病理科工作流程及操作手冊(cè)病理診斷作為疾病診療的“金標(biāo)準(zhǔn)”，其工作流程的規(guī)范性與操作嚴(yán)謹(jǐn)性直接影響診斷質(zhì)量。本手冊(cè)結(jié)合臨床病理實(shí)踐，梳理病理科核心工作環(huán)節(jié)的操作要點(diǎn)與質(zhì)量控制要求，為病理技術(shù)人員及診斷醫(yī)師提供實(shí)用指引。一、標(biāo)本接收與登記管理臨床送檢的病理標(biāo)本需經(jīng)嚴(yán)格的接收與信息核對(duì)，確保后續(xù)流程的準(zhǔn)確性。（一）標(biāo)本接收核查接收人員需逐一核對(duì)送檢申請(qǐng)單與標(biāo)本容器信息：患者姓名、性別、年齡、住院/門診號(hào)、標(biāo)本類型（活檢、手術(shù)切除、細(xì)胞學(xué)標(biāo)本等）、送檢部位、臨床診斷及送檢醫(yī)師信息需完全匹配；同時(shí)檢查標(biāo)本容器是否密閉無(wú)溢漏、固定液（如10%中性福爾馬林）是否足量（標(biāo)本體積與固定液比例宜為1:10）。若為新鮮標(biāo)本（如冰凍切片標(biāo)本），需確認(rèn)送檢時(shí)間符合要求（通常需30分鐘內(nèi)送達(dá)）。（二）信息登記與編號(hào)使用病理信息管理系統(tǒng)（或紙質(zhì)臺(tái)賬）錄入標(biāo)本基本信息，生成唯一病理編號(hào)（含年份、序號(hào)等要素），并將編號(hào)標(biāo)注于申請(qǐng)單、標(biāo)本容器及后續(xù)包埋盒、玻片上，確保全程可追溯。登記完成后，將標(biāo)本與申請(qǐng)單同步移交至標(biāo)本處理區(qū)。二、標(biāo)本處理與組織取材標(biāo)本處理的核心是通過(guò)固定、取材保留病變特征，為后續(xù)制片與診斷提供可靠組織樣本。（一）標(biāo)本固定接收的標(biāo)本（除冰凍、細(xì)胞學(xué)涂片等特殊類型）需立即放入10%中性福爾馬林固定液中，固定時(shí)間根據(jù)標(biāo)本類型調(diào)整：活檢標(biāo)本固定4-6小時(shí)，手術(shù)大標(biāo)本固定12-24小時(shí)（若標(biāo)本較大，需沿最大切面剖開(kāi)，確保固定液充分滲透）。固定過(guò)程中需記錄固定開(kāi)始時(shí)間，避免因固定不足或過(guò)度影響組織形態(tài)。（二）大體檢查與取材1.大體觀察：取材醫(yī)師需觀察標(biāo)本的大小、形狀、顏色、質(zhì)地、包膜完整性、病變部位與周圍組織的關(guān)系等。對(duì)于有大體病變（如腫瘤、潰瘍、壞死等）的標(biāo)本，需詳細(xì)描述病變的位置、范圍、形態(tài)特征；若為手術(shù)切除標(biāo)本（如胃腸、乳腺標(biāo)本），需結(jié)合臨床手術(shù)方式（如根治術(shù)、局部切除）判斷標(biāo)本切緣是否完整。2.組織取材：根據(jù)大體病變特征，選取具有代表性的組織塊（通常2-3塊，每塊大小不超過(guò)1.5cm×1.5cm×0.3cm），包括病變區(qū)、病變與正常組織交界處及正常組織（用于對(duì)照）。取材后將組織塊放入包埋盒，標(biāo)注病理編號(hào)與取材部位（如“胃竇部病變”“乳腺腫物”），并記錄取材數(shù)量與部位信息。三、組織學(xué)制片流程組織學(xué)制片是將組織轉(zhuǎn)化為病理切片的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，需嚴(yán)格把控每一步驟的操作參數(shù)，確保切片厚度均勻、組織完整、染色清晰。（一）脫水與透明將包埋盒中的組織塊依次放入梯度乙醇（75%、85%、95%、100%）中脫水，每級(jí)乙醇處理時(shí)間為1-2小時(shí)（小組織塊可縮短至30分鐘），以徹底去除組織內(nèi)水分；隨后轉(zhuǎn)入二甲苯（或環(huán)保型透明劑）中透明2次，每次15-30分鐘，使組織透明化，便于后續(xù)浸蠟。（二）浸蠟與包埋透明后的組織塊需放入熔化的石蠟中浸蠟，通常在60℃左右的石蠟中浸蠟2-3次，每次1-2小時(shí)，確保石蠟充分滲透組織；浸蠟完成后，將組織塊放入包埋模具，倒入熔化的石蠟，待石蠟?zāi)毯笮纬上瀴K（包埋過(guò)程需注意組織塊的方位，確保切片時(shí)能暴露病變面）。