基因治療載體制備設(shè)備運(yùn)維技師（中級(jí)）考試試卷及答案填空題（每題1分，共10分）1.基因治療載體質(zhì)粒提取設(shè)備的關(guān)鍵校準(zhǔn)項(xiàng)目包括______、核酸濃度檢測(cè)準(zhǔn)確性。2.慢病毒制備用生物安全柜的年度維護(hù)需更換______過(guò)濾器。3.層析系統(tǒng)中，色譜柱的維護(hù)周期通常不超過(guò)______個(gè)月（常規(guī)使用）。4.高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子的定期檢查項(xiàng)目包括______、腐蝕情況。5.基因治療載體設(shè)備運(yùn)維記錄需符合______規(guī)范要求。6.病毒載體濃縮用超濾系統(tǒng)的膜組件清洗液常用______。7.設(shè)備日常運(yùn)維中，需每日記錄的環(huán)境參數(shù)包括溫度、______。8.慢病毒生產(chǎn)用CO?培養(yǎng)箱的校準(zhǔn)周期為每______個(gè)月一次。9.設(shè)備故障排查時(shí)，應(yīng)遵循“先______后復(fù)雜”的原則。10.生物安全柜的氣流速度校準(zhǔn)范圍為_(kāi)_____m/s（入流）。單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.下列哪種設(shè)備不屬于基因治療載體制備核心設(shè)備？A.質(zhì)粒提取儀B.層析系統(tǒng)C.酶標(biāo)儀D.高速離心機(jī)2.慢病毒制備設(shè)備運(yùn)維中，生物安全柜HEPA過(guò)濾器泄漏測(cè)試周期是？A.每月B.每季度C.每半年D.每年3.層析系統(tǒng)色譜柱堵塞的常見(jiàn)原因不包括？A.樣品雜質(zhì)過(guò)多B.流速過(guò)快C.柱溫過(guò)高D.緩沖液未過(guò)濾4.高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子使用后，正確的維護(hù)操作是？A.浸泡強(qiáng)酸B.擦干存干燥處C.直接堆放D.不清潔復(fù)用5.基因治療載體設(shè)備運(yùn)維記錄保存期限是？A.1年B.2年C.3年D.設(shè)備全生命周期6.導(dǎo)致CO?培養(yǎng)箱細(xì)胞生長(zhǎng)異常的故障是？A.CO?傳感器失效B.溫度波動(dòng)±0.5℃C.濕度60%D.門(mén)封條輕微老化7.超濾系統(tǒng)膜組件正確保存方法是？A.去離子水浸泡B.0.5%甲醛浸泡C.干燥保存D.20%乙醇浸泡8.生物安全柜操作錯(cuò)誤的行為是？A.物品放臺(tái)面≤70%B.前窗開(kāi)超過(guò)10cmC.紫外燈預(yù)開(kāi)30minD.廢液密封9.質(zhì)粒提取儀裂解液pH應(yīng)校準(zhǔn)至？A.7.0±0.1B.8.0±0.1C.9.0±0.1D.6.0±0.110.預(yù)防性維護(hù)的核心目的是？A.快速修故障B.延長(zhǎng)設(shè)備壽命C.降運(yùn)維成本D.B和C多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.基因治療載體設(shè)備運(yùn)維需遵循的安全規(guī)范包括？A.生物安全B.電氣安全C.化學(xué)安全D.機(jī)械安全2.層析系統(tǒng)日常維護(hù)內(nèi)容包括？A.緩沖液過(guò)濾B.泵頭密封檢查C.檢測(cè)器校準(zhǔn)D.色譜柱再生3.慢病毒制備設(shè)備需定期校準(zhǔn)的參數(shù)有？A.CO?濃度B.溫度C.轉(zhuǎn)速D.pH值4.設(shè)備故障排查常用方法包括？A.觀察法B.替換法C.測(cè)試法D.排除法5.生物安全柜維護(hù)項(xiàng)目包括？A.HEPA更換B.氣流速度校準(zhǔn)C.紫外燈強(qiáng)度檢測(cè)D.門(mén)封條檢查6.高速離心機(jī)安全操作要求包括？A.轉(zhuǎn)子對(duì)稱(chēng)配平B.轉(zhuǎn)速不超額定值C.運(yùn)行時(shí)遠(yuǎn)離設(shè)備D.及時(shí)清轉(zhuǎn)子腔7.設(shè)備運(yùn)維記錄應(yīng)包含的內(nèi)容有？A.維護(hù)日期B.維護(hù)人員C.維護(hù)項(xiàng)目D.問(wèn)題及處理8.超濾膜組件堵塞處理方法包括？A.反向沖洗B.化學(xué)清洗C.更換膜組件D.提高流速9.屬于“校正”而非“校準(zhǔn)”的項(xiàng)目是？A.調(diào)整溫度偏差B.調(diào)整pH值C.更換過(guò)濾器D.修復(fù)泄漏10.