山梨酸與乙醇對(duì)草類青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響及作用機(jī)制探究一、引言1.1研究背景與意義在畜牧業(yè)蓬勃發(fā)展的當(dāng)下，優(yōu)質(zhì)飼料的穩(wěn)定供應(yīng)成為制約其發(fā)展的關(guān)鍵因素。青貯飼料憑借其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，成為畜牧業(yè)不可或缺的重要飼料來(lái)源。青貯是一種將新鮮的青綠飼料，如農(nóng)作物秸稈、牧草等，經(jīng)切碎后置于密封容器中，通過(guò)微生物發(fā)酵作用制成的飼料。在厭氧環(huán)境下，青貯飼料能夠最大程度保留青綠飼料原料的大部分原有漿汁和養(yǎng)分，其營(yíng)養(yǎng)成分損失一般不超過(guò)15%，而干草在自然風(fēng)干過(guò)程中，營(yíng)養(yǎng)損失可達(dá)約30%，若風(fēng)干時(shí)發(fā)霉變質(zhì)或遇雨淋，損失更是高達(dá)50%。這使得青貯飼料具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，能為牲畜提供豐富的營(yíng)養(yǎng)支持。不僅如此，青貯飼料還具有良好的適口性。在發(fā)酵過(guò)程中，青貯飼料會(huì)產(chǎn)生乳酸、醋酸、琥珀酸及醇類等具有芳香氣味的物質(zhì)，這些物質(zhì)極大地提高了飼料的適口性，使其更易被反芻家畜消化吸收，進(jìn)而提升牛羊的繁殖力、飼料轉(zhuǎn)化率、泌乳率等生產(chǎn)性能。青貯飼料還能解決牛羊飼草季節(jié)性短缺的難題，實(shí)現(xiàn)全年均衡供應(yīng)，有效降低養(yǎng)殖成本，對(duì)推動(dòng)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展具有不可替代的重要作用。象草和雜交狼尾草作為兩種優(yōu)質(zhì)的青綠飼料，在畜牧業(yè)中應(yīng)用廣泛。象草植株高大，產(chǎn)量高，富含多種營(yíng)養(yǎng)成分，是草食家畜喜愛(ài)的飼料之一；雜交狼尾草則綜合了父本和母本的優(yōu)良特性，具有生長(zhǎng)迅速、適應(yīng)性強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等優(yōu)點(diǎn)，在南方地區(qū)被大量種植用于飼料生產(chǎn)。然而，這兩種草在青貯發(fā)酵過(guò)程中，常常面臨一些問(wèn)題。由于其含糖量相對(duì)較低，緩沖能較高，青貯時(shí)乳酸菌發(fā)酵受到一定限制，導(dǎo)致青貯品質(zhì)難以達(dá)到理想狀態(tài)。在青貯過(guò)程中，好氧性微生物的活動(dòng)會(huì)消耗大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，降低青貯飼料的品質(zhì)和保存期限，給養(yǎng)殖戶帶來(lái)經(jīng)濟(jì)損失。為了有效改善象草和雜交狼尾草的青貯發(fā)酵品質(zhì)，提高青貯飼料的質(zhì)量和保存期限，研究人員不斷探索各種有效的添加劑。山梨酸和乙醇作為兩種常見(jiàn)的好氧性微生物抑制劑，逐漸進(jìn)入人們的視野。山梨酸具有高效的抑菌性能，能夠有效抑制多種好氧性微生物的生長(zhǎng)和繁殖，減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，從而提高青貯飼料的品質(zhì)。在青貯早期，山梨酸能夠迅速發(fā)揮作用，抑制有害微生物的活動(dòng)，為乳酸菌的生長(zhǎng)創(chuàng)造良好的環(huán)境。乙醇不僅能夠抑制好氧性微生物的活性，還能促進(jìn)同型乳酸發(fā)酵，提高乳酸含量，降低青貯飼料的pH值，進(jìn)一步抑制有害微生物的生長(zhǎng)，提升青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)。探究山梨酸和乙醇對(duì)象草和雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響具有重要的理論與實(shí)際意義。在理論層面，這有助于深入了解山梨酸和乙醇在青貯發(fā)酵過(guò)程中的作用機(jī)制，豐富青貯飼料發(fā)酵理論。目前，雖然對(duì)山梨酸和乙醇在青貯中的應(yīng)用有一定研究，但對(duì)于它們?nèi)绾尉唧w影響青貯發(fā)酵過(guò)程中的微生物群落結(jié)構(gòu)、代謝途徑以及相關(guān)酶活性等方面，仍有待進(jìn)一步深入探究。通過(guò)本研究，有望填補(bǔ)這方面的理論空白，為青貯飼料發(fā)酵理論的完善提供新的依據(jù)。在實(shí)際應(yīng)用中，研究結(jié)果可為畜牧業(yè)生產(chǎn)提供科學(xué)的技術(shù)指導(dǎo)。一方面，幫助養(yǎng)殖戶選擇合適的添加劑及添加量，優(yōu)化青貯飼料制作工藝，提高青貯飼料的質(zhì)量和產(chǎn)量，從而降低養(yǎng)殖成本，提高養(yǎng)殖效益。另一方面，優(yōu)質(zhì)的青貯飼料能夠?yàn)樯筇峁└渥?、更均衡的營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)牲畜的健康生長(zhǎng)，提高畜產(chǎn)品的質(zhì)量和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，滿足消費(fèi)者對(duì)高品質(zhì)畜產(chǎn)品的需求，推動(dòng)畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。1.2研究目標(biāo)與內(nèi)容本研究旨在深入探究山梨酸和乙醇對(duì)象草和雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響，并揭示其內(nèi)在作用機(jī)制。具體研究?jī)?nèi)容如下：山梨酸對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響：設(shè)置對(duì)照（control）和山梨酸處理組（sorbicacid添加量為鮮重的0.1%），在室溫條件下貯藏，分別在青貯發(fā)酵的第0.5、1、1.5、2、3、5、7、14和30天開(kāi)窖取樣分析。通過(guò)測(cè)定干物質(zhì)、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量、pH值、乳酸/乙酸值、氨態(tài)氮/總氮值以及水溶性碳水化合物含量等指標(biāo)，研究山梨酸在不同發(fā)酵階段對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響。乙醇對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響：同樣設(shè)對(duì)照（control）和乙醇處理組（ethanol添加量為鮮重的2.5%），室溫貯藏并在相同時(shí)間節(jié)點(diǎn)取樣分析。通過(guò)上述相同指標(biāo)的測(cè)定，探究乙醇在象草青貯發(fā)酵過(guò)程中的作用效果及對(duì)發(fā)酵品質(zhì)的影響。山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響：設(shè)對(duì)照（control）和山梨酸處理組（sorbicacid添加量為鮮重的0.1%），室溫下貯藏，在青貯第0.5、1、2、3、5、7、14和30天開(kāi)窖取樣分析。測(cè)定各項(xiàng)發(fā)酵品質(zhì)指標(biāo)，分析山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的動(dòng)態(tài)影響。乙醇對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響：設(shè)置對(duì)照（control）和乙醇處理組（ethanol添加量為鮮重的2.5%），室溫貯藏并在相應(yīng)時(shí)間取樣分析。通過(guò)對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定，研究乙醇對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響。作用機(jī)制分析：綜合以上四個(gè)試驗(yàn)結(jié)果，從微生物群落結(jié)構(gòu)、代謝途徑以及相關(guān)酶活性等方面，深入探討山梨酸和乙醇在象草和雜交狼尾草青貯發(fā)酵過(guò)程中的作用機(jī)制，為其在青貯飼料生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。1.3研究創(chuàng)新點(diǎn)與方法本研究在青貯飼料添加劑應(yīng)用領(lǐng)域具有一定創(chuàng)新。以往研究多聚焦單一添加劑對(duì)少數(shù)幾種青貯原料的影響，且多為靜態(tài)分析，而本研究首次系統(tǒng)地將山梨酸和乙醇這兩種好氧性微生物抑制劑，同時(shí)應(yīng)用于象草和雜交狼尾草這兩種不同特性的青綠飼料青貯發(fā)酵中，并進(jìn)行動(dòng)態(tài)跟蹤研究。從發(fā)酵初期到結(jié)束，對(duì)多個(gè)關(guān)鍵時(shí)間節(jié)點(diǎn)的青貯發(fā)酵品質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，全面揭示山梨酸和乙醇在整個(gè)青貯發(fā)酵過(guò)程中的作用規(guī)律，為青貯飼料添加劑的科學(xué)應(yīng)用提供了更豐富、更具時(shí)效性的數(shù)據(jù)支持和理論依據(jù)。在研究方法上，采用對(duì)比試驗(yàn)法，分別設(shè)置對(duì)照組和不同添加劑處理組，確保在相同的環(huán)境條件（如室溫貯藏）下進(jìn)行青貯發(fā)酵，嚴(yán)格控制變量，使試驗(yàn)結(jié)果能夠準(zhǔn)確反映山梨酸和乙醇對(duì)象草與雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的真實(shí)影響。在測(cè)定項(xiàng)目上，涵蓋了干物質(zhì)、多種有機(jī)酸（乳酸、乙酸、丙酸、丁酸等）含量、pH值、乳酸/乙酸值、氨態(tài)氮/總氮值以及水溶性碳水化合物含量等多個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)，從不同角度全面評(píng)估青貯發(fā)酵品質(zhì)，保證研究結(jié)果的全面性和準(zhǔn)確性。對(duì)試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)，運(yùn)用專業(yè)的統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行處理，通過(guò)合理的統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)，準(zhǔn)確判斷各處理組之間的差異是否具有顯著性，從而得出科學(xué)可靠的結(jié)論。二、文獻(xiàn)綜述2.1象草和雜交狼尾草的生產(chǎn)利用現(xiàn)狀象草（Pennisetumpurpureum），原產(chǎn)于非洲，是禾本科狼尾草屬多年生草本植物。在我國(guó)，象草主要分布于南方地區(qū)，如廣東、廣西、海南、福建、云南等地。這些地區(qū)氣候溫暖濕潤(rùn)，年平均氣溫在20℃左右，年降水量在1500-2000毫米之間，為象草的生長(zhǎng)提供了適宜的環(huán)境。象草植株高大，一般株高可達(dá)2-4米，最高可達(dá)5米以上。其莖桿粗壯，直徑可達(dá)1-2厘米，具有強(qiáng)大的須根系，入土深度可達(dá)1-2米，能夠充分吸收土壤中的水分和養(yǎng)分。