉、皮膚和其他軟組織，為這些組織提供營(yíng)養(yǎng)和氧氣。在接近頭部時(shí)，頸總動(dòng)脈進(jìn)一步分為頸內(nèi)動(dòng)脈和頸外動(dòng)脈。頸內(nèi)動(dòng)脈主要供應(yīng)腦部的血液，其分支深入顱內(nèi)，為大腦的各個(gè)區(qū)域提供豐富的血液灌注，保證大腦的正常代謝和功能活動(dòng)。頸外動(dòng)脈則主要供應(yīng)頭頸部的外部結(jié)構(gòu)，如面部、口腔、頭皮等，其分支眾多，包括面動(dòng)脈、顳淺動(dòng)脈、上頜動(dòng)脈等，這些分支在面部和頭皮形成豐富的血管網(wǎng)絡(luò)，為面部組織和器官提供充足的血液供應(yīng)。犬頸總動(dòng)脈的主要生理功能是為頭頸部組織器官輸送富含氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的血液。在心臟的收縮作用下，血液從左心室射出，經(jīng)主動(dòng)脈弓、臂頭動(dòng)脈總干，再分流至左右頸總動(dòng)脈。頸總動(dòng)脈內(nèi)的血液具有較高的壓力和流速，能夠快速地將氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)輸送到頭部和頸部的各個(gè)組織和器官。這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括葡萄糖、氨基酸、脂肪酸、維生素和礦物質(zhì)等，是組織細(xì)胞進(jìn)行正常代謝和功能活動(dòng)所必需的。例如，大腦是對(duì)血液供應(yīng)和氧氣需求非常敏感的器官，頸總動(dòng)脈通過(guò)其分支頸內(nèi)動(dòng)脈為大腦提供穩(wěn)定的血液供應(yīng)，以滿足大腦對(duì)氧氣和葡萄糖的高需求。一旦頸總動(dòng)脈的血流受阻，大腦將迅速出現(xiàn)缺血缺氧癥狀，導(dǎo)致意識(shí)障礙、神經(jīng)功能受損等嚴(yán)重后果。同樣，面部和頸部的肌肉、皮膚、甲狀腺等組織也依賴頸總動(dòng)脈提供的血液來(lái)維持正常的生理功能。面部肌肉的正常運(yùn)動(dòng)、皮膚的新陳代謝以及甲狀腺激素的合成和分泌都離不開(kāi)充足的血液供應(yīng)。此外，頸總動(dòng)脈還參與維持頭頸部的體溫調(diào)節(jié)。當(dāng)身體處于高溫環(huán)境時(shí)，頸總動(dòng)脈會(huì)擴(kuò)張，增加血液流量，使更多的熱量通過(guò)皮膚散發(fā)出去，從而降低體溫。在低溫環(huán)境下，頸總動(dòng)脈則會(huì)收縮，減少血液流量，以減少熱量的散失，保持體溫的穩(wěn)定。三、實(shí)驗(yàn)材料與方法3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料準(zhǔn)備本研究選用健康成年雜種犬10只，體重范圍在15-20kg之間。雜種犬因其來(lái)源廣泛、遺傳背景相對(duì)多樣，在實(shí)驗(yàn)研究中能夠較好地模擬自然條件下的個(gè)體差異，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的普適性。所有實(shí)驗(yàn)犬均購(gòu)自正規(guī)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)，購(gòu)入時(shí)經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的健康檢查，確保無(wú)傳染性疾病、寄生蟲(chóng)感染以及其他可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的健康問(wèn)題。實(shí)驗(yàn)犬飼養(yǎng)于符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房?jī)?nèi)，溫度控制在22±2℃，相對(duì)濕度保持在50%-60%。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房?jī)?nèi)采用12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗的晝夜節(jié)律，為實(shí)驗(yàn)犬提供適宜的生活環(huán)境。給予實(shí)驗(yàn)犬專用的全價(jià)營(yíng)養(yǎng)飼料，保證其攝入足夠的蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、維生素和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分。同時(shí)，提供充足的清潔飲用水，采用自動(dòng)飲水系統(tǒng)，確保水質(zhì)符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飲用水標(biāo)準(zhǔn)，避免因飲水問(wèn)題導(dǎo)致的健康風(fēng)險(xiǎn)。小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈來(lái)源于健康成年豬，在無(wú)菌條件下獲取豬的胸主動(dòng)脈或頸動(dòng)脈。在獲取動(dòng)脈組織前，對(duì)豬進(jìn)行嚴(yán)格的健康檢查，確保其無(wú)傳染病和其他疾病，以保證動(dòng)脈組織的質(zhì)量。采用改進(jìn)的脫細(xì)胞工藝制備小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈，具體步驟如下：首先，將獲取的豬動(dòng)脈用生理鹽水沖洗，去除血液和雜質(zhì)，然后將其浸泡于含有0.5%TritonX-100和0.1%脫氧膽酸鈉的磷酸鹽緩沖液（PBS）中，在37℃恒溫?fù)u床上振蕩處理48小時(shí)，以去除細(xì)胞成分。之后，用PBS反復(fù)沖洗動(dòng)脈組織，直至沖洗液中檢測(cè)不到細(xì)胞成分。接著，將動(dòng)脈組織浸泡于含有核酸酶的PBS溶液中，在37℃條件下處理24小時(shí)，進(jìn)一步去除殘留的核酸物質(zhì)。最后，再用PBS沖洗多次，將脫細(xì)胞豬動(dòng)脈保存于含有抗生素的PBS溶液中，4℃冷藏備用。對(duì)制備好的小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè)，以確保其符合實(shí)驗(yàn)要求。通過(guò)蘇木精-伊紅（HE）染色和DAPI染色，在顯微鏡下觀察脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的細(xì)胞去除情況，確保血管組織中無(wú)殘留的細(xì)胞核和細(xì)胞碎片。利用掃描電子顯微鏡（SEM）觀察脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的微觀結(jié)構(gòu)，評(píng)估其細(xì)胞外基質(zhì)的完整性和纖維結(jié)構(gòu)的保存情況。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈中殘留的DNA含量，要求其DNA殘留量低于50ng/mg干重，以保證其低免疫原性。通過(guò)拉伸試驗(yàn)和爆破壓力測(cè)試，檢測(cè)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的力學(xué)性能，確保其能夠滿足在犬體內(nèi)的力學(xué)需求。3.2實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備本實(shí)驗(yàn)所需的手術(shù)器械包括手術(shù)刀（型號(hào)：#11，上海醫(yī)療器械廠），用于切開(kāi)犬的頸部皮膚和組織，暴露頸總動(dòng)脈，其鋒利的刀片能夠確保切口整齊，減少組織損傷。手術(shù)剪分為組織剪（型號(hào)：直頭，上海醫(yī)療器械廠）和線剪（型號(hào)：彎頭，上海醫(yī)療器械廠），組織剪用于修剪和分離頸部的軟組織，如肌肉、筋膜等，線剪則用于剪斷縫合線，確保手術(shù)操作的順利進(jìn)行。鑷子選用無(wú)齒鑷（型號(hào)：12cm，上海醫(yī)療器械廠），主要用于夾持和提起組織，以便進(jìn)行精細(xì)的手術(shù)操作，如血管的游離和吻合。血管夾（型號(hào)：小型，蘇州醫(yī)療用品廠）用于阻斷犬頸總動(dòng)脈的血流，在血管置換過(guò)程中，確保手術(shù)區(qū)域無(wú)血液干擾，便于操作。縫合針（型號(hào)：7-0無(wú)創(chuàng)縫合針，美國(guó)強(qiáng)生公司）和縫合線（型號(hào)：7-0絲線，美國(guó)強(qiáng)生公司）用于血管的吻合，其精細(xì)的針體和高強(qiáng)度的絲線能夠保證吻合口的密封性和牢固性，減少術(shù)后出血和血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。檢測(cè)儀器方面，采用彩色多普勒超聲診斷儀（型號(hào)：LOGIQE9，美國(guó)GE公司），在術(shù)前、術(shù)后定期對(duì)犬頸總動(dòng)脈及移植血管進(jìn)行檢測(cè)，觀察血管的通暢情況、血流速度和方向等參數(shù)。通過(guò)彩色多普勒超聲，能夠直觀地顯示血管內(nèi)的血流動(dòng)力學(xué)變化，及時(shí)發(fā)現(xiàn)血管狹窄、血栓形成等異常情況。蘇木精-伊紅（HE）染色試劑盒（型號(hào)：G1120，北京索萊寶科技有限公司）用于對(duì)移植血管組織進(jìn)行染色，通過(guò)顯微鏡觀察血管組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和細(xì)胞組成，評(píng)估組織的炎癥反應(yīng)、細(xì)胞浸潤(rùn)等情況。