慢病毒培養(yǎng)箱日常檢查項(xiàng)目包括？A.CO?鋼瓶壓力B.溫度顯示C.濕度D.門(mén)封條密封性判斷題（每題2分，共20分）1.生物安全柜紫外燈可在有人操作時(shí)開(kāi)啟。（×）2.高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子可用金屬工具清潔。（×）3.層析緩沖液無(wú)需過(guò)濾可直接使用。（×）4.設(shè)備運(yùn)維記錄需維護(hù)人員簽字確認(rèn)。（√）5.CO?培養(yǎng)箱校準(zhǔn)可用標(biāo)準(zhǔn)氣體直接檢測(cè)。（√）6.超濾膜清洗頻率越高越好。（×）7.基因治療載體設(shè)備運(yùn)維無(wú)需考慮GMP。（×）8.生物安全柜前窗高度應(yīng)保持10-15cm。（×）9.設(shè)備故障修復(fù)后需試運(yùn)行驗(yàn)證。（√）10.高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子使用次數(shù)無(wú)限制。（×）簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述慢病毒生物安全柜日常維護(hù)步驟。答案：①每日開(kāi)啟前檢查前窗高度（≤10cm）、氣流指示燈；②操作后用75%乙醇擦臺(tái)面及內(nèi)壁，清廢液；③每周測(cè)紫外燈強(qiáng)度（≥70μW/cm2），不足則更換；④每月查HEPA過(guò)濾器壓差并記錄；⑤每季度校準(zhǔn)氣流速度（0.45-0.55m/s）；⑥年度換HEPA過(guò)濾器并做泄漏測(cè)試。所有維護(hù)需記錄，符合GMP。2.層析柱堵塞的常見(jiàn)原因及排查方法？答案：原因：①樣品含顆粒（未過(guò)濾）；②緩沖液有沉淀（未現(xiàn)配）；③流速超柱耐受值；④柱內(nèi)殘留蛋白/核酸（未再生）。排查：①觀察柱壓突升；②查樣品/緩沖液是否過(guò)濾；③低流速反沖，壓力下降則為顆粒堵塞；④反沖無(wú)效則查柱內(nèi)沉淀，必要時(shí)再生或換柱。3.高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子維護(hù)注意事項(xiàng)？答案：①使用前用放大鏡查裂紋、腐蝕；②樣品對(duì)稱(chēng)配平（偏差≤0.1g）；③轉(zhuǎn)速不超額定值；④運(yùn)行時(shí)遠(yuǎn)離設(shè)備；⑤用后擦干轉(zhuǎn)子腔，轉(zhuǎn)子存干燥無(wú)腐蝕環(huán)境；⑥每500次或1年做超聲無(wú)損檢測(cè)；⑦禁止用金屬工具清潔。4.基因治療載體設(shè)備運(yùn)維SOP核心內(nèi)容？答案：①設(shè)備名稱(chēng)、型號(hào)、位置；②維護(hù)周期（日/周/月/年）；③維護(hù)項(xiàng)目（校準(zhǔn)、清潔、耗材更換）；④操作步驟（如紫外燈開(kāi)啟時(shí)間）；⑤安全要求（防護(hù)裝備）；⑥記錄要求（日期、人員、問(wèn)題處理）；⑦異常處理流程（上報(bào)、修復(fù)驗(yàn)證）。定期評(píng)審SOP，適配GMP及設(shè)備更新。討論題（每題5分，共10分）1.如何制定設(shè)備預(yù)防性維護(hù)計(jì)劃？答案：①梳理核心設(shè)備清單（質(zhì)粒提取儀、層析系統(tǒng)等）；②查說(shuō)明書(shū)確定各設(shè)備維護(hù)周期（如CO?培養(yǎng)箱每6個(gè)月校準(zhǔn)）；③結(jié)合生產(chǎn)計(jì)劃避開(kāi)高峰；④明確維護(hù)項(xiàng)目（HEPA年度更換、轉(zhuǎn)子季度檢查）；⑤分配持證人員，制定時(shí)間表；⑥建記錄臺(tái)賬跟蹤執(zhí)行；⑦定期評(píng)估（故障次數(shù)變化）調(diào)整計(jì)劃，符合GMP要求。2.CO?培養(yǎng)箱濃度偏低的應(yīng)急處理及排查？答案：應(yīng)急：①暫停培養(yǎng)，轉(zhuǎn)移細(xì)胞至備用箱；②記錄異常時(shí)間。排查：①查CO?鋼瓶壓力（≤1MPa換瓶）；②查減壓閥輸出（0.1-0.2MPa）；③查管路泄漏（肥皂水涂接口）；④校準(zhǔn)傳感器（標(biāo)準(zhǔn)氣體對(duì)比）；⑤傳感器失效則聯(lián)系供應(yīng)商更換。試運(yùn)行24小時(shí)確認(rèn)濃度穩(wěn)定（5%±0.1%）后復(fù)用，記錄處理過(guò)程。答案匯總填空題1.pH值校準(zhǔn)2.HEPA（高效空氣）3.124.裂紋5.GMP6.NaOH溶液7.濕度8.69.簡(jiǎn)單10.0.45-0.55單項(xiàng)選擇題1.C2.D