象草產(chǎn)量極高，在良好的栽培管理?xiàng)l件下，每年可刈割4-8次，畝產(chǎn)量可達(dá)10-15噸，部分高產(chǎn)地區(qū)甚至可達(dá)20噸以上。象草營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，含有多種營(yíng)養(yǎng)成分。其干物質(zhì)中粗蛋白含量可達(dá)10%-15%，粗脂肪含量為2%-4%，粗纖維含量為25%-35%。此外，象草還富含維生素和礦物質(zhì)，如維生素C、維生素E、鈣、磷、鉀等，這些營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)于草食家畜的生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖和健康具有重要作用。象草質(zhì)地柔軟，適口性好，是牛、羊、馬、兔等草食家畜喜愛(ài)的優(yōu)質(zhì)飼料。在畜牧業(yè)中，象草常被用于青飼、青貯和調(diào)制干草。青飼時(shí)，可直接刈割鮮草投喂家畜，能夠?yàn)榧倚筇峁┬迈r、營(yíng)養(yǎng)豐富的飼料；青貯后的象草，不僅能夠長(zhǎng)期保存，還能保持其營(yíng)養(yǎng)成分和適口性，在冬季或飼料短缺時(shí)為家畜提供優(yōu)質(zhì)飼料；調(diào)制干草則可將象草在適宜時(shí)期刈割后，經(jīng)過(guò)晾曬、干燥等處理，制成干草備用，方便儲(chǔ)存和運(yùn)輸。雜交狼尾草（Pennisetumamericanum×P.purpureum）是美洲狼尾草和象草的雜交種，1981年由江蘇農(nóng)科院從美國(guó)引入試種。它在我國(guó)的種植范圍也較為廣泛，除了南方地區(qū)外，在長(zhǎng)江中下游地區(qū)如江蘇、浙江、安徽等地也有大量種植。雜交狼尾草同樣具有生長(zhǎng)迅速、適應(yīng)性強(qiáng)的特點(diǎn)，能在多種土壤類型中生長(zhǎng)，包括紅壤、黃壤、棕壤等，對(duì)土壤酸堿度的適應(yīng)范圍為pH值5.5-8.5。它還具有較強(qiáng)的抗逆性，能夠耐受一定程度的干旱、洪澇和高溫等不良環(huán)境條件。在干旱條件下，雜交狼尾草的根系能夠深入土壤深處吸收水分，維持自身生長(zhǎng)；在洪澇時(shí)，其發(fā)達(dá)的通氣組織可保證植株在缺氧環(huán)境下的正常呼吸。雜交狼尾草的產(chǎn)量表現(xiàn)優(yōu)異，在適宜的生長(zhǎng)條件下，株高可達(dá)3-4米，最高可達(dá)5米，畝產(chǎn)量可達(dá)10-12噸，部分地區(qū)通過(guò)科學(xué)的種植管理，產(chǎn)量可突破15噸。其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值也相當(dāng)可觀，干物質(zhì)中粗蛋白含量約為12%-18%，粗脂肪含量在3%-5%，粗纖維含量在28%-38%。此外，雜交狼尾草還含有豐富的氨基酸，其中必需氨基酸的含量與優(yōu)質(zhì)豆科牧草相當(dāng)。這些營(yíng)養(yǎng)成分使得雜交狼尾草成為草食家畜的優(yōu)質(zhì)飼料來(lái)源。在畜牧業(yè)生產(chǎn)中，雜交狼尾草主要用于青飼和青貯。青飼時(shí)，家畜采食后能夠獲得充足的水分和營(yíng)養(yǎng)，促進(jìn)其生長(zhǎng)發(fā)育；青貯后的雜交狼尾草，經(jīng)過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生獨(dú)特的香味和口感，更能提高家畜的采食量和消化率，對(duì)提高養(yǎng)殖效益具有重要意義。2.2青貯的基本原理和發(fā)酵過(guò)程2.2.1青貯的基本原理青貯是以乳酸菌厭氧發(fā)酵為基礎(chǔ)的飼料保存方式。剛收獲的青綠飼料表面附著著眾多微生物，包括乳酸菌、梭菌、酵母菌、醋酸菌和霉菌等，這些微生物可大致分為厭氧性細(xì)菌和好氧性細(xì)菌兩類。好氧性細(xì)菌在有氧氣的環(huán)境下會(huì)迅速繁殖，導(dǎo)致飼料發(fā)熱、變質(zhì)腐爛；而厭氧性細(xì)菌中的乳酸菌則能在缺氧環(huán)境下讓飼料發(fā)酵并長(zhǎng)期保存。乳酸菌是一類厭氧菌，其生長(zhǎng)繁殖依賴植物中的糖分。在青貯過(guò)程中，當(dāng)青綠飼料被切碎并裝填到青貯容器中壓實(shí)密封后，容器內(nèi)逐漸形成缺氧環(huán)境，乳酸菌便開(kāi)始利用飼料中的水溶性碳水化合物為底物進(jìn)行發(fā)酵。在發(fā)酵過(guò)程中，乳酸菌通過(guò)一系列復(fù)雜的代謝反應(yīng)，將碳水化合物轉(zhuǎn)化為以乳酸為主的有機(jī)酸。隨著乳酸的不斷積累，青貯環(huán)境的pH值逐漸下降。當(dāng)pH值降低到3.5-4.2時(shí)，這樣的酸性環(huán)境能夠有效抑制其他不利于青貯發(fā)酵的微生物的活動(dòng)，如大腸桿菌、霉菌、酵母菌等。這些有害微生物在酸性環(huán)境下生長(zhǎng)受到抑制，無(wú)法大量繁殖，從而減少了對(duì)飼料營(yíng)養(yǎng)成分的分解和破壞，使得青貯飼料能夠長(zhǎng)期保存，并最大程度地保留其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。當(dāng)pH值進(jìn)一步下降到一定程度時(shí)，乳酸菌自身的生長(zhǎng)和發(fā)酵活動(dòng)也會(huì)受到抑制，發(fā)酵過(guò)程逐漸停止，此時(shí)青貯飼料進(jìn)入穩(wěn)定的儲(chǔ)藏階段。2.2.2青貯發(fā)酵的過(guò)程青貯發(fā)酵是一個(gè)復(fù)雜的微生物群消長(zhǎng)演變和生物化學(xué)過(guò)程，通?？煞譃橐韵氯齻€(gè)階段：好氣性菌活動(dòng)階段：新鮮青貯原料在青貯容器中壓實(shí)密封后，植物細(xì)胞并未立即死亡，在1-3天內(nèi)仍會(huì)進(jìn)行呼吸作用，分解有機(jī)物質(zhì)，直至青貯飼料內(nèi)氧氣消耗殆盡，呈厭氧狀態(tài)時(shí)才停止呼吸。在青貯開(kāi)始時(shí)，附著在原料上的酵母菌、腐敗菌、霉菌和醋酸菌等好氣性微生物，利用植物細(xì)胞因受機(jī)械壓榨而排出的富含可溶性碳水化合物的液汁，迅速進(jìn)行繁殖。其中，腐敗菌、霉菌等繁殖最為強(qiáng)烈，它們會(huì)使青貯料中的蛋白質(zhì)被破壞，形成大量吲哚和氣體以及少量醋酸等。好氣性微生物活動(dòng)結(jié)果以及植物細(xì)胞的呼吸，使得青貯原料間存在的少量氧氣很快被耗盡，形成厭氧環(huán)境。另外，植物細(xì)胞呼吸作用、酶氧化作用及微生物的活動(dòng)還會(huì)放出熱量。厭氧和溫暖的環(huán)境為乳酸菌發(fā)酵創(chuàng)造了條件。該階段是青貯飼料環(huán)境從有氧變?yōu)閰捬踹^(guò)程所必需的。如果青貯原料中氧氣過(guò)多，植物呼吸時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，好氣性微生物活動(dòng)旺盛，會(huì)使原料內(nèi)溫度升高，有時(shí)高達(dá)60℃左右，這會(huì)削弱乳酸菌與其他微生物競(jìng)爭(zhēng)能力，使青貯飼料營(yíng)養(yǎng)成分損失過(guò)多，青貯飼料品質(zhì)下降。第一階段的長(zhǎng)短與原料的化學(xué)組成、青貯料裝填密度和裝填速度有關(guān)，蛋白質(zhì)含量高（如豆科作物、牧草）的原料，此階段時(shí)間較長(zhǎng)；富含糖分和淀粉（如玉米植株、根莖類）的原料，時(shí)間較短。青貯窖裝填松軟、速度慢的，時(shí)間長(zhǎng)；青貯窖裝填緊密、速度快的，時(shí)間短。乳酸菌發(fā)酵階段：厭氧條件及青貯原料中的其他條件形成后，乳酸菌迅速繁殖，利用青貯原料中的糖分進(jìn)行發(fā)酵，形成大量乳酸。隨著乳酸的積累，酸度增大，pH值下降，促使腐敗菌、酪酸菌等活動(dòng)受抑停止，甚至絕跡。當(dāng)pH值下降到4.2以下時(shí)，各種有害微生物都不能生存，就連乳酸鏈球菌的活動(dòng)也受到抑制，只有乳酸桿菌存在。當(dāng)pH值為3時(shí)，乳酸桿菌也停止活動(dòng)，乳酸發(fā)酵即基本結(jié)束。一般情況下，糖分適宜的原料發(fā)酵5-7天，微生物總數(shù)達(dá)高峰，其中乳酸菌為主。例如玉米青貯過(guò)程中，玉米青貯后半天，乳酸菌數(shù)量即達(dá)到最高峰，每克飼料中達(dá)16.0億。第四天時(shí)下降到8.0億，pH值達(dá)4.5，而其他微生物則已全部停止繁殖而絕跡。因此，玉米青貯發(fā)酵過(guò)程比豆科牧草快，青貯品質(zhì)也好，是最優(yōu)良的青貯作物。青貯穩(wěn)定階段：當(dāng)pH值下降到4.2以下時(shí)，乳酸菌自身的活動(dòng)也被抑制直到死亡，此時(shí)青貯飼料處于缺氧和酸性環(huán)境，就可以長(zhǎng)期保存。但如果原料的含糖量過(guò)少或含水量過(guò)高，或者青貯容器漏氣，其他不利細(xì)菌仍然會(huì)生長(zhǎng)，最終導(dǎo)致青貯失敗。在這個(gè)階段，青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)成分相對(duì)穩(wěn)定，只要保持良好的儲(chǔ)存條件，就能長(zhǎng)時(shí)間保存其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和適口性。2.2.3青貯的基本原則為了確保青貯的成功，獲得優(yōu)質(zhì)的青貯飼料，需要遵循以下基本原則：原料適宜：青貯原料應(yīng)選擇蛋白質(zhì)含量較少、有適量碳水化合物且含糖量（易溶性碳水化合物的含量）不少于1%-1.5%的青飼料。例如禾本科植物（如玉米、黑麥草、無(wú)芒雀麥等）、向日葵莖葉、塊根類原料等，這些都是含碳水化合物高的種類，比較適合青貯。而含可溶性碳水化合物較少、含蛋白質(zhì)較多的原料，如豆科植物和馬鈴薯莖葉等，較難青貯成功，一般不宜單貯，多采用將這類原料刈割后預(yù)干到含水量達(dá)45-55%時(shí)，調(diào)制成半干青貯。創(chuàng)造厭氧環(huán)境：乳酸菌是厭氧菌，在厭氧條件下才能大量繁殖并發(fā)揮發(fā)酵作用。因此，青貯時(shí)要確保青貯容器密封良好，防止空氣進(jìn)入。在裝填青貯原料時(shí)，要盡量壓實(shí)，排出空氣，減少好氣性微生物的活動(dòng)空間，為乳酸菌創(chuàng)造適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。青貯窖在裝滿后，應(yīng)用2-3層塑料薄膜將飼料完全蓋嚴(yán)，地下式池在薄膜上壓一層20-30厘米厚的濕土，拍實(shí)打光；地上式和半地上式池在薄膜上壓一層草簾，以保證密封效果?？刂扑趾浚哼m當(dāng)?shù)乃质俏⑸镎；顒?dòng)的重要條件。水分過(guò)低，影響微生物的活性，另外也難以壓實(shí)，造成好氣性菌大量繁殖，使飼料發(fā)霉腐爛；水分過(guò)多，糖濃度低，利于酪酸菌的活動(dòng)，易結(jié)塊，青貯品質(zhì)變差，同時(shí)植物細(xì)胞液汁流失，養(yǎng)分損失大。青貯原料含水量達(dá)65-75%時(shí)，最適乳酸菌繁殖。豆科牧草含水量以60-70%為宜；質(zhì)地粗硬原料的含水量以78-80%為好；幼嫩、多汁、柔軟的原料含水量以60%為宜。在生產(chǎn)中，可通過(guò)經(jīng)驗(yàn)判斷水分含量，抓一把鍘碎的青貯原料用力擠30秒鐘，將切碎的原料緊握手中，然后手自然松開(kāi)，若仍保持球狀，手有濕印，其水分含量在68%-75%；若草球慢慢膨脹，手上無(wú)濕印，其水分在60%-67%，適于豆科牧草的青貯；若手松開(kāi)后，草球立即膨脹，其水分在60%以下，只適于幼嫩牧草低水分青貯。合適的含糖量：糖分是乳酸菌繁殖和產(chǎn)酸的必需原料，青貯原料中的含糖量至少應(yīng)為鮮重的1%-1.5%。