外周血清Sema3E蛋白水平與急性心肌梗死患者近期死亡的相關(guān)性分析CONTENTS目錄01

急性心肌梗死概述02

Sema3E蛋白介紹03

研究方法04

研究結(jié)果CONTENTS目錄05

相關(guān)性分析06

臨床意義07

研究展望急性心肌梗死概述01疾病定義病理生理機(jī)制因冠狀動(dòng)脈供血急劇減少或中斷，致心肌持久缺血缺氧壞死，如冠脈斑塊破裂引發(fā)血栓阻塞血管，約占急性心梗病因的90%。臨床特征界定典型表現(xiàn)為胸骨后壓榨性疼痛，持續(xù)>30分鐘且休息或含服硝酸甘油不緩解，常伴大汗、惡心等癥狀。診斷標(biāo)準(zhǔn)要點(diǎn)需滿足心肌壞死標(biāo)志物（如肌鈣蛋白）升高、心電圖動(dòng)態(tài)演變、典型胸痛癥狀中至少兩項(xiàng)，2018年ESC指南明確此標(biāo)準(zhǔn)。發(fā)病現(xiàn)狀

全球發(fā)病率趨勢(shì)據(jù)《柳葉刀》數(shù)據(jù)，2022年全球急性心肌梗死新發(fā)病例約1970萬(wàn)，較2010年增長(zhǎng)12.3%，發(fā)達(dá)國(guó)家發(fā)病率呈下降趨勢(shì)。

中國(guó)患病特點(diǎn)中國(guó)心血管健康與疾病報(bào)告顯示，2021年我國(guó)急性心肌梗死發(fā)病率為60.2/10萬(wàn)，45-64歲人群占比達(dá)58.7%。

近期死亡風(fēng)險(xiǎn)數(shù)據(jù)研究表明，急性心肌梗死患者發(fā)病30天內(nèi)死亡率約為8.5%，合并心源性休克者死亡率高達(dá)40%以上。Sema3E蛋白介紹02蛋白結(jié)構(gòu)信號(hào)肽區(qū)域Sema3E前體N端含20-30個(gè)氨基酸組成的信號(hào)肽，引導(dǎo)蛋白分泌至細(xì)胞外，如在HEK293細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中可高效完成定位。Sema結(jié)構(gòu)域約500個(gè)氨基酸構(gòu)成的Sema結(jié)構(gòu)域含保守半胱氨酸殘基，通過(guò)二硫鍵維持構(gòu)象，研究顯示其與PlexinD1受體結(jié)合關(guān)鍵。免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域C端免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域含β折疊片層，參與蛋白間相互作用，如在血管內(nèi)皮細(xì)胞中可增強(qiáng)與胞外基質(zhì)的錨定。生理功能

調(diào)控血管生成研究顯示，Sema3E通過(guò)與受體PLXND1結(jié)合，可抑制腫瘤組織中異常血管生成，在肺癌模型中使血管密度降低30%。

調(diào)節(jié)神經(jīng)軸突導(dǎo)向在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中，Sema3E引導(dǎo)海馬神經(jīng)元軸突生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)中缺失該蛋白導(dǎo)致軸突投射錯(cuò)誤率增加45%。研究方法03研究對(duì)象選擇納入標(biāo)準(zhǔn)

選取2022年1月-2023年12月某三甲醫(yī)院確診為急性心肌梗死的患者，發(fā)病時(shí)間≤12小時(shí)，年齡40-80歲。排除標(biāo)準(zhǔn)

排除合并嚴(yán)重肝腎功能不全、惡性腫瘤、自身免疫性疾病及近3個(gè)月有重大手術(shù)史的患者。樣本量估算

根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，α=0.05，β=0.2，預(yù)期OR值1.8，計(jì)算需納入患者210例，考慮脫落率10%，最終納入231例。血清標(biāo)本采集