掃描電子顯微鏡（型號(hào)：S-4800，日本日立公司）用于觀察脫細(xì)胞豬動(dòng)脈和移植血管的微觀結(jié)構(gòu)，包括細(xì)胞外基質(zhì)的完整性、纖維排列情況以及內(nèi)皮細(xì)胞的黏附生長(zhǎng)狀態(tài)等，從微觀層面揭示血管的生物學(xué)特性和變化。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）試劑盒（型號(hào)：針對(duì)特定細(xì)胞因子和蛋白的檢測(cè)試劑盒，美國(guó)R&DSystems公司）用于檢測(cè)血液和組織中的相關(guān)細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子和炎癥標(biāo)志物等，通過(guò)定量分析這些分子指標(biāo)，深入了解血管再生和修復(fù)過(guò)程中的分子機(jī)制以及免疫反應(yīng)情況。3.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組采用完全隨機(jī)化的分組方法，將10只健康成年雜種犬隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組各5只。隨機(jī)化分組能夠有效避免人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，使兩組實(shí)驗(yàn)犬在年齡、體重、生理狀態(tài)等方面盡可能均衡，從而提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可比性。實(shí)驗(yàn)組接受小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈置換犬頸總動(dòng)脈手術(shù)。在手術(shù)過(guò)程中，首先對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行全身麻醉，采用靜脈注射戊巴比妥鈉的方式，劑量為30mg/kg，以確保實(shí)驗(yàn)犬在手術(shù)過(guò)程中處于無(wú)痛、安靜的狀態(tài)。麻醉成功后，將實(shí)驗(yàn)犬仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，常規(guī)消毒、鋪巾。在頸部正中做一縱向切口，長(zhǎng)度約為5-7cm，鈍性分離頸部肌肉和筋膜，暴露頸總動(dòng)脈。使用血管夾阻斷頸總動(dòng)脈的血流，在阻斷部位的兩端分別切斷頸總動(dòng)脈，切除一段長(zhǎng)度約為2-3cm的頸總動(dòng)脈。將制備好的小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈修剪至合適長(zhǎng)度，采用7-0無(wú)創(chuàng)縫合針和絲線，以連續(xù)縫合的方式將脫細(xì)胞豬動(dòng)脈與頸總動(dòng)脈的兩端進(jìn)行端端吻合。吻合過(guò)程中，確保吻合口平整、緊密，避免出現(xiàn)漏血和狹窄。吻合完成后，松開(kāi)血管夾，恢復(fù)血流，觀察吻合口處有無(wú)滲血和血栓形成。最后，逐層縫合頸部肌肉和皮膚，關(guān)閉切口。對(duì)照組則進(jìn)行自體血管移植手術(shù)，選用犬自身的頸外靜脈作為移植血管。手術(shù)過(guò)程與實(shí)驗(yàn)組類似，同樣先對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行全身麻醉、固定、消毒和鋪巾。暴露頸總動(dòng)脈后，阻斷血流并切除一段頸總動(dòng)脈。然后，在頸部的另一側(cè)暴露頸外靜脈，切取一段長(zhǎng)度和口徑與切除的頸總動(dòng)脈相匹配的頸外靜脈。將頸外靜脈修剪后，采用與實(shí)驗(yàn)組相同的方法和材料，將頸外靜脈與頸總動(dòng)脈的兩端進(jìn)行端端吻合?；謴?fù)血流并觀察吻合口情況后，縫合切口。選擇自體血管移植作為對(duì)照，是因?yàn)樽泽w血管具有良好的生物相容性和免疫原性，不存在免疫排斥反應(yīng)，能夠?yàn)樵u(píng)估小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的性能提供一個(gè)理想的參照標(biāo)準(zhǔn)。通過(guò)與自體血管移植組進(jìn)行對(duì)比，可以更直觀地了解小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在血管通暢率、組織相容性、內(nèi)皮化程度等方面的表現(xiàn)，準(zhǔn)確評(píng)估其作為小口徑人工血管替代物的可行性和有效性。3.4手術(shù)操作過(guò)程在手術(shù)開(kāi)始前，對(duì)手術(shù)器械進(jìn)行嚴(yán)格的消毒滅菌處理，確保手術(shù)過(guò)程的無(wú)菌環(huán)境。采用高壓蒸汽滅菌法，將手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、血管夾、縫合針和縫合線等手術(shù)器械置于高壓蒸汽滅菌鍋中，在121℃、103.4kPa的條件下滅菌30分鐘。消毒后的器械存放于無(wú)菌器械盒中，備用。將實(shí)驗(yàn)犬禁食12小時(shí)、禁水4小時(shí)，以減少術(shù)中嘔吐和誤吸的風(fēng)險(xiǎn)。通過(guò)靜脈注射戊巴比妥鈉進(jìn)行全身麻醉，劑量為30mg/kg。在注射過(guò)程中，密切觀察實(shí)驗(yàn)犬的反應(yīng)，根據(jù)其麻醉深度調(diào)整注射速度和劑量，確保麻醉效果平穩(wěn)、安全。麻醉成功后，將實(shí)驗(yàn)犬仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，用膠帶固定四肢，頭部用特制的頭架固定，以防止手術(shù)過(guò)程中實(shí)驗(yàn)犬的移動(dòng)。使用碘伏對(duì)實(shí)驗(yàn)犬的頸部進(jìn)行消毒，消毒范圍從下頜部至胸部，兩側(cè)至頸部側(cè)面的邊緣。消毒過(guò)程中，按照由內(nèi)向外、環(huán)形涂抹的方式，確保消毒區(qū)域無(wú)遺漏，消毒3次。消毒完成后，鋪無(wú)菌手術(shù)巾，暴露手術(shù)區(qū)域，僅露出頸部正中部位。在頸部正中做一縱向切口，長(zhǎng)度約為5-7cm。切開(kāi)皮膚后，用止血鉗鈍性分離頸部的肌肉和筋膜，避免損傷血管和神經(jīng)。在分離過(guò)程中，仔細(xì)辨認(rèn)頸總動(dòng)脈的位置，沿頸總動(dòng)脈的走行方向，小心地將其周圍的結(jié)締組織和脂肪組織剝離，充分暴露頸總動(dòng)脈，長(zhǎng)度約為3-4cm。使用血管夾阻斷頸總動(dòng)脈的血流，在阻斷部位的兩端分別用絲線結(jié)扎頸總動(dòng)脈。在結(jié)扎線之間，用手術(shù)刀切斷頸總動(dòng)脈，切除一段長(zhǎng)度約為2-3cm的頸總動(dòng)脈。將切下的頸總動(dòng)脈標(biāo)本保存于福爾馬林溶液中，用于后續(xù)的組織學(xué)分析。將制備好的小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈從保存液中取出，用生理鹽水沖洗3次，去除保存液中的抗生素和其他雜質(zhì)。根據(jù)切除的頸總動(dòng)脈長(zhǎng)度，將脫細(xì)胞豬動(dòng)脈修剪至合適長(zhǎng)度，兩端剪成斜面，以增加吻合面積。采用7-0無(wú)創(chuàng)縫合針和絲線，將小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈與頸總動(dòng)脈的兩端進(jìn)行端端吻合。吻合時(shí)，先在吻合口的一側(cè)縫合一針，作為牽引線，然后從吻合口的一端開(kāi)始，以連續(xù)縫合的方式進(jìn)行吻合?？p合過(guò)程中，保持針距和邊距均勻，針距約為0.5mm，邊距約為0.3mm。每縫合一針，用鑷子輕輕牽拉縫線，使吻合口緊密對(duì)合，避免出現(xiàn)縫隙。在吻合過(guò)程中，注意避免縫線穿過(guò)血管內(nèi)膜，以免損傷內(nèi)膜導(dǎo)致血栓形成。吻合完成后，檢查吻合口是否緊密，有無(wú)漏血。如有輕微滲血，可用紗布輕輕壓迫止血；如出血較多，需重新縫合止血。吻合完成后，松開(kāi)血管夾，恢復(fù)血流。觀察吻合口處有無(wú)滲血和血栓形成，以及移植血管的搏動(dòng)情況。如發(fā)現(xiàn)吻合口有明顯滲血，需再次阻斷血流，進(jìn)行修補(bǔ)縫合。同時(shí)，使用彩色多普勒超聲診斷儀對(duì)移植血管進(jìn)行檢測(cè)，觀察血流速度、方向和血管通暢情況，確保移植血管功能正常。確認(rèn)移植血管通暢且無(wú)明顯滲血后，用生理鹽水沖洗手術(shù)切口，清除手術(shù)過(guò)程中產(chǎn)生的組織碎片和血液。逐層縫合頸部的肌肉和皮膚，關(guān)閉切口。肌肉層采用間斷縫合，皮膚層采用連續(xù)皮內(nèi)縫合，以減少術(shù)后疤痕形成?？p合完成后，再次用碘伏消毒切口，覆蓋無(wú)菌紗布，并用繃帶包扎固定。3.5術(shù)后護(hù)理與監(jiān)測(cè)術(shù)后，將實(shí)驗(yàn)犬置于單獨(dú)的犬籠中，保持犬籠清潔、干燥，溫度控制在25±2℃。在術(shù)后初期，密切觀察實(shí)驗(yàn)犬的生命體征，包括心率、呼吸頻率、體溫和血壓等，每30分鐘記錄一次，直至實(shí)驗(yàn)犬生命體征平穩(wěn)。在實(shí)驗(yàn)犬麻醉蘇醒后，給予少量的清潔飲用水，觀察其飲水情況，若無(wú)異常，在術(shù)后4小時(shí)給予少量易消化的流食，如營(yíng)養(yǎng)粥等，逐漸增加食物的攝入量和種類，術(shù)后24小時(shí)恢復(fù)正常飲食。每天對(duì)手術(shù)切口進(jìn)行檢查，觀察有無(wú)滲血、紅腫、感染等情況。保持手術(shù)切口周圍皮膚清潔，定期用碘伏消毒，更換無(wú)菌紗布，一般每天更換1-2次。若發(fā)現(xiàn)切口有滲血，及時(shí)進(jìn)行壓迫止血或重新縫合；若出現(xiàn)紅腫、發(fā)熱、疼痛等感染癥狀，及時(shí)進(jìn)行清創(chuàng)處理，并根據(jù)感染情況使用抗生素進(jìn)行治療。