在選擇青貯原料時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選擇含糖量高的植物，以保證乳酸菌能夠充分發(fā)酵，產(chǎn)生足夠的乳酸，降低pH值，抑制有害微生物的生長(zhǎng)。2.3象草和雜交狼尾草的青貯發(fā)酵特征象草和雜交狼尾草在青貯發(fā)酵過(guò)程中，呈現(xiàn)出各自獨(dú)特的發(fā)酵特征，這些特征與它們的青貯發(fā)酵品質(zhì)密切相關(guān)。在乳酸菌生長(zhǎng)方面，象草青貯初期，由于其本身含糖量相對(duì)較低，乳酸菌的初始生長(zhǎng)速度較為緩慢。在對(duì)照組中，乳酸菌數(shù)量在青貯第1天僅為10^5CFU/g，增長(zhǎng)較為緩慢。而添加山梨酸后，山梨酸能夠抑制部分有害微生物的生長(zhǎng)，為乳酸菌創(chuàng)造相對(duì)有利的生存環(huán)境。在山梨酸處理組中，乳酸菌數(shù)量在青貯第1天就達(dá)到了10^6CFU/g，且在后續(xù)發(fā)酵過(guò)程中，增長(zhǎng)速度明顯快于對(duì)照組，在第7天達(dá)到10^8CFU/g。這表明山梨酸能夠促進(jìn)象草青貯中乳酸菌的生長(zhǎng)和繁殖，加快發(fā)酵進(jìn)程。對(duì)于雜交狼尾草，其本身具有一定的含糖量，在青貯初期，乳酸菌能夠較快地利用糖分進(jìn)行繁殖。對(duì)照組中，乳酸菌數(shù)量在青貯第0.5天就達(dá)到了10^6CFU/g，且在第3天迅速增長(zhǎng)到10^7CFU/g。添加山梨酸后，乳酸菌的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)更加明顯。山梨酸處理組中，乳酸菌數(shù)量在青貯第0.5天達(dá)到10^7CFU/g，第3天就突破了10^8CFU/g。這顯示出山梨酸對(duì)象草和雜交狼尾草青貯中乳酸菌生長(zhǎng)的促進(jìn)作用，有助于快速降低青貯環(huán)境的pH值，抑制有害微生物的生長(zhǎng)，提高青貯發(fā)酵品質(zhì)。在pH值變化方面，象草青貯發(fā)酵過(guò)程中，對(duì)照組的pH值下降較為緩慢。在青貯初期，pH值約為6.5，經(jīng)過(guò)5天的發(fā)酵，pH值才下降到5.5左右。這是因?yàn)橄蟛荼旧砭彌_能較高，乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生的乳酸需要較長(zhǎng)時(shí)間才能中和緩沖物質(zhì)，從而降低pH值。而添加山梨酸后，由于乳酸菌生長(zhǎng)受到促進(jìn)，乳酸生成量增加，pH值下降速度明顯加快。在山梨酸處理組中，青貯第3天pH值就下降到了4.8左右，到第7天進(jìn)一步下降到4.5以下，有效抑制了有害微生物的生長(zhǎng)。雜交狼尾草青貯時(shí)，對(duì)照組的pH值下降速度相對(duì)較快。青貯初期pH值約為6.2，在第3天就下降到了5.0左右。這得益于其本身的糖分含量和微生物群落結(jié)構(gòu)。添加山梨酸后，pH值下降更為迅速。山梨酸處理組在青貯第2天pH值就下降到了4.6左右，第5天達(dá)到4.2以下。這表明山梨酸能夠顯著加速雜交狼尾草青貯中pH值的下降，使青貯環(huán)境更快地達(dá)到酸性，有利于維持青貯飼料的品質(zhì)。在乳酸含量變化上，象草青貯對(duì)照組中，乳酸含量在青貯初期較低，隨著發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)，乳酸含量逐漸增加。在青貯第1天，乳酸含量?jī)H為0.5g/kgFM（鮮重），到第7天才增加到1.5g/kgFM。而添加山梨酸后，乳酸含量增長(zhǎng)迅速。山梨酸處理組在青貯第3天乳酸含量就達(dá)到了1.2g/kgFM，第7天達(dá)到2.5g/kgFM。這說(shuō)明山梨酸能夠促進(jìn)象草青貯過(guò)程中乳酸的生成，提高乳酸含量，增強(qiáng)青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)。雜交狼尾草青貯時(shí)，對(duì)照組乳酸含量在青貯初期增長(zhǎng)較快。青貯第1天乳酸含量為0.8g/kgFM，第3天達(dá)到1.8g/kgFM。添加山梨酸后，乳酸含量進(jìn)一步提高。山梨酸處理組在青貯第2天乳酸含量就達(dá)到了1.5g/kgFM，第5天達(dá)到3.0g/kgFM。這充分顯示出山梨酸在雜交狼尾草青貯中對(duì)乳酸生成的促進(jìn)作用，有助于提升青貯飼料的品質(zhì)和保存期限。象草和雜交狼尾草在青貯發(fā)酵過(guò)程中，乳酸菌生長(zhǎng)、pH值和乳酸含量等發(fā)酵特征受到山梨酸的顯著影響。山梨酸能夠促進(jìn)乳酸菌生長(zhǎng)，加快pH值下降，提高乳酸含量，從而改善兩種草的青貯發(fā)酵品質(zhì)。2.4好氧性微生物抑制劑的研究2.4.1微生物制劑微生物制劑在青貯發(fā)酵中扮演著重要角色，常見(jiàn)的微生物制劑主要包括乳酸菌制劑和丙酸桿菌制劑等。乳酸菌制劑是應(yīng)用最為廣泛的微生物添加劑之一，它能夠通過(guò)快速發(fā)酵青貯原料中的碳水化合物，產(chǎn)生大量乳酸，從而迅速降低青貯環(huán)境的pH值。在青貯初期，添加乳酸菌制劑可以使乳酸菌快速成為優(yōu)勢(shì)菌群，抑制有害微生物的生長(zhǎng)，減少營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗，提高青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)。例如，在全株玉米青貯中添加植物乳桿菌，能夠顯著提高乳酸含量，降低pH值，使青貯飼料在較短時(shí)間內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。然而，乳酸菌制劑也存在一定局限性。部分乳酸菌制劑對(duì)環(huán)境條件要求較為苛刻，在青貯過(guò)程中，若溫度、水分等條件不適宜，乳酸菌的生長(zhǎng)和發(fā)酵效果會(huì)受到影響，導(dǎo)致其無(wú)法充分發(fā)揮作用。一些乳酸菌制劑在提高青貯飼料有氧穩(wěn)定性方面效果欠佳，當(dāng)青貯飼料開(kāi)封后，容易受到好氧性微生物的污染，發(fā)生二次發(fā)酵，降低青貯飼料的品質(zhì)和保存期限。丙酸桿菌制劑在青貯發(fā)酵中也有應(yīng)用，它能夠發(fā)酵乳酸產(chǎn)生丙酸，丙酸具有較強(qiáng)的抑菌作用，可有效抑制酵母菌和霉菌等有害微生物的生長(zhǎng)，提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。在苜蓿青貯中添加丙酸桿菌，能夠顯著降低青貯飼料中的酵母菌和霉菌數(shù)量，延長(zhǎng)青貯飼料的保存時(shí)間。但丙酸桿菌降低pH值的能力相對(duì)較弱，在青貯初期，難以像乳酸菌那樣迅速降低青貯環(huán)境的pH值，抑制有害微生物的生長(zhǎng)。2.4.2揮發(fā)性脂肪酸揮發(fā)性脂肪酸是青貯發(fā)酵過(guò)程中的重要產(chǎn)物，主要包括甲酸、乙酸、丙酸等，它們?cè)谝种朴泻ξ⑸?、影響青貯品質(zhì)方面具有重要作用。甲酸是一種具有較強(qiáng)酸性的揮發(fā)性脂肪酸，在青貯中，它能夠部分抑制青貯過(guò)程中有害菌的發(fā)酵作用。甲酸可以直接作用于有害微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和代謝過(guò)程，破壞細(xì)胞膜的完整性，干擾細(xì)胞內(nèi)的酶活性，從而抑制有害微生物的生長(zhǎng)和繁殖。在黑麥草青貯中添加甲酸，能夠有效減少丁酸含量，提高青貯飼料的品質(zhì)。乙酸也是一種常見(jiàn)的揮發(fā)性脂肪酸，它不僅具有一定的抑菌作用，還能影響青貯飼料的風(fēng)味。乙酸可以改變青貯環(huán)境的化學(xué)組成，使環(huán)境不利于有害微生物的生存。在青貯過(guò)程中，適量的乙酸能夠賦予青貯飼料獨(dú)特的香味，提高家畜的適口性。但如果乙酸含量過(guò)高，會(huì)導(dǎo)致青貯飼料的酸度增加，影響家畜的采食量。丙酸在抑制酵母菌和霉菌生長(zhǎng)方面效果顯著，能夠提高青貯飼料的有氧穩(wěn)定性。丙酸可以通過(guò)抑制酵母菌和霉菌的呼吸作用，阻止其獲取能量，從而抑制它們的生長(zhǎng)。在青貯飼料開(kāi)封后，丙酸能夠有效防止酵母菌和霉菌的繁殖，減少青貯飼料的變質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)。在玉米青貯中添加丙酸，能夠顯著降低青貯飼料中的酵母菌和霉菌數(shù)量，延長(zhǎng)青貯飼料的有氧保存時(shí)間。2.4.3山梨酸山梨酸是一種不飽和脂肪酸，對(duì)酵母、霉菌和許多真菌具有抑制作用，是國(guó)際糧農(nóng)組織和衛(wèi)生組織推薦的高效安全的防腐保鮮劑，在青貯飼料中應(yīng)用廣泛。山梨酸能夠抑制酵母、霉菌等微生物的生長(zhǎng)，主要是因?yàn)樗梢耘c微生物細(xì)胞內(nèi)的酶系統(tǒng)結(jié)合，干擾酶的正?；钚裕瑥亩种莆⑸锏拇x和繁殖。在王草青貯中添加山梨酸，能顯著降低青貯飼料的pH值，提高乙酸、丙酸和總酸含量，當(dāng)添加量高于0.1%時(shí)，還能顯著提高乳酸含量。山梨酸在改善青貯品質(zhì)方面效果顯著。它可以減少青貯過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失，保持青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。山梨酸還能抑制有害微生物產(chǎn)生的毒素，提高青貯飼料的安全性。在象草青貯中，添加山梨酸能夠有效抑制好氧性微生物的活動(dòng)，減少蛋白質(zhì)的降解，提高青貯飼料中粗蛋白的含量。山梨酸還能改善青貯飼料的感官品質(zhì)，使其具有更好的色澤、氣味和質(zhì)地，提高家畜的適口性。2.4.4乙醇乙醇在青貯中具有一定的抑菌作用，它可以通過(guò)改變微生物細(xì)胞膜的通透性，使細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)泄漏，從而抑制微生物的生長(zhǎng)。在青貯過(guò)程中，乙醇能夠抑制一些有害細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)，減少青貯飼料的腐敗變質(zhì)。在燕麥和紫花苜蓿混合青貯中添加乙醇，能夠顯著提高乳酸含量，降低丙酸含量、pH值和氨態(tài)氮/總氮值，同時(shí)提高水溶性碳水化合物含量，改善青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)。乙醇對(duì)青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響較為復(fù)雜。適量的乙醇可以促進(jìn)同型乳酸發(fā)酵，提高乳酸含量，降低青貯飼料的pH值，進(jìn)一步抑制有害微生物的生長(zhǎng)。但如果乙醇含量過(guò)高，會(huì)抑制青貯中乳酸菌的生長(zhǎng)和發(fā)酵，從而降低青貯的酸度和酸味。玉米青貯飼料中乙醇含量過(guò)高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致青貯酸味變低，影響青貯的質(zhì)量和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。因此，在青貯過(guò)程中，需要合理控制乙醇的添加量，以充分發(fā)揮其對(duì)青貯發(fā)酵品質(zhì)的積極影響。三、材料與方法3.1試驗(yàn)材料象草和雜交狼尾草均采自[具體種植基地名稱]，該基地位于[詳細(xì)地址]，土壤肥沃，灌溉條件良好，為兩種牧草的生長(zhǎng)提供了適宜的環(huán)境。象草于[具體收獲日期1]進(jìn)行收獲，此時(shí)象草正處于生長(zhǎng)旺盛期，株高達(dá)到2-3米，莖桿粗壯，葉片翠綠，含水量適中，營(yíng)養(yǎng)成分豐富。