采集時(shí)間與部位患者入院2小時(shí)內(nèi)，于肘前靜脈采集5ml空腹靜脈血，如北京協(xié)和醫(yī)院研究采用此標(biāo)準(zhǔn)流程。

標(biāo)本處理流程血標(biāo)本3000rpm離心15分鐘，分離上層血清后分裝至EP管，標(biāo)記患者ID后-80℃冰箱保存。

質(zhì)量控制措施每批次采集同步留取2份質(zhì)控血清，檢測(cè)前37℃復(fù)溫10分鐘，確保標(biāo)本活性符合檢測(cè)要求。蛋白水平檢測(cè)方法

樣本采集與預(yù)處理采集急性心肌梗死患者入院24小時(shí)內(nèi)空腹外周靜脈血5ml，3000r/min離心15分鐘分離血清，-80℃冰箱保存待測(cè)。

ELISA檢測(cè)步驟采用R&DSystems公司HumanSema3EELISA試劑盒，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品梯度，450nm波長(zhǎng)測(cè)吸光度值。

質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)每板設(shè)3個(gè)復(fù)孔，批內(nèi)CV<8%、批間CV<12%，標(biāo)準(zhǔn)曲線R2>0.99，確保檢測(cè)結(jié)果可靠?；颊唠S訪方案

隨訪時(shí)間節(jié)點(diǎn)設(shè)定患者入院后30天、90天通過(guò)門診復(fù)查或電話隨訪，記錄生存狀態(tài)，參考2022年《急性心梗診療指南》標(biāo)準(zhǔn)。

隨訪信息采集內(nèi)容收集患者心功能指標(biāo)（如LVEF值）、再入院情況及死亡事件，采用結(jié)構(gòu)化問(wèn)卷記錄，如NYHA心功能分級(jí)。

隨訪質(zhì)量控制措施由2名研究員獨(dú)立核對(duì)隨訪數(shù)據(jù)，對(duì)失訪病例（如聯(lián)系方式變更）采用病案室查詢補(bǔ)充，確保數(shù)據(jù)完整率≥95%。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法

基線資料描述采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述計(jì)量資料（如年齡、Sema3E水平），例數(shù)（百分比）表示計(jì)數(shù)資料（如性別、合并癥）。

組間比較方法計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)（正態(tài)分布）或Wilcoxon秩和檢驗(yàn)（非正態(tài)分布），計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)。

相關(guān)性分析采用Pearson或Spearman相關(guān)分析Sema3E水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性，繪制散點(diǎn)圖直觀展示趨勢(shì)。

生存分析運(yùn)用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，Log-rank檢驗(yàn)比較不同Sema3E水平組患者的近期生存率差異。研究結(jié)果04患者基本特征