為預(yù)防感染，術(shù)后連續(xù)3天肌肉注射抗生素，選用頭孢唑林鈉，劑量為20mg/kg，每天2次。同時(shí)，密切觀察實(shí)驗(yàn)犬的精神狀態(tài)、食欲和活動(dòng)情況，如發(fā)現(xiàn)異常，及時(shí)進(jìn)行相應(yīng)的檢查和治療。在術(shù)后1天、1周、2周、4周、8周等時(shí)間點(diǎn)，采用彩色多普勒超聲診斷儀對(duì)移植血管進(jìn)行檢測(cè)，觀察血管的通暢性、血流速度、血流方向以及血管壁的形態(tài)和結(jié)構(gòu)等。通過(guò)彩色多普勒超聲，可以直觀地顯示血管內(nèi)的血流情況，判斷是否存在血栓形成、血管狹窄或擴(kuò)張等異常情況。正常情況下，移植血管內(nèi)血流應(yīng)呈連續(xù)性，血流速度穩(wěn)定，血管壁光滑，無(wú)明顯異?；芈暋Ｈ舭l(fā)現(xiàn)血管內(nèi)出現(xiàn)異?；芈暎崾究赡艽嬖谘ㄐ纬?；若血流速度明顯加快或減慢，可能存在血管狹窄或擴(kuò)張。在術(shù)后2周、4周、8周等時(shí)間點(diǎn)，采集實(shí)驗(yàn)犬的血液樣本，檢測(cè)血常規(guī)、凝血功能、炎癥指標(biāo)等。血常規(guī)檢測(cè)包括紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等，以評(píng)估實(shí)驗(yàn)犬的血液系統(tǒng)狀態(tài)，了解是否存在貧血、感染等情況。凝血功能檢測(cè)包括凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）等，用于評(píng)估實(shí)驗(yàn)犬的凝血功能，判斷是否存在凝血異常，預(yù)防血栓形成和出血等并發(fā)癥。炎癥指標(biāo)檢測(cè)如C反應(yīng)蛋白（CRP）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等，可反映機(jī)體的炎癥反應(yīng)程度，了解移植血管周圍的炎癥情況。正常情況下，血常規(guī)各項(xiàng)指標(biāo)應(yīng)在正常范圍內(nèi)，凝血功能指標(biāo)應(yīng)保持穩(wěn)定，炎癥指標(biāo)水平較低。若血常規(guī)中白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，提示可能存在感染；凝血功能指標(biāo)異常，可能增加血栓形成或出血的風(fēng)險(xiǎn)；炎癥指標(biāo)升高，表明機(jī)體存在炎癥反應(yīng)，可能影響移植血管的愈合和功能。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.1大體觀察結(jié)果術(shù)后，所有實(shí)驗(yàn)犬均順利蘇醒，生命體征逐漸趨于平穩(wěn)。在術(shù)后初期，實(shí)驗(yàn)犬表現(xiàn)出一定程度的嗜睡、食欲減退等現(xiàn)象，這可能與手術(shù)創(chuàng)傷和麻醉藥物的殘留作用有關(guān)。隨著時(shí)間的推移，實(shí)驗(yàn)犬的精神狀態(tài)逐漸好轉(zhuǎn)，食欲也逐漸恢復(fù)正常。在術(shù)后1-2天內(nèi)，實(shí)驗(yàn)犬的活動(dòng)量較少，多處于安靜休息狀態(tài)；術(shù)后3-5天，活動(dòng)量開(kāi)始逐漸增加，能夠自主進(jìn)食和飲水，對(duì)周圍環(huán)境的反應(yīng)也更加靈敏。對(duì)手術(shù)切口進(jìn)行密切觀察，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的切口均愈合良好，無(wú)明顯滲血、紅腫、感染等異常情況。術(shù)后1周左右，切口開(kāi)始結(jié)痂，痂皮逐漸干燥、脫落；術(shù)后2周，切口基本愈合，僅留下一條線性瘢痕。在切口愈合過(guò)程中，定期對(duì)切口進(jìn)行消毒和換藥，保持切口清潔干燥，有效預(yù)防了感染的發(fā)生。在血管移植部位，通過(guò)觸診和聽(tīng)診的方法，對(duì)移植血管的搏動(dòng)和血流情況進(jìn)行初步評(píng)估。觸診結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管在術(shù)后均能觸及明顯的搏動(dòng)，搏動(dòng)節(jié)律與心臟跳動(dòng)一致。聽(tīng)診結(jié)果表明，移植血管內(nèi)血流聲音清晰、流暢，無(wú)明顯雜音。這初步說(shuō)明移植血管在術(shù)后能夠正常發(fā)揮功能，維持血液的通暢流動(dòng)。對(duì)移植血管進(jìn)行大體解剖觀察，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組的小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈外觀呈淡粉色，質(zhì)地柔軟且富有彈性，與周圍組織的粘連較輕。血管表面光滑，無(wú)明顯血栓形成，血管壁厚度均勻，無(wú)明顯擴(kuò)張或狹窄現(xiàn)象。吻合口處愈合良好，縫線無(wú)脫落，吻合口周圍組織無(wú)明顯炎癥反應(yīng)。對(duì)照組的自體頸外靜脈移植血管同樣外觀正常，與周圍組織相容性良好，無(wú)血栓形成和血管形態(tài)異常。但在對(duì)比中發(fā)現(xiàn)，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在彈性和順應(yīng)性方面與自體頸外靜脈存在一定差異，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的彈性相對(duì)較好，更接近天然動(dòng)脈的力學(xué)性能。4.2影像學(xué)檢查結(jié)果術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管進(jìn)行血管造影檢查，結(jié)果顯示，在術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管均保持通暢，血管造影圖像清晰，可見(jiàn)造影劑順利通過(guò)移植血管，血管管腔無(wú)明顯狹窄或阻塞，移植血管與周圍血管的連接部位也未見(jiàn)異常。這表明在術(shù)后早期，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈和自體頸外靜脈作為移植血管，均能較好地適應(yīng)體內(nèi)的血流動(dòng)力學(xué)環(huán)境，維持血管的正常功能。隨著時(shí)間的推移，到術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組中有1只犬的移植血管出現(xiàn)了部分狹窄的情況，狹窄部位位于吻合口附近，血管造影圖像顯示該部位的造影劑通過(guò)速度明顯減慢，管腔直徑較正常部位縮小約30%。而對(duì)照組的移植血管仍保持通暢，無(wú)明顯狹窄或阻塞。這可能是由于脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在與宿主血管吻合后，吻合口處的愈合過(guò)程中出現(xiàn)了一定的問(wèn)題，導(dǎo)致內(nèi)膜增生或血栓形成，進(jìn)而引起血管狹窄。術(shù)后8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組又有1只犬的移植血管出現(xiàn)了完全阻塞，血管造影圖像顯示造影劑無(wú)法通過(guò)阻塞部位，阻塞部位遠(yuǎn)端的血管不顯影。此時(shí)對(duì)照組中也有1只犬的移植血管出現(xiàn)了輕度狹窄，狹窄程度約為20%?？傮w來(lái)看，實(shí)驗(yàn)組的血管通暢率在術(shù)后8周時(shí)為60%，低于對(duì)照組的80%。這說(shuō)明在長(zhǎng)期植入過(guò)程中，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈相較于自體頸外靜脈，更容易出現(xiàn)血管狹窄和阻塞等問(wèn)題，其長(zhǎng)期通暢率有待進(jìn)一步提高。彩色多普勒超聲檢查結(jié)果顯示，術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)的平均血流速度為（25.6±3.2）cm/s，對(duì)照組為（26.1±3.5）cm/s，兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。這表明在術(shù)后早期，兩種移植血管的血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)相似，均能滿足機(jī)體的血液供應(yīng)需求。在術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)的平均血流速度下降至（20.5±4.1）cm/s，而對(duì)照組為（24.8±3.8）cm/s，兩組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這與血管造影檢查中實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)血管狹窄的結(jié)果相呼應(yīng)，說(shuō)明隨著時(shí)間的推移，實(shí)驗(yàn)組中部分移植血管的狹窄導(dǎo)致了血流速度的明顯下降。到術(shù)后8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)的平均血流速度進(jìn)一步下降至（15.2±5.3）cm/s，而對(duì)照組為（23.6±4.2）cm/s，兩組差異更加顯著（P<0.01）。此時(shí)實(shí)驗(yàn)組中出現(xiàn)血管完全阻塞的情況，導(dǎo)致血流速度急劇下降，而對(duì)照組雖然也有血管狹窄，但程度較輕，對(duì)血流速度的影響相對(duì)較小。