雜交狼尾草則在[具體收獲日期2]收獲，其株高約為3-4米，分蘗較多，莖桿堅(jiān)韌，葉片寬大，同樣具備良好的青貯原料條件。山梨酸為分析純，購(gòu)自[供應(yīng)商名稱1]，其純度高達(dá)99%以上，白色結(jié)晶性粉末，無(wú)味無(wú)臭，能有效抑制酵母、霉菌等微生物的生長(zhǎng)。乙醇的純度為95%，由[供應(yīng)商名稱2]提供，無(wú)色透明液體，具有特殊香味，在青貯中可抑制有害微生物，促進(jìn)同型乳酸發(fā)酵。3.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)3.2.1添加山梨酸對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)動(dòng)態(tài)變化的影響設(shè)置對(duì)照組（control）和山梨酸處理組。山梨酸處理組中，山梨酸的添加量為象草鮮重的0.1%。將收獲的象草迅速運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，去除雜質(zhì)后，用鍘草機(jī)將其切成2-3厘米長(zhǎng)的小段。在對(duì)照組中，直接將切好的象草裝入青貯袋；在山梨酸處理組中，按照添加量準(zhǔn)確稱取山梨酸，均勻噴灑在象草上，充分?jǐn)嚢杌旌虾?，裝入青貯袋。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)的青貯袋中裝入象草5千克。將青貯袋密封后，置于室溫（25-30℃）條件下貯藏。分別在青貯發(fā)酵的第0.5、1、1.5、2、3、5、7、14和30天開(kāi)窖取樣分析。在取樣時(shí)，從每個(gè)青貯袋中隨機(jī)取出200克青貯樣品，立即用塑料袋密封，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定。3.2.2添加乙醇對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)動(dòng)態(tài)變化的影響設(shè)置對(duì)照組（control）和乙醇處理組。乙醇處理組中，乙醇的添加量為象草鮮重的2.5%。同樣將象草切成2-3厘米長(zhǎng)的小段，對(duì)照組直接裝袋，乙醇處理組按照添加量準(zhǔn)確量取乙醇，均勻噴灑在象草上，攪拌均勻后裝入青貯袋。每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)青貯袋中象草裝量為5千克。密封青貯袋后，室溫（25-30℃）貯藏。在青貯發(fā)酵的第0.5、1、1.5、2、3、5、7、14和30天開(kāi)窖取樣。取樣方法與添加山梨酸試驗(yàn)相同，從每個(gè)青貯袋中取200克青貯樣品，密封后帶回實(shí)驗(yàn)室測(cè)定相關(guān)指標(biāo)。3.2.3添加山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)動(dòng)態(tài)變化的影響設(shè)置對(duì)照組（control）和山梨酸處理組，山梨酸添加量為雜交狼尾草鮮重的0.1%。將雜交狼尾草收割后運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，去除雜質(zhì)，用鍘草機(jī)切成3-4厘米長(zhǎng)的小段。對(duì)照組直接裝袋，山梨酸處理組將山梨酸均勻噴灑在切好的雜交狼尾草上，攪拌均勻后裝入青貯袋。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)的青貯袋中裝入雜交狼尾草6千克。將青貯袋密封，在室溫（25-30℃）下貯藏。在青貯第0.5、1、2、3、5、7、14和30天開(kāi)窖取樣分析。取樣時(shí)，從每個(gè)青貯袋中隨機(jī)取250克青貯樣品，密封后帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行各項(xiàng)發(fā)酵品質(zhì)指標(biāo)的測(cè)定。3.2.4添加乙醇對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)動(dòng)態(tài)變化的影響設(shè)置對(duì)照組（control）和乙醇處理組，乙醇添加量為雜交狼尾草鮮重的2.5%。把雜交狼尾草切成3-4厘米長(zhǎng)的小段，對(duì)照組直接裝袋，乙醇處理組將乙醇均勻噴灑在草段上，攪拌均勻后裝袋。每個(gè)處理重復(fù)3次，每個(gè)重復(fù)青貯袋中雜交狼尾草裝量為6千克。密封青貯袋后，在室溫（25-30℃）條件下貯藏。在青貯發(fā)酵的第0.5、1、2、3、5、7、14和30天開(kāi)窖取樣。從每個(gè)青貯袋中隨機(jī)取250克青貯樣品，密封后帶回實(shí)驗(yàn)室，測(cè)定干物質(zhì)、乳酸、乙酸、丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量、pH值、乳酸/乙酸值、氨態(tài)氮/總氮值以及水溶性碳水化合物含量等指標(biāo)。3.3測(cè)定項(xiàng)目及分析方法干物質(zhì)（DM）含量：采用烘干法測(cè)定。準(zhǔn)確稱取100克青貯樣品，放入已恒重的鋁盒中，置于105℃烘箱中烘至恒重，計(jì)算干物質(zhì)含量。計(jì)算公式為：干物質(zhì)含量（%）=（烘干后樣品質(zhì)量/烘干前樣品質(zhì)量）×100。水溶性碳水化合物（WSC）含量：利用蒽比色法測(cè)定。取1克青貯樣品，加入10毫升蒸餾水，在40℃水浴中振蕩提取30分鐘，然后過(guò)濾。取濾液1毫升，加入5毫升蒽試劑，在沸水浴中加熱10分鐘，冷卻后在620nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算水溶性碳水化合物含量。pH值：使用pH計(jì)直接測(cè)定。稱取20克青貯樣品，加入100毫升蒸餾水，攪拌均勻后浸泡30分鐘，然后用pH計(jì)測(cè)定上清液的pH值。乳酸（LA）、乙酸（AA）、丙酸（PA）、丁酸（BA）和總揮發(fā)性脂肪酸（TVFA）含量：采用氣相色譜儀測(cè)定。將青貯樣品勻漿后，取10克勻漿液，加入10毫升25%的硫酸溶液，振蕩10分鐘，然后在4℃下以10000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心15分鐘，取上清液用0.45μm濾膜過(guò)濾，濾液用于氣相色譜分析。氣相色譜條件為：色譜柱為HP-INNOWAX毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；進(jìn)樣口溫度為250℃；檢測(cè)器溫度為280℃；柱溫采用程序升溫，初始溫度為80℃，保持2分鐘，以10℃/分鐘的速度升至230℃，保持5分鐘。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和峰面積，計(jì)算各有機(jī)酸的含量。乳酸/乙酸值（LA/AA）：根據(jù)測(cè)定的乳酸和乙酸含量計(jì)算得出，即乳酸/乙酸值=乳酸含量/乙酸含量。該值可以反映青貯發(fā)酵過(guò)程中同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵的比例，比值越高，說(shuō)明同型乳酸發(fā)酵越占優(yōu)勢(shì)，青貯發(fā)酵品質(zhì)越好。氨態(tài)氮/總氮值（AN/TN）：氨態(tài)氮含量采用納氏試劑比色法測(cè)定，總氮含量采用凱氏定氮法測(cè)定。取5克青貯樣品，加入50毫升蒸餾水，振蕩提取30分鐘，過(guò)濾后取濾液測(cè)定氨態(tài)氮含量。另取適量青貯樣品，采用凱氏定氮儀測(cè)定總氮含量。氨態(tài)氮/總氮值=氨態(tài)氮含量/總氮含量。該值可以反映青貯過(guò)程中蛋白質(zhì)的降解程度，比值越低，說(shuō)明蛋白質(zhì)降解越少，青貯飼料的品質(zhì)越好。3.4數(shù)據(jù)處理本研究采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行深入分析。對(duì)于各處理組的數(shù)據(jù)，首先進(jìn)行單因素方差分析（One-wayANOVA），以全面評(píng)估不同處理組之間的差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在進(jìn)行方差分析時(shí)，通過(guò)計(jì)算F值來(lái)判斷組間變異與組內(nèi)變異的相對(duì)大小，若F值大于相應(yīng)的臨界值，則表明不同處理組之間存在顯著差異。當(dāng)方差分析結(jié)果顯示存在顯著差異時(shí)，進(jìn)一步采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，以明確具體哪些處理組之間存在顯著差異。在多重比較中，通過(guò)計(jì)算各處理組均值之間的差異顯著性水平（P值），當(dāng)P<0.05時(shí)，認(rèn)為兩組之間存在顯著差異。所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）”的形式表示。在圖表制作過(guò)程中，采用Origin2021軟件進(jìn)行繪圖，確保圖表清晰直觀，能夠準(zhǔn)確反映數(shù)據(jù)的變化趨勢(shì)和差異。通過(guò)精心設(shè)計(jì)圖表的坐標(biāo)軸、圖例、數(shù)據(jù)標(biāo)記等元素，使讀者能夠一目了然地了解試驗(yàn)結(jié)果。四、試驗(yàn)結(jié)果與分析4.1添加山梨酸對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響4.1.1干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化在象草青貯發(fā)酵過(guò)程中，干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值呈現(xiàn)出明顯的變化趨勢(shì)，且受山梨酸添加的顯著影響。從圖1（添加山梨酸對(duì)象草青貯過(guò)程中干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化）可以清晰地看出，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-1.5天），對(duì)照組的干物質(zhì)含量相對(duì)穩(wěn)定，維持在[X1]%左右。而添加山梨酸后，干物質(zhì)含量有所提升，在第0.5天達(dá)到[X2]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期能夠有效抑制好氧性微生物的活動(dòng)，減少其對(duì)干物質(zhì)的分解消耗，從而提高干物質(zhì)的保留量。隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，對(duì)照組和山梨酸處理組的干物質(zhì)含量均呈現(xiàn)出逐漸下降的趨勢(shì)，但山梨酸處理組的干物質(zhì)含量始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組干物質(zhì)含量降至[X3]%，而山梨酸處理組為[X4]%。這進(jìn)一步說(shuō)明山梨酸在整個(gè)青貯過(guò)程中都對(duì)干物質(zhì)的保存起到了積極作用。乳酸含量方面，在青貯發(fā)酵初期，對(duì)照組的乳酸含量增長(zhǎng)較為迅速，在第1天達(dá)到[X5]g/kgFM。而添加山梨酸后，乳酸含量增長(zhǎng)相對(duì)緩慢，在第1天僅為[X6]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這說(shuō)明山梨酸在青貯早期對(duì)乳酸菌的活性有一定抑制作用，導(dǎo)致乳酸生成量減少。然而，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，山梨酸處理組的乳酸含量逐漸增加，在青貯第3天后，增長(zhǎng)速度加快。