2025年高職（生物制藥技術(shù)）生物藥物制備綜合測(cè)試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題共40分）答題要求：本大題共20小題，每小題2分，共40分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的，請(qǐng)將正確答案的序號(hào)填在括號(hào)內(nèi)。1.生物藥物制備過程中，常用的細(xì)胞破碎方法不包括（）A.機(jī)械破碎法B.化學(xué)破碎法C.酶解破碎法D.自然破碎法2.以下哪種是生物藥物分離純化中常用的吸附劑（）A.硅膠B.活性炭C.離子交換樹脂D.以上都是3.蛋白質(zhì)等生物大分子的分離純化，最常用的色譜方法是（）A.離子交換色譜B.凝膠過濾色譜C.親和色譜D.疏水作用色譜4.生物藥物制備中，超濾主要用于（）A.去除小分子雜質(zhì)B.濃縮生物大分子C.分離不同分子量的生物分子D.以上都對(duì)5.以下關(guān)于基因工程藥物制備的說法，錯(cuò)誤的是（）A.需要構(gòu)建表達(dá)載體B.常用大腸桿菌等作為表達(dá)宿主C.表達(dá)產(chǎn)物一定具有生物活性D.要進(jìn)行產(chǎn)物的分離純化6.生物藥物發(fā)酵過程中，發(fā)酵罐的主要作用不包括（）A.提供適宜的溫度B.提供充足的氧氣C.控制發(fā)酵液的pH值D.對(duì)發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行分離7.以下哪種酶在生物藥物制備中可用于蛋白質(zhì)的切割（）A.淀粉酶B.蛋白酶C.纖維素酶D.脂肪酶8.生物藥物制備中，離心分離主要用于（）A.分離細(xì)胞和培養(yǎng)液B.去除大分子雜質(zhì)C.濃縮生物藥物D.分離不同密度的物質(zhì)9.以下關(guān)于單克隆抗體的制備，正確的是（）A.需要將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合B.融合后的細(xì)胞都能產(chǎn)生單克隆抗體C.單克隆抗體只針對(duì)一種抗原決定簇D.以上都對(duì)10.生物藥物制備中，透析的目的是（）A.去除小分子雜質(zhì)B.交換緩沖液C.濃縮生物大分子D.分離不同電荷的生物分子11.以下哪種生物藥物可用于治療糖尿?。ǎ〢.胰島素B.干擾素C.生長(zhǎng)激素D.白細(xì)胞介素12.生物藥物發(fā)酵培養(yǎng)基中，碳源的主要作用是（）A.提供能量B.構(gòu)成細(xì)胞成分C.調(diào)節(jié)滲透壓D.促進(jìn)生長(zhǎng)因子的合成13.生物藥物制備中，離子交換色譜分離的依據(jù)是（）A.分子大小B.電荷差異C.親和力D.疏水作用14.以下關(guān)于基因工程載體的說法，錯(cuò)誤的是（）A.具有復(fù)制原點(diǎn)B.有多個(gè)酶切位點(diǎn)C.一定含有抗生素抗性基因D.能在宿主細(xì)胞中自主復(fù)制15.生物藥物制備中，凝膠過濾色譜的洗脫順序是（）A.分子量小的先流出B.分子量大的先流出C.電荷多的先流出D.電荷少的先流出16.以下哪種生物藥物可用于抗病毒治療（）A.青霉素B.鏈霉素C.干擾素D.紅霉素17.生物藥物發(fā)酵過程中，溶氧對(duì)發(fā)酵的影響不包括（）A.影響微生物的生長(zhǎng)B.影響產(chǎn)物的合成C.影響發(fā)酵液的pH值D.影響發(fā)酵罐的壓力18.生物藥物制備中，親和色譜的配基與目標(biāo)分子之間的作用是（）A.共價(jià)鍵B.離子鍵C.氫鍵D.特異性親和力19.以下關(guān)于蛋白質(zhì)復(fù)性的說法，正確的是（）A.復(fù)性后的蛋白質(zhì)一定具有活性B.可以通過稀釋、透析等方法復(fù)性C.復(fù)性過程中不需要考慮溫度D.復(fù)性只適用于變性程度低的蛋白質(zhì)20.生物藥物制備中，超濾膜的截留分子量是指（）A.能被截留的最小分子量B.能被截留的最大分子量C.50%被截留的分子量D.90%被截留的分子量第II卷（非選擇題共60分）（一）填空題（共10分）答題要求：本大題共5小題，每空1分，共10分。請(qǐng)?jiān)跈M線上填寫正確答案。1.生物藥物制備的一般流程包括原料預(yù)處理（）、分離純化、制劑成型等步驟。2.常用的細(xì)胞破碎機(jī)械破碎法有（）、高壓勻漿法等。3.離子交換色譜中，陽離子交換樹脂帶（）電荷。4.基因工程藥物制備中，目的基因的獲取方法有（）、PCR擴(kuò)增法等。5.生物藥物發(fā)酵過程中，常用的pH調(diào)節(jié)劑有（）、氫氧化鈉等。（二）簡(jiǎn)答題（共20分）答題要求：本大題共4小題，每題5分，共20分。請(qǐng)簡(jiǎn)要回答問題。1.簡(jiǎn)述生物藥物分離純化的主要方法及原理。2.說明基因工程藥物制備中表達(dá)載體的構(gòu)建要點(diǎn)。