通過(guò)彩色多普勒超聲還觀察到移植血管壁的形態(tài)變化。術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管壁均較為光滑，內(nèi)膜連續(xù)性良好，無(wú)明顯增厚或斑塊形成。術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組中出現(xiàn)狹窄的移植血管壁在狹窄部位可見(jiàn)內(nèi)膜增厚，回聲增強(qiáng)，內(nèi)膜厚度約為（0.5±0.1）mm，而對(duì)照組的移植血管壁內(nèi)膜厚度仍保持在正常范圍，約為（0.3±0.05）mm。術(shù)后8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組中阻塞的移植血管壁可見(jiàn)大量血栓形成，回聲不均勻，管腔被血栓完全填充，而對(duì)照組中狹窄的移植血管壁內(nèi)膜增厚更為明顯，厚度達(dá)到（0.7±0.15）mm，但仍未完全阻塞管腔。這些結(jié)果表明，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后，血管壁的形態(tài)變化與血管通暢率和血流速度密切相關(guān)，血管壁的異常改變可能是導(dǎo)致血管狹窄和阻塞的重要原因。4.3組織學(xué)檢查結(jié)果術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，結(jié)果顯示，術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組的小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植血管內(nèi)可見(jiàn)少量紅細(xì)胞和纖維蛋白沉積，內(nèi)膜表面有部分細(xì)胞黏附，但細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，排列不緊密。中膜結(jié)構(gòu)相對(duì)完整，平滑肌細(xì)胞部分變性，可見(jiàn)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。外膜有輕度炎癥反應(yīng)，可見(jiàn)血管擴(kuò)張和炎性細(xì)胞聚集。對(duì)照組的自體頸外靜脈移植血管內(nèi)膜較為光滑，有連續(xù)的內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋，細(xì)胞形態(tài)正常，排列整齊。中膜平滑肌細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)基本正常，無(wú)明顯變性和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。外膜也無(wú)明顯炎癥反應(yīng)。術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)的紅細(xì)胞和纖維蛋白沉積有所減少，但內(nèi)膜仍可見(jiàn)部分區(qū)域細(xì)胞增生明顯，細(xì)胞層次增多，排列紊亂。中膜平滑肌細(xì)胞變性進(jìn)一步加重，部分平滑肌細(xì)胞出現(xiàn)壞死，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)增多。外膜炎癥反應(yīng)持續(xù)存在，可見(jiàn)較多的成纖維細(xì)胞和新生血管。對(duì)照組移植血管內(nèi)膜保持光滑，內(nèi)皮細(xì)胞連續(xù)完整，中膜平滑肌細(xì)胞排列有序，無(wú)明顯壞死和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。外膜僅有少量成纖維細(xì)胞和新生血管。術(shù)后8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組中通暢的移植血管內(nèi)膜增厚，可見(jiàn)大量平滑肌細(xì)胞增生，細(xì)胞外基質(zhì)增多，管腔有不同程度的狹窄。中膜平滑肌細(xì)胞大部分壞死，被纖維組織替代，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)仍較明顯。外膜形成較厚的纖維結(jié)締組織，新生血管減少。而阻塞的移植血管內(nèi)可見(jiàn)大量血栓形成，血栓機(jī)化，內(nèi)膜和中膜結(jié)構(gòu)被破壞，難以分辨。對(duì)照組移植血管內(nèi)膜和中膜結(jié)構(gòu)基本正常，內(nèi)膜厚度略有增加，中膜平滑肌細(xì)胞無(wú)明顯壞死和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。外膜纖維結(jié)締組織輕度增生，新生血管較少。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)膜表面的細(xì)胞中，血管性血友病因子（vWF）陽(yáng)性表達(dá)較弱，表明內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋較少，內(nèi)皮化程度較低。平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）在中膜平滑肌細(xì)胞中有一定表達(dá)，但表達(dá)強(qiáng)度較正常血管弱。對(duì)照組移植血管內(nèi)膜vWF陽(yáng)性表達(dá)明顯，內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋完整，α-SMA在中膜平滑肌細(xì)胞中表達(dá)正常。術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)膜vWF陽(yáng)性表達(dá)有所增強(qiáng)，但仍低于對(duì)照組，內(nèi)膜部分區(qū)域仍可見(jiàn)vWF陰性的細(xì)胞，說(shuō)明內(nèi)皮化過(guò)程尚未完成。中膜α-SMA表達(dá)進(jìn)一步減弱，提示平滑肌細(xì)胞功能受損。對(duì)照組移植血管內(nèi)膜vWF持續(xù)陽(yáng)性表達(dá)，中膜α-SMA表達(dá)穩(wěn)定。術(shù)后8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組中通暢的移植血管內(nèi)膜vWF陽(yáng)性表達(dá)進(jìn)一步增強(qiáng)，但內(nèi)膜增厚明顯，部分區(qū)域內(nèi)皮細(xì)胞排列不整齊。中膜α-SMA表達(dá)微弱，纖維組織增多。而阻塞的移植血管內(nèi)，vWF和α-SMA幾乎無(wú)表達(dá)。對(duì)照組移植血管內(nèi)膜vWF陽(yáng)性表達(dá)正常，中膜α-SMA表達(dá)穩(wěn)定，血管結(jié)構(gòu)保持相對(duì)完整。通過(guò)對(duì)這些組織學(xué)切片圖像的分析，可以清晰地看到移植血管在不同時(shí)間點(diǎn)的內(nèi)膜、中膜、外膜結(jié)構(gòu)變化，以及細(xì)胞浸潤(rùn)、增殖情況，為評(píng)估小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為小口徑人工血管替代物的性能提供了重要的組織學(xué)依據(jù)。4.4免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果在術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)采集實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組實(shí)驗(yàn)犬的血液樣本，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)免疫球蛋白（IgG、IgM）和細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-γ）等免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)的水平。術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組血清中IgG水平為（15.6±2.3）mg/mL，IgM水平為（3.5±0.8）mg/mL；對(duì)照組IgG水平為（10.2±1.5）mg/mL，IgM水平為（2.1±0.5）mg/mL。實(shí)驗(yàn)組IgG和IgM水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.01），這表明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后引發(fā)了機(jī)體較為明顯的體液免疫反應(yīng)，導(dǎo)致免疫球蛋白水平升高。細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組IL-6水平為（125.6±15.8）pg/mL，TNF-α水平為（85.4±10.2）pg/mL，IFN-γ水平為（56.7±8.5）pg/mL；對(duì)照組IL-6水平為（56.3±8.2）pg/mL，TNF-α水平為（32.5±5.6）pg/mL，IFN-γ水平為（21.4±4.3）pg/mL。實(shí)驗(yàn)組中促炎細(xì)胞因子IL-6、TNF-α和IFN-γ的水平均顯著高于對(duì)照組（P<0.01），說(shuō)明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后引起了較強(qiáng)的炎癥反應(yīng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生大量促炎細(xì)胞因子。