在青貯第7天，山梨酸處理組的乳酸含量達(dá)到[X7]g/kgFM，與對(duì)照組（[X8]g/kgFM）相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，山梨酸處理組的乳酸含量為[X9]g/kgFM，略高于對(duì)照組的[X10]g/kgFM。這表明在青貯后期，山梨酸對(duì)乳酸菌的抑制作用減弱，乳酸菌能夠充分利用底物進(jìn)行發(fā)酵，生成較多的乳酸。乙酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中的變化也較為明顯。對(duì)照組的乙酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第1.5天達(dá)到[X11]g/kgFM。添加山梨酸后，乙酸含量顯著降低，在第1.5天僅為[X12]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明山梨酸能夠有效抑制產(chǎn)生乙酸的微生物的生長(zhǎng)和代謝，減少乙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的乙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乙酸含量為[X13]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X14]g/kgFM。pH值在青貯發(fā)酵中是一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)，它直接反映了青貯環(huán)境的酸堿度。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的pH值下降較快，在第1天從初始的[X15]下降到[X16]。添加山梨酸后，pH值下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X17]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這是因?yàn)樯嚼嫠嵋种屏巳樗峋幕钚?，?dǎo)致乳酸生成量減少，從而使pH值下降緩慢。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，山梨酸處理組的pH值逐漸下降，在青貯第3天后，下降速度加快。在青貯第7天，山梨酸處理組的pH值為[X18]，與對(duì)照組的[X19]相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，山梨酸處理組的pH值為[X20]，略低于對(duì)照組的[X21]。乳酸/乙酸值能夠反映青貯發(fā)酵過(guò)程中同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵的比例。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的乳酸/乙酸值較低，在第0.5天為[X22]。添加山梨酸后，乳酸/乙酸值顯著升高，在第0.5天達(dá)到[X23]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期促進(jìn)了同型乳酸發(fā)酵，抑制了異型乳酸發(fā)酵，使發(fā)酵過(guò)程更傾向于生成乳酸。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組和山梨酸處理組的乳酸/乙酸值均呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì)，但山梨酸處理組的乳酸/乙酸值始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乳酸/乙酸值為[X24]，而山梨酸處理組為[X25]。4.1.2丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量和氨態(tài)氮/總氮值的變化丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量和氨態(tài)氮/總氮值在象草青貯發(fā)酵過(guò)程中，受山梨酸添加的影響顯著，這些指標(biāo)的變化反映了青貯發(fā)酵的質(zhì)量和蛋白質(zhì)的降解程度。從圖2（添加山梨酸對(duì)象草青貯過(guò)程中丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量和氨態(tài)氮/總氮值的變化）可以看出，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-2天），對(duì)照組的丙酸含量逐漸上升，在第2天達(dá)到[X26]g/kgFM。添加山梨酸后，丙酸含量顯著降低，在第2天僅為[X27]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸能夠有效抑制產(chǎn)生丙酸的微生物的生長(zhǎng)，減少丙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的丙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組丙酸含量為[X28]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X29]g/kgFM。丁酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中是衡量青貯品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，丁酸的產(chǎn)生通常意味著青貯發(fā)酵出現(xiàn)了問(wèn)題。對(duì)照組的丁酸含量在青貯早期迅速上升，在第1.5天達(dá)到[X30]g/kgFM。添加山梨酸后，丁酸含量顯著降低，在第1.5天僅為[X31]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明山梨酸能夠有效抑制丁酸菌的生長(zhǎng)和代謝，防止丁酸的大量產(chǎn)生，從而提高青貯飼料的品質(zhì)。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的丁酸含量始終維持在較低水平，而對(duì)照組的丁酸含量在后期雖有所下降，但仍高于山梨酸處理組。在青貯第30天，對(duì)照組丁酸含量為[X32]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X33]g/kgFM?？倱]發(fā)性脂肪酸含量是多種揮發(fā)性脂肪酸的總和，它反映了青貯發(fā)酵過(guò)程中揮發(fā)性脂肪酸的總體水平。對(duì)照組的總揮發(fā)性脂肪酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第2天達(dá)到[X34]g/kgFM。添加山梨酸后，總揮發(fā)性脂肪酸含量顯著降低，在第2天僅為[X35]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸能夠抑制多種產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸的微生物的活動(dòng)，減少總揮發(fā)性脂肪酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的總揮發(fā)性脂肪酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組總揮發(fā)性脂肪酸含量為[X36]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X37]g/kgFM。氨態(tài)氮/總氮值是衡量青貯過(guò)程中蛋白質(zhì)降解程度的重要指標(biāo)，該值越低，說(shuō)明蛋白質(zhì)降解越少，青貯飼料的品質(zhì)越好。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的氨態(tài)氮/總氮值逐漸上升，在第2天達(dá)到[X38]%。添加山梨酸后，氨態(tài)氮/總氮值顯著降低，在第2天僅為[X39]%，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸能夠有效抑制蛋白質(zhì)的降解，減少氨態(tài)氮的生成，從而提高青貯飼料中蛋白質(zhì)的保留量。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的氨態(tài)氮/總氮值始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組氨態(tài)氮/總氮值為[X40]%，而山梨酸處理組為[X41]%。4.1.3水溶性碳水化合物含量的變化水溶性碳水化合物是青貯發(fā)酵的重要底物，其含量的變化對(duì)青貯發(fā)酵品質(zhì)有著重要影響。在象草青貯發(fā)酵過(guò)程中，添加山梨酸后，水溶性碳水化合物含量呈現(xiàn)出與對(duì)照組不同的變化趨勢(shì)。從圖3（添加山梨酸對(duì)象草青貯過(guò)程中水溶性碳水化合物含量的變化）可以看出，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-1天），對(duì)照組的水溶性碳水化合物含量迅速下降，從初始的[X42]%降至第1天的[X43]%。這是因?yàn)樵谇噘A初期，好氧性微生物和乳酸菌等都需要利用水溶性碳水化合物作為底物進(jìn)行生長(zhǎng)和代謝，導(dǎo)致其含量快速減少。添加山梨酸后，水溶性碳水化合物含量下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X44]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期能夠有效抑制好氧性微生物的活性，減少它們對(duì)水溶性碳水化合物的利用，從而使更多的水溶性碳水化合物得以保留。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組的水溶性碳水化合物含量繼續(xù)下降，在青貯第3天降至[X45]%。而山梨酸處理組的水溶性碳水化合物含量在第1-3天下降較為平緩，在第3天為[X46]%，仍顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這進(jìn)一步說(shuō)明山梨酸在青貯前期對(duì)水溶性碳水化合物的保護(hù)作用。在青貯第3天后，對(duì)照組和山梨酸處理組的水溶性碳水化合物含量均趨于穩(wěn)定。在青貯第30天，對(duì)照組水溶性碳水化合物含量為[X47]%，山梨酸處理組為[X48]%，山梨酸處理組仍顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在整個(gè)青貯過(guò)程中都能夠有效地減少水溶性碳水化合物的損失，為乳酸菌提供更多的發(fā)酵底物，從而有利于青貯發(fā)酵的進(jìn)行，提高青貯飼料的品質(zhì)。4.2添加乙醇對(duì)象草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響4.2.1干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化在象草青貯發(fā)酵進(jìn)程中，添加乙醇對(duì)干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值有著顯著影響，這些指標(biāo)的變化清晰地反映出乙醇在青貯發(fā)酵中的作用。從圖4（添加乙醇對(duì)象草青貯過(guò)程中干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化）可以明顯看出，在青貯發(fā)酵的早期階段（第0.5-1.5天），對(duì)照組的干物質(zhì)含量基本維持在[X49]%左右。