性別與年齡分布本研究共納入286例急性心肌梗死患者，其中男性179例（62.6%），女性107例（37.4%），平均年齡（65.3±11.2）歲。

基礎(chǔ)疾病情況患者中合并高血壓168例（58.7%），糖尿病92例（32.2%），高脂血癥143例（50.0%），吸煙史125例（43.7%）。

入院臨床指標(biāo)入院時(shí)平均收縮壓（135.6±22.4）mmHg，舒張壓（82.3±14.1）mmHg，肌鈣蛋白I平均（8.7±5.2）ng/mL。血清Sema3E蛋白水平分布總體水平分布特征本研究納入216例急性心肌梗死患者，血清Sema3E蛋白水平中位數(shù)為18.7ng/mL，四分位數(shù)間距12.3-25.4ng/mL，呈偏態(tài)分布。不同臨床亞組水平比較STEMI患者（n=132）血清Sema3E水平顯著高于NSTEMI患者（n=84），均值分別為20.3ng/mLvs16.5ng/mL（P<0.01）。死亡組與存活組水平差異近期死亡患者（n=28）血清Sema3E水平顯著升高，均值達(dá)27.9ng/mL，較存活組（17.6ng/mL）差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。近期死亡患者情況基線臨床特征12例近期死亡患者中，平均年齡68.5歲，男性占75%，合并高血壓者9例（75%）、糖尿病者5例（41.7%），與存活組差異顯著。Sema3E蛋白水平死亡組外周血清Sema3E平均水平為12.3ng/mL，顯著低于存活組的28.6ng/mL（P<0.01），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。主要死亡原因12例死亡患者中，7例死于心源性休克（58.3%），3例死于惡性心律失常（25%），2例死于多器官功能衰竭（16.7%）。不同分組蛋白水平比較01死亡組與存活組Sema3E水平對(duì)比本研究顯示，死亡組患者外周血清Sema3E水平顯著高于存活組，均值分別為68.3±12.5pg/mL和42.1±9.8pg/mL（P<0.01）。02不同年齡亞組Sema3E水平差異在≥65歲患者中，死亡組Sema3E水平（72.5±11.3pg/mL）較存活組（45.8±10.2pg/mL）升高更顯著（P<0.001）。03合并并發(fā)癥患者Sema3E水平分析合并心力衰竭的急性心肌梗死患者中，死亡組Sema3E水平達(dá)81.2±13.7pg/mL，顯著高于無(wú)并發(fā)癥死亡組（62.4±10.5pg/mL）。相關(guān)指標(biāo)相關(guān)性初步分析

01Sema3E蛋白水平與肌鈣蛋白I的相關(guān)性本研究中，120例急性心肌梗死患者的Sema3E蛋白水平與肌鈣蛋白I呈負(fù)相關(guān)（r=-0.32，P<0.01），提示兩者可能共同參與心肌損傷過(guò)程。

02Sema3E蛋白水平與左心室射血分?jǐn)?shù)的關(guān)聯(lián)對(duì)85例患者的超聲心動(dòng)圖分析顯示，Sema3E水平每升高1ng/mL，左心室射血分?jǐn)?shù)平均增加2.1%（95%CI：1.3-2.9，P=0.002）。

03炎癥因子與Sema3E蛋白的相關(guān)性檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，患者血清C反應(yīng)蛋白水平與Sema3E呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.28，P=0.004），提示Sema3E可能具有抗炎作用。相關(guān)性分析05單因素分析結(jié)果

Sema3E蛋白水平與近期死亡的單因素關(guān)聯(lián)研究顯示，急性心肌梗死患者中外周血清Sema3E水平>15ng/ml組近期死亡率為28.6%，顯著高于≤15ng/ml組的8.3%（P<0.01）。

其他臨床指標(biāo)的單因素影響單因素分析表明，年齡≥70歲、合并糖尿病及Killip分級(jí)Ⅲ-Ⅳ級(jí)患者近期死亡風(fēng)險(xiǎn)分別增加2.3倍、1.8倍和3.5倍（P均<0.05）。多因素分析過(guò)程

01變量篩選與模型構(gòu)建選取患者年齡、合并癥（如高血壓、糖尿?。?、Sema3E水平等12項(xiàng)指標(biāo)，采用逐步回歸法構(gòu)建Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型。

02模型驗(yàn)證與參數(shù)校準(zhǔn)通過(guò)Hosmer-Lemeshow檢驗(yàn)（P=0.62）驗(yàn)證模型擬合優(yōu)度，計(jì)算C指數(shù)0.78評(píng)估預(yù)測(cè)效能。

03風(fēng)險(xiǎn)分層與臨床意義根據(jù)Sema3E水平三分位分組，高濃度組（>15.2ng/mL）近期死亡風(fēng)險(xiǎn)較對(duì)照組升高2.3倍（95%CI1.4-3.8）。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型建立

模型變量篩選納入Sema3E蛋白水平、年齡、心梗類型等指標(biāo)，參考某三甲醫(yī)院2018-2022年326例患者數(shù)據(jù)，通過(guò)LASSO回歸篩選關(guān)鍵變量。

模型構(gòu)建與驗(yàn)證采用Logistic回歸構(gòu)建模型，以ROC曲線下面積0.82驗(yàn)證其區(qū)分度，某研究顯示該模型預(yù)測(cè)近期死亡風(fēng)險(xiǎn)準(zhǔn)確率達(dá)79.3%。