術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組IgG水平為（18.9±3.1）mg/mL，較術(shù)后1周有所升高，IgM水平為（3.8±0.9）mg/mL，變化不明顯；對(duì)照組IgG水平為（11.5±1.8）mg/mL，IgM水平為（2.3±0.6）mg/mL。實(shí)驗(yàn)組IgG和IgM水平仍顯著高于對(duì)照組（P<0.01），表明體液免疫反應(yīng)持續(xù)存在。細(xì)胞因子方面，實(shí)驗(yàn)組IL-6水平為（156.8±20.1）pg/mL，TNF-α水平為（102.3±12.5）pg/mL，IFN-γ水平為（78.9±10.2）pg/mL；對(duì)照組IL-6水平為（65.4±9.5）pg/mL，TNF-α水平為（38.6±6.2）pg/mL，IFN-γ水平為（25.6±5.1）pg/mL。實(shí)驗(yàn)組促炎細(xì)胞因子水平進(jìn)一步升高，且與對(duì)照組差異顯著（P<0.01），說(shuō)明炎癥反應(yīng)隨著時(shí)間的推移有所加劇。術(shù)后8周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組IgG水平為（16.5±2.8）mg/mL，較術(shù)后4周略有下降，IgM水平為（3.6±0.8）mg/mL；對(duì)照組IgG水平為（12.0±2.0）mg/mL，IgM水平為（2.5±0.7）mg/mL。雖然實(shí)驗(yàn)組IgG和IgM水平仍高于對(duì)照組，但差異較之前有所減?。≒<0.05），提示體液免疫反應(yīng)可能在逐漸減弱。細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組IL-6水平為（135.4±18.5）pg/mL，TNF-α水平為（90.2±11.3）pg/mL，IFN-γ水平為（65.3±9.1）pg/mL；對(duì)照組IL-6水平為（70.5±10.1）pg/mL，TNF-α水平為（42.3±7.0）pg/mL，IFN-γ水平為（28.7±5.5）pg/mL。實(shí)驗(yàn)組促炎細(xì)胞因子水平雖仍高于對(duì)照組，但升高趨勢(shì)有所減緩（P<0.05），表明炎癥反應(yīng)在一定程度上得到了控制。綜合免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后引發(fā)了機(jī)體明顯的免疫反應(yīng)，包括體液免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)。在移植初期，免疫反應(yīng)較為強(qiáng)烈，隨著時(shí)間的推移，免疫反應(yīng)雖有所變化，但在術(shù)后8周時(shí)仍未完全恢復(fù)到正常水平。這提示在將小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈應(yīng)用于臨床血管移植時(shí)，需要充分考慮免疫反應(yīng)對(duì)移植效果的影響，采取相應(yīng)的免疫調(diào)節(jié)措施，以提高移植血管的長(zhǎng)期通暢率和穩(wěn)定性。五、結(jié)果分析與討論5.1小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈置換犬頸總動(dòng)脈的可行性分析血管通暢性是評(píng)估小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈置換犬頸總動(dòng)脈可行性的關(guān)鍵指標(biāo)之一。本研究中，通過(guò)血管造影和彩色多普勒超聲檢查對(duì)移植血管的通暢性進(jìn)行了動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管均保持通暢，這表明在術(shù)后早期，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈能夠適應(yīng)犬體內(nèi)的血流動(dòng)力學(xué)環(huán)境，維持血管的正常功能。然而，隨著時(shí)間的推移，實(shí)驗(yàn)組的血管通暢率逐漸下降。術(shù)后4周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組中有1只犬的移植血管出現(xiàn)了部分狹窄；術(shù)后8周時(shí)，又有1只犬的移植血管出現(xiàn)了完全阻塞，此時(shí)實(shí)驗(yàn)組的血管通暢率為60%，低于對(duì)照組的80%。這說(shuō)明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在長(zhǎng)期植入過(guò)程中，存在一定的局限性，容易出現(xiàn)血管狹窄和阻塞等問(wèn)題，影響其長(zhǎng)期通暢率。實(shí)驗(yàn)組中血管狹窄和阻塞的原因可能是多方面的。從血液動(dòng)力學(xué)角度來(lái)看，小口徑血管內(nèi)血流速度相對(duì)較慢，容易導(dǎo)致血小板和凝血因子在血管壁表面聚集，形成血栓。脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為一種異種移植材料，雖然經(jīng)過(guò)脫細(xì)胞處理后免疫原性有所降低，但仍可能引發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)。免疫反應(yīng)產(chǎn)生的炎癥細(xì)胞和細(xì)胞因子會(huì)刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，導(dǎo)致內(nèi)膜增生，進(jìn)而引起血管狹窄。在手術(shù)操作過(guò)程中，血管吻合技術(shù)的優(yōu)劣也會(huì)對(duì)血管通暢性產(chǎn)生影響。若吻合口不平整、縫線過(guò)粗或過(guò)密，都可能導(dǎo)致血流動(dòng)力學(xué)改變，增加血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。組織相容性是衡量小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈能否成功用于犬頸總動(dòng)脈置換的重要因素。通過(guò)大體觀察、組織學(xué)檢查和免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)，對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的組織相容性進(jìn)行了評(píng)估。大體觀察結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組的小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈與周圍組織的粘連較輕，表明其在一定程度上具有較好的組織相容性。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)可見(jiàn)少量紅細(xì)胞和纖維蛋白沉積，內(nèi)膜表面有部分細(xì)胞黏附，但細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，排列不緊密，中膜平滑肌細(xì)胞部分變性，可見(jiàn)少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，外膜有輕度炎癥反應(yīng)。隨著時(shí)間的推移，炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增生逐漸加重。免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果表明，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后引發(fā)了機(jī)體明顯的免疫反應(yīng)，包括體液免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)。在移植初期，免疫反應(yīng)較為強(qiáng)烈，隨著時(shí)間的推移，免疫反應(yīng)雖有所變化，但在術(shù)后8周時(shí)仍未完全恢復(fù)到正常水平。這說(shuō)明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在組織相容性方面存在一定的問(wèn)題，免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)可能會(huì)影響移植血管的長(zhǎng)期穩(wěn)定性和功能。為了提高小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的組織相容性，可采取多種措施。在脫細(xì)胞工藝方面，進(jìn)一步優(yōu)化脫細(xì)胞方法，確保細(xì)胞成分徹底去除，減少免疫原性物質(zhì)的殘留。對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈進(jìn)行表面修飾，如涂覆抗凝血和抗炎物質(zhì)，可降低血栓形成和炎癥反應(yīng)的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。在移植手術(shù)前，對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行免疫預(yù)處理，調(diào)節(jié)其免疫系統(tǒng)，降低對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的免疫排斥反應(yīng)。5.2影響移植效果的因素探討手術(shù)操作是影響小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植效果的重要因素之一，其中血管吻合技術(shù)尤為關(guān)鍵。在本實(shí)驗(yàn)中，血管吻合的質(zhì)量直接關(guān)系到移植血管的通暢性和長(zhǎng)期穩(wěn)定性。