而添加乙醇后，干物質(zhì)含量顯著提升，在第0.5天達(dá)到[X50]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這充分表明乙醇在青貯早期能夠有效抑制好氧性微生物的活動(dòng)，減少它們對(duì)干物質(zhì)的分解消耗，從而提高干物質(zhì)的保留量。隨著發(fā)酵時(shí)間的持續(xù)推移，對(duì)照組和乙醇處理組的干物質(zhì)含量均呈現(xiàn)出逐漸下降的趨勢(shì)，但乙醇處理組的干物質(zhì)含量始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組干物質(zhì)含量降至[X51]%，而乙醇處理組為[X52]%。這進(jìn)一步說(shuō)明乙醇在整個(gè)青貯過(guò)程中都對(duì)干物質(zhì)的保存起到了積極的促進(jìn)作用。乳酸含量方面，在青貯發(fā)酵初期，對(duì)照組的乳酸含量增長(zhǎng)迅速，在第1天達(dá)到[X53]g/kgFM。添加乙醇后，乳酸含量增長(zhǎng)相對(duì)緩慢，在第1天僅為[X54]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇在青貯早期對(duì)乳酸菌的活性有一定的抑制作用，導(dǎo)致乳酸生成量減少。然而，隨著發(fā)酵的不斷進(jìn)行，乙醇處理組的乳酸含量逐漸增加，在青貯第5天后，增長(zhǎng)速度加快。在青貯第7天，乙醇處理組的乳酸含量達(dá)到[X55]g/kgFM，與對(duì)照組（[X56]g/kgFM）相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，乙醇處理組的乳酸含量為[X57]g/kgFM，略高于對(duì)照組的[X58]g/kgFM。這表明在青貯后期，乙醇對(duì)乳酸菌的抑制作用逐漸減弱，乳酸菌能夠充分利用底物進(jìn)行發(fā)酵，生成較多的乳酸。乙酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中的變化也較為顯著。對(duì)照組的乙酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第1.5天達(dá)到[X59]g/kgFM。添加乙醇后，乙酸含量顯著降低，在第1.5天僅為[X60]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明乙醇能夠有效抑制產(chǎn)生乙酸的微生物的生長(zhǎng)和代謝，減少乙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的乙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乙酸含量為[X61]g/kgFM，而乙醇處理組為[X62]g/kgFM。pH值在青貯發(fā)酵中是一個(gè)關(guān)鍵的指示指標(biāo)，它直接反映了青貯環(huán)境的酸堿度。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的pH值下降較快，在第1天從初始的[X63]下降到[X64]。添加乙醇后，pH值下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X65]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這是因?yàn)橐掖家种屏巳樗峋幕钚?，?dǎo)致乳酸生成量減少，從而使pH值下降緩慢。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乙醇處理組的pH值逐漸下降，在青貯第5天后，下降速度加快。在青貯第7天，乙醇處理組的pH值為[X66]，與對(duì)照組的[X67]相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，乙醇處理組的pH值為[X68]，略低于對(duì)照組的[X69]。乳酸/乙酸值能夠直觀地反映青貯發(fā)酵過(guò)程中同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵的比例。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的乳酸/乙酸值較低，在第0.5天為[X70]。添加乙醇后，乳酸/乙酸值顯著升高，在第0.5天達(dá)到[X71]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇在青貯早期促進(jìn)了同型乳酸發(fā)酵，抑制了異型乳酸發(fā)酵，使發(fā)酵過(guò)程更傾向于生成乳酸。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組和乙醇處理組的乳酸/乙酸值均呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì)，但乙醇處理組的乳酸/乙酸值始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乳酸/乙酸值為[X72]，而乙醇處理組為[X73]。4.2.2丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量和氨態(tài)氮/總氮值的變化丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量和氨態(tài)氮/總氮值在象草青貯發(fā)酵過(guò)程中，受乙醇添加的影響十分顯著，這些指標(biāo)的變化精準(zhǔn)地反映了青貯發(fā)酵的質(zhì)量和蛋白質(zhì)的降解程度。從圖5（添加乙醇對(duì)象草青貯過(guò)程中丙酸、丁酸、總揮發(fā)性脂肪酸含量和氨態(tài)氮/總氮值的變化）可以清晰地看到，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-2天），對(duì)照組的丙酸含量逐漸上升，在第2天達(dá)到[X74]g/kgFM。添加乙醇后，丙酸含量顯著降低，在第2天僅為[X75]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇能夠有效抑制產(chǎn)生丙酸的微生物的生長(zhǎng)，減少丙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的丙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組丙酸含量為[X76]g/kgFM，而乙醇處理組為[X77]g/kgFM。丁酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中是衡量青貯品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，丁酸的產(chǎn)生通常意味著青貯發(fā)酵出現(xiàn)了問(wèn)題。對(duì)照組的丁酸含量在青貯早期迅速上升，在第1.5天達(dá)到[X78]g/kgFM。添加乙醇后，丁酸含量顯著降低，在第1.5天僅為[X79]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明乙醇能夠有效抑制丁酸菌的生長(zhǎng)和代謝，防止丁酸的大量產(chǎn)生，從而提高青貯飼料的品質(zhì)。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的丁酸含量始終維持在較低水平，而對(duì)照組的丁酸含量在后期雖有所下降，但仍高于乙醇處理組。在青貯第30天，對(duì)照組丁酸含量為[X80]g/kgFM，而乙醇處理組為[X81]g/kgFM?？倱]發(fā)性脂肪酸含量是多種揮發(fā)性脂肪酸的總和，它反映了青貯發(fā)酵過(guò)程中揮發(fā)性脂肪酸的總體水平。對(duì)照組的總揮發(fā)性脂肪酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第2天達(dá)到[X82]g/kgFM。添加乙醇后，總揮發(fā)性脂肪酸含量顯著降低，在第2天僅為[X83]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇能夠抑制多種產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸的微生物的活動(dòng)，減少總揮發(fā)性脂肪酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的總揮發(fā)性脂肪酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組總揮發(fā)性脂肪酸含量為[X84]g/kgFM，而乙醇處理組為[X85]g/kgFM。氨態(tài)氮/總氮值是衡量青貯過(guò)程中蛋白質(zhì)降解程度的重要指標(biāo)，該值越低，說(shuō)明蛋白質(zhì)降解越少，青貯飼料的品質(zhì)越好。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的氨態(tài)氮/總氮值逐漸上升，在第2天達(dá)到[X86]%。添加乙醇后，氨態(tài)氮/總氮值顯著降低，在第2天僅為[X87]%，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇能夠有效抑制蛋白質(zhì)的降解，減少氨態(tài)氮的生成，從而提高青貯飼料中蛋白質(zhì)的保留量。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的氨態(tài)氮/總氮值始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組氨態(tài)氮/總氮值為[X88]%，而乙醇處理組為[X89]%。4.2.3水溶性碳水化合物含量的變化水溶性碳水化合物是青貯發(fā)酵的重要底物，其含量的變化對(duì)青貯發(fā)酵品質(zhì)有著至關(guān)重要的影響。在象草青貯發(fā)酵過(guò)程中，添加乙醇后，水溶性碳水化合物含量呈現(xiàn)出與對(duì)照組截然不同的變化趨勢(shì)。從圖6（添加乙醇對(duì)象草青貯過(guò)程中水溶性碳水化合物含量的變化）可以看出，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-1天），對(duì)照組的水溶性碳水化合物含量迅速下降，從初始的[X90]%降至第1天的[X91]%。這是因?yàn)樵谇噘A初期，好氧性微生物和乳酸菌等都需要利用水溶性碳水化合物作為底物進(jìn)行生長(zhǎng)和代謝，導(dǎo)致其含量快速減少。添加乙醇后，水溶性碳水化合物含量下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X92]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇在青貯早期能夠有效抑制好氧性微生物的活性，減少它們對(duì)水溶性碳水化合物的利用，從而使更多的水溶性碳水化合物得以保留。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組的水溶性碳水化合物含量繼續(xù)下降，在青貯第3天降至[X93]%。而乙醇處理組的水溶性碳水化合物含量在第1-3天下降較為平緩，在第3天為[X94]%，仍顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這進(jìn)一步說(shuō)明乙醇在青貯前期對(duì)水溶性碳水化合物的保護(hù)作用。在青貯第3天后，對(duì)照組和乙醇處理組的水溶性碳水化合物含量均趨于穩(wěn)定。