（三）切片與貼片使用石蠟切片機(jī)將蠟塊切成3-5μm厚的薄片，要求切片厚度均勻、組織完整無(wú)皺褶、無(wú)刀痕。將切片漂浮于40-45℃的展片水中展平（展片時(shí)間根據(jù)組織類型調(diào)整，一般不超過(guò)1分鐘），隨后用經(jīng)防脫片處理的載玻片撈取切片，使組織貼附于玻片中央，放入60℃烤箱中烤片1-2小時(shí)，確保切片與玻片充分黏附，避免脫片。（四）HE染色1.脫蠟與水化：烤片后，切片經(jīng)二甲苯脫蠟2次（每次10分鐘），再經(jīng)梯度乙醇（100%、95%、85%、75%）水化至水；2.蘇木精染色：切片放入蘇木精染液中染色5-10分鐘，隨后用自來(lái)水沖洗，放入鹽酸乙醇分化液（1%鹽酸+95%乙醇）中分化數(shù)秒（至細(xì)胞核呈藍(lán)紫色、背景無(wú)色），再用自來(lái)水返藍(lán)；3.伊紅染色：切片放入伊紅染液中染色1-3分鐘，隨后經(jīng)梯度乙醇脫水、二甲苯透明，最后用中性樹(shù)膠封片，制成HE切片。四、病理診斷與報(bào)告簽發(fā)病理診斷需結(jié)合臨床信息、大體表現(xiàn)與鏡下形態(tài)，必要時(shí)借助輔助技術(shù)（如免疫組化、分子檢測(cè)）明確診斷。（一）鏡下診斷診斷醫(yī)師需系統(tǒng)觀察HE切片：先在低倍鏡（4×、10×）下觀察組織整體結(jié)構(gòu)、病變分布，再在高倍鏡（20×、40×）下分析細(xì)胞形態(tài)、核質(zhì)比、核分裂象等特征。對(duì)于疑難病例，需調(diào)取大體照片、臨床病史（如病史、影像學(xué)檢查），或與送檢醫(yī)師溝通補(bǔ)充信息。（二）輔助診斷技術(shù)應(yīng)用若鏡下形態(tài)不典型，需進(jìn)一步行免疫組化（如判斷腫瘤來(lái)源、良惡性）、特殊染色（如PAS染色顯示糖原、抗酸染色顯示結(jié)核桿菌）或分子檢測(cè)（如HPV檢測(cè)、基因測(cè)序）。輔助檢查需嚴(yán)格遵循試劑說(shuō)明書與室內(nèi)質(zhì)控要求，確保結(jié)果可靠。（三）報(bào)告簽發(fā)與審核1.報(bào)告內(nèi)容：病理報(bào)告需包含患者基本信息、標(biāo)本信息（類型、部位）、大體描述、鏡下描述、診斷意見(jiàn)（明確診斷或傾向性診斷，必要時(shí)備注“建議結(jié)合臨床”“建議隨訪”等）；2.審核流程：初診醫(yī)師完成報(bào)告后，需由高年資醫(yī)師或主任醫(yī)師審核，確保診斷邏輯清晰、措辭準(zhǔn)確；疑難病例需經(jīng)科內(nèi)會(huì)診（≥2名醫(yī)師討論）或外院會(huì)診后簽發(fā)；3.報(bào)告發(fā)放：報(bào)告可通過(guò)紙質(zhì)版（經(jīng)審核簽字后）或電子系統(tǒng)推送至臨床科室，同時(shí)需做好報(bào)告歸檔與查詢管理。五、質(zhì)量控制與安全管理（一）質(zhì)量控制要點(diǎn)1.標(biāo)本處理質(zhì)量：定期抽查固定液濃度、固定時(shí)間，確保組織固定效果；取材時(shí)記錄病變特征的完整性，避免遺漏關(guān)鍵病變；2.制片質(zhì)量：每日檢查切片厚度、染色清晰度，對(duì)不合格切片重新制片；開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)控（如HE染色質(zhì)控片），定期參加室間質(zhì)評(píng)（如病理診斷質(zhì)控中心組織的病例會(huì)診）；3.診斷質(zhì)量：建立疑難病例隨訪制度，跟蹤診斷與臨床結(jié)局的符合度，持續(xù)優(yōu)化診斷水平。（二）安全管理要求1.生物安全：處理標(biāo)本時(shí)佩戴手套、口罩、防護(hù)鏡，避免直接接觸標(biāo)本；銳器（如手術(shù)刀、切片刀）使用后立即放入銳器盒，若發(fā)生銳器傷，需立即擠出傷口血液，用流動(dòng)水沖洗、碘伏消毒并報(bào)告科室負(fù)責(zé)人；2.化學(xué)安全：甲醛、二甲苯等試劑需儲(chǔ)存在通風(fēng)良好的試劑柜中，操作時(shí)開(kāi)啟通風(fēng)櫥；定期檢查試劑有效期，避免