若吻合口不平整，存在縫隙或錯(cuò)位，會(huì)導(dǎo)致血流動(dòng)力學(xué)改變，使血液在吻合口處形成湍流，增加血小板和凝血因子的聚集機(jī)會(huì)，從而促進(jìn)血栓形成。在血管吻合過(guò)程中，縫線的選擇和使用也至關(guān)重要。縫線過(guò)粗會(huì)對(duì)血管組織造成較大的損傷，刺激血管內(nèi)膜增生，增加血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)；縫線過(guò)密則可能導(dǎo)致血管壁局部缺血，影響吻合口的愈合。此外，手術(shù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)增加感染的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)也會(huì)使血管長(zhǎng)時(shí)間處于缺血狀態(tài)，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷，進(jìn)而影響移植效果。為了提高血管吻合的質(zhì)量，應(yīng)采用精細(xì)的顯微外科技術(shù)。在吻合前，對(duì)血管斷端進(jìn)行仔細(xì)的修剪，確保斷端平整、光滑，無(wú)血管外膜和組織的嵌入。選擇合適的縫線，如7-0無(wú)創(chuàng)縫合針和絲線，其直徑細(xì)小，對(duì)血管組織的損傷較小。在吻合過(guò)程中，保持針距和邊距均勻，一般針距控制在0.5mm左右，邊距控制在0.3mm左右，以確保吻合口緊密對(duì)合，減少縫隙的產(chǎn)生。同時(shí)，注意避免縫線穿過(guò)血管內(nèi)膜，以免損傷內(nèi)膜導(dǎo)致血栓形成。此外，提高手術(shù)醫(yī)生的操作熟練度，縮短手術(shù)時(shí)間，也有助于減少手術(shù)創(chuàng)傷和并發(fā)癥的發(fā)生，提高移植效果。脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的處理方法對(duì)移植效果有著深遠(yuǎn)的影響，脫細(xì)胞工藝的優(yōu)化是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在本研究中，采用了含有0.5%TritonX-100和0.1%脫氧膽酸鈉的磷酸鹽緩沖液（PBS）進(jìn)行脫細(xì)胞處理，雖然在一定程度上能夠去除細(xì)胞成分，但仍可能存在少量細(xì)胞殘留和免疫原性物質(zhì)。這些殘留的細(xì)胞和免疫原性物質(zhì)會(huì)引發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維組織增生，影響移植血管的長(zhǎng)期通暢率和穩(wěn)定性。脫細(xì)胞過(guò)程中對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的損傷也不容忽視，過(guò)度的脫細(xì)胞處理可能會(huì)破壞細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)構(gòu)和生物活性，降低其對(duì)細(xì)胞的黏附、增殖和分化的支持能力。為了優(yōu)化脫細(xì)胞工藝，可采用多種方法聯(lián)合處理。在物理方法方面，可結(jié)合超聲處理、凍融循環(huán)等技術(shù)，增強(qiáng)脫細(xì)胞效果。超聲處理能夠產(chǎn)生空化效應(yīng)，破壞細(xì)胞膜，促進(jìn)細(xì)胞成分的釋放；凍融循環(huán)則通過(guò)細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成和融化，使細(xì)胞破裂，加速脫細(xì)胞過(guò)程。在化學(xué)方法上，可嘗試使用新型的脫細(xì)胞試劑，如離子型表面活性劑與非離子型表面活性劑的組合，既能有效去除細(xì)胞成分，又能減少對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的損傷。酶學(xué)方法也是優(yōu)化脫細(xì)胞工藝的重要手段，如使用核酸酶進(jìn)一步去除殘留的核酸物質(zhì)，降低免疫原性。在脫細(xì)胞處理后，對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈進(jìn)行適當(dāng)?shù)男揎椇吞幚恚缃宦?lián)處理，可增強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)的穩(wěn)定性和力學(xué)性能，提高其在體內(nèi)的耐久性。免疫反應(yīng)是影響小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植效果的關(guān)鍵因素之一。本研究結(jié)果顯示，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后引發(fā)了機(jī)體明顯的免疫反應(yīng)，包括體液免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)。免疫球蛋白（IgG、IgM）水平在移植后顯著升高，表明機(jī)體產(chǎn)生了體液免疫反應(yīng)。促炎細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IFN-γ）水平也明顯升高，說(shuō)明炎癥反應(yīng)較為強(qiáng)烈。免疫反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)到移植血管周圍，釋放多種細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)，刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，引起內(nèi)膜增生，進(jìn)而導(dǎo)致血管狹窄和阻塞。免疫反應(yīng)還可能導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，破壞血管的內(nèi)皮屏障功能，促進(jìn)血栓形成。為了降低免疫反應(yīng)對(duì)移植效果的影響，可采取多種免疫調(diào)節(jié)措施。在移植前，對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行免疫預(yù)處理，如使用免疫抑制劑或進(jìn)行免疫脫敏治療，調(diào)節(jié)其免疫系統(tǒng)，降低對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的免疫排斥反應(yīng)。在移植過(guò)程中，對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈進(jìn)行表面修飾，如涂覆免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)，可抑制免疫細(xì)胞的活化和炎癥反應(yīng)的發(fā)生。在移植后，給予實(shí)驗(yàn)犬適當(dāng)?shù)拿庖咭种扑幬铮绛h(huán)孢素A、他克莫司等，控制免疫反應(yīng)的強(qiáng)度。還可以通過(guò)基因編輯技術(shù)，對(duì)豬動(dòng)脈進(jìn)行改造，降低其免疫原性，從源頭上減少免疫反應(yīng)的發(fā)生。5.3與其他血管移植材料的比較分析在小口徑血管移植領(lǐng)域，自體血管、人工合成血管以及小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈是常用的血管移植材料，它們各自具有獨(dú)特的特點(diǎn)和應(yīng)用前景。自體血管，如大隱靜脈、乳內(nèi)動(dòng)脈等，一直被視為小口徑血管移植的“金標(biāo)準(zhǔn)”。其最大的優(yōu)勢(shì)在于具有完美的生物相容性，作為自身組織，不會(huì)引發(fā)免疫排斥反應(yīng)。在血管移植后，能夠與宿主組織迅速整合，血管內(nèi)皮細(xì)胞能夠快速覆蓋移植血管表面，有效防止血栓形成。自體血管的力學(xué)性能與宿主血管高度匹配，能夠適應(yīng)體內(nèi)的血流動(dòng)力學(xué)環(huán)境，維持正常的血管舒縮功能。在冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)中，乳內(nèi)動(dòng)脈作為移植血管，其長(zhǎng)期通暢率較高，患者的預(yù)后效果良好。然而，自體血管的獲取存在一定的局限性。一方面，可供移植的自體血管來(lái)源有限，尤其是對(duì)于一些需要多次血管移植或血管病變范圍廣泛的患者，難以獲取足夠長(zhǎng)度和合適口徑的自體血管。另一方面，獲取自體血管會(huì)對(duì)患者造成額外的創(chuàng)傷，增加手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)和術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生幾率，如取大隱靜脈后可能導(dǎo)致下肢腫脹、疼痛、傷口感染等問(wèn)題。人工合成血管主要包括膨體聚四氟乙烯（ePTFE）和聚酯（Dacron）等材料。這類血管具有來(lái)源廣泛、易于加工成型的優(yōu)點(diǎn)，可以根據(jù)不同的臨床需求制備成各種尺寸和形狀。人工合成血管的力學(xué)性能穩(wěn)定，能夠承受一定的血流壓力。ePTFE人工血管具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和生物惰性，在大口徑血管移植中取得了較好的效果。在主動(dòng)脈置換手術(shù)中，ePTFE人工血管能夠有效替代病變的主動(dòng)脈，恢復(fù)正常的血流。但在小口徑血管移植中，人工合成血管存在明顯的不足。其生物相容性較差，容易引發(fā)血小板黏附和血栓形成，導(dǎo)致血管通暢率較低。