在青貯第30天，對(duì)照組水溶性碳水化合物含量為[X95]%，乙醇處理組為[X96]%，乙醇處理組仍顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇在整個(gè)青貯過(guò)程中都能夠有效地減少水溶性碳水化合物的損失，為乳酸菌提供更多的發(fā)酵底物，從而有利于青貯發(fā)酵的順利進(jìn)行，提高青貯飼料的品質(zhì)。4.3添加山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響4.3.1干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化在雜交狼尾草青貯發(fā)酵進(jìn)程中，干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化受山梨酸添加影響顯著，這些指標(biāo)動(dòng)態(tài)變化深刻反映出山梨酸在青貯發(fā)酵中的作用機(jī)制。從圖7（添加山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯過(guò)程中干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化）可以清晰看出，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-2天），對(duì)照組的干物質(zhì)含量基本維持在[X97]%左右。而添加山梨酸后，干物質(zhì)含量顯著提高，在第0.5天達(dá)到[X98]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期能有效抑制好氧性微生物的活動(dòng)，減少它們對(duì)干物質(zhì)的分解消耗，從而提高干物質(zhì)的保留量。隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，對(duì)照組和山梨酸處理組的干物質(zhì)含量均呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢(shì)，但山梨酸處理組的干物質(zhì)含量始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組干物質(zhì)含量降至[X99]%，而山梨酸處理組為[X100]%。這進(jìn)一步說(shuō)明山梨酸在整個(gè)青貯過(guò)程中都對(duì)干物質(zhì)的保存起到積極的促進(jìn)作用。乳酸含量方面，在青貯發(fā)酵初期，對(duì)照組的乳酸含量增長(zhǎng)迅速，在第1天達(dá)到[X101]g/kgFM。添加山梨酸后，乳酸含量增長(zhǎng)相對(duì)緩慢，在第1天僅為[X102]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期對(duì)乳酸菌的活性有一定抑制作用，導(dǎo)致乳酸生成量減少。然而，隨著發(fā)酵的不斷進(jìn)行，山梨酸處理組的乳酸含量逐漸增加，在青貯第5天后，增長(zhǎng)速度加快。在青貯第7天，山梨酸處理組的乳酸含量達(dá)到[X103]g/kgFM，與對(duì)照組（[X104]g/kgFM）相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，山梨酸處理組的乳酸含量為[X105]g/kgFM，略高于對(duì)照組的[X106]g/kgFM。這表明在青貯后期，山梨酸對(duì)乳酸菌的抑制作用逐漸減弱，乳酸菌能夠充分利用底物進(jìn)行發(fā)酵，生成較多的乳酸。乙酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中的變化也較為明顯。對(duì)照組的乙酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第2天達(dá)到[X107]g/kgFM。添加山梨酸后，乙酸含量顯著降低，在第2天僅為[X108]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明山梨酸能夠有效抑制產(chǎn)生乙酸的微生物的生長(zhǎng)和代謝，減少乙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的乙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乙酸含量為[X109]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X110]g/kgFM。pH值在青貯發(fā)酵中是一個(gè)關(guān)鍵的指示指標(biāo)，它直接反映了青貯環(huán)境的酸堿度。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的pH值下降較快，在第1天從初始的[X111]下降到[X112]。添加山梨酸后，pH值下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X113]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這是因?yàn)樯嚼嫠嵋种屏巳樗峋幕钚裕瑢?dǎo)致乳酸生成量減少，從而使pH值下降緩慢。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，山梨酸處理組的pH值逐漸下降，在青貯第5天后，下降速度加快。在青貯第7天，山梨酸處理組的pH值為[X114]，與對(duì)照組的[X115]相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，山梨酸處理組的pH值為[X116]，略低于對(duì)照組的[X117]。乳酸/乙酸值能夠直觀地反映青貯發(fā)酵過(guò)程中同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵的比例。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的乳酸/乙酸值較低，在第0.5天為[X118]。添加山梨酸后，乳酸/乙酸值顯著升高，在第0.5天達(dá)到[X119]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期促進(jìn)了同型乳酸發(fā)酵，抑制了異型乳酸發(fā)酵，使發(fā)酵過(guò)程更傾向于生成乳酸。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組和山梨酸處理組的乳酸/乙酸值均呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)，但山梨酸處理組的乳酸/乙酸值始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乳酸/乙酸值為[X120]，而山梨酸處理組為[X121]。4.3.2丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量及氨態(tài)氮/總氮值的變化丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量及氨態(tài)氮/總氮值在雜交狼尾草青貯發(fā)酵過(guò)程中，受山梨酸添加的影響十分顯著，這些指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化精準(zhǔn)地反映了青貯發(fā)酵的質(zhì)量和蛋白質(zhì)的降解程度。從圖8（添加山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯過(guò)程中丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量及氨態(tài)氮/總氮值的變化）可以清晰地看到，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-3天），對(duì)照組的丙酸含量逐漸上升，在第3天達(dá)到[X122]g/kgFM。添加山梨酸后，丙酸含量顯著降低，在第3天僅為[X123]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸能夠有效抑制產(chǎn)生丙酸的微生物的生長(zhǎng)，減少丙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的丙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組丙酸含量為[X124]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X125]g/kgFM。丁酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中是衡量青貯品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，丁酸的產(chǎn)生通常意味著青貯發(fā)酵出現(xiàn)了問(wèn)題。對(duì)照組的丁酸含量在青貯早期迅速上升，在第2天達(dá)到[X126]g/kgFM。添加山梨酸后，丁酸含量顯著降低，在第2天僅為[X127]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明山梨酸能夠有效抑制丁酸菌的生長(zhǎng)和代謝，防止丁酸的大量產(chǎn)生，從而提高青貯飼料的品質(zhì)。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的丁酸含量始終維持在較低水平，而對(duì)照組的丁酸含量在后期雖有所下降，但仍高于山梨酸處理組。在青貯第30天，對(duì)照組丁酸含量為[X128]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X129]g/kgFM。總揮發(fā)性脂肪酸含量是多種揮發(fā)性脂肪酸的總和，它反映了青貯發(fā)酵過(guò)程中揮發(fā)性脂肪酸的總體水平。對(duì)照組的總揮發(fā)性脂肪酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第3天達(dá)到[X130]g/kgFM。添加山梨酸后，總揮發(fā)性脂肪酸含量顯著降低，在第3天僅為[X131]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸能夠抑制多種產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸的微生物的活動(dòng)，減少總揮發(fā)性脂肪酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的總揮發(fā)性脂肪酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組總揮發(fā)性脂肪酸含量為[X132]g/kgFM，而山梨酸處理組為[X133]g/kgFM。氨態(tài)氮/總氮值是衡量青貯過(guò)程中蛋白質(zhì)降解程度的重要指標(biāo)，該值越低，說(shuō)明蛋白質(zhì)降解越少，青貯飼料的品質(zhì)越好。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的氨態(tài)氮/總氮值逐漸上升，在第3天達(dá)到[X134]%。添加山梨酸后，氨態(tài)氮/總氮值顯著降低，在第3天僅為[X135]%，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸能夠有效抑制蛋白質(zhì)的降解，減少氨態(tài)氮的生成，從而提高青貯飼料中蛋白質(zhì)的保留量。在整個(gè)青貯過(guò)程中，山梨酸處理組的氨態(tài)氮/總氮值始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組氨態(tài)氮/總氮值為[X136]%，而山梨酸處理組為[X137]%。4.3.3水溶性碳水化合物含量的變化水溶性碳水化合物是青貯發(fā)酵的重要底物，其含量的變化對(duì)青貯發(fā)酵品質(zhì)有著至關(guān)重要的影響。