2025年大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)（細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題，共40分）（總共20題，每題2分，每題只有一個(gè)正確答案，請(qǐng)將正確答案填在括號(hào)內(nèi)）1.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是（）A.DMEMB.RPMI1640C.MEMD.F122.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清的主要作用不包括（）A.提供營(yíng)養(yǎng)成分B.促進(jìn)細(xì)胞貼壁C.抑制細(xì)胞生長(zhǎng)D.提供生長(zhǎng)因子3.細(xì)胞培養(yǎng)的最佳pH值范圍是（）A.6.5-7.0B.7.0-7.2C.7.2-7.4D.7.4-7.64.原代細(xì)胞培養(yǎng)的來(lái)源不包括（）A.胚胎組織B.成體組織C.腫瘤組織D.細(xì)胞系5.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，防止微生物污染的關(guān)鍵措施是（）A.超凈臺(tái)消毒B.培養(yǎng)基滅菌C.操作人員無(wú)菌操作D.培養(yǎng)箱定期清潔6.細(xì)胞凍存時(shí)，常用的凍存保護(hù)劑是（）A.DMSOB.甘油C.血清D.以上都是7.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，正確的操作順序是（）A.37℃水浴快速解凍-離心棄上清-加培養(yǎng)液重懸接種B.4℃冰箱解凍-離心棄上清-加培養(yǎng)液重懸接種C.室溫解凍-離心棄上清-加培養(yǎng)液重懸接種D.直接接種-加培養(yǎng)液培養(yǎng)8.用于細(xì)胞計(jì)數(shù)的儀器是（）A.顯微鏡B.流式細(xì)胞儀C.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板D.酶標(biāo)儀9.細(xì)胞培養(yǎng)中，支原體污染的檢測(cè)方法不包括（）A.熒光定量PCRB.相差顯微鏡觀察C.電子顯微鏡觀察D.革蘭氏染色10.細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，一般當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至（）密度時(shí)進(jìn)行傳代A.50%-60%B.60%-70%C.70%-80%D.80%-90%11.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，CO?培養(yǎng)箱的作用是（）A.提供CO?維持pHB.提供適宜溫度C.提供無(wú)菌環(huán)境D.以上都是12.以下哪種細(xì)胞適合貼壁生長(zhǎng)（）A.淋巴細(xì)胞B.巨噬細(xì)胞C.成纖維細(xì)胞D.懸浮細(xì)胞13.細(xì)胞培養(yǎng)用的水一般要求是（）A.蒸餾水B.去離子水C.雙蒸水D.超純水14.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，抗生素的使用原則是（）A.常規(guī)添加B.必要時(shí)添加C.禁止添加D.隨意添加15.細(xì)胞培養(yǎng)的無(wú)菌操作環(huán)境要求空氣潔凈度達(dá)到（）A.100級(jí)B.1000級(jí)C.10000級(jí)D.100000級(jí)16.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的繪制一般需要測(cè)定細(xì)胞數(shù)量（）A.1-2天B.2-3天C.3-5天D.5-7天17.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清滅活的目的是（）A.去除補(bǔ)體B.去除支原體C.去除細(xì)菌D.去除病毒18.細(xì)胞培養(yǎng)中，胰蛋白酶消化細(xì)胞的濃度一般是（）A.0.01%-0.02%B.0.02%-0.05%C.0.05%-0.1%D.0.1%-0.2%19.細(xì)胞培養(yǎng)的器皿清洗后，常用的消毒方法是（）A.紫外線照射B.高壓蒸汽滅菌C.酒精擦拭D.化學(xué)消毒劑浸泡20.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法不包括（）A.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡率B.TUNEL法檢測(cè)凋亡細(xì)胞C.免疫熒光檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白D.細(xì)胞活力檢測(cè)第II卷（非選擇題，共60分）二、填空題（每題2分，共10分）1.細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基主要由______、______、______和______等組成。2.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，常見的污染類型有______污染、______污染和______污染。3.細(xì)胞凍存時(shí)，一般采用______℃每分鐘降溫至______℃，然后放入______℃冰箱保存。4.細(xì)胞傳代培養(yǎng)的方法有______傳代和______傳代。5.細(xì)胞培養(yǎng)中，細(xì)胞活力的檢測(cè)方法常用______和______。三、判斷題（每題2分，共10分）1.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清濃度越高對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)越好。（）2.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，只要超凈臺(tái)消毒了就不會(huì)有微生物污染。（）3.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇過(guò)程中，溫度變化對(duì)細(xì)胞活性沒有影響。（）4.原代細(xì)胞培養(yǎng)比細(xì)胞系培養(yǎng)更容易成功。（）5.細(xì)胞培養(yǎng)用的試劑可以不進(jìn)行無(wú)菌處理。（）四、簡(jiǎn)答題（每題10分，共20分）1.簡(jiǎn)述細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程。2.如何檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染？五、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（20分）設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，探究不同濃度的生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響。要求寫出實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)步驟、預(yù)期結(jié)果及分析（實(shí)驗(yàn)材料包括細(xì)胞株、不同濃度生長(zhǎng)因子溶液、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿等；實(shí)驗(yàn)步驟要詳細(xì)描述分組、加樣、培養(yǎng)、檢測(cè)等操作；預(yù)期結(jié)果要說(shuō)明不同濃度生長(zhǎng)因子下細(xì)胞增殖的變化趨勢(shì)，并分析原因）。答案：1.A2.C3.C4.D5.C6.D7.A8.C9.D10.D11.D12.C13.C（一般雙蒸水即可滿足細(xì)胞培養(yǎng)要求，超純水成本高。這里答案設(shè)置為雙蒸水更符合常見情況）14.B15.A16.D17.A18.B19.B20.D填空題答案：1.氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)鹽、碳水化合物2.細(xì)菌、真菌、支原體3.-1、-20、-704.胰蛋白酶、機(jī)械5.臺(tái)盼藍(lán)染色法、MTT法判斷題答案：1.×2.×3.×4.×5.×簡(jiǎn)答題答案：1.細(xì)胞培養(yǎng)基本流程：準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)所需的器皿、培養(yǎng)基、血清等物品并消毒滅菌。獲取細(xì)胞（如原代細(xì)胞從組織分離或購(gòu)買細(xì)胞系），將細(xì)胞接種到合適的培養(yǎng)基中，置于適宜條件（如溫度、CO?濃度）的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，定期觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到實(shí)驗(yàn)所需數(shù)量或狀態(tài)時(shí)進(jìn)行收獲用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。2.檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的方法：熒光定量PCR，可特異性擴(kuò)增支原體的核酸片段進(jìn)行定量檢測(cè)；相差顯微鏡觀察，支原體污染的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)改變、生長(zhǎng)速度異常等，在相差顯微鏡下可觀察到細(xì)胞表面細(xì)微變化；電子顯微鏡觀察，能直接觀察到支原體的形態(tài)結(jié)構(gòu)；還可使用支原體檢測(cè)試劑盒，通過(guò)檢測(cè)相關(guān)代謝產(chǎn)物來(lái)判斷是否有支原體污染。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題答案：實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄坎煌瑵舛鹊纳L(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響。實(shí)驗(yàn)材料：某細(xì)胞株、不同濃度生長(zhǎng)因子溶液（如0ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、30ng/ml）、培養(yǎng)基（含血清）、培養(yǎng)瓶、移液器、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、MTT試劑等。實(shí)驗(yàn)步驟：將細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶中，分為5組，每組設(shè)置多個(gè)復(fù)孔。分別加入不同濃度生長(zhǎng)因子溶液，其他