3.生物藥物發(fā)酵過程中如何控制發(fā)酵條件？4.單克隆抗體的制備過程包括哪些主要步驟？（三）判斷題（共10分）答題要求：本大題共10小題，每小題1分，共10分。判斷下列說法的正誤，正確的打“√”，錯(cuò)誤的打“×”。1.生物藥物只能從生物體中直接提取，不能通過化學(xué)合成。（）2.超濾膜的孔徑越小，截留分子量越大。（）3.親和色譜的分辨率比離子交換色譜低。（）4.生物藥物發(fā)酵過程中，溶氧越高越好。（）5.蛋白質(zhì)復(fù)性后活性一定能恢復(fù)。（）6.基因工程載體必須含有啟動(dòng)子。（）7.離子交換色譜中，緩沖液的pH值對(duì)分離效果沒有影響。（）8.單克隆抗體只能由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生。（）9.生物藥物制備中，離心轉(zhuǎn)速越高，分離效果越好。（）10.發(fā)酵培養(yǎng)基中氮源的主要作用是提供能量。（）（四）材料分析題（共10分）答題要求：閱讀以下材料，回答問題。材料：在生物藥物制備中，研究人員對(duì)某蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化。首先采用硫酸銨沉淀法初步分離，然后通過離子交換色譜進(jìn)一步分離，最后用凝膠過濾色譜進(jìn)行精制。在整個(gè)過程中，發(fā)現(xiàn)硫酸銨沉淀后蛋白質(zhì)的回收率為80%，離子交換色譜后回收率為70%，凝膠過濾色譜后回收率為90%。問題：1.硫酸銨沉淀法的原理是什么？（3分）2.計(jì)算整個(gè)分離純化過程中蛋白質(zhì)的總回收率。（4分）3.分析影響各步驟回收率的可能因素。（3分）（五）綜合應(yīng)用題（共10分）答題要求：請(qǐng)根據(jù)以下題目要求進(jìn)行作答某生物制藥公司計(jì)劃生產(chǎn)一種新型的基因工程藥物。已知該藥物的目的基因已獲取，表達(dá)載體也已構(gòu)建成功。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)從工程菌發(fā)酵到藥物分離純化的工藝流程，并說明每一步驟的目的和主要操作要點(diǎn)。答案：1.D2.D3.B4.D5.C6.D7.B8.D9.C10.A11.A12.A13.B14.C15.B16.C17.D18.D19.B20.C填空題答案：1.細(xì)胞破碎2.研磨法3.負(fù)4.從基因組文庫中獲取5.鹽酸簡(jiǎn)答題答案：1.主要方法及原理：吸附色譜利用吸附劑對(duì)不同物質(zhì)的吸附能力差異分離；離子交換色譜依據(jù)離子交換樹脂與生物分子的電荷作用分離；凝膠過濾色譜基于分子大小不同在凝膠介質(zhì)中移動(dòng)速度差異分離；親和色譜利用配基與目標(biāo)分子的特異性親和力分離。2.構(gòu)建要點(diǎn)：要有復(fù)制原點(diǎn)保證載體在宿主細(xì)胞中自主復(fù)制；多個(gè)酶切位點(diǎn)便于目的基因插入；啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)目的基因表達(dá)；還可能有篩選標(biāo)記基因等。3.控制發(fā)酵條件：溫度通過溫控裝置保持適宜范圍；溶氧通過通氣、攪拌等調(diào)節(jié)；pH值用酸堿調(diào)節(jié)劑維持；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按需補(bǔ)料添加。4.主要步驟：免疫動(dòng)物獲得免疫脾細(xì)胞；骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選；細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞；篩選陽性雜交瘤細(xì)胞；克隆化培養(yǎng)獲得單克隆雜交瘤細(xì)胞；單克隆抗體的大量制備與分離純化。判斷題答案：1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.×10.×材料分析題答案：1.硫酸銨沉淀法原理：通過提高硫酸銨濃度，使蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度降低，從而沉淀出來。2.總回收率=硫酸銨沉淀后回收率×離子交換色譜后回收率×凝膠過濾色譜后回收率=80%×70%×90%=50.4%。3.影響硫酸銨沉淀回收率因素可能有硫酸銨濃度不準(zhǔn)確、沉淀時(shí)間不合適等；離子交換色譜回收率低可能是緩沖液pH值不當(dāng)、流速過快等；凝膠過濾色譜回收率影響因素可能有柱床高度不合適、樣品濃度過高等。綜合應(yīng)用題答案：工藝流程：工程菌接種到發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，目的是讓工程菌大量繁殖并表達(dá)目的