人工合成血管與天然血管的順應(yīng)性不匹配，在長(zhǎng)期植入過(guò)程中，會(huì)引起血管壁的應(yīng)力集中，導(dǎo)致內(nèi)膜增生和管腔狹窄。有研究表明，ePTFE人工血管在小口徑血管移植后的1年通暢率僅為30%-50%，遠(yuǎn)不能滿足臨床需求。小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為一種新型的血管移植材料，具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。通過(guò)脫細(xì)胞處理，去除了豬動(dòng)脈中的細(xì)胞成分，降低了免疫原性，同時(shí)保留了細(xì)胞外基質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)和生物活性成分，為細(xì)胞的黏附、增殖和分化提供了良好的微環(huán)境。在本研究中，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在移植后能夠在一定程度上誘導(dǎo)血管組織的再生和修復(fù)。其彈性和順應(yīng)性相對(duì)較好，更接近天然動(dòng)脈的力學(xué)性能，能夠在一定程度上減少因順應(yīng)性不匹配導(dǎo)致的內(nèi)膜增生和管腔狹窄問(wèn)題。但小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈也存在一些問(wèn)題。盡管經(jīng)過(guò)脫細(xì)胞處理，仍可能殘留少量免疫原性物質(zhì)，引發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng)，影響移植血管的長(zhǎng)期穩(wěn)定性。在血管內(nèi)皮化方面，脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的內(nèi)皮化速度較慢，難以在短期內(nèi)形成完整的內(nèi)皮細(xì)胞層，增加了血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)。綜上所述，不同的血管移植材料在小口徑血管移植中各有優(yōu)劣。自體血管雖然生物相容性好，但來(lái)源有限且獲取創(chuàng)傷大；人工合成血管來(lái)源廣泛、力學(xué)性能穩(wěn)定，但生物相容性差，小口徑移植效果不佳；小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈具有一定的優(yōu)勢(shì)，如低免疫原性和較好的力學(xué)性能，但也存在免疫反應(yīng)和內(nèi)皮化問(wèn)題。在未來(lái)的研究中，需要進(jìn)一步優(yōu)化小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的制備工藝，降低免疫原性，加快內(nèi)皮化進(jìn)程，同時(shí)結(jié)合其他技術(shù)手段，如表面修飾、細(xì)胞種植等，提高其作為小口徑人工血管替代物的性能，為心血管疾病的治療提供更有效的選擇。5.4研究結(jié)果的臨床應(yīng)用前景與局限性本研究結(jié)果為臨床小口徑血管移植提供了重要的理論依據(jù)和實(shí)踐參考，具有一定的臨床應(yīng)用前景。小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈作為一種潛在的小口徑人工血管替代物，其低免疫原性和良好的生物相容性為解決當(dāng)前小口徑人工血管面臨的免疫排斥和血栓形成等問(wèn)題提供了新的思路。在冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)、外周血管旁路移植術(shù)以及血液透析血管通路建立等臨床治療中，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈有望作為自體血管的替代選擇，為那些無(wú)法獲取足夠自體血管或自體血管條件不佳的患者提供治療方案。通過(guò)進(jìn)一步優(yōu)化脫細(xì)胞工藝和表面修飾技術(shù)，提高其內(nèi)皮化程度和長(zhǎng)期穩(wěn)定性，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈有可能成為一種安全、有效的小口徑人工血管，改善心血管疾病患者的治療效果和生活質(zhì)量。然而，本研究也存在一定的局限性。從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面來(lái)看，雖然犬頸總動(dòng)脈在解剖結(jié)構(gòu)和血流動(dòng)力學(xué)方面與人類的一些重要?jiǎng)用}具有相似性，但犬與人類在生理和免疫等方面仍存在差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推至人體時(shí)可能存在一定的偏差。在后續(xù)研究中，有必要開(kāi)展靈長(zhǎng)類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，以更準(zhǔn)確地評(píng)估小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在人體中的安全性和有效性。本研究的觀察時(shí)間相對(duì)較短，僅觀察到術(shù)后8周的情況。而在臨床應(yīng)用中，小口徑人工血管需要長(zhǎng)期保持通暢和穩(wěn)定的功能。因此，未來(lái)需要進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的隨訪研究，觀察脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在體內(nèi)的長(zhǎng)期生物學(xué)行為和變化，包括血管的長(zhǎng)期通暢率、免疫反應(yīng)的持續(xù)時(shí)間和強(qiáng)度、組織的慢性炎癥反應(yīng)以及血管壁的結(jié)構(gòu)和功能變化等。這樣才能全面了解其在臨床應(yīng)用中的潛在風(fēng)險(xiǎn)和問(wèn)題，為其臨床轉(zhuǎn)化提供更可靠的數(shù)據(jù)支持。本研究在免疫調(diào)節(jié)和內(nèi)皮化促進(jìn)等方面的研究還不夠深入，需要進(jìn)一步探索有效的干預(yù)措施，以提高小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的性能。六、結(jié)論與展望6.1研究主要結(jié)論本研究通過(guò)將小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈置換犬頸總動(dòng)脈，對(duì)其作為小口徑人工血管替代物的可行性和有效性進(jìn)行了深入探究，取得了以下主要結(jié)論：在血管通暢性方面，術(shù)后1周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的移植血管均保持通暢，表明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在術(shù)后早期能夠適應(yīng)犬體內(nèi)的血流動(dòng)力學(xué)環(huán)境。但隨著時(shí)間推移，實(shí)驗(yàn)組血管通暢率逐漸下降，術(shù)后4周時(shí)有1只犬的移植血管出現(xiàn)部分狹窄，術(shù)后8周時(shí)又有1只犬的移植血管完全阻塞，此時(shí)實(shí)驗(yàn)組血管通暢率為60%，低于對(duì)照組的80%。這說(shuō)明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在長(zhǎng)期植入過(guò)程中存在局限性，容易出現(xiàn)血管狹窄和阻塞等問(wèn)題，影響其長(zhǎng)期通暢率。從組織相容性來(lái)看，大體觀察顯示實(shí)驗(yàn)組小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈與周圍組織粘連較輕。組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，術(shù)后早期實(shí)驗(yàn)組移植血管內(nèi)有少量紅細(xì)胞和纖維蛋白沉積，內(nèi)膜表面細(xì)胞黏附但形態(tài)不規(guī)則，中膜平滑肌細(xì)胞部分變性，外膜有輕度炎癥反應(yīng)，且隨著時(shí)間推移，炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增生逐漸加重。免疫反應(yīng)相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)表明，小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后引發(fā)了機(jī)體明顯的免疫反應(yīng)，包括體液免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，在移植初期免疫反應(yīng)較為強(qiáng)烈，術(shù)后8周時(shí)仍未完全恢復(fù)到正常水平。這表明小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈在組織相容性方面存在一定問(wèn)題，免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)可能影響移植血管的長(zhǎng)期穩(wěn)定性和功能。手術(shù)操作、脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的處理方法以及免疫反應(yīng)是影響移植效果的重要因素。血管吻合技術(shù)的優(yōu)劣直接關(guān)系到移植血管的通暢性和長(zhǎng)期穩(wěn)定性，手術(shù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)增加感染風(fēng)險(xiǎn)和血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。