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合成生物學(xué)底盤細(xì)胞研發(fā)工程師崗位招聘考試試卷及答案填空題(10題,每題1分)1.合成生物學(xué)中,底盤細(xì)胞是指經(jīng)過設(shè)計(jì)改造、可承載外源功能模塊的______宿主細(xì)胞。2.常用原核底盤細(xì)胞主要包括大腸桿菌和______。3.RNA聚合酶結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄的序列是______。4.CRISPR-Cas9中g(shù)RNA的作用是______。5.底盤設(shè)計(jì)核心原則之一是______(模塊可替換組合)。6.釀酒酵母常用于合成______類復(fù)雜產(chǎn)物(如青蒿酸)。7.基因組簡化的主要方法包括同源重組和______。8.生物正交系統(tǒng)不干擾______代謝。9.底盤需具備遺傳穩(wěn)定性、______和代謝兼容性。10.全球大學(xué)生合成生物學(xué)競賽是______。答案1.標(biāo)準(zhǔn)化/工程化2.枯草芽孢桿菌3.啟動子4.靶向結(jié)合特定DNA5.模塊化設(shè)計(jì)6.次生代謝物7.CRISPR編輯8.內(nèi)源9.可操作性10.iGEM單項(xiàng)選擇題(10題,每題2分)1.常用原核底盤是?A.釀酒酵母B.大腸桿菌C.人類細(xì)胞D.擬南芥2.啟動子功能是?A.終止轉(zhuǎn)錄B.啟動翻譯C.啟動轉(zhuǎn)錄D.調(diào)控翻譯3.CRISPR中切割DNA的蛋白是?A.Cas9B.gRNAC.啟動子D.終止子4.最小基因組僅保留?A.所有基因B.非必需基因C.必需基因D.外源基因5.合成脂肪酸常用底盤?A.大腸桿菌B.釀酒酵母C.藍(lán)細(xì)菌D.枯草芽孢桿菌6.合成途徑組裝不包括?A.重疊PCRB.吉布森組裝C.酶切連接D.細(xì)胞融合7.底盤設(shè)計(jì)需避免?A.代謝交叉干擾B.模塊化C.遺傳穩(wěn)定D.可擴(kuò)展8.生物正交反應(yīng)特點(diǎn)?A.干擾內(nèi)源代謝B.需外源底物C.依賴內(nèi)源酶D.無特異性9.真核底盤是?A.枯草芽孢桿菌B.大腸桿菌C.釀酒酵母D.谷氨酸棒桿菌10.表征代謝流常用工具?A.熒光顯微鏡B.質(zhì)譜C.凝膠電泳D.PCR答案1.B2.C3.A4.C5.A6.D7.A8.B9.C10.B多項(xiàng)選擇題(10題,每題2分,多選少選不得分)1.底盤核心特征?A.標(biāo)準(zhǔn)化B.模塊化C.可擴(kuò)展D.遺傳不穩(wěn)定2.常用底盤生物?A.大腸桿菌B.釀酒酵母C.藍(lán)細(xì)菌D.人類細(xì)胞3.關(guān)鍵元件包括?A.啟動子B.終止子C.RBSD.抗體4.底盤優(yōu)化策略?A.基因組簡化B.代謝重構(gòu)C.啟動子工程D.凋亡誘導(dǎo)5.CRISPR組成?A.Cas蛋白B.gRNAC.啟動子D.終止子6.途徑組裝方式?A.吉布森組裝B.重疊PCRC.酶切連接D.同源重組7.底盤應(yīng)用領(lǐng)域?A.生物醫(yī)藥B.生物能源C.環(huán)境治理D.食品發(fā)酵8.生物正交優(yōu)勢?A.不干擾內(nèi)源B.特異性高C.可調(diào)控D.依賴內(nèi)源酶9.安全設(shè)計(jì)包括?A.營養(yǎng)缺陷型B.自殺基因C.轉(zhuǎn)移阻斷D.無限制繁殖10.表征方法?A.生長曲線B.HPLC檢測產(chǎn)物C.基因組測序D.Westernblot答案1.ABC2.ABC3.ABC4.ABC5.AB6.ABCD7.ABCD8.ABC9.ABC10.ABCD判斷題(10題,每題2分,√/×)1.底盤必須是天然未改造細(xì)胞?()2.啟動子是轉(zhuǎn)錄終止元件?()3.釀酒酵母是原核底盤?()4.CRISPR可編輯底盤基因組?()5.底盤無需考慮代謝負(fù)載?()6.模塊化是核心原則?()7.最小基因組僅含必需基因?()8.生物正交干擾內(nèi)源代謝?()9.iGEM是合成生物學(xué)競賽?()10.底盤研發(fā)無需考慮成本?()答案1.×2.×3.×4.√5.×6.√7.√8.×9.√10.×簡答題(4題,每題5分)1.簡述底盤細(xì)胞核心定義及關(guān)鍵特征。答案:底盤是工程化改造的標(biāo)準(zhǔn)化宿主,可承載外源模塊實(shí)現(xiàn)特定目標(biāo)。關(guān)鍵特征:①標(biāo)準(zhǔn)化(元件遵循統(tǒng)一規(guī)則);②模塊化(模塊可替換組合);③可擴(kuò)展(支持多模塊組裝);④遺傳穩(wěn)定(改造后無明顯突變);⑤代謝兼容(外源與內(nèi)源無嚴(yán)重干擾)。2.列舉3種常用底盤及應(yīng)用場景。答案:①大腸桿菌:生長快、操作簡單,用于合成小分子(乙醇、氨基酸)及重組蛋白;②釀酒酵母:真核可糖基化,用于合成復(fù)雜次生代謝物(青蒿酸、胰島素前體);③藍(lán)細(xì)菌:光合底盤,利用CO?合成生物燃料、多糖。3.基因組簡化的目的及方法。答案:目的:減少冗余代謝、降低負(fù)載、提高目標(biāo)效率、簡化調(diào)控。方法:①同源重組刪除非必需基因;②CRISPR精準(zhǔn)切割刪除;③轉(zhuǎn)座子誘變篩選可刪基因;④逐步刪除大片段非必需區(qū)域。4.啟動子在底盤設(shè)計(jì)中的作用及選擇原則。答案:作用:調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始,決定表達(dá)強(qiáng)度及時(shí)空特異性。選擇原則:①強(qiáng)度匹配(按需選強(qiáng)弱);②特異性(僅底盤激活);③可調(diào)控(誘導(dǎo)型如IPTG);④兼容(無內(nèi)源干擾)。討論題(2題,每題5分)1.如何平衡代謝負(fù)載與目標(biāo)產(chǎn)物效率?答案:①模塊化拆分途徑,減少交叉干擾;②啟動子工程匹配各步強(qiáng)度;③敲除競爭途徑(如副產(chǎn)物基因);④基因組簡化降低冗余消耗;⑤動態(tài)調(diào)控(生長階段激活途徑,避免資源競
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