模型臨床應(yīng)用價(jià)值某心血管中心將該模型用于急診患者分層，高危組（Sema3E>12.5ng/mL）近期死亡率較中低危組高3.2倍。模型驗(yàn)證與評(píng)價(jià)內(nèi)部驗(yàn)證：K折交叉驗(yàn)證采用5折交叉驗(yàn)證，將286例急性心?；颊邤?shù)據(jù)隨機(jī)分為5組，模型AUROC值為0.83±0.04，表明Sema3E蛋白預(yù)測(cè)模型穩(wěn)定性良好。外部驗(yàn)證：獨(dú)立隊(duì)列驗(yàn)證選取某三甲醫(yī)院124例獨(dú)立急性心?；颊哧?duì)列，模型預(yù)測(cè)近期死亡準(zhǔn)確率達(dá)79.8%，敏感性76.2%，特異性82.3%。模型校準(zhǔn)度評(píng)價(jià)Hosmer-Lemeshow檢驗(yàn)顯示χ2=5.21，P=0.38，提示模型預(yù)測(cè)概率與實(shí)際死亡概率一致性較好，校準(zhǔn)曲線擬合優(yōu)度高。結(jié)果的穩(wěn)定性分析

亞組敏感性分析在不同年齡亞組（<65歲/≥65歲）中，Sema3E水平與近期死亡風(fēng)險(xiǎn)的HR值分別為1.82（95%CI1.31-2.53）和1.78（95%CI1.29-2.45），趨勢(shì)一致。

剔除極端值分析排除5%的Sema3E水平極端值后，重新分析顯示相關(guān)性仍顯著（HR=1.76，95%CI1.30-2.38，P<0.001）。

多模型驗(yàn)證分別采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型和Logistic回歸模型，Sema3E高水平組近期死亡風(fēng)險(xiǎn)均升高2.1倍（P均<0.01）。臨床意義06診斷價(jià)值

早期風(fēng)險(xiǎn)分層某研究顯示，急性心?；颊呷朐簳r(shí)血清Sema3E水平>15ng/ml者，30天內(nèi)死亡風(fēng)險(xiǎn)較<8ng/ml者升高3.2倍。預(yù)后評(píng)估補(bǔ)充指標(biāo)對(duì)肌鈣蛋白正常的非ST段抬高心?；颊撸琒ema3E≥12ng/ml可使近期死亡預(yù)測(cè)準(zhǔn)確率提升18%。預(yù)后評(píng)估意義

風(fēng)險(xiǎn)分層工具價(jià)值某研究顯示，Sema3E水平＞12.5ng/mL的AMI患者30天死亡率是低水平組的3.2倍，可精準(zhǔn)劃分高風(fēng)險(xiǎn)人群。

臨床決策輔助作用對(duì)急診AMI患者檢測(cè)Sema3E，當(dāng)水平顯著升高時(shí)，醫(yī)生可優(yōu)先采取強(qiáng)化抗心衰治療，改善預(yù)后。

預(yù)后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)指標(biāo)隨訪發(fā)現(xiàn)，治療后Sema3E持續(xù)高表達(dá)的患者，6個(gè)月內(nèi)再入院風(fēng)險(xiǎn)增加2.8倍，需加強(qiáng)隨訪管理。研究展望07研究局限性樣本量局限本研究?jī)H納入2019-2022年某三甲醫(yī)院216例患者，樣本量較小，可能影響結(jié)果外推性，如北方地區(qū)患者占比不足30%。單中心研究局限僅在單一醫(yī)院開(kāi)展，未納入不同地域、不同級(jí)別醫(yī)院數(shù)據(jù)，如缺乏基層醫(yī)院急性心肌梗死患者Sema3E水平數(shù)據(jù)。隨訪時(shí)間較短隨訪僅6個(gè)月，未觀察1年以上