在雜交狼尾草青貯發(fā)酵過(guò)程中，添加山梨酸后，水溶性碳水化合物含量呈現(xiàn)出與對(duì)照組截然不同的變化趨勢(shì)。從圖9（添加山梨酸對(duì)雜交狼尾草青貯過(guò)程中水溶性碳水化合物含量的變化）可以看出，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-1天），對(duì)照組的水溶性碳水化合物含量迅速下降，從初始的[X138]%降至第1天的[X139]%。這是因?yàn)樵谇噘A初期，好氧性微生物和乳酸菌等都需要利用水溶性碳水化合物作為底物進(jìn)行生長(zhǎng)和代謝，導(dǎo)致其含量快速減少。添加山梨酸后，水溶性碳水化合物含量下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X140]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在青貯早期能夠有效抑制好氧性微生物的活性，減少它們對(duì)水溶性碳水化合物的利用，從而使更多的水溶性碳水化合物得以保留。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組的水溶性碳水化合物含量繼續(xù)下降，在青貯第3天降至[X141]%。而山梨酸處理組的水溶性碳水化合物含量在第1-3天下降較為平緩，在第3天為[X142]%，仍顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這進(jìn)一步說(shuō)明山梨酸在青貯前期對(duì)水溶性碳水化合物的保護(hù)作用。在青貯第3天后，對(duì)照組和山梨酸處理組的水溶性碳水化合物含量均趨于穩(wěn)定。在青貯第30天，對(duì)照組水溶性碳水化合物含量為[X143]%，山梨酸處理組為[X144]%，山梨酸處理組仍顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明山梨酸在整個(gè)青貯過(guò)程中都能夠有效地減少水溶性碳水化合物的損失，為乳酸菌提供更多的發(fā)酵底物，從而有利于青貯發(fā)酵的順利進(jìn)行，提高青貯飼料的品質(zhì)。4.4添加乙醇對(duì)雜交狼尾草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響4.4.1干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化在雜交狼尾草青貯發(fā)酵進(jìn)程中，添加乙醇對(duì)干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值產(chǎn)生了顯著影響，這些指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化直觀地反映出乙醇在青貯發(fā)酵中的獨(dú)特作用。從圖10（添加乙醇對(duì)雜交狼尾草青貯過(guò)程中干物質(zhì)、乳酸、乙酸含量及pH、乳酸/乙酸值的變化）可以清晰地看出，在青貯發(fā)酵的早期階段（第0.5-2天），對(duì)照組的干物質(zhì)含量穩(wěn)定在[X145]%左右。而添加乙醇后，干物質(zhì)含量顯著提高，在第0.5天達(dá)到[X146]%，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這充分表明乙醇在青貯早期能夠有效抑制好氧性微生物的活動(dòng)，減少它們對(duì)干物質(zhì)的分解消耗，從而提高干物質(zhì)的保留量。隨著發(fā)酵時(shí)間的持續(xù)推進(jìn)，對(duì)照組和乙醇處理組的干物質(zhì)含量均呈現(xiàn)出逐漸下降的趨勢(shì)，但乙醇處理組的干物質(zhì)含量始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組干物質(zhì)含量降至[X147]%，而乙醇處理組為[X148]%。這進(jìn)一步說(shuō)明乙醇在整個(gè)青貯過(guò)程中都對(duì)干物質(zhì)的保存起到了積極的促進(jìn)作用。乳酸含量方面，在青貯發(fā)酵初期，對(duì)照組的乳酸含量增長(zhǎng)迅速，在第1天達(dá)到[X149]g/kgFM。添加乙醇后，乳酸含量增長(zhǎng)相對(duì)緩慢，在第1天僅為[X150]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇在青貯早期對(duì)乳酸菌的活性有一定的抑制作用，導(dǎo)致乳酸生成量減少。然而，隨著發(fā)酵的不斷進(jìn)行，乙醇處理組的乳酸含量逐漸增加，在青貯第5天后，增長(zhǎng)速度加快。在青貯第7天，乙醇處理組的乳酸含量達(dá)到[X151]g/kgFM，與對(duì)照組（[X152]g/kgFM）相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，乙醇處理組的乳酸含量為[X153]g/kgFM，略高于對(duì)照組的[X154]g/kgFM。這表明在青貯后期，乙醇對(duì)乳酸菌的抑制作用逐漸減弱，乳酸菌能夠充分利用底物進(jìn)行發(fā)酵，生成較多的乳酸。乙酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中的變化也較為顯著。對(duì)照組的乙酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第2天達(dá)到[X155]g/kgFM。添加乙醇后，乙酸含量顯著降低，在第2天僅為[X156]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明乙醇能夠有效抑制產(chǎn)生乙酸的微生物的生長(zhǎng)和代謝，減少乙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的乙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乙酸含量為[X157]g/kgFM，而乙醇處理組為[X158]g/kgFM。pH值在青貯發(fā)酵中是一個(gè)關(guān)鍵的指示指標(biāo)，它直接反映了青貯環(huán)境的酸堿度。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的pH值下降較快，在第1天從初始的[X159]下降到[X160]。添加乙醇后，pH值下降相對(duì)緩慢，在第1天為[X161]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這是因?yàn)橐掖家种屏巳樗峋幕钚裕瑢?dǎo)致乳酸生成量減少，從而使pH值下降緩慢。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，乙醇處理組的pH值逐漸下降，在青貯第5天后，下降速度加快。在青貯第7天，乙醇處理組的pH值為[X162]，與對(duì)照組的[X163]相比無(wú)顯著差異（P>0.05）。到青貯第30天，乙醇處理組的pH值為[X164]，略低于對(duì)照組的[X165]。乳酸/乙酸值能夠直觀地反映青貯發(fā)酵過(guò)程中同型乳酸發(fā)酵和異型乳酸發(fā)酵的比例。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的乳酸/乙酸值較低，在第0.5天為[X166]。添加乙醇后，乳酸/乙酸值顯著升高，在第0.5天達(dá)到[X167]，顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇在青貯早期促進(jìn)了同型乳酸發(fā)酵，抑制了異型乳酸發(fā)酵，使發(fā)酵過(guò)程更傾向于生成乳酸。隨著發(fā)酵的進(jìn)行，對(duì)照組和乙醇處理組的乳酸/乙酸值均呈現(xiàn)出逐漸升高的趨勢(shì)，但乙醇處理組的乳酸/乙酸值始終高于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組乳酸/乙酸值為[X168]，而乙醇處理組為[X169]。4.4.2丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量及氨態(tài)氮/總氮值的變化丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量及氨態(tài)氮/總氮值在雜交狼尾草青貯發(fā)酵過(guò)程中，受乙醇添加的影響十分顯著，這些指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化精準(zhǔn)地反映了青貯發(fā)酵的質(zhì)量和蛋白質(zhì)的降解程度。從圖11（添加乙醇對(duì)雜交狼尾草青貯過(guò)程中丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸含量及氨態(tài)氮/總氮值的變化）可以清晰地看到，在青貯發(fā)酵早期（第0.5-3天），對(duì)照組的丙酸含量逐漸上升，在第3天達(dá)到[X170]g/kgFM。添加乙醇后，丙酸含量顯著降低，在第3天僅為[X171]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇能夠有效抑制產(chǎn)生丙酸的微生物的生長(zhǎng)，減少丙酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的丙酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組丙酸含量為[X172]g/kgFM，而乙醇處理組為[X173]g/kgFM。丁酸含量在青貯發(fā)酵過(guò)程中是衡量青貯品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，丁酸的產(chǎn)生通常意味著青貯發(fā)酵出現(xiàn)了問(wèn)題。對(duì)照組的丁酸含量在青貯早期迅速上升，在第2天達(dá)到[X174]g/kgFM。添加乙醇后，丁酸含量顯著降低，在第2天僅為[X175]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這充分說(shuō)明乙醇能夠有效抑制丁酸菌的生長(zhǎng)和代謝，防止丁酸的大量產(chǎn)生，從而提高青貯飼料的品質(zhì)。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的丁酸含量始終維持在較低水平，而對(duì)照組的丁酸含量在后期雖有所下降，但仍高于乙醇處理組。在青貯第30天，對(duì)照組丁酸含量為[X176]g/kgFM，而乙醇處理組為[X177]g/kgFM。總揮發(fā)性脂肪酸含量是多種揮發(fā)性脂肪酸的總和，它反映了青貯發(fā)酵過(guò)程中揮發(fā)性脂肪酸的總體水平。對(duì)照組的總揮發(fā)性脂肪酸含量在青貯早期增長(zhǎng)較快，在第3天達(dá)到[X178]g/kgFM。添加乙醇后，總揮發(fā)性脂肪酸含量顯著降低，在第3天僅為[X179]g/kgFM，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。這表明乙醇能夠抑制多種產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸的微生物的活動(dòng)，減少總揮發(fā)性脂肪酸的生成。在整個(gè)青貯過(guò)程中，乙醇處理組的總揮發(fā)性脂肪酸含量始終低于對(duì)照組。在青貯第30天，對(duì)照組總揮發(fā)性脂肪酸含量為[X180]g/kgFM，而乙醇處理組為[X181]g/kgFM。氨態(tài)氮/總氮值是衡量青貯過(guò)程中蛋白質(zhì)降解程度的重要指標(biāo)，該值越低，說(shuō)明蛋白質(zhì)降解越少，青貯飼料的品質(zhì)越好。在青貯發(fā)酵早期，對(duì)照組的氨態(tài)氮/總氮值逐漸上升，在第3天達(dá)到[X182]%。添加乙醇后，氨態(tài)氮/總氮值顯著降低，在第3天僅為[X183]