脫細(xì)胞工藝的優(yōu)化至關(guān)重要，目前的脫細(xì)胞方法雖能去除部分細(xì)胞成分，但仍可能殘留免疫原性物質(zhì)并對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)造成損傷。免疫反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移，引起內(nèi)膜增生和血栓形成，影響移植血管的功能。與其他血管移植材料相比，自體血管生物相容性好但來(lái)源有限且獲取創(chuàng)傷大；人工合成血管來(lái)源廣泛、力學(xué)性能穩(wěn)定，但生物相容性差，小口徑移植效果不佳；小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈具有低免疫原性和較好力學(xué)性能等優(yōu)勢(shì)，但也存在免疫反應(yīng)和內(nèi)皮化問(wèn)題。6.2未來(lái)研究方向在制備工藝改進(jìn)方面，未來(lái)可致力于研發(fā)更高效、溫和的脫細(xì)胞方法，以徹底清除豬動(dòng)脈中的細(xì)胞成分，減少免疫原性物質(zhì)的殘留。通過(guò)優(yōu)化物理、化學(xué)和酶學(xué)處理的組合方式，精準(zhǔn)控制脫細(xì)胞過(guò)程，在保證細(xì)胞去除效果的同時(shí)，最大程度地保留細(xì)胞外基質(zhì)的生物活性和力學(xué)性能。利用新型的生物材料和技術(shù)，如納米技術(shù)、3D打印技術(shù)等，對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈進(jìn)行表面修飾和結(jié)構(gòu)優(yōu)化。通過(guò)納米涂層技術(shù)，在脫細(xì)胞豬動(dòng)脈表面構(gòu)建具有抗凝血、抗炎和促進(jìn)細(xì)胞黏附功能的納米結(jié)構(gòu)，提高其生物相容性和抗血栓形成能力。借助3D打印技術(shù)，精確控制脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的微觀結(jié)構(gòu)和力學(xué)性能，使其更好地匹配天然血管的特性。免疫抑制方案優(yōu)化也是未來(lái)研究的重要方向之一。深入研究小口徑脫細(xì)胞豬動(dòng)脈移植后免疫反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制和信號(hào)通路，尋找關(guān)鍵的免疫調(diào)節(jié)靶點(diǎn)?；谶@些靶點(diǎn)，開(kāi)發(fā)新型的免疫抑制劑或免疫調(diào)節(jié)策略，實(shí)現(xiàn)對(duì)免疫反應(yīng)的精準(zhǔn)調(diào)控。探索聯(lián)合使用多種免疫抑制劑的最佳組合和劑量，在有效抑制免疫排斥反應(yīng)的同時(shí)，減少免疫抑制劑的副作用。結(jié)合基因治療、細(xì)胞治療等新興技術(shù)，對(duì)宿主的免疫系統(tǒng)進(jìn)行修飾和調(diào)節(jié)，提高其對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的耐受性。通過(guò)基因編輯技術(shù)，改變宿主免疫細(xì)胞的表面受體或信號(hào)分子，使其對(duì)脫細(xì)胞豬動(dòng)脈的識(shí)別和攻擊能力降低。利用間充質(zhì)干細(xì)胞等具有免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞，抑制免疫反應(yīng)，促進(jìn)移植血管的愈合和功能恢復(fù)。在長(zhǎng)期效果觀察方面，開(kāi)展更長(zhǎng)期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究，延長(zhǎng)觀察時(shí)間，跟蹤移植血管在體內(nèi)的長(zhǎng)期穩(wěn)定性和功能變化。建立完善的長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)體系，綜合運(yùn)用影像學(xué)、組織學(xué)、免疫學(xué)和分子生物學(xué)等多種檢測(cè)手段，全面評(píng)估移植血管的通暢率、組織相容性、內(nèi)皮化程度、血管壁的結(jié)構(gòu)和功能以及免疫反應(yīng)的變化等指標(biāo)。深入研究移植血管在長(zhǎng)期使用過(guò)程中出現(xiàn)的并發(fā)癥，如內(nèi)膜增生、血栓形成、血管狹窄和閉塞等，分析其發(fā)生的原因和機(jī)制，提出針對(duì)性的預(yù)防和治療措施。通過(guò)建立數(shù)學(xué)模型和計(jì)算機(jī)模擬等方法，預(yù)測(cè)移植血管的長(zhǎng)期性能和壽命，為臨床應(yīng)用提供更科學(xué)的依據(jù)。七、參考文獻(xiàn)[1]中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告編寫(xiě)組。中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告2020概要[J].中國(guó)循環(huán)雜志，2021,36(06):521-545.[2]國(guó)家心血管病醫(yī)療質(zhì)量控制中心.2021年中國(guó)心血管病醫(yī)療質(zhì)量報(bào)告[J].中國(guó)循環(huán)雜志，2022,37(06):521-548.[3]陳詩(shī)雨，張超，趙強(qiáng)，等。小口徑人工血管的研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào)，2020,39(03):365-374.[4]LiY,ZhangY,LiuX,etal.Anovelpoly(dopamine)-lysinecoatingtopromoteendothelializationandfunctionalremodelingofsmall-diametertissue-engineeredbloodvessels[J].ActaBiomaterialia,2021,129:374-387.[5]周亞平，孫磊，王丹，等。具有“雙重抗凝血效應(yīng)”的小口徑人工血管的構(gòu)建及性能研究[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)，2021,42(11):3313-3320.[6]BadylakSF,FreytesDO,GilbertTW.Extracellularmatrixasabiologicalscaffoldmaterial:structureandfunction[J].ActaBiomaterialia,2009,5(1):1-13.[7]陳俊，趙強(qiáng)，劉沙，等。脫細(xì)胞豬主動(dòng)脈基質(zhì)的制備及性能研究[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志，2017,31(06):751-757.[8]孫磊，趙強(qiáng)，周亞平，等。脫細(xì)胞豬主動(dòng)脈基質(zhì)構(gòu)建小口徑組織工程血管的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志，2018,32(04):454-461.[9]王春生，陸樹(shù)洋，張鵬，等。豬頸總動(dòng)脈及股動(dòng)脈小口徑血管移植模型的比較[J].復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2014,41(04):458-460+465.[10]黃明清，李杰，李翠玲，等。小口徑脫細(xì)胞基質(zhì)人工血管移植的研究[J].中華普通外科雜志，2010,25(07):562-565.[11]施德兵，符偉國(guó)，何紅兵，等。血管移植物置換犬頸總動(dòng)脈的研究[J].中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2010,27(05):553-555+681.[12]王學(xué)寧，陳長(zhǎng)志，楊岷，等。脫細(xì)胞肝素處理犬頸動(dòng)脈的異種移植研究[J].外科理論與實(shí)踐，2006,11(03):235-238.[2]國(guó)家心血管病醫(yī)療質(zhì)量控制中心.2021年中國(guó)心血管病醫(yī)療質(zhì)量報(bào)告[J].中國(guó)循環(huán)雜志，2022,37(06):521-548.[3]陳詩(shī)雨，張超，趙強(qiáng)，等。小口徑人工血管的研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào)，2020,39(03):365-374.[4]LiY,ZhangY,LiuX,etal.Anovelpoly(dopamine)-lysinecoatingtopromoteendothelializationandfunctionalremodelingofsmall-diametertissue-engineeredbloodvessels[J].ActaBiomaterialia,2021,129:374-387.[5]周亞平，孫磊，王丹，等。具有“雙重抗凝血效應(yīng)”的小口徑人工血管的構(gòu)建及性能研究[J].高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào)，2021,42(11):3313-3320.[6]BadylakSF,FreytesDO,GilbertTW.Extracellularmatrixasabiologicalscaffoldmaterial:structureandfunction[J].ActaBi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